ウサギの虚血と再灌流障害のモデル

このプロトコルは非存続および存続の実験のためのウサギ モデルでその場の激しい地方心筋虚血そして再灌流の傷害を引き起こすために簡単で、信頼でき、再現性がある方法論を提供する。この技術は、2つの異なる外科的アプローチにより、死亡率と罹患率が最小限に抑えられています。この方法論は費用対効果が高く、技術的要求が低いため、外科の専門知識がなくても研究者が実行できます。

ミニ開胸術でLADを露出させることは困難な場合があります。4回目の肋間腔前胸骨傍切開を横方向に5〜6センチメートル延長し、そのような曝露とウサギの剖検を事前に練習することをお勧めします。生存研究のために左ミニ開胸術を行うには、枕を使用して麻酔をかけたウサギの左側を約30度持ち上げます。

触診し、フェルトチップのマーキングペンで骨のランドマークの輪郭を描きます。10番の刃を使用して、胸骨の外側境界に隣接して横方向に5〜6センチメートル伸びる第5肋骨の上にある皮膚を切開します。電気焼灼を使用して、大胸筋を内側に分割し、続いて前鋸筋を外側に分割します。

次に、肋間筋を第5肋骨の上で分割して、神経血管束を温存します。鋭い解剖を使用して、メッツェンバウムのハサミで頭頂胸膜を切開し、第4肋間腔から胸膜腔に慎重に入り、肋骨スプレッダーまたは胸骨リトラクターを挿入できるようになるまで、最初の胸膜切開を肋骨と平行に両方向に伸ばします。肋骨のスペース内に肋骨スプレッダーまたは胸骨リトラクターを配置し、それを広げて心臓と心嚢を視覚化します。

DeBakey鉗子を使用して心膜を持ち上げます。メッツェンバウムのハサミで開き、LAD動脈の分離を進めます。これにより、LADとその枝に適切に曝露することで、心臓の前外側表面を最適に視覚化できます。

LAD動脈を分離するには、3番目の対角線枝をテーパー針の3-0ポリプロピレン縫合糸で囲み、針を取り外します。サバイバルケースでは、LADを分離するために使用した3本の3-0ポリプロピレン糸を切り取り、両端をゆるく結びます。3本の3-0ポリプロピレン糸は、心臓を採取する際にリスクのある領域と梗塞ゾーンを識別するために使用されます。

手術後、肋骨の周りに2-0ポリグラクチン910の8の字縫いを2針結びます。筋肉層と皮下層を3-0ポリジオキサノン縫合糸でランニングスタイルで閉じます。次に、5-0のモノフィラメント縫合糸を使用して皮下的に皮膚を閉じます。

最後に、胸膜エラーを排出するために針開胸検査を行います。非生存試験の場合は、湾曲したメイヨーハサミを使用して胸骨正中切開術を直ちに進めてください。胸骨リトラクターを使用して心臓と心嚢を視覚化し、前に示したように心膜を開きます。

以前に行った開胸手術の部分で配置された 3-0 ポリプロピレン スレッド ループを視覚化します。LAD動脈を分離するには、その第3斜めの枝をテーパー針の3-0ポリプロピレン縫合糸で囲みます。次に、針を取り外し、ポリプロピレンフィラメントの両端を小さなビニールチューブに通してスネアを形成します。

DeBakey鉗子を使用して、2つのポリプロピレンフィラメントの間に長方形のPTFEプレジェットを配置し、孤立したLAD動脈とビニールチューブの間に挟み込みます。ビニールチューブを押し下げ、ポリプロピレン縫合糸フィラメントを引き上げて冠状動脈を閉塞させ、このスネアを締めます。蚊取り皒を使用してチューブをクランプし、希望の気密性を維持します。

心外膜の局所チアノーゼを観察して心筋虚血を確認します。虚血誘発の30分後にスネアを取り外します。実験の最後に、生化学的および組織分析のために心臓を採取します。

虚血前、虚血中、および再灌流時に記録された心電図は、頻脈、不整脈、伝導系の欠陥、梗塞関連のQ波の発生、およびSTセグメントの偏差を示しました。2Dエコー測定値は、虚血前と比較して、虚血中および虚血後において、分数短縮が減少することを示しました。局所心筋虚血を誘発してから30分後、心筋壊死の証拠が観察されました。.

最も重要なプロトコルステップは、動脈を損傷したり静脈出血を引き起こしたりすることなくLADを慎重に取り囲み、血管痙攣を防ぐためにPTFEプレジェットを適切に配置し、LADを含めてリスクのある一貫した領域を作成することです。この方法論は、血管損傷、慢性心筋虚血、急性心筋スタニングモデルで、心血管の分子力学、病態生理学的メカニズム、および治療標的を明らかにし、有用性を実証し、診断および治療アルゴリズムを開発するのに役立ちます。