JoVE Logo

Sign In

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يضع البروتوكول الحالي نموذجا لإصابة العصب الوجهي باستخدام الفحص المجهري للتحقيق في الآليات التشخيصية والعلاجية لشلل الوجه مجهول السبب.

Abstract

شلل الوجه مجهول السبب هو أكثر أنواع إصابات العصب الوجهي شيوعا ، حيث يمثل ما يقرب من 70٪ من حالات شلل الوجه المحيطي. لا يمكن أن يؤدي هذا المرض إلى تغيير في تعبيرات الوجه فحسب ، بل يؤثر أيضا بشكل كبير على نفسية المرضى. في الحالات الشديدة ، يمكن أن يؤثر على العمل الطبيعي وحياة المرضى. لذلك ، فإن البحث عن إصلاح إصابات العصب الوجهي له أهمية سريرية مهمة. من أجل دراسة آلية هذا المرض ، من الضروري إجراء تجارب حيوانية ذات صلة ، من بينها أهم مهمة إنشاء نموذج حيواني له نفس التسبب في المرض البشري. إن ضغط العصب الوجهي داخل العظم الصخري ، وخاصة جذع العصب عند تقاطع الطرف البعيد للقناة السمعية الداخلية وجزء المتاهة ، هو التسبب في شلل الوجه مجهول السبب. من أجل محاكاة هذا المرض الشائع ، تم إنشاء نموذج إصابة الضغط للجزء الرئيسي خارج الجمجمة من العصب الوجهي في هذه الدراسة. تم تقييم الضرر العصبي عن طريق الفحص السلوكي والفيزيولوجي الكهربي والنسيجي. أخيرا ، تم اختيار 50 جم من القوة الثابتة و 90 ثانية إصابة المشبك كمعلمات إصابة لبناء نموذج مستقر لشلل الوجه مجهول السبب.

Introduction

كنوع من شلل الوجه المحيطي ، فإن شلل الوجه مجهول السبب هو سمة من سمات المسببات غير المعروفة ، والبداية الحادة ، والدورة المحددة ذاتيا1،2. لا تزال مسببات وشلل الوجه مجهول السبب غير مؤكدة3. في الوقت الحاضر ، هناك طرق علاج مختلفة لشلل الوجه4 ، ويعكس تنوع العلاجات عدم وجود خيارات العلاج المثلى. يعد استخدام تقنيات البيولوجيا الخلوية والجزيئية لدراسة آلية إصابة العصب الوجهي هو الأساس لإنشاء طرق علاج فعالة لشلل الوجه. لذلك ، فإن نموذج إصابة العصب الوجهي المناسب والمستقر مهم بشكل خاص.

في الوقت الحاضر ، لا توجد طريقة قياسية لإنشاء نموذج إصابة العصب الوجهي. تشمل طرق التحضير الحالية تطعيم الفيروس5 ، والتقسيم6 ، والتحفيز البارد7 ، والضغط8 . يعتقد أن العدوى الفيروسية ، والتشنج الوعائي الغاذي العصبي ، والتهاب المناعة الذاتية ، وما إلى ذلك ، قد تسبب نقص التروية الموضعي والتنكس والوذمة في العصب الوجهي9،10،11. علاوة على ذلك ، يمكن أن تسبب جميع العوامل المذكورة أعلاه ضغطا على الجذع الرئيسي للعصب الوجهي في قناة العصب الوجهي العظمية الضيقة12،13. بالإضافة إلى ذلك ، كانت إصابات الأعصاب الطرفية الأكثر شيوعا التي تم تحديدها أثناء العمليات الجراحية هي الضغط والكدمة14. بناء على النظريات والظواهر السريرية المذكورة أعلاه ، نعتقد أن إعداد نموذج إصابة العصب الوجهي من خلال إصابة الضغط أكثر منطقية. ومع ذلك ، فإن معظم الطرق الحالية لتنفيذ إصابات الضغط لا توفر معايير كمية للقوة والوقت. في هذه الدراسة ، قمنا بقياس قوة ومدة إصابة الضغط لتحسين قابلية استنساخ النموذج المعمول به.

Protocol

تمت الموافقة على جميع التجارب على والإشراف عليها من قبل لجنة أخلاقيات في مستشفى شينخوا التابعة لكلية الطب بجامعة شنغهاي جياوتونغ (XHEC-F-2023-061). تم استخدام ذكور الفئران Sprague-Dawley ، 200-300 جم ، في هذه الدراسة. تم الحصول على من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم تقسيم الفئران بشكل عشوائي إلى أربع مجموعات (ن = 10): مجموعة جراحة الشام ، ومجموعة الإصابة 30 ثانية ، ومجموعة إصابة 60 ثانية ، ومجموعة إصابة 90 ثانية.

1. تحريض التخدير وإعداد

  1. ارتد معدات الحماية الشخصية التالية: قناع جراحي ، قفازات جراحية ، ثوب يمكن التخلص منه.
  2. قم بوزن الفئران وتخديرها بهيدروكلوريد الكيتامين بجرعة 50 مجم / كجم عن طريق الحقن داخل الصفاق (IP). تطبيق ميلوكسيكام (5 ملغ/كغ؛ IP) للمسكنات المحيطة بالجراحة. تأكد من عمق التخدير باستخدام قرصة إصبع القدم.
  3. ضع مرهم العين على كلتا العينين لمنع الجفاف.
  4. بعد التخدير ، ضع الفئران في وضع الانبطاح وقم بتثبيت الرأس بحيث يكون الجانب الأيسر من الوجه لأعلى. احلق الشعر خلف الأذن اليسرى وقم بتطهير الجلد. قم بتغطية الجرذ بالستارة الجراحية المعقمة.

2. إنشاء نموذج إصابة سحق موضعي للجذع خارج الجمجمة للعصب الوجهي

ملاحظة: تعقيم جميع المعدات قبل الاستخدام. تم إجراء جميع العمليات في غرفة العمليات.

  1. قم بعمل شق طولي بطول 2 سم خلف الأذن اليسرى ، وقم بتشريح الجلد والأنسجة تحت الجلد لفصل الفجوة الطبيعية بين عضلات الوجه وعنق الرحم.
  2. استخدم ملاقط دقيقة ومقصات دقيقة لفصل جذع العصب الوجهي تماما بين الثقبة القارية والغدة النكفية ، بطول مكشوف يبلغ حوالي 1 سم.
  3. استخدم ملقط الإصابات الكمية للأعصاب الطرفية (جدول المواد) لتثبيت جذع العصب الوجهي لإحداث إصابة. حدد موقع الإصابة على بعد 0.5 سم من الثقبة العليا العلوي. ضع شدة إصابة قدرها 50 جم ووقت إصابة 30 ثانية و 60 ثانية و 90 ثانية على التوالي.
  4. خياطة تحت الجلد والجلد بخيط الحرير. تطهير الشق.
  5. بالنسبة للفئران في مجموعة التحكم في الجراحة الصورية ، قم بقطع الجلد والأنسجة تحت الجلد بعد التخدير وكشف وفصل الجذع الرئيسي المقابل للعصب الوجهي. بعد ذلك ، خياطة الشق على الفور.
  6. راقب صحة ، وحافظ على الاستلقاء القصي ، واحتفظ به في ظروف دافئة.
  7. انقل الجرذ مرة أخرى إلى قفص السكن بعد أن يكون الجرذ واعيا.

3. الاختبار السلوكي

ملاحظة: تم تقييم وظيفة العصب الوجهي للفئران قبل الجراحة وبعد 48 ساعة من الجراحة (الشكل 1). تم حساب درجات رد الفعل الوميض وحركة الججس وموضع طرف الأنف15. كلما ارتفعت الدرجة الإجمالية ، زادت شدة درجة إصابة العصب الوجهي (الجدول 1).

  1. منعكس الوميض (BR):
    1. قم بتوصيل إبرة 18 جم بحقنة سعة 2 مل ونفخ الهواء في عين الفئران من مسافة 2 سم. راقب حركة الجفن وإغلاقه.
    2. النتيجة وفقا للمعايير التالية: لا يوجد فرق كبير على كلا الجانبين: 0 نقطة. تأخر إغلاق الجانب المصاب مقارنة بالجانب السليم: 1 نقطة ؛ عدم القدرة على إغلاق الجفن المصاب: 2 نقطة.
  2. حركة الاهتزازات (VM):
    1. احسب حركات المجسات الثنائية للفئران في غضون 30 ثانية.
    2. النتيجة وفقا للمعايير التالية: لا يوجد فرق كبير في حركة المجسات الثنائية: 0 نقطة ؛ حركة شعيرات الجانب المصاب أضعف من حركة الجانب السليم: 1 نقطة ؛ فقدان حركة الشعيرات على الجانب المصاب: 2 نقطة.
  3. وضع طرف الأنف.
    1. طرف الأنف المركزي: 0 نقطة ؛ طرف الأنف يميل نحو الجانب الصحي: 1 نقطة.
      ملاحظة: تشير النتيجة الإجمالية البالغة 0 نقطة إلى الوضع الطبيعي ، وتشير 1-2 نقطة إلى شلل خفيف في الوجه (شلل جزئي) ، وتشير 3-4 نقاط إلى شلل واضح في الوجه (شلل جزئي) ، و 5 نقاط تشير إلى شلل كامل في الوجه15.

4. الكشف الفيزيولوجي الكهربي العصبي

ملاحظة: تم إجراء التصوير الكهربائي للوجه (ENoG) قبل الإصابة ، وبعد الجراحة مباشرة ، وبعد 48 ساعة من الجراحة (الشكل 2 ، الجدول 2 ، الجدول 3 ، والجدول 4).

  1. ضع قطب التأريض تحت جلد الطرف السفلي الأيسر.
  2. أدخل قطب التسجيل (قطب إبرة ثنائي القطب متحد المركز) في الجانب المصاب من عضلة المجسات ، بعمق اختراق 5 مم.
  3. ضع قطب التحفيز (قطب إبرة متحد المركز) على غشاء العصب الوجهي. تحفيز الأطراف القريبة والبعيدة من العصب الوجهي المصاب بشكل منفصل.
  4. استخدم تيار نبضة موجة مربعة بتردد 1 هرتز ، وعرض موجة 0.1 مللي ثانية ، ونطاق ترشيح من 10-3000 هرتز.
  5. استخدم محفزات 2 مللي أمبير و 5 مللي أمبير و 10 مللي أمبير و 15 مللي أمبير و 20 مللي أمبير للحث على توليد جهد عمل العضلات المركب.
  6. سجل زمن الوصول (Lm) وذروة السعة (Am) للموجة M.
    ملاحظة: تشير الموجة M إلى الشكل الموجي الأول والأكثر وضوحا المسجل. النقطة التي يترك فيها شكل الموجة خط الأساس هي نقطة البداية لشكل الموجة. المسافة من نقطة بداية خط الأساس إلى نقطة بداية شكل الموجة هي Lm. المسافة بين أعلى وأدنى قمم الشكل الموجي هي Am.
  7. اترك فاصلا زمنيا مدته 5 دقائق بين كل تحفيز لضمان تعافي الأعصاب.

5. الفحص النسيجي

  1. بعد الانتهاء من اختبارات الفيزيولوجيا الكهربية ، استخدم ملاقط دقيقة لرفع العصب والمقص الدقيق لقطع عينة العصب. تشمل العينة جذع العصب الوجهي من نقطة الإصابة إلى الغدة النكفية ، وهي الألياف العصبية في الطرف البعيد من نقطة الإصابة ، بطول إجمالي يبلغ حوالي 0.5 سم.
  2. قم بإصلاح عينة العصب في 4٪ بارافورمالدهيد لمدة 24 ساعة وقم بإعداد أقسام مدمجة في البارافين16.
  3. قم بتلطيخ الأقسام باستخدام طريقة تلطيخ الهيماتوكسيلين واليوزين (H & E)16 واحصل على صور بتكبير 100x و 400x باستخدام مجهر فوتوغرافي بصري (الشكل 3).
    ملاحظة: بعد إزالة العينة العصبية وخياطة الجلد تحت التخدير ، تم القتل الرحيم للفئران بواسطة البنتوباربيتال الصوديوم (150 مجم / كجم ؛ IP).

النتائج

الاختبار السلوكي
قبل الجراحة ، كانت درجات رد الفعل الوامض وحركة الججس وموضع طرف الأنف 0 نقطة في جميع الفئران التجريبية ، مما يشير إلى أن جميع الفئران لديها وظيفة العصب الوجهي سليمة. في تقييم وظيفة العصب الوجهي بعد 48 ساعة من الجراحة, وجد أن الدرجات الفردية للفئران في كل مجموعة إصابة قد زادت. علاوة على ذلك ، زادت النتيجة الإجمالية تدريجيا مع إطالة وقت إصابة العصب الوجهي (الجدول 1).

أظهرت سجلات نشاط الوجه للفئران في كل مجموعة بعد 48 ساعة من الجراحة أن تناسق الوجه اختفى تدريجيا مع تمديد وقت الإصابة. في مجموعة الإصابات 30 ثانية ، كانت وجوه الفئران متناظرة بشكل أساسي. في مجموعة الإصابات 60 ثانية ومجموعة الإصابات 90 ثانية ، تحول طرف الأنف للفئران نحو الجانب السليم (الجانب الأيمن). كانت هذه الظاهرة أكثر وضوحا في مجموعة الإصابات في التسعينيات منها في المجموعات الأخرى (الشكل 1).

الكشف عن الفيزيولوجيا الكهربية العصبية
قبل الجراحة ، وجدت الاختبارات الفيزيولوجية الكهربية أن تحفيز الثقبة الخشائية للعصب الوجهي يمكن أن يولد بثبات موجات M (الشكل 2 أ ، د ، ز). مباشرة بعد الجراحة ، عند تحفيز الطرف القريب من موقع الإصابة ، تم تسجيل موجات M في مجموعة الإصابات 30 ثانية ، ولكن تم إطالة وتقليل كل من Lm و Am. في مجموعات الإصابات في الستينيات والتسعينيات ، لم يتم تسجيل موجات M. عند تحفيز الجزء البعيد من موقع الإصابة ، يمكن تسجيل موجات M بثبات في جميع مجموعات الإصابات الثلاث ، وكان شكل الموجة و Lm و Am متوافقا مع تلك التي سبقت الجراحة (الشكل 2 ب ، ه ، ح). بعد 48 ساعة من الجراحة ، كانت هناك اختلافات ذات دلالة إحصائية بين مجموعات الإصابة (الشكل 2C ، F ، I). في مجموعة الإصابات في 30 ثانية ، تم تسجيل موجات M في كل من التحفيز القريب والبعيد. علاوة على ذلك ، لم يكن هناك فرق ذي دلالة إحصائية في Lm قبل الجراحة وبعدها (انظر الجدول 2). في مجموعة الإصابات في 60 ثانية ، لم يتم تسجيل موجات M تحت التحفيز القريب. تحت التحفيز البعيد ، لم تسجل 70٪ من الفئران موجات M. تم تسجيل إمكانات عمل العضلات المركبة الضعيفة بشكل كبير (CMAP) في 30٪ من الفئران. تم إطالة وانخفاض Lm و Am بشكل ملحوظ ، على التوالي (انظر الجدول 3). بالنسبة لمجموعة الإصابات في التسعينيات ، لم يظهر التحفيز القريب أو البعيد CMAP (انظر الجدول 4).

الفحص المرضي
أظهر تلطيخ H & E أنه لم يكن هناك أي ضرر لعينة العصب الوجهي في مجموعة الجراحة الوهمية ، وأن مورفولوجيا العصب الوجهي كانت كاملة. في مجموعة الإصابات في الثلاثينيات ، لم يكن هناك انهيار محوري كبير أو إزالة الميالين من العصب البعيد في الموقع المتضرر ، وكان مورفولوجيا المحاور وأغماد المايلين مشابهة لتلك الخاصة بالمجموعة الضابطة. كانت النوى الملطخة بعمق لا تزال موزعة بالتساوي ، ولم تكن هناك زيادة كبيرة في العدد. في كل من مجموعات الإصابات في الستينيات والتسعينيات ، لوحظ حدوث تغيرات في الانهيار المحوري وإزالة الميالين في الأعصاب البعيدة في الموقع المتضرر ، مع تورم ألياف عصبية مرئي وانقطاع طبيعي للمحاور وأغلفة المايلين. تحت مجهر عالي الطاقة (400x) ، لوحظ أن عدد النوى الملطخة بعمق في العينة قد زاد بشكل كبير ، وظهر عدد كبير من النوى المستديرة ، والتي كانت تعتبر ضامة متسللة. كما تضخمت نواة خلية شوان الأصلية المسطحة بشكل كبير. كانت التغييرات المرضية المذكورة أعلاه أكثر وضوحا في مجموعة الإصابات في التسعينيات منها في مجموعة الإصابات في 60 ثانية (الشكل 3).

figure-results-3560
الشكل 1: صور تمثيلية تم التقاطها بعد 48 ساعة من الجراحة تظهر ملامح الوجه لمجموعات مختلفة من الفئران. (A-D) الأمامي: يعرض الجزء الأمامي. (E-H) Inferior: يعرض الجزء السفلي. التحكم الصحي: مجموعة جراحة الوهم. 30 ثانية: مجموعة إصابات 30 ثانية. 60 ثانية: 60 ثانية مجموعة الإصابات. 90 ثانية: 90 ثانية مجموعة الإصابات. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-4317
الشكل 2: الشكل الموجي التمثيلي ل CMAP المستحث بالقرب من نقطة إصابة العصب في كل مجموعة في أوقات مختلفة. (أ ، د ، ز) CMAP الناتج عن التحفيز في الثقبة القبرية قبل الإصابة. (ب ، ه ، ح) CMAP الناتج عن المحفزات البعيدة والقريبة مباشرة بعد الإصابة. (ج ، و ، أنا) CMAP الناتج عن المحفزات البعيدة والقريبة بعد 48 ساعة من الإصابة. في BC و E-F و H-I ، تم إنشاء الصفين العلويين من أشكال الموجة عن طريق التحفيز البعيد ، بينما تم إنشاء الصفوف الثلاثة السفلية من أشكال الموجة عن طريق التحفيز القريب. 30 ثانية: مجموعة إصابات 30 ثانية. 60 ثانية: 60 ثانية مجموعة الإصابات. 90 ثانية: 90 ثانية مجموعة الإصابات. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-5422
الشكل 3: صور تلطيخ H & E التمثيلية لأعصاب الوجه المقطوعة في كل مجموعة بعد 48 ساعة من الإصابة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

مجموعة جراحة الشاممجموعة الإصابات 30 ثانيةمجموعة الإصابات 60 ثانيةمجموعة الإصابات في 90 ثانية
منعكس وميض0 ± 00.5 ± 0.531.4 ± 0.702 ± 0
حركة الاهتزازات0 ± 00.6 ± 0.521.0 ± 0.672 ± 0
وضع طرف الأنف0 ± 00.1 ± 0.320.8 ± 0.421 ± 0
مجموع النقاط0 ± 01.2 ± 0.923.2 ± 1.235 ± 0

الجدول 1: درجة وظيفة العصب الوجهي للفئران بعد 48 ساعة من الجراحة (ن = 10).

ما قبل الجراحةمباشرة بعد الإصابة48 ساعة بعد الإصابة
قريببعيدقريببعيد
لومن (مللي ثانية)1.12 ± 0.09** 1.54 ± 0.121.13 ± 0.191.13 ± 0.211.12 ± 0.13
صباحا (mv)4.16 ± 0.52** 1.36 ± 0.724.17 ± 0.63*3.83 ± 0.75*3.92 ± 1.11

الجدول 2: الكمون (Lm) والسعة (Am) لموجات M في نقاط زمنية مختلفة في مجموعة الإصابة 30 ثانية (ن = 10). * يشير إلى اختلاف إحصائي بين المجموعات (P < 0.05) ، ** يشير إلى اختلاف معتد به بين المجموعات (P < 0.01). تمت مقارنة جميع النتائج مع ما قبل الجراحة.

ما قبل الجراحةمباشرة بعد الإصابة48 ساعة بعد الإصابة
قريببعيدقريبΔ بعيد
لومن (مللي ثانية)1.12 ± 0.09/1.12 ± 0.21/** 2.04 ± 0.81
صباحا (mv)4.16 ± 0.52/4.14 ± 0.56/*3.92 ± 1.11

الجدول 3: الكمون (Lm) والسعة (Am) لموجات M في نقاط زمنية مختلفة في مجموعة الإصابات 60 ثانية (ن = 10). Δ يشير إلى أن 30٪ فقط من الفئران (ن = 3) تظهر موجات M. / يشير إلى عدم ظهور أي شكل موجي. * يشير إلى الاختلاف الإحصائي بين المجموعات (P < 0.05)، ** يشير إلى اختلاف معتد به بين المجموعات (P < 0.01). تمت مقارنة جميع النتائج مع ما قبل الجراحة.

ما قبل الجراحةمباشرة بعد الإصابة48 ساعة بعد الإصابة
قريببعيدقريبΔ بعيد
لومن (مللي ثانية)1.12 ± 0.09/1.13 ± 0.11//
صباحا (mv)4.16 ± 0.52/4.15 ± 0.67//

الجدول 4: الكمون (Lm) والسعة (Am) لموجات M في نقاط زمنية مختلفة في مجموعة الإصابة في 90 ثانية (ن = 10). / يشير إلى عدم ظهور أي شكل موجي.

Discussion

من الضروري دراسة آلية إصلاح إصابة العصب الوجهي لدى المرضى الذين يعانون من شلل الوجه مجهولالسبب 17. يجب أن تفي درجة نموذج إصابة العصب الوجهي بالمتطلبات التالية. أولا ، يجب ألا تكون درجة إصابة العصب الوجهي خفيفة جدا ، مثل درجة سندرلاند من الدرجة1 ، والتي يمكن أن تصلح ذاتيا تماما دون تدخل من المخدرات. ثانيا ، لا ينبغي أن تكون شديدة جدا ، مثل درجة سندرلاند الخامسة ، والتي تتطلب تدخلا جراحيا. ثالثا ، يجب أن تكون درجة إصابة العصب الوجهي مستقرة وموحدة. لذلك ، من المهم دمج الاختبارات السلوكية والفيزيولوجية الكهربية والنسيجية كأساس لاختيار النموذج.

العوامل التي تؤثر على قوة إصابة السحق هي حجم القوة ومدة العمل. في هذه الدراسة ، استخدمنا ملقطا كمية للإصابة العصبية الطرفية عصامية ، مع تعيين القوة كمية (50 جم) ووقت الفعل كمتغيرات (لقط لمدة 30 ثانية و 60 ثانية و 90 ثانية على التوالي). قمنا بتسجيل وتقييم درجة شلل الوجه من خلال ملاحظة منعكس الوميض وحركة الاهتزاز وموضع طرف الأنف للفئران. هذا مشابه لمقياس House Brackmann (H-B) المستخدم بشكل شائع في التقييمالسريري 19. وجدنا أن متوسط الدرجة الإجمالية لتقييم وظيفة العصب الوجهي كان 1.2 ± 0.92 نقطة في مجموعة الإصابة 30 ثانية ، مما يشير إلى شلل خفيف في العصب الوجهي. عندما كان وقت الإصابة 60 ثانية ، كان متوسط النتيجة الإجمالية 3.2 ± 1.23 نقطة ، وأظهرت الفئران أعراض شلل الوجه الواضحة ، مثل اختفاء منعكس الوميض ، وانخفاض نشاط المجسات ، والتغيرات في موضع طرف الأنف. في مجموعة الإصابات في التسعينيات ، أظهرت جميع الفئران شلل كامل في الوجه من 5 نقاط.

أظهر الكشف الفيزيولوجي الكهربي العصبي أن تحفيز الطرف القريب مباشرة بعد الإصابة يشير إلى ضعف التوصيل في مجموعة الإصابة 30 ثانية ، بينما يشير تحفيز الأطراف القريبة والبعيدة بعد 48 ساعة إلى التعافي الجزئي لوظيفة التوصيل. وهذا يعني أنه كان هناك تدمير محوري جزئي في العصب الوجهي التالف لحظة الإصابة. ومع ذلك ، كان هذا الضرر خفيفا نسبيا ، ويمكن لوظيفة التوصيل العصبي أن تصلح ذاتيا جزئيا. لذلك ، لم يكن نموذج مجموعة الإصابة في 30 ثانية يفضي إلى ملاحظة تأثير التدخل العلاجي على إصلاح العصب الوجهي. بالنسبة لمجموعة الإصابة في التسعينيات ، لم يلاحظ أي شكل موجي في الطرف القريب من التحفيز مباشرة بعد الإصابة ، مما يشير إلى أن جميع المحاور في المنطقة المحلية للإصابة قد فقدت وظيفة التوصيل. ومع ذلك ، لم يلاحظ أي شكل موجي في الطرف البعيد من التحفيز بعد 48 ساعة ، مما يشير إلى أن جميع الأعصاب في الطرف البعيد لنقطة التحفيز قد خضعت لتنكس Wallerian في غضون 48 ساعة ، وفقدت وظيفة التوصيل العصبي تماما. في هذا الوقت ، لا يمكن أن يظهر شكل الموجة بشكل طبيعي في الطرف القريب من التحفيز. لذلك ، كان هذا النموذج مناسبا لأبحاث شلل الوجه مجهول السبب. بالنسبة لمجموعة الإصابات في الستينيات ، وجدنا أن التأثيرات الفيزيولوجية الكهربية المكتشفة لم تكن مستقرة ولم تكن مناسبة للبحث اللاحق.

وجد فحص مورفولوجيا الأنسجة أنه لم يكن هناك أي تغيير كبير تقريبا في مجموعة الإصابة 30 ثانية بعد 48 ساعة من الإصابة ، مما يشير إلى أن درجة الضرر كانت خفيفة وتم إصلاحها بشكل أساسي ، بما يتماشى مع درجة سندرلاند من الدرجة الأولى. أظهرت كل من مجموعة الإصابات في 60 ثانية ومجموعة الإصابات في التسعينيات التغيرات المرضية المبكرة النموذجية للتنكسالواليري 20. من بينها ، أظهرت مجموعة الإصابات في التسعينيات تغييرات أكثر أهمية ، مثل التفكك المحوري ، وإزالة الميالين ، وتكاثر خلايا شوان ، وتسلل البلاعم ، مما يشير إلى درجة أكثر خطورة من الضرر في هذه المجموعة. لم تتسبب جميع مجموعات الإصابة في إتلاف الغشاء الخارجي للعصب والفاسيكولوس. لذلك ، لم تكن هناك إصابة من الدرجة الرابعة إلى الخامسة في سندرلاند.

على الرغم من أن هذا النموذج الحيواني يمكن أن يعكس بدقة خصائص شلل العصب الوجهي ، إلا أنه لا يمكن أن يقترب تماما من الحدوث الفعلي لشلل الوجه لدى البشر. بالمقارنة مع طرق التحضير الأخرى ، تم تحديد قوة ووقت ضغط العصب الوجهي في هذه الدراسة ، وكان إعداد النموذج قابلا للتكرار. سيكون هذا النموذج الحيواني مفيدا في تشخيص وعلاج شلل الوجه مجهول السبب.

Disclosures

وأعلن أصحاب البلاغ أنه لا يوجد تضارب في المصالح متنافسا.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من خلال منح المشاريع من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82203637) ومؤسسة تطوير العلوم والتكنولوجيا التابعة لجامعة نانجينغ الطبية (NMUB20210220).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
4% paraformaldehyde fixing solutionBeyotime BiotechnologyP0099
Clean bench Airtech
Electronic balance Shanghai Precision Instrument FactoryAS909
Freezing microtomeLeicaCM1900
Hematoxylin eosin (HE) staining kitBeyotime BiotechnologyC0105S
Ketamine Sigma57074-21-2
Optical photographic microscopeOlympusIX90
Pentobarbital sodiumChemSrc57-33-0
Quantitative peripheral nerve injury forcepsIn-house Patent number: CN20082015530.3
Sprague-Dawley ratsJiangsu Jicui Yaokang Biotechnology Co., Ltd
Surgical operating microscopeOPMI 1FR proergoZEISS

References

  1. Gagyor, I., Madhok, V. B., Daly, F., Sullivan, F. Antiviral treatment for Bell's palsy (idiopathic facial paralysis). Cochrane Database Syst Rev. 9 (9), (2019).
  2. Furukawa, T., et al. The use of basic fibroblast growth factor to treat intractable Bell's palsy administered via transcanal endoscopic ear surgery. Am J Otolaryngol. 45 (1), 104020 (2023).
  3. Qin, Y., et al. To explore the pathogenesis of Bell's palsy using diffusion tensor image. Sci Rep. 13 (1), 15298 (2023).
  4. Teixeira, L. J., Valbuza, J. S., Prado, G. F. Physical therapy for Bell's palsy (idiopathic facial paralysis). Cochrane Database Syst Rev. 12 (12), (2011).
  5. Mu, H., et al. The alterations and significance of intercellular adhesion molecule-1 in mouse brainstem during herpes simplex virus type 1-induced facial palsy. Appl Biochem Biotechnol. 194 (8), 3483-3493 (2022).
  6. Fujii, K., et al. Accelerated outgrowth in cross-facial nerve grafts wrapped with adipose-derived stem cell sheets. J Tissue Eng Regen Med. 14 (8), 1087-1099 (2020).
  7. Joko, T., Yamada, H., Kimura, T., Teraoka, M., Hato, N. Non-recovery animal model of severe facial paralysis induced by freezing the facial canal. Auris Nasus Larynx. 47 (5), 778-784 (2020).
  8. Cai, J., et al. Neuroprotective effect of brimonidine against facial nerve crush injury in rats via suppressing GFAP/PAF activation and neuroinflammation. ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 83 (6), 449-456 (2021).
  9. Eviston, T. J., Croxson, G. R., Kennedy, P. G., Hadlock, T., Krishnan, A. V. Bell's palsy: aetiology, clinical features and multidisciplinary care. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 86 (12), 1356-1361 (2015).
  10. Heckmann, J. G., Urban, P. P., Pitz, S., Guntinas-Lichius, O., Gagyor, I. The diagnosis and treatment of idiopathic facial paresis (Bell's Palsy). Dtsch Arztebl Int. 116 (41), 692-702 (2019).
  11. Zhang, W., et al. The etiology of Bell's palsy: a review. J Neurol. 267 (7), 1896-1905 (2020).
  12. Touska, P., et al. Computed tomographic features of the proximal petrous facial nerve canal in recurrent Bell's palsy. Laryngoscope Investig Otolaryngol. 6 (4), 816-823 (2021).
  13. Murai, A., et al. The facial nerve canal in patients with Bell's palsy: an investigation by high-resolution computed tomography with multiplanar reconstruction. Eur Arch Otorhinolaryngol. 270 (7), 2035-2038 (2013).
  14. Mourad, S. I., Al-Dubai, S. A., Elsayed, S. A., El-Zehary, R. R. Efficacy of platelet-rich fibrin and tacrolimus on facial nerve regeneration: an animal study. Int J Oral Maxillofac Surg. 51 (2), 279-287 (2022).
  15. Chen, D., Zhang, D., Xu, L., Han, Y., Wang, H. The alterations of matrix metalloproteinase-9 in mouse brainstem during herpes simplex virus type 1-induced facial palsy. J Mol Neurosci. 51 (3), 703-709 (2013).
  16. Hu, B., et al. Delivery of basic fibroblast growth factor through an in situ forming smart hydrogel activates autophagy in Schwann cells and improves facial nerves generation via the PAK-1 signaling pathway. Front Pharmacol. 13, 778680 (2022).
  17. Kline, L. B., Kates, M. M., Tavakoli, M. Bell Palsy. JAMA. 326 (19), 1983 (2021).
  18. Kamble, N., Shukla, D., Bhat, D. Peripheral nerve injuries: Electrophysiology for the neurosurgeon. Neurol India. 67 (6), 1419-1422 (2019).
  19. Machetanz, K., et al. Design and evaluation of a custom-made electromyographic biofeedback system for facial rehabilitation. Front Neurosci. 16, 666173 (2022).
  20. Conforti, L., Gilley, J., Coleman, M. P. Wallerian degeneration: an emerging axon death pathway linking injury and disease. Nat Rev Neurosci. 15 (6), 394-409 (2014).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved