במבחנה שיטת שליטה ריכוזי גזים הלוגניים בתרבית תאים אפיתל מכתשי

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלת מפתח בתחום המחקר של פגיעה ריאות ותיקון כגון בדיקת נספח הלוגן כטיפולים חדשניים פוטנציאליים לתסמונת מצוקה נשימתית חריפה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מסתמכת על שיטה פשוטה מאוד לתרבת את התאים ולחשוף אותם לסוכנים הלוגניים על מנת להגיע לריכוזים מדויקים ומבוקרים. כדי לבנות את התא אטום, להשתמש בתיבת פוליפרופילן הרמטי עם קיבולת של 6.5 ליטר.

לקדוח חור בקוטר 2.5 ס"מ בצד התחתון של הקיר הצדדי של התיבה. לאחר מכן הכנס צינור גלי עם סימן ירוק אשר ישמש צינור קלט תערובת אוויר גז. ולאטום אותו עם סיליקון.

לאחר מכן, לקדוח חור שני עם קוטר 2.5 ס"מ בצד העליון של הקיר הצדדי הנגדי. הכנס צינור גלי נוסף עם סימן אדום ולחבר אותו עם מסנן פחם אשר ישמש צינור פלט תערובת אוויר גז. ואז לאטום אותו עם סיליקון.

לאחר מכן לקדוח חור הדוק עם קוטר ארבעה מילימטר במרכז הקיר. הכנס את צינורות עירוי קצר המחובר בסעפת עם מנעול פיתוי זכר מסתובב. חבר אותו למנתח גז ואטם אותו עם סיליקון.

לאחר מכן מניחים מדחום דיגיטלי בתוך התא אטום. תחת מכסה המנוע של מחלץ מעבדה, להתאים אישית מעגל מכונת הרדמה כדי לעבור את צינור גז תחמוצת החנקן על ידי פחמן דו חמצני. הכנס מכשיר אדים מחומם לצינור שבין מכונת ההרדמה לתא אטום כדי לחמם את תערובת זרימת הגז לכ-37 מעלות צלזיוס.

חבר את התא אטום עם צינור גלי מסומן ירוק לתוך מעגל מכונת הרדמה אישית. לאחר מכן, מניחים את התא אטום על צלחת חמה להגדיר 37 מעלות צלזיוס. מניחים צלחת שש באר המכילה תאי אפיתל מים אנושיים לתוך התא אטום ולאטום את המכסה.

לווסת את קצב זרימת הגז כדי להשיג במהירות 5% של CO2. ואז לפתוח את אידוי סוכן הלוגן ולהתאים את האחוז הרצוי. לאחר ערכי היעד מושגים, להפחית את קצב זרימת הגז טרי לליטר אחד לדקה.

התא אטום יכול להישמר עם קצב זרימת גז זה כל עוד יש צורך בניסוי. הקורסים של ריכוזי sevoflurane ו isoflurane במדיום היו דומים לאורך זמן. מיד לאחר שנקבע הריכוז הנדרש של סוכן הלוגני, הריכוזים עלו במהלך השעה הראשונה.

לאחר מכן הושגה מישור שנמשך עד שהממשל של הסוכן הלוגני נעצר. לאחר הפרעה הממשל, הריכוזים ירדו בתוך שעה. המוצגים כאן הם שברים של סוכן הלוגן לאורך זמן בתא אטום נמדד על ידי מנתח הגז.

הליך זה זול יחסית וקל מאוד לאימוץ גם כאשר חוקרים מעולם לא תמרנו תא אטום לפני כן. בעקבות הליך זה, שיטות אחרות כמו כימות חלבון ו- RNA, immunofluorescence, מדידת חרניות חלבון ותחבורה חופשית ניתן לבצע על מנת לענות על שאלות על ההשפעות הספציפיות של סוכני הלוגן במהלך פגיעה ריאות אפיתל ורזולוציה שלה. לאחר התפתחותה, טכניקה זו עשויה לסלול את הדרך למחקר בתחום תסמונת מצוקה נשימתית חריפה כדי להמשיך לחקור את המנגנון המעורב בפגיעה בריאות אפיתל במהלך ARDS ולבדוק טיפולים חדשניים.