في المختبر أسلوب التحكم بتركيزات غازات المهلجنة في استزراع الخلايا الظهارية السنخية

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على السؤال الرئيسي في مجال البحث عن إصابة الرئة وإصلاح مثل اختبار مساعد هالجنات كعلاجات جديدة محتملة لمتلازمة الضائقة التنفسية الحادة. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تعتمد على طريقة بسيطة جدا لثقافة الخلايا وتعريضها لعوامل هالوجينة من أجل الوصول إلى تركيزات دقيقة وخاضعة للرقابة. لبناء غرفة محكم, استخدام مربع البولي بروبلين المحكم بسعة 6.5 لتر.

حفر حفرة قطرها 2.5 سنتيمتر على الجانب السفلي من الجدار الجانبي للمربع. ثم إدراج أنبوب المموج مع علامة خضراء والتي ستكون بمثابة أنبوب مدخلات خليط الهواء الغاز. وختم مع السيليكون.

بعد ذلك، حفر حفرة ثانية بقطر 2.5 سنتيمتر على الجانب العلوي من الجدار الجانبي المقابل. إدراج أنبوب آخر المموج مع علامة حمراء وربطه مع مرشح الفحم الذي سيكون بمثابة أنبوب إخراج خليط الهواء الغاز. ثم ختمه مع السيليكون.

في وقت لاحق حفر حفرة ضيقة مع قطرها أربعة ملليمترات في وسط الجدار. إدراج أنابيب التسريب قصيرة التي يتم توصيلها في متعددة مع قفل إغراء الذكور الدورية. قم بتوصيله إلى محلل الغاز وختمه بالسيليكون.

ثم ضع ميزان حرارة رقمي داخل الغرفة محكم. تحت غطاء مستخرج مختبر، تخصيص دائرة آلة مخدرة للتبديل خط غاز أكسيد النيتروز عن طريق ثاني أكسيد الكربون. أدخل مرطبًا ساخنًا في الأنبوب بين آلة التخدير والغرفة محكمًا لتدفئة خليط تدفق الغاز إلى حوالي 37 درجة مئوية.

قم بتوصيل الغرفة محكم مع أنبوب المموج الأخضر ملحوظ في دائرة آلة التخدير المخصصة. المقبل، وضع غرفة محكم على لوحة ساخنة تعيين إلى 37 درجة مئوية. ضع ستة صحن يحتوي على خلايا ظهارية بشرية مقزّزة في غرفة محكم وختم الغطاء.

تنظيم معدل تدفق الغاز للحصول بسرعة على 5٪ من ثاني أكسيد الكربون. ثم افتح متبخر العامل المهلجنة وقم بضبط النسبة المئوية المطلوبة. بمجرد تحقيق القيم المستهدفة، تقليل معدل تدفق الغاز الطازج إلى لتر واحد في الدقيقة.

يمكن الحفاظ على غرفة محكم مع هذا معدل تدفق الغاز طالما لزم الأمر للتجربة. وكانت دورات تركيزات سيفوفلوران وإيزوفلوران في الوسط متشابهة مع مرور الوقت. مباشرة بعد تحديد التركيز المطلوب من العامل المهلجن ، ارتفعت التركيزات خلال الساعة الأولى.

ثم تم التوصل إلى هضبة استمرت حتى تم إيقاف إدارة العامل المهلجن. بعد انقطاع الإدارة، انخفضت التركيزات في غضون ساعة واحدة. تظهر هنا كسور العامل المهلجن بمرور الوقت في غرفة محكم تقاس من قبل محلل الغاز.

هذا الإجراء غير مكلفة نسبيا وسهلة جدا لاعتماد حتى عندما يكون الباحثون لم يتلاعب غرفة محكم من قبل. بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل البروتين والرنا الكم، والفلوروس المناعية، وقياس نفاذية البروتين والنقل الحر من أجل الإجابة على الأسئلة حول الآثار المحددة للعوامل المهلجنة أثناء إصابة الرئة الظهارية وحسمها. بعد تطورها، قد تمهد هذه التقنية الطريق للبحث في مجال متلازمة الضائقة التنفسية الحادة لمواصلة دراسة الآلية التي تنطوي عليها إصابة الرئة الظهارية خلال ARDS واختبار العلاجات الجديدة.