Roma Wieczorek ve onların mükemmel düzenleme yardım için Peter Kurdybacha ve Leon Decker ve Uli Heuter onların mükemmel teknik destek için teşekkür etmek istiyorum.

hayvan konular içeren yordamlar onaylanan kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) tarafından RWTH Aachen Üniversitesi, AZ 84-02.04.2012.A234.
 Not: yordamı farelerde yetişkin erkek yaban tip CD1 arka plan ile kullanma uygulaması gösterilmiştir. Fareler önce ve yemek, özel veteriner kontrol ve tedavi için uygun erişimi temin ameliyattan sonra bir özel laboratuvar biriminde tutmak. Hayvanlar üzerinden aldıysanız dışında bir haftalık iklimlendirme ameliyat gerçekleştirmeden önce izin.
 1. donör hazırlanması <ol><li>steril malzeme ve aletleri steril koşullar enfeksiyonları önlemek için ameliyat sırasında korumak için kullanın.</li>
	<li>Her fare % 1.5 karışımı ile birim isoflurane ve % 100 oksijen bir yüz maskesi ile anestezi. Fare sırtüstü pozisyon ve teyp bir platformda ayakları için ameliyat masasına yattı. Onun refleksleri fare yeterince anestezi emin olmak için arka ayaklarına pinching tarafından kontrol edin. İşlem sırasında kurutma önlemek için göze oftalmik merhem yerleştirin.</li>
	<li>Tüm saç depilatory bir jel kullanarak karından kaldırın veya bir tıraş makinesi kullanın. Steril koşullarda işlemini gerçekleştirin. Scrubs klorheksidin ve steril su alternatif ile karın dezenfekte.</li>
	<li>Makas veya neşter ile donör aort Ensizyon karın üzerinden kaldırın. Bağırsak el ile sağa doğru çekin. Hafifçe el ile bağırsak üzerinde toz ücretsiz eldiven kullanarak yan yansıtır.
	<ol><li>Bağırsak nemli tutmak için serum ıslak gazlı bez bir parça yerleştirin.</li>
		<li>Uzağa--dan çok dikkatli bir künt diseksiyon cımbızla kullanarak çevreleyen doku abdominal aort teşrih.</li>
		<li>Renal arterler ve onun çatallanma vena kava üzerinden arasında aorta segment cımbızla ayırın.</li>
		<li>Bu segmentte çok dikkatli bir şekilde 11-0 monofilament tek dikiş kullanarak tüm küçük dalları güvenli.</li>
		<li>Aort kaldırmadan önce 0.5 ml (mL) tuzlu çözüm inferior vena kava 50 U heparin içeren enjekte.</li>
		<li>Aorta segment kaldırıldıktan sonra exsanguinate donör hayvanın izin.</li>
		<li>Dokuları tam olarak serum fizyolojik ile durulayın ve buz gibi Salin bir kaba hemen transfer.</li>
	</ol></li></ol> 2. Alıcının hazırlanması <ol><li>% 1.5 karışımı ile alıcı hayvan birimi isoflurane ve % 100 oksijen bir yüz maskesi ile anestezi sonra saç kaldırmak ve (Bölüm 1) dezenfekte. Bir neşter ile leğen kemiği için xiphoid gelen bir orta hat kesi yapmak ve karın duvarları geri çek. Gözlerde kuruluk işlem sırasında önlemek için oftalmik merhem yerleştirin.</li>
	<li>Tuzlu çözüm bağırsaklarında ıslatılmış gazlı bez ve çok yavaşça yerinden hayvan için şal &#39; yolunda.</li>
	<li>İnfrarenal aortada ücretsiz renal arterler arasında proksimale teşrih ve cımbız ile klemple çatallanma.</li>
	<li>Bu segmentte çok dikkatli bir şekilde 11-0 monofilament tek dikiş kullanarak tüm küçük dalları güvenli.</li>
	<li>6-0 tek ipek dikiş ile aort proksimal ve distal kısımları kelepçe.</li>
	<li>Kelepçeler arasında orta aort bölmek ve Lümen açık temizlemek için heparinized serum fizyolojik ile kesme biter sulamak.</li>
	<li>Greft aort herhangi bir burulma düzgün donör ve alıcı (yerleştirerek önlemek için dikkat çekici 11-0 monofilament ile dikiş tarafından takip alan gemi eklenen besleme gemi ucuyla orthotopic bulunduğu yer şekil 1) 10.</li> <li>dikkatle bitişik harfler bir izlenebilirliği anastomoz yürütülmesi sonra serbest bırakmak. Distal klempi piyasaya çıkış tarihi. Alçak basınç birlikte proksimal yüksek basınç yan bırakmadan önce duvarlar tutan bu sonuç.</li>
	<li>Greft hemen sıvı ve görünür nabzını kontrol edin. Yavaşça ipek kalıntıları çıkarmak. 1-2 mm en iyi örtüşme uzunluğudur donör ve alıcı aort arasında.</li>
	<li>Karın karın boşluğu döndürmek ve bütün kapatmak ile çalışan 3-0 Poliglikolik asit dikiş yarası.</li>
	<li>Fare buprenorfin vermek (0,05 mg/kg vücut ağırlığı subkutan (SC)) anestezi sonlandırmadan önce.</li>
	<li>Bir hayvan, tamamen bilinçli kadar sahipsiz bırakmayın. Ağrı yönetmek terapi buprenophine 0,05 mg/kg vücut ağırlığı ile yönetilen SC ameliyat sonrası üç gün boyunca günde üç kere Kurumsal Gözetim vücut tarafından onaylanmış.</li>
	Yukarıda açıklanan <li>hasat, doku anestezi için olarak alıcı fareler ve floş gemi fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) ile % 4 formaldehit/PBS tarafından takip (pH 7.4 =) kardiyak ponksiyon tarafından. Greftler yavaşça çıkarın. %4 formaldehit/PBS gecede fiksasyonu sonra işlem örnekleri daha fazla ve parafin içinde embed.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-+invasive+in+vivo+analysis+of+a+murine+aortic+graft+using+high+resolution+ultrasound+microimaging.">Non- invasive in vivo analysis of a murine aortic graft using high resolution ultrasound microimaging.</a> Eur J Radiol. 81 (2), 244-249 (2012).</li><li>Daugherty, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+atherosclerosis.">Mouse models of atherosclerosis.</a> Am J Med Sci. 323 (1), 3-10 (2002).</li><li>Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+arteriosclerosis:+from+arterial+injuries+to+vascular+grafts.">Mouse models of arteriosclerosis: from arterial injuries to vascular grafts.</a> Am J Pathol. 165 (1), 1-10 (2004).</li><li>Daugherty, A., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+abdominal+aortic+aneurysms.">Mouse models of abdominal aortic aneurysms.</a> Arterioscler Thromb Vasc .Biol. 24 (3), 429-434 (2004).</li><li>Zernecke, A., Shagdarsuren, E., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+in+atherosclerosis:+an+update.">Chemokines in atherosclerosis: an update.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28 (11), 1897-1908 (2008).</li><li>Chereshnev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+heterotopic+aortic+arch+transplantation.">Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation.</a> J Surg Res. 111 (2), 171-176 (2003).</li><li>Koulack, J., McAlister, V. C., Giacomantonio, C. A., Bitter-Suermann, H., MacDonald, A. S., Lee, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Engelbrecht, G., Kahn, D., Duminy, F., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+rapid+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">New rapid technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 13 (6), 340-344 (1992).</li><li>Baxter, K., Hao, P. M., Howden, B. O., Saunder, A., Jablonski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+technique+of+abdominal+heart+transplantation+in+the+rat.">Modified technique of abdominal heart transplantation in the rat.</a> J Heart Lung Transplant. 17 (11), 1057-1064 (1998).</li><li>Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice:+a+new+model+of+allograft+arteriosclerosis.">Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis.</a> J Heart Lung Transplant. 18 (10), 946-951 (1999).</li><li>Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histopathology+of+microarterial+anastomoses:+end-to-end+versus+end-in-end+(sleeve)+technique.">Histopathology of microarterial anastomoses: end-to-end versus end-in-end (sleeve) technique.</a> J Hand Surg Am. 15, 619-625 (1990).</li><li>Charo, I. F., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+roles+of+chemokines+and+chemokine+receptors+in+inflammation.">The many roles of chemokines and chemokine receptors in inflammation.</a> N Engl J Med. 354 (6), 610-621 (2006).</li><li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+surgical+technique+for+the+establishment+of+a+murine+model+of+aortic+transplantation.">Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation.</a> Microsurgery. 18 (6), 368-371 (1998).</li><li>Guo, L., Agarwal, A., George, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice+for+the+study+of+vascular+disease.">Orthotopic aortic transplantation in mice for the study of vascular disease.</a> J Vis Exp. (69), e4338 (2012).</li></ol>

Yazarlar onlar rakip hiçbir mali çıkarları var bildirin.

Bu çalışmada önce çeşitli diğer nakli modelleri farelerde iyice analiz3,6,7,10,13,14vardı. O bizim ölçütleriyle eşleşen ve kol anastomoz geleneksel uçtan uca dikiş yöntemleri ile karşılaştırıldığında yüksek bir güvenilirlik gösterdi aort nakli Dambrin vd tarafından değişiklikleri ile kol tekniği kullanarak model seçildi 1 , 10.
Bu önemli ölçüde azaltılmış çapraz klemp süresi ameliyat sırasında aorta zarar en aza ile birçok yönden olumlu bir tekniktir. Tromboz sıklığı düşük gemi kalibre donör ve alıcı arasında bir potansiyel uyumsuzluk kaçınarak ek olarak gözlendi. Yukarıdaki gözlemleri bu teknik son derece aort nakli farelerde vasküler hastalığı araştırma için uygun olun.
Bir takip çalışması bir ultrason nakli sonra 8 hafta gerçekleştirildiği, herhangi bir önemli değişiklik algılanmadı. Bu varsayımlar aort cerrahisi sırasında herhangi bir hasar en az1olacağını doğruladı.
Bu makalede sunulan aşılama yordam hiçbir bozulma greft bütünlüğü ve işlevi hem de güvence altına alır. Bu nedenle, bu deneysel nakli model dejeneratif damar hastalığı genetik farelerde gelecekteki moleküler ve farmakolojik araştırmalar için değerli bir araç olarak hizmet söylenebilir.
İnanıyoruz video rehber bu basit arterio-arter modeli kullanımını gösteren malzeme öğretim olarak işlev görebilir ve daha verimli tartışma vasküler patolojiler birçok önemli konularda katkıda bulunacaktır. Bu çok hızlı anastomoz yöntem genetiği farelerde damar hastalıkları eğitim için kullanılabilir. Bir değişiklik ile ekimi kombine anevrizma modeli olarak da kullanılabilir.
İşlem sırasında kritik noktaları vardır. Dikiş yerleştirilmesi en önemli adım olduğunu. Cerrah tarafından donör ve alıcı doğru hizalaması herhangi bir burulma aort önlemek için dikkat çekmek vardır. Kelepçeler dikkatle anastomoz muayene sonra kaldırılır. Distal klempi her zaman ilk alçak basınç duvarlar birlikte önce proksimal yüksek basınç yan yayın holding sonuçlanan piyasaya sürülmelidir. Düzgün bir şekilde yayın dizisi takip sonucu kanasın.

Bir önceki çalışmada belirttiği gibi büyük ilgi belirli vasküler yanıt greft tarafından neden olduğu ve arteriogenic çevre ile bağlı bazı sistemik faktörler arasında ayrımcılık sağlayan fare aort nakli modelleri için ödenen 1 , 2 , 3. eleme ve transgenik fareler durumu önemli bir rol oynar en büyük etken olduğunu. Böyle bir model onların katılımı belirlenmesi ve ateroskleroz ve anevrizma oluşumu4, gibi dejeneratif damar hastalığı gelişimi ile ilişkili yeni patofizyolojik yolları belirleme imkanı sunuyor 5.
Bu bir iç iskemi/reperfüzyon aşılama sırasında yaralanma nakli için amaçlanan damarları görünebilir dikkati çekiyor. Bu nedenle, greft bütünlüğü veya ameliyat sonrası dönemde beklenmeyen bir enflamatuar reaksiyon ile belirli sorunları oluşumunu muhtemelen dejeneratif vasküler hastalıklar3 patofizyolojik değişiklikler iyileştirmelerden dışarıda bırakılamaz ,4,5,6,7. Kol anastomoz damarları arter anastomoz az bir milimetre çapında için alternatif sıra içinde yöntemidir ve başarılı bir şekilde daha sonra adapte böbrek ve kalp nakli Sıçanlarda aort için uygulanmıştır Dambrin ve ark. tarafından farelerde nakli 8 , 9 , 10 , 11.
Aort hasar kol nakli tekniği kullanılarak bu ortalama sadece 20 dakika süren nedeniyle bir çok düşük teknik başarısızlık oranı ile en aza indirgemek. Önceki sonuçlarımız kol tekniği1kullanarak nakli sonra bir isograft vivo içinde mükemmel fonksiyonel ve yapısal özelliklerini gösterdi. Dambrin ve ark. tarif bu kısa bir öğrenme eğrisi başarı oranı % 78'i şey bitti sonra10. Örneğin8sıçan böbrek nakli kol teknikle trombozu Engelbrecht vd gözlemlemek değil tromboz gibi komplikasyonlar nadirdir.
Fare aort nakli modeli ile kol anastomoses ISO/homogreft reaksiyonlar transplante gemi içinde çalışmak için hızlı ve kolay bir araçtır. Bu video bizim laboratuvarda yapılan aort nakli yordamı gösterir. Bu nakli model vasküler hastalık altta yatan patolojik mekanizmaları tanımlamada yararlı olabilir ve moleküler ve farmakolojik müdahaleler12daha fazla değerlendirilmesi için katkıda bulunabilir.

<table><tbody><tr><td>Halsey Needle Holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12001-13</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps -</td><td>Fine Science Tools</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Lexer-Baby Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14079-10</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Micro Needle Holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12060-01</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Scissors</td><td>Aesculap, Germany</td><td>Typ OC498R</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Suture Forceps</td><td>Geuder, Germany</td><td>19015</td><td></td></tr><tr><td>6-0 silk black (Silk)</td><td>Deknatel, Research Triangle Park NC, USA</td><td>18020-60- FST</td><td></td></tr><tr><td>11-0 monofilament (Ethilon)</td><td>Ethicon, Norderstedt, Germany</td><td>EH7438G</td><td></td></tr><tr><td>3-0 polyglycolic acid suture (Serafit)</td><td>Serag-Wiessner, Naila, Germany</td><td>60203214</td><td></td></tr><tr><td>Isofluorane</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% saline</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthene eye and nose cream</td><td>Bayer, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscop</td><td>Zeiss</td><td>Opmi MDO/S5</td><td></td></tr><tr><td>Vaporiser</td><td>Eickemeyer</td><td>TEC3</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound</td><td>Vevo, Canada</td><td>770,2100</td><td></td></tr></tbody></table>

using the sleeve technique in a mouse model of aortic transplantation - an instructional video

Orthotopic aort nakli kol tekniği kullanarak yaralanma ile başarısızlık oranı sadece % 10-20 aortaya azaltır. Kısa ve kolay çalışmalar ISO/allo greft izin 20 dk ortalama kol yöntemini kullanan farelerde aort anastomose vakti gelmişti. Aşağıdaki makalede, bizim Laboratuvarda kullanılan aort nakli yordam. Fareler % 1.5 birim isoflurane ve yüz maskesi ile % 100 oksijen karışımı ile anestezi. Bu noktada, renal arter ve onun çatallanma arasında aorta segment vena kava, serbestçe hazırlanan ve clampedat ayrılmış olan tek ipek dikiş proksimal ve distal kesimi. Aort kaldırma önce heparin içeren bir serum fizyolojik çözüm inferior vena kava enjekte ettiler. Sonra aort kelepçeler arasında kesildi ve serum fizyolojik heparin çözüm Lümen temizlemek için kullanılmıştır. Monofilament dikiş kol teknikle abdominal aort orthotopic pozisyonda nakli için kullanıldı.

Yükseltilmiş bir tromboz riski olsa anestezi gözlenen hiçbir fiziksel bozulma ile 15-30 dakika içinde fareler kurtarıldı. Ultrason analiz Postoperatif takip sırasında kullanıldı. Çalışmada kullanılan yaban tipi fareler hiçbir değişiklik onların Lümen boyutta sergiledi. Buna göre ne stenoses ne de aneurysmal oluşumları gözlenmiştir. Organ nakli hayvanlar plak geliştirme (Şekil 2) damar duvarlarının sergilemek başarısız oldu.
İmmunohistology gibi geleneksel boyama prosedürler plak, desen düz kas hücreleri ve makrofajlar birikimi belirlemek için kullanılabilir. Histolojik çalışma ve immunohistokimyasal boyama greft bütünlüğünü sınamak için aşılama sonra 6 hafta gerçekleştirilen. Histolojik boyama (Hematoksilen ve Eozin (o) ve immunohistokimyasal (düz kas aktin (SMA) ve makrofaj (MAC2)) boyama (şekil 3) bize gösterdi değişmeden düz kas hücreleri, sağlam endotel hücre astar ve Hayır dağıtım şekilleri intima hücrelerde birikimi. Bu bulgular Hayır önemli lezyon veya hücre harekete geçirmek aşılı gemiler (şekil 3) algılandığını göstermektedir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig1.jpg"> 
Resim 1 : Kollu tekniği. Abdominal aort kol tekniği kullanarak nakli. Bu yordamda bulaşan aort yüzeysel ısırıkları besleme gemi mevcut ile orthotopic pozisyonda yerleştirilmişti. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig2.jpg"> 
Resim 2 : İntraoperatif ve ultrason resimleri. İntraoperatif (nekropsi) görünümü greft 6 hafta sonra nakli(a), üç boyutlu ultrason (B) ve B-modu görünümü (C) örnekleri. Ameliyat sonrası takip ultrason kullanılarak yapılmıştır. Resimleri herhangi bir değişiklik ile greft açıklık Lümen boyutlu olarak göster. Ayrıca, hiçbir stenoses veya aneurysmal oluşumları gözlenmiştir. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig3.jpg"> 
Şekil 3 : Histolojik ve immünhistokimya görüntüler. 6 hafta sonra nakli transplante hayvanların histolojik ve immünhistokimya temsilcisi görüntüler. Önemli lezyon yok içinde transplante aortas Histoloji tarafından tespit edilmiştir (Hematoksilen ve Eozin, o, 100 X büyütme, ölçek çubuğu = 50 µm), (düz kas aktin SMA (kırmızı) veya makrofaj MAC2 (yeşil), 200 X büyütme, ölçek çubuğu = boyama immunohistokimyasal 25 µm). Çekirdeklerin DAPI tarafından (mavi) karşı lekeli. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video at JoVE.com

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Biz farelerde kol tekniği kullanarak bir orthotopic aort nakli modeli mevcut. Bu damar hastalığı çalışmalarda istihdam bir çok hızlı anastomoz yöntemdir.

Kol tekniği aort transplantasyonu - eğitici bir Video bir fare Model kullanma

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

using-sleeve-technique-mouse-model-aortic-transplantation-an

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

8.9K Görüntüleme.  Ruhr- University Bochum. Biz farelerde kol tekniği kullanarak bir orthotopic aort nakli modeli mevcut. Bu damar hastalığı çalışmalarda istihdam bir çok hızlı anastomoz yöntemdir.

Video: Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

Damar Hastalığı Çalışmaları Farelerde Ortotopik Aort Nakli

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Tıp

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique was developed and reported in 2001 by Niimi. Described here are the techniques that have evolved over more than a decade in the hands of three surgeons (Plenter, Grazia, Pietra) in our center. These techniques are now being passed on to a younger generation of surgeons and researchers.
Based largely on the Niimi experience, the procedures used have evolved in the fine details - details which we will endeavor to relate here in such a way that others may be able to use this very useful model. Like Niimi, we have found that a video aid to learning is a priceless resource for the beginner.

The manuscript describes the steps required to perform the heterotopic heart transplant in the mouse.

Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to improve surgical efficiency. In our lab, we have optimized the cuff technique with two major steps. First, we used the inner tube technique to insert a temporary inner tube into the external jugular vein and carotid artery blood vessel to facilitate eversion of the vessel over the cuff. Second, we performed complete heterotopic cardiac transplantation through the collaboration of two experienced surgeons. These modifications effectively reduced the operation time to 25 minutes, with a success rate of 95%. In this report, we describe these procedures in detail and provide a supplemental video. We believe that this report on the improved cuff technique will offer practical guidance for murine heterotopic heart transplantation and will enhance the utility of this mouse model for basic research.

We introduce an inner tube approach to the cuff technique for mouse cervical heterotopic heart transplantation to help evert the vessel over the cuff. We found that cooperation between two experienced surgeons markedly shortens the operation time.

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Mouse Heterotopic Cervical Cardiac Transplantation Utilizing Vascular Cuffs

Murine models of cardiac transplantation are frequently utilized to study ischemia-reperfusion injury, innate and adaptive immune responses after transplantation, and the impact of immunomodulatory therapies on graft rejection. Heterotopic cervical heart transplantation in mice was first described in 1991 using sutured anastomoses and subsequently modified to include cuff techniques. This modification allowed for improved success rates, and since then, there have been multiple reports that have proposed further technical improvements. However, translation into more widespread utilization remains limited due to the technical difficulty associated with graft anastomoses, which requires precision to achieve adequate length and caliber of the cuffs to avoid vascular anastomotic twisting or excessive tension, which can result in damage to the graft. The present protocol describes a modified technique for performing heterotopic cervical cardiac transplantation in mice which involves cuff placement on the recipient's common carotid artery and the donor's pulmonary artery in alignment with the direction of the blood flow.

Mouse cardiac transplantation models represent valuable research tools for studying transplantation immunology. The present protocol details mouse heterotopic cervical cardiac transplantation that involves the placement of cuffs on the recipient's common carotid artery and the donor's pulmonary artery trunk to allow for laminar blood flow.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Murine models of cardiac transplantation are frequently utilized to study ischemia-reperfusion injury, innate and adaptive immune responses after ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. However, only minor improvement in the long-term results of transplanted solid organs could be observed over the past decades. In this context, chronic allograft vasculopathy (CAV) still represents the leading cause of late organ failure in cardiac, renal and pulmonary transplantation.
Thus far, the underlying pathogenesis of CAV development remains unclear, explaining why effective treatment strategies are presently missing and emphasizing a need for relevant experimental models in order to study the underlying pathophysiology leading to CAV formation. The following protocol describes a murine heterotopic cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique. In this technique, a segment of the thoracic aorta is interpositioned in the right common carotid artery. With the use of the non-suture cuff technique, an easy to learn and reproducible model can be established, minimizing the possible heterogeneity of sutured vascular micro anastomoses.

Here, we present a protocol of heterotopic aortic transplantation in mice using the non-suture cuff technique in a cervical murine model. This model can be used to study the underlying pathology of chronic allograft vasculopathy (CAV) and can help evaluate new therapeutic agents in order to prevent its formation.

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

A Modified Cuff Technique for Mouse Cervical Heterotopic Heart Transplantation Model

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for investigating the mechanism of cardiac allograft rejection in preclinical studies because of their high homology with human genes. This understanding would help develop unique approaches to improving patients&#39; long-term survival treated with cardiac allografts. In a mouse model, abdominal donor heart implantation is commonly performed with an end-to-end&#160;anastomosis to the recipient&#39;s aorta and inferior vena cava using stitches. In this model, the donor&#39;s heart is implanted by end-to-end anastomosis to the recipient&#39;s carotid artery and jugular vein by the modified-Cuff technique. The transplantation surgery is performed without stitching and thus may increase the survival of the recipient since there is no interference with the blood supply and venous reflux of the lower body. This mouse model would help investigate the mechanisms underlying the immunological and pathological (acute/chronic) rejection of cardiac allografts.

In the present protocol, a mouse heart transplantation model is used for investigating the mechanism of cardiac allograft rejection. In this heterotopic heart transplantation model, operation efficiency is improved, and the survival of cardiac grafts is ensured by a cervical end-to-end anastomosis of heart implantation using a modified Cuff technique.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for ...

Fare Karaciğer Transplantasyonunda Etkili Vasküler Anastomoz Stratejileri

Vascular Reconstruction with the Cuff Technique in Mouse Orthotopic Liver Transplantation

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. However, the technical challenges pose a barrier to utilizing this valuable experimental model and passing on these skills to the next generation. The most challenging aspect of this procedure is vascular reconstruction, including the portal vein (PV), infrahepatic inferior vena cava (IHIVC), and suprahepatic inferior vena cava. The use of plastic cuffs, rather than sutures, allows for smoother PV and IHIVC reconstruction. Vessels are reconstructed by attaching a cuff made from an intravenous catheter to the tip of the graft vessel and interposing the cuff into the recipient vessel. The two most crucial aspects are properly visualizing the inner lumen of the vessel and avoiding the use of excessive force. Our aim is to provide a technical overview of vascular reconstructions using the cuff technique in recipient surgery. These technical tips for the cuff technique are expected to help microsurgeons facilitate vascular reconstruction and advance their research.

Yazar Spotlight: Yağlı Karaciğer Transplantasyonunda Soğuk İskemi ve Sıcak Reperfüzyon Hasarının Araştırılması

This protocol provides technical information for vessel reconstruction using the cuff technique in mouse orthotopic liver transplantation.

Fare Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunda Cuff Tekniği ile Vasküler Rekonstrüksiyon

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. ...

Kol tekniği aort transplantasyonu - eğitici bir Video bir fare Model kullanma

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Damar Hastalığı Çalışmaları Farelerde Ortotopik Aort Nakli

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Fare Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunda Cuff Tekniği ile Vasküler Rekonstrüksiyon

Fare Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunda Cuff Tekniği ile Vasküler Rekonstrüksiyon

Fare Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunda Cuff Tekniği ile Vasküler Rekonstrüksiyon