その優秀な技術支援の Uli Heuter レオン デッカーとの優秀な編集協力、ピーター Kurdybacha ローマ ヴィツォレクに感謝したいと思います。

動物を対象とする手順がアーヘン工科大学、アリゾナ州 84 02.04.2012.A234 で承認された機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC).
 注: CD1 の背景を持つ成人男性野生型マウスを使用して、手順を説明します。食品、動物用の特殊なコントロールや治療への適切なアクセスを確保し、手術前後の専門研究所単位でマウスを飼うため。動物を購入した場合の手術を行う前に、1 週間を順化外。
 1 ドナーの準備 <ol><li>感染症を避けるために手術中に滅菌状態を維持するために滅菌材料・機器を使用します。</li>。
	<li>は、ボリューム イソフルランとフェイス マスクを通して酸素を 100% 1.5% の混合物に各マウスを麻酔します。仰臥位とテープでプラットフォーム オペレーティング テーブルにすべての足でマウスを置きます。その反射を確認するには、マウスを十分に麻酔、確かに後部のフィートをつまんでします。プロシージャの間に乾燥を防ぐために目の上眼軟膏を置きます</li>。
	<li>脱毛ジェルを使用して腹部からすべての髪を削除または髭剃りを使用します。無菌条件下で操作を実行します。クロルヘキシジンと滅菌水のスクラブを交互に腹部を消毒します</li>。
	<li>ハサミやメスで正中線腹部切開を介してドナー大動脈を削除します。右に手動で腸を撤回します。手動で軽くパウダー フリー手袋を使用する側に上腸を反映します。
	<ol><li>それを湿った保つため生理食塩水で湿らしたガーゼの部分に腸を配置します</li>。
		<li>離れて非常に慎重にピンセットで鈍的切離を使用して周囲の組織から腹部大動脈を解剖します</li>。
		<li>ピンセットで腎動脈と上大静脈からの分岐の間に大動脈のセグメントを区切ります</li>。
		<li>このセグメントを非常に慎重に 11-0 モノフィラメント縫合を使用のすべての小さな枝を確保します</li>。
		<li>大動脈を削除する前に下大静脈にヘパリンの 50 U を含む生理食塩水の溶液 0.5 ミリリットル (mL) を挿入します</li>。
		<li>大動脈のセグメントが削除された後の exsanguinate ドナー動物ができます</li>。
		<li>生理食塩水を完全にグラフトをすすいで氷冷生理食塩水の容器にすぐに転送します</li>。
	</ol></li></ol> 2。受信者の準備 <ol><li>ボリューム イソフルランとフェイス マスクを通して酸素を 100% 1.5% の混合物を持つ受信者の動物の麻酔を髪を削除し、(セクション 1) を駆除します。メスと骨盤に、剣から中間線切開を行い、腹部の壁を撤回します。プロシージャの間に乾燥を防ぐために目の上眼軟膏を置きます</li>。
	<li>ラップ食塩水内腸ガーゼを湿らせたし、動物に非常にゆっくり転置 &#39; s 右</li>。
	<li>Dissect 高齢者大動脈腎動脈の間無料の近位と遠位のピンセット分岐します</li>。
	<li>このセグメントを非常に慎重に 11-0 モノフィラメント縫合を使用のすべての小さな枝を確保します</li>。
	<li>6-0 シングル絹縫合糸で大動脈の近位および遠位部分をクランプします</li>。
	<li>クランプ間の中間に大動脈を分割し、ルーメン オープンをフラッシュするヘパリン生理食塩水で切口を灌漑します</li>。
	<li>は世話を正しく合わせてドナーと受信者 (大動脈の任意のねじれを避けるために 11-0 のモノフィラメントで縫合に続いて受信容器に挿入餌容器端と同所性同種の位置にグラフトを配置します。 図 1) 10.</li> <li>吻合部の検査を実施した後、合字を慎重に取り外します。まず遠位クランプをリリースします。この方が低気圧が近位部の高圧側を解放する前に、一緒に壁を保持します</li>。
	<li>はすぐに移植を灌流し、パルスが見えるを確認してください。絹の残党を慎重に取り外します。ドナーと受信者の大動脈の間最適なラップの長さは 1-2 mm.</li>
	<li>腹部の内容を腹腔内に戻り、全体を閉じる実行中 3-0 ポリグ リコール酸縫合糸で巻き</li>。
	<li>マウス ブプレノルフィンを与える (0.05 mg/kg 体重の皮下 (SC)) 麻酔を終了する前にします</li>。
	<li>放置しないでください動物それが完全に意識するまで。疼痛管理 buprenophine 0.05 mg/kg 体重で療法が SC 術後後 3 日間一日に三回管理機関監督機関による承認</li>。
	<li>組織採取、麻酔として受信者のマウスの上記の説明し、4% ホルムアルデヒド/PBS、続いてリン酸緩衝生理食塩水 (PBS) で血管のフラッシュ (pH 7.4 を =) 心臓穿刺によって。グラフトをそっと取り外します。4% ホルムアルデヒド/PBS で一晩固定後プロセス標本はさらに、パラフィンに埋め込む</li>。
</ol>

<ol>
	<li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-+invasive+in+vivo+analysis+of+a+murine+aortic+graft+using+high+resolution+ultrasound+microimaging.">Non- invasive in vivo analysis of a murine aortic graft using high resolution ultrasound microimaging.</a> Eur J Radiol. 81 (2), 244-249 (2012).</li><li>Daugherty, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+atherosclerosis.">Mouse models of atherosclerosis.</a> Am J Med Sci. 323 (1), 3-10 (2002).</li><li>Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+arteriosclerosis:+from+arterial+injuries+to+vascular+grafts.">Mouse models of arteriosclerosis: from arterial injuries to vascular grafts.</a> Am J Pathol. 165 (1), 1-10 (2004).</li><li>Daugherty, A., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+abdominal+aortic+aneurysms.">Mouse models of abdominal aortic aneurysms.</a> Arterioscler Thromb Vasc .Biol. 24 (3), 429-434 (2004).</li><li>Zernecke, A., Shagdarsuren, E., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+in+atherosclerosis:+an+update.">Chemokines in atherosclerosis: an update.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28 (11), 1897-1908 (2008).</li><li>Chereshnev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+heterotopic+aortic+arch+transplantation.">Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation.</a> J Surg Res. 111 (2), 171-176 (2003).</li><li>Koulack, J., McAlister, V. C., Giacomantonio, C. A., Bitter-Suermann, H., MacDonald, A. S., Lee, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Engelbrecht, G., Kahn, D., Duminy, F., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+rapid+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">New rapid technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 13 (6), 340-344 (1992).</li><li>Baxter, K., Hao, P. M., Howden, B. O., Saunder, A., Jablonski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+technique+of+abdominal+heart+transplantation+in+the+rat.">Modified technique of abdominal heart transplantation in the rat.</a> J Heart Lung Transplant. 17 (11), 1057-1064 (1998).</li><li>Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice:+a+new+model+of+allograft+arteriosclerosis.">Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis.</a> J Heart Lung Transplant. 18 (10), 946-951 (1999).</li><li>Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histopathology+of+microarterial+anastomoses:+end-to-end+versus+end-in-end+(sleeve)+technique.">Histopathology of microarterial anastomoses: end-to-end versus end-in-end (sleeve) technique.</a> J Hand Surg Am. 15, 619-625 (1990).</li><li>Charo, I. F., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+roles+of+chemokines+and+chemokine+receptors+in+inflammation.">The many roles of chemokines and chemokine receptors in inflammation.</a> N Engl J Med. 354 (6), 610-621 (2006).</li><li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+surgical+technique+for+the+establishment+of+a+murine+model+of+aortic+transplantation.">Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation.</a> Microsurgery. 18 (6), 368-371 (1998).</li><li>Guo, L., Agarwal, A., George, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice+for+the+study+of+vascular+disease.">Orthotopic aortic transplantation in mice for the study of vascular disease.</a> J Vis Exp. (69), e4338 (2012).</li></ol>

著者は、彼らは競合する金銭的な利益があることを宣言します。

この研究の前にマウスでの他の各種の移植モデルは徹底的に分析3,6,7,10,13,14.私たちの条件にマッチした従来のエンド-エンド縫合方法と比較してスリーブ吻合部の高い信頼性を示したと Dambrinらによって変更とスリーブを用いた大動脈移植モデルが選択されました。1,10。
この手法は、クロス クランプ時間かなり短縮術中大動脈へのダメージを最小限に抑えることと多くの点で有利です。血栓症の発生率が低いは、容器口径ドナーと受信者の間の潜在的な不一致を避けることに加えられなかった。上記の観察はこの手法をマウスの大動脈移植における血管疾患を調査するため非常に作る。
超音波が移植後 8 週間が実行されたフォロー アップ研究で有意な変化は認められなかった.これは手術中に大動脈への損傷が最小限1だろうと仮定を確認しました。
この記事で紹介した移植術は障害血管整合性とその機能の両方を保証します。したがって、この実験的移植モデルが退行性血管疾患遺伝子改変マウスでの将来の分子および薬理学的調査のための貴重なツールとして可能性があります判断できます。
ビデオのガイドすることができますこの単純な動静脈動脈モデルの使用を示す教材として機能することと、血管病態の多くの重要な問題についてさらに実り多い議論に貢献することと考えています。この非常に急速な吻合法は、遺伝子組み換えマウスで血管疾患を勉強するに使えます。移植併用動脈瘤モデルでの変更としても使えます。
プロシージャの間に重要なポイントがあります。縫合自体を配置することは、最も重要なステップです。外科医は、ドナーとレシピエントの適切な配置による大動脈の任意のねじれを避けるために世話をするが。クランプは、吻合部の検査後慎重に削除されます。遠位クランプは、まず近位部の高圧側のリリース前に壁を保持している低圧の結果常に解放する必要があります。正しく次のリリースのシーケンスの結果を出血でしょう。

移植自体によって引き起こされる特定の血管反応と arteriogenic 環境に接続されている特定の全身的要因の識別をできるマウス大動脈移植モデルに細心の注意を支払われている先行研究で指摘したよう1,2,3。 ここで重要な役割を果たしている主要な要因は、ノックアウト、トランスジェニック マウスの可用性です。このようなモデルに関与識別および退行性血管疾患、動脈硬化や動脈瘤形成4,などの開発に関連付けられている新しい病態生理学的経路を決定する可能性を提供しています5。
それは、本質的な虚血/再灌流を移植中に移植用血管への損傷が表示されますは注目に値するです。したがって、移植の整合性や術後の期間中に予期しない炎症性反応に関する特定の問題の発生がおそらく血管の変性疾患3 の病態生理学的変化を除外除外できません。、4,5,6,7。スリーブ吻合は直径 1 ミリ以下の血管の動脈吻合のため代替エンドで方法で、大動脈に続いて合わせられたラットの腎・心臓移植で正常に適用されています。Dambrinらによるマウスの移植8,9,10,11。
スリーブの移植技術を用いた大動脈損傷は非常に技術的な失敗率が低く、平均でわずか 20 分を持続的な原因を最小限に抑えます。以前の研究結果は、スリーブ法1を用いた移植後体内の isograft の構造と機能性を実証しています。Dambrinら説明短い学習曲線の成功率は 78% を終わった後10。血栓症などの合併症はまれですが、たとえば Engelbrechtらがラット8腎移植でスリーブを用いた血栓症を観察しなかったです。
スリーブ吻合とマウス大動脈移植モデルは、iso/同種移植血管反応を研究する迅速かつ簡単なツールです。このビデオは、当研究室で実施する大動脈移植手順を示しています。この移植モデル血管変性疾患の根本的な病理メカニズムを定義する際に役に立つかもしれませんし、分子および薬理学的介入の12のそれ以上の評価に貢献するかもしれない。

<table><tbody><tr><td>Halsey Needle Holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12001-13</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps -</td><td>Fine Science Tools</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Lexer-Baby Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14079-10</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Micro Needle Holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12060-01</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Scissors</td><td>Aesculap, Germany</td><td>Typ OC498R</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Suture Forceps</td><td>Geuder, Germany</td><td>19015</td><td></td></tr><tr><td>6-0 silk black (Silk)</td><td>Deknatel, Research Triangle Park NC, USA</td><td>18020-60- FST</td><td></td></tr><tr><td>11-0 monofilament (Ethilon)</td><td>Ethicon, Norderstedt, Germany</td><td>EH7438G</td><td></td></tr><tr><td>3-0 polyglycolic acid suture (Serafit)</td><td>Serag-Wiessner, Naila, Germany</td><td>60203214</td><td></td></tr><tr><td>Isofluorane</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% saline</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthene eye and nose cream</td><td>Bayer, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscop</td><td>Zeiss</td><td>Opmi MDO/S5</td><td></td></tr><tr><td>Vaporiser</td><td>Eickemeyer</td><td>TEC3</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound</td><td>Vevo, Canada</td><td>770,2100</td><td></td></tr></tbody></table>

using the sleeve technique in a mouse model of aortic transplantation - an instructional video

スリーブを用いた同所性同種大動脈弁移植は、唯一の 10-20% の故障率で大動脈への損傷を低減します。スリーブ メソッドを使用してマウスの大動脈を吻合するために時間は短くて簡単な平均 20 分、iso/同種移植の研究を許可します。次の資料では、私たちの研究室で使用される大動脈移植手順について説明します。マウスは、1.5% ボリューム イソフルランとフェイス マスクを通して 100% の酸素の混合物で麻酔をかけられました。この時点で、大動脈腎動脈とその分岐間のセグメントは、上大静脈、自由に準備と clampedat から分離された単一の絹糸と近位および遠位のセグメント。大動脈の削除する前に、ヘパリンを含む食塩は下大静脈に注入されました。大動脈クランプの間カットされたし、生理食塩水ヘパリン溶液を用いて内腔をフラッシュします。モノフィラメント縫合糸で袖のテクニックは、同所性同種位置で腹部大動脈を移植するために使用されました。

血栓症の高いリスクがあったが、マウスがない観測の身体障害を持つ 15-30 分以内麻酔から回復しました。超音波解析が行われた術後フォロー。野生型マウスの研究で使用されるは、内腔の寸法変化を起こしません。したがって、狭窄も動脈瘤の形成が観察されました。移植動物は血管壁 (図 2) のプラーク開発を展示できませんでした。
プラーク, 平滑筋細胞とマクロファージの集積を決定する immunohistology など従来の汚損プロシージャを使用できます。本研究では組織学的免疫組織化学染色をグラフトの整合性をテストする接ぎ木後 6 週間行った。組織染色 (ヘマトキシリンとエオシン (HE) および免疫組織化学染色 (平滑筋アクチン (SMA) とマクロファージ (MAC2)) (図 3) を見せてくれた平滑筋細胞、内皮細胞のライニング、および no の分布パターンをそのまま内膜の細胞の蓄積。グラフト血管 (図 3) で検出された重要な病変や細胞の活性化がないことが示唆されました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig1.jpg"> 
図 1: 袖の手法。腹部大動脈は、袖のテクニックを使用して移植されました。この手順ではドナーの大動脈は浅刺さ餌容器内に存在と同所性同種の位置に置かれました。<a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig2.jpg"> 
図 2: 術中超音波画像と。移植移植 (A)、(B) 三次元超音波および B モード表示 (C) 後 6 週間の術中 (剖検) ビューの例です。術後のフォロー アップは、超音波を用いて行った。写真は、ルーメンの次元で変化なしでグラフトの開存を表示.また、狭窄や動脈瘤の形成は認められなかった。<a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig3.jpg"> 
図 3: 組織学的および免疫組織化学画像。移植後 6 週間で移植した動物の組織学的および免疫組織化学の代表的なイメージ。組織によって移植された大動脈に大きな病変認められなかった (ヘマトキシリンとエオシン、彼は、100 倍の倍率、スケールバー = 50 μ m)、免疫組織染色 (平滑筋アクチン SMA (赤)、またはマクロファージ MAC2 (緑) 200 X 倍率、スケール バー =25 μ m)。核カウンターで染色 DAPI (青).<a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

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Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

マウスでスリーブを用いた同所性同種大動脈移植モデルを提案します。それは非常に急速な吻合法のことで、血管疾患の研究に用いることができます。

大動脈弁移植 - 教則ビデオのマウスモデルでスリーブを用いた

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

using-sleeve-technique-mouse-model-aortic-transplantation-an

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

8.9K ビュー.  Ruhr- University Bochum. マウスでスリーブを用いた同所性同種大動脈移植モデルを提案します。それは非常に急速な吻合法のことで、血管疾患の研究に用いることができます。

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Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

血管疾患の研究のためのマウスにおける同所性大動脈移植

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

医学

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

変更されたカフ法を用いたマウス子宮頸心臓移植モデル

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique was developed and reported in 2001 by Niimi. Described here are the techniques that have evolved over more than a decade in the hands of three surgeons (Plenter, Grazia, Pietra) in our center. These techniques are now being passed on to a younger generation of surgeons and researchers.
Based largely on the Niimi experience, the procedures used have evolved in the fine details - details which we will endeavor to relate here in such a way that others may be able to use this very useful model. Like Niimi, we have found that a video aid to learning is a priceless resource for the beginner.

The manuscript describes the steps required to perform the heterotopic heart transplant in the mouse.

ネズミ異心臓移植技術

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to improve surgical efficiency. In our lab, we have optimized the cuff technique with two major steps. First, we used the inner tube technique to insert a temporary inner tube into the external jugular vein and carotid artery blood vessel to facilitate eversion of the vessel over the cuff. Second, we performed complete heterotopic cardiac transplantation through the collaboration of two experienced surgeons. These modifications effectively reduced the operation time to 25 minutes, with a success rate of 95%. In this report, we describe these procedures in detail and provide a supplemental video. We believe that this report on the improved cuff technique will offer practical guidance for murine heterotopic heart transplantation and will enhance the utility of this mouse model for basic research.

We introduce an inner tube approach to the cuff technique for mouse cervical heterotopic heart transplantation to help evert the vessel over the cuff. We found that cooperation between two experienced surgeons markedly shortens the operation time.

マウスの心臓移植のためのカフ技術の最適化

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

免疫・感染学

Mouse Heterotopic Cervical Cardiac Transplantation Utilizing Vascular Cuffs

Murine models of cardiac transplantation are frequently utilized to study ischemia-reperfusion injury, innate and adaptive immune responses after transplantation, and the impact of immunomodulatory therapies on graft rejection. Heterotopic cervical heart transplantation in mice was first described in 1991 using sutured anastomoses and subsequently modified to include cuff techniques. This modification allowed for improved success rates, and since then, there have been multiple reports that have proposed further technical improvements. However, translation into more widespread utilization remains limited due to the technical difficulty associated with graft anastomoses, which requires precision to achieve adequate length and caliber of the cuffs to avoid vascular anastomotic twisting or excessive tension, which can result in damage to the graft. The present protocol describes a modified technique for performing heterotopic cervical cardiac transplantation in mice which involves cuff placement on the recipient's common carotid artery and the donor's pulmonary artery in alignment with the direction of the blood flow.

Mouse cardiac transplantation models represent valuable research tools for studying transplantation immunology. The present protocol details mouse heterotopic cervical cardiac transplantation that involves the placement of cuffs on the recipient's common carotid artery and the donor's pulmonary artery trunk to allow for laminar blood flow.

血管カフを用いたマウスヘテロトピック頸部心臓移植

Murine models of cardiac transplantation are frequently utilized to study ischemia-reperfusion injury, innate and adaptive immune responses after ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. However, only minor improvement in the long-term results of transplanted solid organs could be observed over the past decades. In this context, chronic allograft vasculopathy (CAV) still represents the leading cause of late organ failure in cardiac, renal and pulmonary transplantation.
Thus far, the underlying pathogenesis of CAV development remains unclear, explaining why effective treatment strategies are presently missing and emphasizing a need for relevant experimental models in order to study the underlying pathophysiology leading to CAV formation. The following protocol describes a murine heterotopic cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique. In this technique, a segment of the thoracic aorta is interpositioned in the right common carotid artery. With the use of the non-suture cuff technique, an easy to learn and reproducible model can be established, minimizing the possible heterogeneity of sutured vascular micro anastomoses.

Here, we present a protocol of heterotopic aortic transplantation in mice using the non-suture cuff technique in a cervical murine model. This model can be used to study the underlying pathology of chronic allograft vasculopathy (CAV) and can help evaluate new therapeutic agents in order to prevent its formation.

改変非縫合カフ技術を用いたマウス子宮頸動脈大動脈移植モデル

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

A Modified Cuff Technique for Mouse Cervical Heterotopic Heart Transplantation Model

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for investigating the mechanism of cardiac allograft rejection in preclinical studies because of their high homology with human genes. This understanding would help develop unique approaches to improving patients&#39; long-term survival treated with cardiac allografts. In a mouse model, abdominal donor heart implantation is commonly performed with an end-to-end&#160;anastomosis to the recipient&#39;s aorta and inferior vena cava using stitches. In this model, the donor&#39;s heart is implanted by end-to-end anastomosis to the recipient&#39;s carotid artery and jugular vein by the modified-Cuff technique. The transplantation surgery is performed without stitching and thus may increase the survival of the recipient since there is no interference with the blood supply and venous reflux of the lower body. This mouse model would help investigate the mechanisms underlying the immunological and pathological (acute/chronic) rejection of cardiac allografts.

In the present protocol, a mouse heart transplantation model is used for investigating the mechanism of cardiac allograft rejection. In this heterotopic heart transplantation model, operation efficiency is improved, and the survival of cardiac grafts is ensured by a cervical end-to-end anastomosis of heart implantation using a modified Cuff technique.

マウス頸部異所性心臓移植モデルのための修正カフ法

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for ...

マウス肝移植における効率的な血管吻合のための戦略

Vascular Reconstruction with the Cuff Technique in Mouse Orthotopic Liver Transplantation

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. However, the technical challenges pose a barrier to utilizing this valuable experimental model and passing on these skills to the next generation. The most challenging aspect of this procedure is vascular reconstruction, including the portal vein (PV), infrahepatic inferior vena cava (IHIVC), and suprahepatic inferior vena cava. The use of plastic cuffs, rather than sutures, allows for smoother PV and IHIVC reconstruction. Vessels are reconstructed by attaching a cuff made from an intravenous catheter to the tip of the graft vessel and interposing the cuff into the recipient vessel. The two most crucial aspects are properly visualizing the inner lumen of the vessel and avoiding the use of excessive force. Our aim is to provide a technical overview of vascular reconstructions using the cuff technique in recipient surgery. These technical tips for the cuff technique are expected to help microsurgeons facilitate vascular reconstruction and advance their research.

著者スポットライト:脂肪肝移植における冷虚血と温再灌流障害の探索

This protocol provides technical information for vessel reconstruction using the cuff technique in mouse orthotopic liver transplantation.

マウス同所性肝移植におけるカフ技術による血管再建

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. ...

大動脈弁移植 - 教則ビデオのマウスモデルでスリーブを用いた

要約

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この動画の章

血管疾患の研究のためのマウスにおける同所性大動脈移植

変更されたカフ法を用いたマウス子宮頸心臓移植モデル

ネズミ異心臓移植技術

マウスの心臓移植のためのカフ技術の最適化

血管カフを用いたマウスヘテロトピック頸部心臓移植

改変非縫合カフ技術を用いたマウス子宮頸動脈大動脈移植モデル

マウス頸部異所性心臓移植モデルのための修正カフ法

マウス同所性肝移植におけるカフ技術による血管再建

マウス同所性肝移植におけるカフ技術による血管再建

マウス同所性肝移植におけるカフ技術による血管再建