11.20 : Высокоэффективная жидкостная хроматография: типы детекторов

Роль детекторов в высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) заключается в анализе растворенных веществ по мере их выхода из хроматографической колонки. Детектор распознает свойство растворенного вещества и генерирует соответствующие электрические сигналы, которые преобразуются в читаемый график отклика детектора в зависимости от времени элюирования, называемый хроматограммой на компьютере. Существует несколько типов детекторов ВЭЖХ, каждый из которых имеет свои преимущества и ограничения в зависимости от свойств аналита и требуемой чувствительности. Важно отметить, что ни один метод обнаружения ВЭЖХ не может обнаружить все аналиты. По этой причине системы ВЭЖХ могут включать два или более детекторов в одном цикле для повышения точности и чувствительности обнаружения. Некоторые часто используемые детекторы ВЭЖХ включают спектрофотометрические детекторы, детекторы показателя преломления, электрохимические детекторы, детекторы масс-спектрометрии, с преобразованием Фурье в инфракрасной области (FTIR), детекторы рассеяния света и фотоионизации.

УФ-видимые (UVD) и флуоресцентные (FLD) детекторы являются спектрофотометрическими детекторами. УФ-видимые детекторы измеряют количество света, поглощенного аналитом на определенной длине волны в присутствии непоглощающей подвижной фазы. Эти детекторы широко используются, поскольку они просты, надежны и обеспечивают хорошую чувствительность. Они наиболее эффективны для обнаружения соединений с ароматическими или сопряженными системами двойных связей. Флуоресцентные детекторы измеряют флуоресценцию, испускаемую аналитом при возбуждении светом определенной длины волны. Они высокочувствительны и селективны, что делает их подходящими для обнаружения соединений с флуоресцентными свойствами. Они обычно используются для анализа фармацевтических препаратов, загрязнителей окружающей среды, нефтепродуктов и натуральных продуктов.

Детекторы с показателем преломления (RID) измеряют разницу в показателе преломления между подвижной фазой и аналитом при прохождении через детектор. Они реагируют почти на все растворенные вещества, но у них есть некоторые недостатки. Они чувствительны к изменениям давления и температуры, имеют низкую чувствительность и не могут обнаруживать следовые количества аналитов. Они обычно используются для анализа нехромофорных и нефлуоресцентных соединений, таких как сахара, липиды и полимеры.

Электрохимические детекторы (ECD) измеряют электрические свойства аналита, такие как его окислительный или восстановительный потенциал. Эти детекторы основаны на амперометрии, вольтамперометрии, кулонометрии и кондуктометрии. Они обычно используются для анализа соединений, которые могут быть электрохимически активными, таких как нейротрансмиттеры, аминокислоты и пестициды.

Масс-спектрометрические (MС) детекторы идентифицируют и количественно определяют аналиты на основе их отношения массы к заряду. Они высокочувствительны и специфичны, что делает их подходящими для обнаружения следовых количеств аналитов. Проблема с этими детекторами заключается в том, что им требуются образцы в газовой фазе, а растворитель должен быть испарен. Масс-спектрометры обычно используются для анализа сложных смесей, таких как белки, пептиды и метаболиты. Другие детекторы включают FTIR, детекторы рассеяния света и фотоионизации.