저자 아무 승인 있다.

메서드를 사용 하면 보고는 9 일 2 월 2016 (참조 10571)에 본 머 스 대학 연구 윤리 위원회에서 윤리적인 승인을 받은 연구에 활용 했다.
 1. LSCI 설정 <ol><li>시스템 기능에 대 한 그것의 3 개의 소켓 (전원 공급 장치, 범용 직렬 버스 (USB)와 IEEE1394)를 moorFLPI LSCI 후면 패널 연결.</li>
	<li>MoorFLPI LSCI는, 거꾸로 돌아서 지원에 고정으로 4 나사를 사용 하 여 데스크톱 지원 팔 조립 올리다</li>
	<li>하향 이미징 때 장착 브래킷을 돌립니다. 
	참고: 있는 LSCI는 3 개의 컨트롤: (1) 확대/축소 조절기 &#8211; 위치에 설정 하는 이미징 덜 확대 조정 될 수 있습니다 작고 큰 시야에 대 한 최대 및 최소 설정을 각각. 반복성을 보장 하기 위해, 인덱싱 링 라벨 제공 됩니다; (2) 초점 조정자 &#8211;이 측정 거리에 의존 하 고 이미지 위치 설정 된 후 조정 해야 합니다. 반복성을 보장 하기 위해, 인덱싱 링 라벨 제공 됩니다; (3) 편광판 &#8211; 선형 편광 필터는 노출 된 장기에서 반사광을 최소화 하기 위해 사용할 수 있는 &#8211; 360 ° 회전 마운트를 돌릴 수 있다.</li>
	<li>는 카메라를 제어 하는 소프트웨어를 설치 합니다. 소프트웨어 측정 및 검토 기능을 제공 하는 두 개의 모듈로 나누어져.</li>
</ol> 2. 참가자 준비 <ol><li>확인 평가 (22 ± 1 ° C) 온도 제어 룸에서 수행 되 고 참가자는 실내 온도에 맞게 테스트 전에 10 분 동안 앉아 있다.</li>
	<li>피하기 인공 광과 주변광 785에서 작동 하는 적외선 레이저 소스 근처 moorFLPI에 영향을 미칠 수 있는 참가자 나는 LSCI에 빛나는 햇빛의 강한 원천이 nm. 
	참고: 주변 조명 수준을 허용 여부를 확인 하는 간단한 테스트 이미지 설정 윈도우를 열고 레이저 방해입니다. 이미지가 거의 완전히 검은 경우 다음 아무 추가 단계는 필요; 아직도 너무 많이 주변 빛 현재 이다, 추가 작업은 필요.</li>
	<li>참가자 장착, 경우, 바닥에 평평의 발 평가 통해 편안 하 고 대화 방지.</li>
	<li>장소 8 cm 2 접착제 불투명의 혈액 흐름을 마스크 피부 영역에 패치 (AOP) (예, Leukotape). 이 유물 운동, 높은 감도에서 LSCI의 단점에 대 한 계정 수행 되 고 신호 캐 microcirculatory 혈액 흐름의 측정을 위해 사용 됩니다.</li>
</ol> 3. 미세 이미지 측정 <ol><li>선택 &#39; 공간 처리 &#39; 152 x 113 픽셀에서 두 번째 캡처 당 25 프레임.</li>
	<li>선택 &#39; 라이브 이미지 측정 &#39; 영상 확대/축소, 초점 및 최소한의 반사광에 대 한 편광판을 조정 하 여 다음 참가자에서 20 cm의 위치를 조정 하 고. 이미지 꽤 나타납니다 &#39; 플랫 &#39;와 특색이.</li>
	<li>작은 변화 및 낮은 플럭스는 노출 시간 20 ms의 높은 감도 설정.</li>
	<li>25 Hz의 디스플레이 속도 0.3의 시간 상수를 사용 하 여 빠른 혈액 흐름 변화를 담당 하 고 이미지의 노이즈 감소를 통해 최적의 대비를 달성 하기 위해 s.</li>
	<li>두 개의 동일한 크기 (2cm 2) 관심 영역 (ROI), 투자 수익 1 및 ROI 2 라는 만듭니다. 그래서 8 cm 2 AOP 내 투자 수익 2을 맞춥니다. 돌 ROIs는 교환 하지 있도록 하지만 기계적 움직임 ROI 2 이상 AO 영역에 있는 경우 다시 중심에 대 한 필요를 줄이기 위해 2-4 cm 이내 가까이 보관. 
	참고: 혈액 흐름 측정 있을 것입니다 덜 정확 낮은 및 높은 강도 영역, 그래서 최적의 이득 설정 하는 것이 중요 하다. 이득 값 범위 0-사이 200. 최적의 이득 설정 값은 70-80의 범위에서 달성.</li>
	<li>수행 플럭스 참조 기준선을 기준으로 측량. 이 방법론의 소개 &#39; 나머지 &#39; 참조 기준으로 단계. 따라서, 익스프레스는 &#39; 빠른 &#39; 및 &#39; 느린 &#39; 비율로 단계 혈액 흐름, 베이스 라인에서 변경 &#39; 나머지 &#39; 단계.</li>
	<li>혈액 흐름 측정 비디오 포맷에 기록 하 고 이미지 검토 모듈을 사용 하 여 오프 라인 분석을 위해 저장.</li>
</ol> 4. 오프 라인 분석 참고: moorFLPI 이미지 검토 소프트웨어 비디오 분석을 수행 하 여 있습니다.
<li>계산 ROIs 일련의 평균 혈의 내 평균 유량 <ol>. 투자 수익 1 피부 혈액 흐름의 실제 측정 이며 ROI 2는 AOP에서 backscattered 레이저 반점 피부 신호.</li>
	<li>투자 수익 투자 수익 1 (피부 혈)에서 2를 빼면 평균 혈액 흐름 계산. 
	1-2 후 아 후 아 말은 혈액의 흐름 =</li></ol>

<ol>
	<li>Mahe, G., Rousseau, P., Durand, S., Leftheriotis, G., Abraham, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+speckle+contract+imaging+accurately+measures+blood+flow+over+moving+skin+surfaces.">Laser speckle contract imaging accurately measures blood flow over moving skin surfaces.</a> Microvas Res. 81 (2), 183-188 (2010).</li><li>Rousseau, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increasing+the+&amp;#34;region+of+interest&amp;#34;+and+&amp;#34;time+of+interest&amp;#34;,+both+reduce+the+variability+of+blood+flow+measurements+using+laser+speckle+contrast+imaging.">Increasing the &amp;#34;region of interest&amp;#34; and &amp;#34;time of interest&amp;#34;, both reduce the variability of blood flow measurements using laser speckle contrast imaging.</a> Microvas Res. 82, 88-91 (2011).</li><li>Hecht, N., Woitzik, J., Dreier, J., Vajkoczy, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoperative+monitoring+of+cerebral+blood+flow+by+laser+speckle+contrast+analysis.">Intraoperative monitoring of cerebral blood flow by laser speckle contrast analysis.</a> Neurosurg Focus. 27 (4), 1-6 (2009).</li><li>Mahe, G., Durand, S., Humeau-Heurtier, A., Leftheriotis, G., Abrham, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+experimental+conditions+on+noncontact+laser+recordings+in+microvascular+studies.">Impact of experimental conditions on noncontact laser recordings in microvascular studies.</a> Microcirculation. 19 (8), 669-675 (2012).</li><li>Cheng, H., Duong, T. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+laser-speckle-imaging+analysis+method+and+its+application+to+retinal+blood+flow+imaging.">Simplified laser-speckle-imaging analysis method and its application to retinal blood flow imaging.</a> Opt Lett. 32 (15), 2188-2190 (2007).</li><li>Doherty, J., McNamara, P., Clancy, N. T., Enfield, J. G., Leahy, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+instruments+for+investigation+of+microcirculatory+blood+flow+and+red+blood+cell+concentration.">Comparison of instruments for investigation of microcirculatory blood flow and red blood cell concentration.</a> J Biomed Opt. 14 (3), 034025 (2009).</li><li>Briers, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+speckle+contrast+imaging+for+measuring+blood+flow.">Laser speckle contrast imaging for measuring blood flow.</a> Opt Appl. 37 (1), 139-152 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> moorFLPI User Manual. (8), (2012).</li><li>Mahe, G., Durand, S., Humeau-Heurtier, A., Abraham, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Experimental+Conditions+on+Noncontact+Laser+Recordings+in+Microvascular+Studies.">Impact of Experimental Conditions on Noncontact Laser Recordings in Microvascular Studies.</a> Microcirculation. 19, 669-675 (2012).</li><li>Bahadori, S., Immins, T., Wainwright, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+calf+neuromuscular+electrical+stimulation+and+intermittent+pneumatic+compression+on+thigh+microcirculation.">The effect of calf neuromuscular electrical stimulation and intermittent pneumatic compression on thigh microcirculation.</a> Micro Res. 111, 37-41 (2017).</li><li>Omarjee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimisation+of+movement+detection+and+artifact+removal+during+laser+speckle+contrast+imaging.">Optimisation of movement detection and artifact removal during laser speckle contrast imaging.</a> Miscrovas Res. 97 (1), 75-80 (2015).</li></ol>

저자는 공개 없다.

이 연구의 목적은 측정 및 단일 실험에서 LSCI를 사용 하 여 미세 혈관 혈액의 속도 번갈아의 분석에 대 한 소설 기법을 소개 했다. 측정은 주변광, 진동, 호흡 등 꿈 틀 참가자 움직임 영향을 받을 수 있습니다. 프로토콜에서 설명 하는 단계는 모두 그 효과 최소화 하 고 혈액 미세의 안정적이 고 반복 가능한 측정을 얻을 하도록 설계 되었습니다.
그것은 프로토콜 내에서 모든 단계는 미세 혈액의 정확한 측정에 대 한 중요 한, 도입 기술 했다 발견 다음 순차 테스트 모든 가능한 설정 옵션 및 조합을 사용할 수 있는 등의 강조: 시간 상수, 확대/축소 설정, 노출 시간, 속도, 이득 및 플럭스 이미지 팔레트를 표시 합니다. 결과 분석 되었다 하 고 최적의 이미징 설정을 찾을 수 있도록 라이브 비디오 디스플레이 및 오프 라인 분석을 사용 하 여 반복 했다. 이것은 이미지 프로세싱 소프트웨어를 사용 하 여 높은 관류 생산 레이저 스펙 클 패턴의 급속 한 변화 하 고 잘 정의 된 얼룩의 낮은 콘트라스트 영역 비디오 이미지에서 생산 되는 결과적으로 사실 필수적 이었다. 관류 이미지 microcirculatory 관류의 색으로 구분 된 지도에서 다음 만들어집니다.
실험적인 지역 및 참여 준비 필수, 수를 발견 하 고 이러한 적외선 레이저 소스 근처 moorFLPI 방해로이 일광 (창)의 소스 또는 인공의 빛, 강한 소스 근처 일을 방지 하 여 제어할 수 있습니다. 그것은 참가자의 운동과 환경 진동 모두 혈 구별 되지 않은 신호를 생성 인정 했다 프로토콜 또한 한 AOP를 도입 했다. AOP 얇은 하지만 불투명, 빛 및 액세스할 수 있는 옵션을 피하기 위해 중요 한 반사광 현미경으로 거친 표면 영역을 제공 하는 단순 하지만 효과적인 선택이 될을 입증 했다. Omarjee 그 외 여러분 에 의해 예비 연구 11 하이라이트는 Leukotape 반사 신호 진폭 피부 다른 만들고 주제; 사이 크게 다릅니다 잠재적인 제한 그러나 마 외. 1 참가자의 급격 한 차이 발견. Leukotape는 다른 맞춤형 bilayer 접착 패치 보다 더 접근 방정식 (1) 측정의 정확도 대체 AOP를 사용 하 여 향상 될 수 있습니다.
오프 라인 분석 섹션 ROIs의 크기의 중요성 및 관심의 영역 내의 그들의 위치를 강조 했다. 처음에, 더 큰 투자 수익 1, 약 8 cm은2, 투자 수익 2 중첩이 시도 되었다. 이 방법론 곧 취소 유물 운동 투자 수익 2 이동 결과로 인해 안정적인 되었고 라이브 실험 위해 다시 투자 수익 2 센터 중지 했다. 또 다른 짧은 오는 이상 backscattered 신호 했다 그 때문에 투자 수익 1 오버레이 AOP, 평균 유량 이상 했다 계정을, AOP에서 지역 이었다. 이 미세 혈액의 큰 단면도 간과 되 고 따라서 결과 유출 데이터 잘못 되었습니다 것을 의미 합니다. 따라서, 방법론 2 cm의 어느 두 ROIs2, 8 cm2 및 (하지만 서로의 2-4 cm 이내 유지), 투자 수익 1 및 ROI 2 사이 아무 상호 작용의 AOP와 함께 혈액의 측정을 위한 안정적이 고 반복 분석 기법을 제공 미세입니다.

레이저 반점 대비 이미징 (LSCI)은 검증 된 비접촉, 실시간 모니터링 혈액 흐름 미세1,2,3,4,,56 을 분석 하는 방법 , 7.이 문서에 사용 되는 LSCI moorFLPI 전체 필드입니다. 고해상도로 공간과 일시적인 현상 이라고 "레이저 반점"를 사용 하 여 넓은 영역에 혈액 흐름 관류의 측정이 장치6의 주요 이점 중 하나입니다. 미세 혈관의 실시간 평가 흩어져 얼룩 패턴을 사용 하 여 카메라를 통해 촬영 된 패턴을 통해 이루어집니다. 이미지 프로세싱 소프트웨어는 높은 관류 레이저 반점 패턴에 의해 충전 결합 장치 (CCD) 통합은 급속 한 변화를 생성 하는 사실에 작동 하는 moorFLPI LSCI는 임상 및 생리 연구를 위한 것입니다, 그 낮은 대비8의 지역 생산 대비 계량 고 결과 속은 관류 이미지8을 생산 하기 위해 코딩 된 색상입니다.
불행 하 게도,는 LSCI 환경 진동, 유물 및 주제 영역9의 움직임에 아주 과민 하다. 이 날짜에 도전 하는 대체 흐름 상태를 공부 하는 때 제공 했다. 이 문서는 신경 근육 학 전기 자극 장치를 검사 되 고 사지의 움직임 있을 때 혈액 미세 측정 하는 데 사용 되었다 최근 연구10 에 설명 된 명시적 기술의 세부 사항을 설명 합니다.

<table><tbody><tr><td>moorFLPI LSCI</td><td>Moor Instruments</td><td>Not Available - Online Link Provided in descreption</td><td>moorFLPI is an instrument designed for the measurment of blood flow within microvasculature by using infra red laser speckle contrast analysis.&amp;nbsp; https://gb.moor.co.uk/</td></tr><tr><td>moorFLPI Image Review Module</td><td>Moor Instruments</td><td>No Available - Online Link Provided</td><td>Used with moorFLPI, user can record and measure changes in blood flow by changerating a colour coded map of tissue perfusion.&amp;nbsp; https://gb.moor.co.uk/</td></tr><tr><td>Leukotape</td><td>BSN Medical</td><td>72978-10</td><td>Medical tape with microporous surface. http://www.bsnmedical.co.uk/fileadmin/z-countries/United_Kingdom/PDF/L/Leukotape_K_A46PP_low_res_11112013.pdf</td></tr></tbody></table>

a novel approach to overcome movement artifact when using a laser speckle contrast imaging system for alternating speeds of blood microcirculation

레이저 반점 대비 영상 (LSCI) microcirculatory 혈액의 흐름을 측정 하기 위한 강력한 아직 간단한 기법을 제공 합니다. 피 동적 응답에 대 한 이상적인는 LSCI 같은 방식으로는 종래의 레이저 도플러 영상 (LDI)에 사용 됩니다. 그러나, 대략 1 밀리미터의 최대 피부 깊이 LSCI는 주로 표면 혈액의 흐름에 초점을 설계 되었습니다. 그것은 최대의 피부 표면 영역을 측정 하는 데 사용은 15 cm x 20 cm. 이 종이 계정을 microcirculations;의 속도 번갈아에 도입 된 새로운 기술 즉 모두 느리고 빠른 흐름 유량 측정은 LSCI를 사용 하 여. 소설 기법 또한 유물 운동에 높은 감도 LSCI의 가장 큰 단점을 극복 했다. 접착성 불투명 패치 (AOP)는 레이저 반점 피부 신호에서 AOP에서 LSCI 신호를 빼서 microcirculatory 혈액 흐름의 만족 스러운 기록에 대 한 소개 된다. 플럭스 변화 참조 기준선을 기준으로 측정 하는 경우는 LSCI 가장 강력 하기 때문에 최적의 설정은 또한 정의 백분율로 표시 하는 혈액 microcirculatory 플럭스와 기준선에서 변경. 이러한 변화는 혈액 흐름 시스템의 상태를 분석 하는 데 사용할 수 있습니다.

LSCI 실험 설정 확인 기능 도구 그림 1 에 설명 되어. 앞쪽 허벅지의 영역에 혈액 흐름의 측정을 위한 일반적인 참가자 준비 그림입니다. 조정 가능한 장착 브래킷 microvasculature 어떤 특정 피부 영역 내 혈액 흐름의 측정에 대 한 LSCI의 회전을 허용 한다. 그림 2 혈액 미세 측정에 대 한 프로토콜에서 설명 하는 맞춤된 설정 된 전형적인 원시 얼룩 이미지와 변환 된 얼룩 이미지의 예를 설명 합니다.
그림 3 은 피부 지역 및 AOP (3.1 단계) LSCI 원시 이미지 설치 (3.2 단계), 느린 혈액 흐름 (단계 3.3)에 대 한 라이브 이미지의 배치와 라이브 이미지는 빠른 혈 (3.4 단계) 번갈아 플럭스의 연속 데이터 기록 달성에 대 한 우리 ing moorFLPI LSCI 색상표 색 설정을 플럭스 레벨 사이의 차별화 수 있습니다. 표준 16 색 팔레트와 낮은 플럭스 본적이 파란색, 중간 플럭스 값은 녹색으로 볼과 높은 유량 값은 오렌지와 빨간색으로 볼 수 있습니다.
피부 혈 레이저 반점 관류 단위 (LSPU)로 표시 됩니다. 그림 4 는 피부의 지역에 투자 수익 1, 투자 수익 2 AOP의 그래픽 대표를 보여준다. 평균 혈 오프 라인 분석 투자 수익 1 및 투자 수익 2, 방정식 (1)에서 데이터를 사용 하 여 계산 됩니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig1.jpg"> 
그림 1: moorFLPI LSCI 실험 설정된 최대 데스크톱 지원 팔, 케이블 출력, 위치 제어 (조정자, 초점 조정자 및 편광판 확대), AOP 및 이미지 설정의 구성에 대 한 노트북 <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig2.jpg"> 
그림 2: 데이터 기록 전에 원시 얼룩 이미지. 2.1-2.2) 플럭스 및 원시 얼룩 덜 정확한 혈액 흐름 측정 될 수 있는 가난한 가시성 높은 이득 결과로 심하게 구성된 설정의 이미지. 2.3-2.4) 시스템 프로토콜에 의하여 구성 된 신뢰할 수 있는 결과 대 한 최대의 가시성과 올바른 이득 인. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig3.jpg"> 
그림 3: moorFLPI LSCI를 사용 하 여 설치 및 기록 측정의 개요. 3.1. 피부 (허벅지) 2 cm2 유물 운동에 대 한 계정에 AOP의 지역. 3.2)는 원시 얼룩 '평평 하 고 특색이 없는' 이미지 좋은 캐 최적의 설정으로 빛의 강도 나타내는. 3.3)는 라이브 이미지는 느린 혈액 흐름의 기록. 3.4)는 라이브 이미지는 빠른 혈액 흐름의 기록. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig4.jpg"> 
그림 4: 피부의 지역에 1 투자 수익, 투자 수익 2, AOP 레이아웃의 그래픽 표현. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="3">나머지 (기준선 참조) (LSPU)</td>
			<td colspan="4">느린 혈액 흐름 (LSPU)</td>
			<td colspan="4">적당 한 혈액의 흐름 (LSPU)</td>
			<td colspan="4">빠른 혈 (LSPU)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>의미 플럭스-ROI 1</td>
			<td>의미 플럭스-ROI 2</td>
			<td>혈액의 흐름을 의미</td>
			<td>의미 플럭스-ROI 1</td>
			<td>의미 플럭스-ROI 2</td>
			<td>혈액의 흐름을 의미</td>
			<td>혈액 흐름 증가 % 기준에서</td>
			<td>의미 플럭스-ROI 1</td>
			<td>의미 플럭스-ROI 2</td>
			<td>혈액의 흐름을 의미</td>
			<td>혈액 흐름 증가 % 기준에서</td>
			<td>의미 플럭스-ROI 1</td>
			<td>의미 플럭스-ROI 2</td>
			<td>혈액의 흐름을 의미</td>
			<td>혈액 흐름 증가 % 기준에서</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>157.9</td>
			<td>35.1</td>
			<td>122.8</td>
			<td>178.5</td>
			<td>41.6</td>
			<td>136.9</td>
			<td>10.9</td>
			<td>216.9</td>
			<td>44.6</td>
			<td>172.3</td>
			<td>33.5</td>
			<td>418.9</td>
			<td>77.5</td>
			<td>341.4</td>
			<td>94.2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
표 1: 기준, 느리고, 중간에 투자 수익 1 및 투자 수익 2 LSPU에 플럭스를 의미 하 고 혈액 흐름을 빠르게. 혈액 흐름 증가 초기 단계에서 비율 변화로 표현 된다.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig5.jpg"> 
그림 5: 투자 수익 1 및 ROI 2 피부 표면 영역 (허벅지)에 포지셔닝의 예. 16 색 팔레트 perfusions의 조미를 설명합니다. 데이터는 관류 단위로 투자 수익 1 및 ROI 2 기록 하 고 혈액 미세 측정 방정식 1에에서 설명 된 대로 뺀. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Approach to Overcome Movement Artifact When Using a Laser Speckle Contrast Imaging System for Alternating Speeds of Blood Microcirculation at JoVE.com

A Novel Approach to Overcome Movement Artifact When Using a Laser Speckle Contrast Imaging System for Alternating Speeds of Blood Microcirculation

레이저 반점 대비 미세 혈액의 속도 번갈아 위한 이미징 시스템을 사용 하는 경우 운동 유물을 극복 하는 새로운 접근 방식

이 연구 측정 및 레이저 반점 대비 영상 장치를 사용 하 여 단일 실험에서 미세 혈관 혈액의 속도 번갈아의 분석에 대 한 새로운 기술을 소개 합니다.

The laser speckle contrast imager (LSCI) provides a powerful yet simple technique for measuring microcirculatory blood flow. Ideal for blood dynamic ...

a-novel-approach-to-overcome-movement-artifact-when-using-laser

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

8.3K 조회수.  Bournemouth University. 이 연구 측정 및 레이저 반점 대비 영상 장치를 사용 하 여 단일 실험에서 미세 혈관 혈액의 속도 번갈아의 분석에 대 한 새로운 기술을 소개 합니다.

비디오: A Novel Approach to Overcome Movement Artifact When Using a Laser Speckle Contrast Imaging System for Alternating Speeds of Blood Microcirculation

How to Build a Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) System to Monitor Blood Flow

Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) is a simple yet powerful technique that is used for full-field imaging of blood flow. The technique analyzes fluctuations in a dynamic speckle pattern to detect the movement of particles similar to how laser Doppler analyzes frequency shifts to determine particle speed. Because it can be used to monitor the movement of red blood cells, LSCI has become a popular tool for measuring blood flow in tissues such as the retina, skin, and brain. It has become especially useful in neuroscience where blood flow changes during physiological events like functional activation, stroke, and spreading depolarization can be quantified. LSCI is also attractive because it provides excellent spatial and temporal resolution while using inexpensive instrumentation that can easily be combined with other imaging modalities. Here we show how to build a LSCI setup and demonstrate its ability to monitor blood flow changes in the brain during an animal experiment.

How to Build a Laser Speckle Contrast Imaging LSCI System to Monitor Blood Flow

This video demonstrates how to build a Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) system that can easily be used to monitor blood flow.

어떻게 레이저를 작성하는 것은 혈액 흐름을 모니터링하는 콘트라스트 이미징 (LSCI) 시스템 스페클

Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) is a simple yet powerful technique that is used for full-field imaging of blood flow.  The technique analyzes ...

연구

신경과학

Micro-particle Image Velocimetry for Velocity Profile Measurements of Micro Blood Flows

Micro-particle image velocimetry (&mu;PIV) is used to visualize paired images of micro particles seeded in blood flows. The images are cross-correlated to give an accurate velocity profile. A protocol is presented for &mu;PIV measurements of blood flows in microchannels. At the scale of the microcirculation, blood cannot be considered a homogeneous fluid, as it is a suspension of flexible particles suspended in plasma, a Newtonian fluid. Shear rate, maximum velocity, velocity profile shape, and flow rate can be derived from these measurements. Several key parameters such as focal depth, particle concentration, and system compliance, are presented in order to ensure accurate, useful data along with examples and representative results for various hematocrits and flow conditions.

Micro-particle image velocimetry (&mu;PIV) is used to visualize paired images of micro particles seeded in blood flows which are cross-correlated to give an accurate velocity profile. Shear rate, maximum velocity, velocity profile shape, and flow rate, each of which has clinical applications, can be derived from these measurements.

마이크로 혈액 흐름의 속도 분포 측정을위한 마이크로 입자 이미지 유속계

Micro-particle image velocimetry (&mu;PIV) is used to visualize paired images of micro particles seeded in blood flows. The images are cross-correlated to ...

생체공학

Controlled Microfluidic Environment for Dynamic Investigation of Red Blood Cell Aggregation

Blood, as a non-Newtonian biofluid, represents the focus of numerous studies in the hemorheology field. Blood constituents include red blood cells, white blood cells and platelets that are suspended in blood plasma. Due to the abundance of the RBCs (40% to 45% of the blood volume), their behavior dictates the rheological behavior of blood especially in the microcirculation. At very low shear rates, RBCs are seen to assemble and form entities called aggregates, which causes the non-Newtonian behavior of blood. It is important to understand the conditions of the aggregates formation to comprehend the blood rheology in microcirculation. The protocol described here details the experimental procedure to determine quantitatively the RBC aggregates in microcirculation under constant shear rate, based on image processing. For this purpose, RBC-suspensions are tested and analyzed in 120 x 60 &#181;m poly-dimethyl-siloxane (PDMS) microchannels. The RBC-suspensions are entrained using a second fluid in order to obtain a linear velocity profile within the blood layer and thus achieve a wide range of constant shear rates. The shear rate is determined using a micro Particle Image Velocimetry (&#181;PIV) system, while RBC aggregates are visualized using a high speed camera. The videos captured of the RBC aggregates are analyzed using image processing techniques in order to determine the aggregate sizes based on the images intensities.

The protocol described details an experimental procedure to quantify Red Blood Cell (RBC) aggregates under a controlled and constant shear rate, based on image processing techniques. The goal of this protocol is to relate RBC aggregate sizes to the corresponding shear rate in a controlled microfluidic environment.

적혈구 집계 동적 조사를위한 미세 유체 제어 환경

Blood, as a non-Newtonian biofluid, represents the focus of numerous studies in the hemorheology field. Blood constituents include red blood cells, white ...

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

Intravital microscopy (IVM) is a powerful optical imaging technique that has made possible the visualization, monitoring and quantification of various biological events in real time and in live animals. This technology has greatly advanced our understanding of physiological processes and pathogen-mediated phenomena in specific organs.
In this study, IVM is applied to the mouse liver and protocols are designed to image in vivo the circulatory system of the liver and measure red blood cell (RBC) velocity in individual hepatic vessels. To visualize the different vessel subtypes that characterize the hepatic organ and perform blood flow speed measurements, C57Bl/6 mice are intravenously injected with a fluorescent plasma reagent that labels the liver-associated vasculature. IVM enables in vivo, real time, measurement of RBC velocity in a specific vessel of interest. Establishing this methodology will make it possible to investigate liver hemodynamics under physiological and pathological conditions. Ultimately, this imaging-based methodology will be important for studying the influence of L. donovani infection&#160;on hepatic hemodynamics.
This method can be applied to other infectious models and mouse organs and might be further extended to pre-clinical testing of a drug&#8217;s effect on inflammation by quantifying its effect on blood flow.

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

This article reports on a detailed method for the dynamic measurement and quantification of blood flow velocity within individual blood vessels of the mouse liver vasculature using intravital microscopy imaging in combination with a specific methodology for image acquisition and analysis.

다음 간 생체 내에 현미경 이미징<em&gt; 슈만 편모충</em&gt; 감염 : 간 혈류의 평가

Intravital microscopy (IVM) is a powerful optical imaging technique that has made possible the visualization, monitoring and quantification of various ...

면역학 및 감염병학

Spatial Temporal Analysis of Fieldwise Flow in Microvasculature

Changes in blood flow velocity and distribution are vital in maintaining tissue and organ perfusion in response to varying cellular needs. Further, appearance of defects in microcirculation can be a primary indicator in the development of multiple pathologies. Advances in optical imaging have made intravital microscopy (IVM) a practical approach, permitting imaging at the cellular and subcellular level in live animals at high-speed over time. Yet, despite the importance of maintaining adequate tissue perfusion, spatial and temporal variability in capillary flow is seldom documented. In the standard approach, a small number of capillary segments are chosen for imaging over a limited time. To comprehensively quantify capillary flow in an unbiased way we developed Spatial Temporal Analysis of Fieldwise Flow (STAFF), a macro for FIJI open-source&#160;image analysis software. Using high-speed image sequences of full fields of blood flow within capillaries, STAFF produces&#160;images that represent motion over time called kymographs for every time interval for every vascular segment. From the kymographs STAFF calculates velocities from the distance that red blood cells move over time, and outputs the velocity data as a sequence of color-coded spatial maps for visualization and tabular output for quantitative analyses. In normal mouse livers, STAFF analyses quantified profound differences in flow velocity between pericentral and periportal regions within lobules. Even more unexpected are the differences in flow velocity seen between sinusoids&#160;that are side by side and fluctuations seen within individual vascular segments over seconds. STAFF is a powerful new tool capable of providing novel insights by enabling measurement of the complex spatiotemporal dynamics of capillary flow.

To quantify microvascular flow from high speed capillary flow image sequences, we developed STAFF (Spatial Temporal Analysis of Fieldwise Flow) software. Across the full image field and over time, STAFF evaluates flow velocities and generates a sequence of color-coded spatial maps for visualization and tabular output for quantitative analyses.

마이크로 혈관 구조에서 필드 와이즈 흐름의 공간 시간 분석

Changes in blood flow velocity and distribution are vital in maintaining tissue and organ perfusion in response to varying cellular needs. Further, ...

Blood Flow Imaging with Ultrafast Doppler

The pulsed-Doppler effect is the main technique used in clinical echography to assess blood flow. Applied with conventional focused ultrasound Doppler modes, it has several limits. Firstly, a finely tuned signal filtering operation is needed to distinguish blood flows from surrounding moving tissues. Secondly, the operator must choose between localizing the blood flows or quantifying them. In the last two decades, ultrasound imaging has undergone a paradigm shift with the emergence of ultrafast ultrasound using unfocused waves. In addition to a hundredfold increase in framerate (up to 10000 Hz), this new technique also breaks the conventional quantification/localization trade-off, offering a complete blood flow mapping of the field of view and a simultaneous access to fine velocities measurements at the single-pixel level (down to 50 &#181;m). This data continuity in both spatial and temporal dimensions strongly improves the tissue/blood filtering process, which results in an increase sensitivity to small blood flow velocities (down to 1 mm/s). In this method paper, we aim to introduce the concept of ultrafast Doppler as well as its main parameters. Firstly, we summarize the physical principles of unfocused wave imaging. Then, we present the Doppler signal processing main steps. Particularly, we explain the practical implementation of the critical tissue/blood flow separation algorithms and on the extraction of velocities from these filtered data. This theoretical description is supplemented by in vitro experiences. A tissue phantom embedding a canal with flowing blood-mimicking fluid is imaged with a research programmable ultrasound system. A blood flow image is obtained and the flow characteristics are displayed for several pixels in the canal. Finally, a review of in vivo applications is proposed, showing examples in several organs such as carotids, kidney, thyroid, brain and heart.

This protocol shows how to apply ultrafast ultrasound Doppler imaging to quantify blood flows. After a 1 s long acquisition, the experimenter has access to a movie of the full field of view with axial velocity values for each pixel every &#8776;0.3 ms (depending on the ultrasound time of flight).

The pulsed-Doppler effect is the main technique used in clinical echography to assess blood flow. Applied with conventional focused ultrasound Doppler ...

Laser Doppler: A Tool for Measuring Pancreatic Islet Microvascular Vasomotion In Vivo

As a functional status of microcirculation, microvascular vasomotion is important for the delivery of oxygen and nutrients and the removal of carbon dioxide and waste products. The impairment of microvascular vasomotion might be a crucial step in the development of microcirculation-related diseases. In addition, the highly vascularized pancreatic islet is adapted to support endocrine function. In this respect, it seems possible to infer that the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion might affect pancreatic islet function. Analyzing the pathological changes of the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion may be a feasible strategy to determine contributions that pancreatic islet microcirculation makes to related diseases, such as diabetes mellitus, pancreatitis, etc. Therefore, this protocol describes using a laser Doppler blood flow monitor to determine the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion, and to establish parameters (including average blood perfusion, amplitude, frequency, and relative velocity of pancreatic islet microvascular vasomotion) for evaluation of the microcirculatory functional status. In a streptozotocin-induced diabetic mouse model, we observed an impaired functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion. In conclusion, this approach for assessing pancreatic islet microvascular vasomotion in vivo may reveal mechanisms relating to pancreatic islet diseases.

Laser Doppler: A Tool for Measuring Pancreatic Islet Microvascular Vasomotion In Vivo

Pancreatic islet microvascular vasomotion regulates islet blood distribution and maintains the physiological function of islet &#946; cells. This protocol describes using a laser Doppler monitor to determine the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion in vivo and to assess the contributions of pancreatic islet microcirculation to pancreatic-related diseases.

레이저 도플러: 췌 장 섬 Microvascular Vasomotion에 Vivo에서 측정 하기 위한 도구

As a functional status of microcirculation, microvascular vasomotion is important for the delivery of oxygen and nutrients and the removal of carbon ...

의학

A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids direct contact with the measured area, it is suitable for monitoring blood flow changes during wound healing in human patients. Vestibuloplasty is periodontal surgery to the oral vestibule, aiming to restore vestibular depth with simultaneous enlargement of the keratinized gingiva. In this special clinical case, a split thickness flap was elevated at the first upper premolar and a xenogenic collagen matrix was adapted to the resulting recipient bed. LSCI was used to monitor the re- and neovascularization of the graft and the surrounding mucosa for one year. A protocol is introduced for the correct adjustment of microcirculation measurement in the oral mucosa, highlighting difficulties and possible failures.
The clinical case study presented demonstrated that &#8212; following the appropriate protocol &#8212; LSCI is a suitable and reliable method for following up microcirculation in a healing wound in the human oral mucosa and gives useful information on graft integration.

This study introduces a protocol for measuring microcirculation in human oral mucosa by laser speckle contrast imaging. The monitoring of wound healing after vestibuloplasty combined with a xenogenic collagen graft is presented on a clinical case.

새로운 접근 방식을 접목 Neovascularization 인간의 Gingiva에 모니터링

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids ...

Quantification of Cerebral Perfusion using Laser Speckle Imaging and Infarct Volume using MRI in a Pre-clinical Model of Posterior Circulation Stroke

Background: Basilar artery occlusion (BAO) is a subset of posterior circulation stroke that carries a mortality as high as 90%.&#160; The current clinical standard to diagnose ischemic stroke include computerized tomography (CT), CT angiography and perfusion and magnetic resonance imaging (MRI). Large animal pre-clinical models to accurately reflect the clinical disease as well as methods to assess stroke burden and evaluate treatments are lacking.
Methods: We describe a canine model of large vessel occlusion (LVO) stroke in the posterior circulation, and developed a laser speckle imaging (LSI) protocol to monitor perfusion changes in real time.&#160; We then utilized high b-value DWI (b=1800s/mm2) MRI to increase detection sensitivity. We also evaluated the ability of magnetic resonance angiography (MRA) to assess arterial occlusion and correlate with DSA. Finally, we verified infarct size from apparent diffusion coefficient (ADC) mapping with histology.&#160;
Results:&#160; Administration of thromboembolism occluded the basilar artery as tracked by DSA (n=7).&#160; &#160;LSI correlated with DSA, demonstrating a reduction in perfusion after stroke onset that persisted throughout the experiment, allowing us to monitor perfusion in real time.&#160; DWI with an optimized b-value for dogs illustrated the stroke volume and allowed us to derive ADC and magnetic resonance angiography (MRA) images. The MRA performed at the end of the experiment correlated with DSA performed after occlusion. Finally, stroke burden on MRI correlated with histology.
Conclusions: Our studies demonstrate real time perfusion imaging using LSI of a canine thromboembolic LVO model of posterior circulation stroke, which utilizes multimodal imaging important in the diagnosis and treatment of ischemic stroke.

A canine model of LVO stroke was utilized to develop laser speckle imaging to monitor cerebral perfusion in real-time.&#160; Diffusion-weighted MRI was optimized to image infarct volume utilizing a high b-value, enabling ADC and MRA, correlated with DSA at the time of stroke.&#160; Finally, ADC reconstructions correlated with histological findings.

Background: Basilar artery occlusion (BAO) is a subset of posterior circulation stroke that carries a mortality as high as 90%.&#160; The current clinical ...

Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for analyzing collateral arteries and leukocytes in arteriogenesis is ex vivo (immuno-) histological methodology. However, this technique does not allow the measurement of dynamic processes such as blood flow, shear stress, cell-cell interactions, and particle velocity. This paper presents a protocol to monitor in vivo processes in growing collateral arteries during arteriogenesis utilizing intravital imaging. The method described here is a reliable tool for dynamics measurement and offers a high-contrast analysis with minimal photo-cytotoxicity, provided by multiphoton excitation microscopy. Prior to analyzing growing collateral arteries, arteriogenesis was induced in the adductor muscle of mice by unilateral ligation of the femoral artery.
After the ligation, the preexisting collateral arteries started to grow due to increased shear stress. Twenty-four hours after surgery, the skin and subcutaneous fat above the collateral arteries were removed, constructing a pocket for further analyses. To visualize blood flow and immune cells during in vivo imaging, CD41-fluorescein isothiocyanate (FITC) (platelets) and CD45-phycoerythrin (PE) (leukocytes) antibodies were injected intravenously (i.v.) via a catheter placed in the tail vein of a mouse. This article introduces intravital multiphoton imaging as an alternative or in vivo complementation to the commonly used static ex vivo (immuno-) histological analyses to study processes relevant for arteriogenesis. In summary, this paper describes a novel and dynamic in vivo method to investigate immune cell trafficking, blood flow, and shear stress in a hindlimb model of arteriogenesis, which enhances evaluation possibilities notably.

The recruitment of leukocytes and platelets constitutes an essential component necessary for the effective growth of collateral arteries during arteriogenesis. Multiphoton microscopy is an efficient tool for tracking cell dynamics with high spatio-temporal resolution in vivo and less photo-toxicity to study leukocyte recruitment and extravasation during arteriogenesis.

쥐 뒷다리 모델에서 동맥 형성 중 백혈구 모집을 모니터링하기 위한 다광자 생체 내 이미징

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for ...