המחברים לא תודות לך

שיטת דיווח היה מנוצל במחקר זה קיבלה את אישור האתית של ועדת האתיקה של המחקר אוניברסיטת בורנמות ב-9 בפברואר 2016 (הפניה 10571).
 1. להגדיר LSCI <ol><li>לחבר את moorFLPI LSCI הפאנל האחורי כדי שלה שלוש ארובות (אספקת החשמל, אפיק טורי אוניברסלי (USB), מסוג IEEE1394) עבור מערכת לפונקציה.</li>
	<li>להרכיב שולחן העבודה תומך הזרוע באמצעות 4 ברגים עם moorFLPI LSCI מתהפך, קבוע כדי התמיכה בזרוע</li>
	<li>לסובב ההרכבה עבור הדמיה כלפי מטה כאשר מצורף. 
	הערה: LSCI יש שלושה פקדים: שמאי (1) זום &#8211; עם הצלם להגדיר בעמדה, פחות הגדלה ניתן לכוונן הגדרות המזערי והמרבי עבור שדות מבט קטן ולא גדול יותר בהתאמה. כדי להבטיח הדיר, מסופק תווית יצירת אינדקס של הטבעת; (2) מיקוד שמאי &#8211; זה הוא תלוי מרחק המדידה, חייב להיות מותאם לאחר קביעת מיקום התמונה. כדי להבטיח הדיר, מסופק תווית יצירת אינדקס של הטבעת; (3) מקטב &#8211; מסנן מהפכנית ליניארי זמין למזער סימונים השתקפות של איברים חשופים &#8211; ההר מסתובב ניתן להפעיל באמצעות 360°-</li>
	<li>להתקין את התוכנה כדי לשלוט על המצלמה. התוכנה מחולקת שני מודולים מתן פונקציה סקירה ובחינת.</li>
</ol> 2. הכנת המשתתפים <ol><li>ודא ההערכה מבוצעת בחדר מבוקרת טמפרטורה (22 ± 1 ° C) וכי המשתתפים יושבים במשך 10 דקות לפני בדיקות כדי להסתגל בטמפרטורת החדר.</li>
	<li>להימנע חזקה מקור אור מלאכותי, השמש זורחת על המשתתף או את LSCI כמו תאורת עלול להשפיע על moorFLPI ליד מקור לייזר אינפרא אדום פועל ב 785 nm. 
	הערה: בדיקה פשוטה כדי לוודא אור הסביבה רמות מקובל הוא על ידי פתיחת חלון הגדרת הדמיה ומשבית את הלייזר. אם התמונה היא כמעט לחלוטין שחור ואז אין צעדים נוספים נדרשים; אם יש עדיין בהווה אור מקיף מדי, עוד נדרשת פעולה.</li>
	<li>להבטיח המשתתפים רגועה במהלך המבדק, עם הרגליים על הקרקע, אם יושב, להימנע השיחות.</li>
	תיקון <li>מקום 8 ס מ 2 של אטום דבק (AOP) (למשל, Leukotape) על אזור עור כדי להסוות את זרימת הדם. פעולה זו מתבצעת לחשבון על החיסרון של LSCI מבחינת רגישות גבוהה החפץ לתנועה, אות backscatter ישמש למדידת זרימת הדם microcirculatory.</li>
</ol> 3. מנתחי מיקרו תמונה מדידה <ol><li>בחר &#39; עיבוד מרחבי &#39; עבור 25 מסגרות לכל השני לכידת פיקסלים 152 x 113.</li>
	<li>בחר &#39; לחיות תמונה מדידה &#39; ולהתאים את המיקום של הצלם 20 ס מ מן המשתתף ואחריו התאמת זום, פוקוס, מקטב עבור ראי מינימלי. התמונה אמורה להופיע די &#39; שטוח &#39;, נכחדה.</li>
	<li>להגדיר את זמן החשיפה של 20 ms רגישות גבוהה שינויים קטנים, השטף נמוך.</li>
	<li>שיעור התצוגה של 25 הרץ ולהשתמש קבוע הזמן של 0.3 s לקחת בחשבון שינויים זרימת דם מהירה, וכדי להשיג חדות אופטימלית דרך להפחית את הרעש בתמונה.</li>
	<li>ליצור שני בגודל שווה (2 ס מ 2) אזורים מעניינים (ROI), בשם רועי 1 ו- ROI 2. ליישר 2 רועי אז זה בתוך ה 8 ס"מ 2 AOP. . שמור על עצמך כך ROIs הם לא מתחלפות אך שמרה סגור בתוך 2-4 ס מ, כדי להפחית את הצורך מרכוז מחדש אם כל תנועה מכנית תוצאות ROI 2 כבר לא להיות באזור אאו. 
	הערה: מדידת זרימת הדם יהיה פחות מדויק באזורים בעוצמה נמוכה וגבוהה, לכן חשוב שתהיה הגדרה של האופטימלית רווח. הטווחים ערך רווח בין 0 - 200. ערך ההגדרה רווח אופטימלי מושגת בטווח של 70-80-</li>
	<li>השטף בצע מדידות ביחס תוכנית בסיסית הפניה. במקרה של מתודולוגיה זו, להציג את &#39; השאר &#39; הבמה כקו הפניה. לכן, אקספרס &#39; מהר &#39; ו &#39; איטי &#39; הבמה זרימת הדם כאחוז לשנות תוכנית בסיסית, &#39; מנוחה &#39; הבמה.</li>
	<li>להקליט מדידת זרימת דם בפורמט וידאו ולשמור לניתוח במצב לא מקוון באמצעות מודול סקירה של התמונה.</li>
</ol> 4. ניתוח מנותק הערה: moorFLPI תמונה סקירה תוכנה מאפשר פתיחת וידאו כדי לבצע ניתוח.
<ol><li>חישוב שטף רשע בתוך ROIs בעקבות סדרת הקלטות של זרימת הדם מרושע. רועי 1 הוא המדד האמיתי של זרימת הדם לעור, רועי 2 הוא האיתות backscattered לייזר חודרני העור AOP.</li>
	<li>לחשב את זרימת הדם אומר על-ידי חיסור 2 רועי רועי 1 (זרימת הדם בעור). 
	רועי 1 - רועי 2 = זרימת הדם רשע</li></ol>

<ol>
	<li>Mahe, G., Rousseau, P., Durand, S., Leftheriotis, G., Abraham, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+speckle+contract+imaging+accurately+measures+blood+flow+over+moving+skin+surfaces.">Laser speckle contract imaging accurately measures blood flow over moving skin surfaces.</a> Microvas Res. 81 (2), 183-188 (2010).</li><li>Rousseau, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increasing+the+&amp;#34;region+of+interest&amp;#34;+and+&amp;#34;time+of+interest&amp;#34;,+both+reduce+the+variability+of+blood+flow+measurements+using+laser+speckle+contrast+imaging.">Increasing the &amp;#34;region of interest&amp;#34; and &amp;#34;time of interest&amp;#34;, both reduce the variability of blood flow measurements using laser speckle contrast imaging.</a> Microvas Res. 82, 88-91 (2011).</li><li>Hecht, N., Woitzik, J., Dreier, J., Vajkoczy, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoperative+monitoring+of+cerebral+blood+flow+by+laser+speckle+contrast+analysis.">Intraoperative monitoring of cerebral blood flow by laser speckle contrast analysis.</a> Neurosurg Focus. 27 (4), 1-6 (2009).</li><li>Mahe, G., Durand, S., Humeau-Heurtier, A., Leftheriotis, G., Abrham, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+experimental+conditions+on+noncontact+laser+recordings+in+microvascular+studies.">Impact of experimental conditions on noncontact laser recordings in microvascular studies.</a> Microcirculation. 19 (8), 669-675 (2012).</li><li>Cheng, H., Duong, T. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+laser-speckle-imaging+analysis+method+and+its+application+to+retinal+blood+flow+imaging.">Simplified laser-speckle-imaging analysis method and its application to retinal blood flow imaging.</a> Opt Lett. 32 (15), 2188-2190 (2007).</li><li>Doherty, J., McNamara, P., Clancy, N. T., Enfield, J. G., Leahy, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+instruments+for+investigation+of+microcirculatory+blood+flow+and+red+blood+cell+concentration.">Comparison of instruments for investigation of microcirculatory blood flow and red blood cell concentration.</a> J Biomed Opt. 14 (3), 034025 (2009).</li><li>Briers, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+speckle+contrast+imaging+for+measuring+blood+flow.">Laser speckle contrast imaging for measuring blood flow.</a> Opt Appl. 37 (1), 139-152 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> moorFLPI User Manual. (8), (2012).</li><li>Mahe, G., Durand, S., Humeau-Heurtier, A., Abraham, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Experimental+Conditions+on+Noncontact+Laser+Recordings+in+Microvascular+Studies.">Impact of Experimental Conditions on Noncontact Laser Recordings in Microvascular Studies.</a> Microcirculation. 19, 669-675 (2012).</li><li>Bahadori, S., Immins, T., Wainwright, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+calf+neuromuscular+electrical+stimulation+and+intermittent+pneumatic+compression+on+thigh+microcirculation.">The effect of calf neuromuscular electrical stimulation and intermittent pneumatic compression on thigh microcirculation.</a> Micro Res. 111, 37-41 (2017).</li><li>Omarjee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimisation+of+movement+detection+and+artifact+removal+during+laser+speckle+contrast+imaging.">Optimisation of movement detection and artifact removal during laser speckle contrast imaging.</a> Miscrovas Res. 97 (1), 75-80 (2015).</li></ol>

המחברים אין לחשוף.

מטרת מחקר זה הייתה להכיר טכניקה הרומן מדידה וניתוח של לסירוגין מהירויות מנתחי מיקרו מחזור לדם בניסוי יחיד באמצעות LSCI. המדידות יכולה להיות מושפעת תאורת, רטט ותנועה המשתתף כולל הנשימה בפקעת. השלבים המתוארים הפרוטוקול כל עוצבו כדי למזער את ההשפעות האלה ולקבל מידות הדיר ואמין מנתחי מיקרו מחזור לדם.
יודגש כי בכל שלב בתוך הפרוטוקול הוא קריטי עבור מדידה מדויקת מנתחי מיקרו מחזור לדם, הטכניקה הציג היה שהתגלו הבאים רציפים בדיקה של כל אפשרויות הגדרה אפשרית, כולל שילובים הזמינים: זמן קבוע, הגדרה מסוימת של מרחק, זמן החשיפה, להציג שיעור, רווח, שטף הצבעים בתמונה. התוצאות נותחו וחזר באמצעות הצגת וידיאו בשידור חי וניתוח במצב לא מקוון כדי למצוא הדמיה ההגדרה של האופטימלית. זה היה חיוני כמו התמונה בתוכנת עיבוד משתמשת העובדה זלוף גבוהה מייצרת וריאציה מהירה בדפוס חודרני לייזר, כתוצאה מכך שטח ניגודיות נמוכה של חודרני מוגדרים היטב מיוצר תמונת הוידיאו. זלוף התמונה נוצר לאחר מכן מפת זלוף microcirculatory מקודדות לפי צבעים.
הכנת שטח והשתתפות ניסיוני הוא נמצא כדי להיות חיוני, זה יכול להיות נשלט על ידי הימנעות עבודה בקרבת מקורות אור יום (חלון) או מקורות חזקה של אור מלאכותי,. כמו אלה עלולים להפריע moorFLPI ליד מקור לייזר אינפרא אדום. הפרוטוקול הציג גם AOP של זה היה הודה כי הסביבה רטט והתנועה של המשתתף שניהם לייצר אותות הם נבדלים של זרימת הדם. AOP הוכיחה להיות בחירה פשוטה אך יעילה, המציע אפשרות דק אבל אטום, קלה ונגישה אשר היו פני שטח ברמה המיקרוסקופית קשה להימנע משמעותי סימונים השתקפות. מחקר ראשוני על ידי. Omarjee et al. 11 מדגיש מגבלה פוטנציאליים לפיו Leukotape יוצר משרעת האות של השתקפות שונה מזה של העור, משתנה באופן משמעותי בין הנושאים; עם זאת מאהה. et al. 1 מצאו שום הבדל קיצוני בין המשתתפים. למרות Leukotape הוא נגיש יותר מאשר אחרים העידו, מדבקות bilayer, דיוק המדידה משוואה (1) יכול להיות מוגברת על ידי שימוש AOP חלופית.
המקטע ניתוח מנותק הדגיש את החשיבות של גדלים של ROIs, המיקום שלהם בתוך האזור של עניין. בתחילה, 1 רועי גדול יותר, כ 8 ס"מ2, נשפט אשר בשכבות את 2 ROI. מתודולוגיה זו הפכה בלתי אמין עקב תנועת החפץ וכתוצאה מכך רועי 2. התזוזה, הניסוי בשידור חי היה צריך לעצור כדי למרכז את 2 רועי מחדש. מגיע קצר נוסף היה כי בשל רועי 1 AOP את בשכבת-על, שטף רשע כבר לא לקח את האזור תחת AOP לחשבון, לא היה עוד אות backscattered. משמעות הדבר היא חלק גדול microcirculation דם היה שיצפו, ולכן הנתונים המתקבלים השטף לא היו נכונים. לכן, מתודולוגיה, אילו ROIs שני של 2 ס מ2, עם AOP של 8 ס"מ2 ו אין אינטראקציה בין רועי 1 ו- ROI 2 (אך כל הזמן בתוך 2-4 ס מ אחד מהשני), מספק שיטה אמינה וניתוח הדיר למדידה של דם מנתחי מיקרו.

לייזר חודרני לעומת זאת הדמיה (LSCI) הוא מוכחת ללא מגע, בזמן אמת, ניטור בשיטה כדי לנתח את הדם לזרום microcirculation1,2,3,4,5,6 , 7. LSCI שימוש בנייר הזה הוא moorFLPI שדה מלא. מדידת זלוף זרימת הדם באזורים גדולים ברזולוציה יכולות גבוהה באמצעות תופעה הנקראת "לייזר חודרני" הוא אחד היתרונות העיקריים של התקן זה6. ההערכה בזמן אמת מנתחי מיקרו מחזורי נעשה באמצעות תבניות שנלכדה באמצעות מצלמה באמצעות דפוסי חודרני פזורים. בהתחשב בכך moorFLPI LSCI מיועד מחקר קליני פיזיולוגיים, התמונה בתוכנת עיבוד עובד על העובדה שהזו זלוף גבוהה מייצרת וריאציה מהירה של התבנית חודרני לייזר, אשר לאחר מכן משולב על ידי טעונה מצמידים התקן (CCD) כדי לייצר שטח של ניגודיות נמוכה8. הניגוד הוא לכמת, וכתוצאה מכך שטף צבע מקודד כדי לייצר תמונת זלוף8.
למרבה הצער, LSCI רגיש מאוד רטט סביבתיים, החפץ, התנועה של אזור9הנושא. עד היום זה סיפקה מאתגר בעת הברית זרימה מתחלפים נחקרו. מאמר זה מסביר פרטים של הטכניקה מפורשת המתוארים מחקר האחרונות10 איפה היה מכשיר גירוי עצבי חשמלי המשמש למדידת microcirculation דם כאשר יש תנועה של האיבר נבחנת.

<table><tbody><tr><td>moorFLPI LSCI</td><td>Moor Instruments</td><td>Not Available - Online Link Provided in descreption</td><td>moorFLPI is an instrument designed for the measurment of blood flow within microvasculature by using infra red laser speckle contrast analysis.&amp;nbsp; https://gb.moor.co.uk/</td></tr><tr><td>moorFLPI Image Review Module</td><td>Moor Instruments</td><td>No Available - Online Link Provided</td><td>Used with moorFLPI, user can record and measure changes in blood flow by changerating a colour coded map of tissue perfusion.&amp;nbsp; https://gb.moor.co.uk/</td></tr><tr><td>Leukotape</td><td>BSN Medical</td><td>72978-10</td><td>Medical tape with microporous surface. http://www.bsnmedical.co.uk/fileadmin/z-countries/United_Kingdom/PDF/L/Leukotape_K_A46PP_low_res_11112013.pdf</td></tr></tbody></table>

a novel approach to overcome movement artifact when using a laser speckle contrast imaging system for alternating speeds of blood microcirculation

םלצה ניגודיות חודרני לייזר (LSCI) מספק שיטה רבי-עוצמה אך פשוטה למדידת זרימת הדם microcirculatory. אידיאלי עבור תגובות דינמי דם, LSCI משמש באותה צורה כמו קונבנציונאלי לייזר דופלר Imager (LDI). עם זאת, עם עומק עור מרבי של-1 מ מ, LSCI נועד להתמקד בעיקר זרימת דם שטחיים. הוא משמש כדי למדוד את עור פני שטחים של עד 15 ס"מ x 20 ס"מ. הטכניקה החדשה שהוצגה בזו מהווה נייר לסירוגין למהירות של microcirculations; כלומר הן איטי ומהיר זרימה השטף מדידה באמצעות את LSCI. הטכניקה הרומן מתגבר גם על חסרונה הגדול של LSCI, אשר הוא רגישות גבוהה החפץ לתנועה. תיקון אטום דבק (AOP) הוא הציג להקלטה משביע רצון של זרימת הדם microcirculatory, על-ידי חיסור האיתות LSCI AOP האות העור לייזר חודרני. ההגדרה של האופטימלית מוגדרת גם כי LSCI הוא החזק ביותר כאשר שטף שינויים נמדדים ביחס תוכנית בסיסית הפניה, עם שטף microcirculatory דם המבוטא באחוזים לשנות מקו הבסיס. שינויים אלה עשויים לשמש לניתוח המצב של מערכת זרימת הדם.

LSCI ניסיוני להגדיר המותווה באיור 1 עם כלים פונקציונליים מזוהה. מודגם טיפוסי המשתתף הכנה מדידה של זרימת הדם על שטח של הירך הקדמי. בכן ההרכבה מתכוונן מאפשר סיבוב LSCI עבור המידה של זרימת הדם בתוך microvasculature של כל שטח העור מסוים. איור 2 מתאר דוגמה טיפוסי חודרני raw התמונה ותמונה חודרני שהומר עם הגדרות העידו שפורטו בפרוטוקול למדידה מנתחי מיקרו מחזור לדם.
איור 3 מראה דוגמה של שטח העור והמיקום של AOP (שלב 3.1), LSCI ההתקנה הדמיה raw (שלב 3.2), תמונה בשידור חי עבור זרימת הדם איטית (שלב 3.3), חי תמונה עבור זרימת דם מהירה (שלב 3.4) בתאריך הקלטה רציפה לנתונים של השטף לסירוגין בנו ing moorFLPI LSCI. הצבעים קידוד הצבעים הגדרת מאפשר בידול בין רמות השטף. בלוח הצבעים הסטנדרטי של 16 צבעים, השטף נמוך נראה כמו כחול, השטף בינוני ערכים נראים כמו ירוק, השטף גבוה ערכים נתפסים כתום ואדום.
זרימת הדם בעור מבוטא ביחידות לייזר חודרני זלוף (LSPU). איור 4 מציג את ייצוג גרפי של 1 רועי, רועי 2 ו AOP על שטח של העור. זרימת הדם הממוצע מחושב בניתוח מנותק תוך שימוש בנתונים של רועי 1 ו- 2 רועי, משוואה (1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig1.jpg"> 
איור 1: האם הגדרת ניסיוני LSCI moorFLPI זרוע תמיכה בשולחן עבודה, כבל פלטים, מיקום הפקדים (זום שמאי, שמאי המוקד ואת מקטב), AOP, מחשב נייד עבור קביעת תצורה של הגדרת התמונה. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig2.jpg"> 
איור 2: חודרני Raw התמונה לפני נתונים הקלטה. 2.1 - 2.2) שטף ותמונות חודרני raw של סביבה קשות שתצורתו נקבעה וכתוצאה מכך רווח גבוה עם ראות עני אשר יניבו מידה פחות מדויק של זרימת דם. 2.3 - 2.4) מערכת מוגדרת לפי פרוטוקול, וכתוצאה מכך רווח הנכון עם ראות מירבית לקבלת תוצאה אמינה. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig3.jpg"> 
איור 3: סקירה כללית של המדידות וההתקנה הרשומה באמצעות moorFLPI LSCI. 3.1. אזור של העור (ירך) עם 2 ס מ2 AOP להביא בחשבון לתנועה החפץ. 3.2) חודרני raw 'שטוח ו נכחדה' תמונת המציינת את עוצמת האור backscatter טוב עם מיטביים הגדרה. 3.3) הקלטה תמונה חיה של זרימת דם איטי. 3.4) הקלטה תמונה חיה של זרימת דם מהירה. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig4.jpg"> 
איור 4: ייצוג גרפי של הפריסה 1 רועי, רועי 2 ו AOP על שטח של העור- <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="3">השאר (הפניה בסיסית) (LSPU)</td>
			<td colspan="4">זרימת הדם איטית (LSPU)</td>
			<td colspan="4">זרימת הדם מתונה (LSPU)</td>
			<td colspan="4">זרימת דם מהירה (LSPU)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 1</td>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 2</td>
			<td>זאת אומרת זרימת הדם</td>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 1</td>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 2</td>
			<td>זאת אומרת זרימת הדם</td>
			<td>הדם זורם עלייה % מקו</td>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 1</td>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 2</td>
			<td>זאת אומרת זרימת הדם</td>
			<td>הדם זורם עלייה % מקו</td>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 1</td>
			<td>זאת אומרת שטף - רועי 2</td>
			<td>זאת אומרת זרימת הדם</td>
			<td>הדם זורם עלייה % מקו</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>157.9</td>
			<td>35.1</td>
			<td>122.8</td>
			<td>178.5</td>
			<td>41.6</td>
			<td>136.9</td>
			<td>10.9</td>
			<td>216.9</td>
			<td>44.6</td>
			<td>172.3</td>
			<td>33.5</td>
			<td>418.9</td>
			<td>77.5</td>
			<td>341.4</td>
			<td>94.2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
טבלה 1: התכוונתי השטף ב LSPU רועי 1 ו- 2 רועי בנקודת ההתחלה, איטי, מתון ומהר הדם לזרום. עלייה בזרימת הדם מבוטאת שינוי אחוז מן הבמה בסיסית.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56415/56415fig5.jpg"> 
איור 5: דוגמה של רועי 1 ו- 2 רועי מיצוב על שטח פני העור (ירך). לוח 16 צבעים מתאר את lavers של perfusions. נתוני הקליטה עבור רועי 1 ו- 2 רועי ביחידות זלוף, יופחת כמוסבר משוואה 1 למדידה מנתחי מיקרו מחזור לדם. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56415/56415fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Approach to Overcome Movement Artifact When Using a Laser Speckle Contrast Imaging System for Alternating Speeds of Blood Microcirculation at JoVE.com

A Novel Approach to Overcome Movement Artifact When Using a Laser Speckle Contrast Imaging System for Alternating Speeds of Blood Microcirculation

גישה מוזרה כדי להתגבר על החפץ תנועה בעת שימוש ניגוד חודרני לייזר מערכת הדמיה עבור לסירוגין מהירויות פיפטות לקיחת דם

מחקר זה מציג שיטה הרומן מדידה וניתוח של לסירוגין מהירויות מנתחי מיקרו מחזור לדם בניסוי יחיד באמצעות imager ניגודיות חודרני של לייזר.

The laser speckle contrast imager (LSCI) provides a powerful yet simple technique for measuring microcirculatory blood flow. Ideal for blood dynamic ...

a-novel-approach-to-overcome-movement-artifact-when-using-laser

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

8.3K Views.  Bournemouth University. מחקר זה מציג שיטה הרומן מדידה וניתוח של לסירוגין מהירויות מנתחי מיקרו מחזור לדם בניסוי יחיד באמצעות imager ניגודיות חודרני של לייזר.

Video: A Novel Approach to Overcome Movement Artifact When Using a Laser Speckle Contrast Imaging System for Alternating Speeds of Blood Microcirculation

How to Build a Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) System to Monitor Blood Flow

Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) is a simple yet powerful technique that is used for full-field imaging of blood flow. The technique analyzes fluctuations in a dynamic speckle pattern to detect the movement of particles similar to how laser Doppler analyzes frequency shifts to determine particle speed. Because it can be used to monitor the movement of red blood cells, LSCI has become a popular tool for measuring blood flow in tissues such as the retina, skin, and brain. It has become especially useful in neuroscience where blood flow changes during physiological events like functional activation, stroke, and spreading depolarization can be quantified. LSCI is also attractive because it provides excellent spatial and temporal resolution while using inexpensive instrumentation that can easily be combined with other imaging modalities. Here we show how to build a LSCI setup and demonstrate its ability to monitor blood flow changes in the brain during an animal experiment.

How to Build a Laser Speckle Contrast Imaging LSCI System to Monitor Blood Flow

This video demonstrates how to build a Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) system that can easily be used to monitor blood flow.

כיצד לבנות לייזר רבב הדמיה ניגודיות (LSCI) מערכת לפקח זרימת הדם

Laser Speckle Contrast Imaging (LSCI) is a simple yet powerful technique that is used for full-field imaging of blood flow.  The technique analyzes ...

Neuroscience

Micro-particle Image Velocimetry for Velocity Profile Measurements of Micro Blood Flows

Micro-particle image velocimetry (&mu;PIV) is used to visualize paired images of micro particles seeded in blood flows. The images are cross-correlated to give an accurate velocity profile. A protocol is presented for &mu;PIV measurements of blood flows in microchannels. At the scale of the microcirculation, blood cannot be considered a homogeneous fluid, as it is a suspension of flexible particles suspended in plasma, a Newtonian fluid. Shear rate, maximum velocity, velocity profile shape, and flow rate can be derived from these measurements. Several key parameters such as focal depth, particle concentration, and system compliance, are presented in order to ensure accurate, useful data along with examples and representative results for various hematocrits and flow conditions.

Micro-particle image velocimetry (&mu;PIV) is used to visualize paired images of micro particles seeded in blood flows which are cross-correlated to give an accurate velocity profile. Shear rate, maximum velocity, velocity profile shape, and flow rate, each of which has clinical applications, can be derived from these measurements.

Velocimetry תמונת מיקרו חלקיקים למדידות בפרופיל מהירות של מיקרו זורם דם

Micro-particle image velocimetry (&mu;PIV) is used to visualize paired images of micro particles seeded in blood flows. The images are cross-correlated to ...

Bioengineering

Controlled Microfluidic Environment for Dynamic Investigation of Red Blood Cell Aggregation

Blood, as a non-Newtonian biofluid, represents the focus of numerous studies in the hemorheology field. Blood constituents include red blood cells, white blood cells and platelets that are suspended in blood plasma. Due to the abundance of the RBCs (40% to 45% of the blood volume), their behavior dictates the rheological behavior of blood especially in the microcirculation. At very low shear rates, RBCs are seen to assemble and form entities called aggregates, which causes the non-Newtonian behavior of blood. It is important to understand the conditions of the aggregates formation to comprehend the blood rheology in microcirculation. The protocol described here details the experimental procedure to determine quantitatively the RBC aggregates in microcirculation under constant shear rate, based on image processing. For this purpose, RBC-suspensions are tested and analyzed in 120 x 60 &#181;m poly-dimethyl-siloxane (PDMS) microchannels. The RBC-suspensions are entrained using a second fluid in order to obtain a linear velocity profile within the blood layer and thus achieve a wide range of constant shear rates. The shear rate is determined using a micro Particle Image Velocimetry (&#181;PIV) system, while RBC aggregates are visualized using a high speed camera. The videos captured of the RBC aggregates are analyzed using image processing techniques in order to determine the aggregate sizes based on the images intensities.

The protocol described details an experimental procedure to quantify Red Blood Cell (RBC) aggregates under a controlled and constant shear rate, based on image processing techniques. The goal of this protocol is to relate RBC aggregate sizes to the corresponding shear rate in a controlled microfluidic environment.

סביבת Microfluidic מבוקרת לדינמית חקירה של צבירת תאי דם האדום

Blood, as a non-Newtonian biofluid, represents the focus of numerous studies in the hemorheology field. Blood constituents include red blood cells, white ...

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

Intravital microscopy (IVM) is a powerful optical imaging technique that has made possible the visualization, monitoring and quantification of various biological events in real time and in live animals. This technology has greatly advanced our understanding of physiological processes and pathogen-mediated phenomena in specific organs.
In this study, IVM is applied to the mouse liver and protocols are designed to image in vivo the circulatory system of the liver and measure red blood cell (RBC) velocity in individual hepatic vessels. To visualize the different vessel subtypes that characterize the hepatic organ and perform blood flow speed measurements, C57Bl/6 mice are intravenously injected with a fluorescent plasma reagent that labels the liver-associated vasculature. IVM enables in vivo, real time, measurement of RBC velocity in a specific vessel of interest. Establishing this methodology will make it possible to investigate liver hemodynamics under physiological and pathological conditions. Ultimately, this imaging-based methodology will be important for studying the influence of L. donovani infection&#160;on hepatic hemodynamics.
This method can be applied to other infectious models and mouse organs and might be further extended to pre-clinical testing of a drug&#8217;s effect on inflammation by quantifying its effect on blood flow.

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

This article reports on a detailed method for the dynamic measurement and quantification of blood flow velocity within individual blood vessels of the mouse liver vasculature using intravital microscopy imaging in combination with a specific methodology for image acquisition and analysis.

מיקרוסקופית Intravital הדמיה של הכבד הבא<em&gt; שושנת יריחו</em&gt; זיהום: הערכה של פרמטרים המודינמיים בדיה

Intravital microscopy (IVM) is a powerful optical imaging technique that has made possible the visualization, monitoring and quantification of various ...

Immunology and Infection

Spatial Temporal Analysis of Fieldwise Flow in Microvasculature

Changes in blood flow velocity and distribution are vital in maintaining tissue and organ perfusion in response to varying cellular needs. Further, appearance of defects in microcirculation can be a primary indicator in the development of multiple pathologies. Advances in optical imaging have made intravital microscopy (IVM) a practical approach, permitting imaging at the cellular and subcellular level in live animals at high-speed over time. Yet, despite the importance of maintaining adequate tissue perfusion, spatial and temporal variability in capillary flow is seldom documented. In the standard approach, a small number of capillary segments are chosen for imaging over a limited time. To comprehensively quantify capillary flow in an unbiased way we developed Spatial Temporal Analysis of Fieldwise Flow (STAFF), a macro for FIJI open-source&#160;image analysis software. Using high-speed image sequences of full fields of blood flow within capillaries, STAFF produces&#160;images that represent motion over time called kymographs for every time interval for every vascular segment. From the kymographs STAFF calculates velocities from the distance that red blood cells move over time, and outputs the velocity data as a sequence of color-coded spatial maps for visualization and tabular output for quantitative analyses. In normal mouse livers, STAFF analyses quantified profound differences in flow velocity between pericentral and periportal regions within lobules. Even more unexpected are the differences in flow velocity seen between sinusoids&#160;that are side by side and fluctuations seen within individual vascular segments over seconds. STAFF is a powerful new tool capable of providing novel insights by enabling measurement of the complex spatiotemporal dynamics of capillary flow.

To quantify microvascular flow from high speed capillary flow image sequences, we developed STAFF (Spatial Temporal Analysis of Fieldwise Flow) software. Across the full image field and over time, STAFF evaluates flow velocities and generates a sequence of color-coded spatial maps for visualization and tabular output for quantitative analyses.

אנליזה מרחבית של תזרים שדות במיקרוvasקובלטורה

Changes in blood flow velocity and distribution are vital in maintaining tissue and organ perfusion in response to varying cellular needs. Further, ...

Blood Flow Imaging with Ultrafast Doppler

The pulsed-Doppler effect is the main technique used in clinical echography to assess blood flow. Applied with conventional focused ultrasound Doppler modes, it has several limits. Firstly, a finely tuned signal filtering operation is needed to distinguish blood flows from surrounding moving tissues. Secondly, the operator must choose between localizing the blood flows or quantifying them. In the last two decades, ultrasound imaging has undergone a paradigm shift with the emergence of ultrafast ultrasound using unfocused waves. In addition to a hundredfold increase in framerate (up to 10000 Hz), this new technique also breaks the conventional quantification/localization trade-off, offering a complete blood flow mapping of the field of view and a simultaneous access to fine velocities measurements at the single-pixel level (down to 50 &#181;m). This data continuity in both spatial and temporal dimensions strongly improves the tissue/blood filtering process, which results in an increase sensitivity to small blood flow velocities (down to 1 mm/s). In this method paper, we aim to introduce the concept of ultrafast Doppler as well as its main parameters. Firstly, we summarize the physical principles of unfocused wave imaging. Then, we present the Doppler signal processing main steps. Particularly, we explain the practical implementation of the critical tissue/blood flow separation algorithms and on the extraction of velocities from these filtered data. This theoretical description is supplemented by in vitro experiences. A tissue phantom embedding a canal with flowing blood-mimicking fluid is imaged with a research programmable ultrasound system. A blood flow image is obtained and the flow characteristics are displayed for several pixels in the canal. Finally, a review of in vivo applications is proposed, showing examples in several organs such as carotids, kidney, thyroid, brain and heart.

This protocol shows how to apply ultrafast ultrasound Doppler imaging to quantify blood flows. After a 1 s long acquisition, the experimenter has access to a movie of the full field of view with axial velocity values for each pixel every &#8776;0.3 ms (depending on the ultrasound time of flight).

הדמיית זרימת דם עם דופלר אולטרה מהיר

The pulsed-Doppler effect is the main technique used in clinical echography to assess blood flow. Applied with conventional focused ultrasound Doppler ...

Laser Doppler: A Tool for Measuring Pancreatic Islet Microvascular Vasomotion In Vivo

As a functional status of microcirculation, microvascular vasomotion is important for the delivery of oxygen and nutrients and the removal of carbon dioxide and waste products. The impairment of microvascular vasomotion might be a crucial step in the development of microcirculation-related diseases. In addition, the highly vascularized pancreatic islet is adapted to support endocrine function. In this respect, it seems possible to infer that the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion might affect pancreatic islet function. Analyzing the pathological changes of the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion may be a feasible strategy to determine contributions that pancreatic islet microcirculation makes to related diseases, such as diabetes mellitus, pancreatitis, etc. Therefore, this protocol describes using a laser Doppler blood flow monitor to determine the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion, and to establish parameters (including average blood perfusion, amplitude, frequency, and relative velocity of pancreatic islet microvascular vasomotion) for evaluation of the microcirculatory functional status. In a streptozotocin-induced diabetic mouse model, we observed an impaired functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion. In conclusion, this approach for assessing pancreatic islet microvascular vasomotion in vivo may reveal mechanisms relating to pancreatic islet diseases.

Laser Doppler: A Tool for Measuring Pancreatic Islet Microvascular Vasomotion In Vivo

Pancreatic islet microvascular vasomotion regulates islet blood distribution and maintains the physiological function of islet &#946; cells. This protocol describes using a laser Doppler monitor to determine the functional status of pancreatic islet microvascular vasomotion in vivo and to assess the contributions of pancreatic islet microcirculation to pancreatic-related diseases.

לייזר דופלר: כלי למדידת הלבלב איון Microvascular Vasomotion In Vivo

As a functional status of microcirculation, microvascular vasomotion is important for the delivery of oxygen and nutrients and the removal of carbon ...

A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids direct contact with the measured area, it is suitable for monitoring blood flow changes during wound healing in human patients. Vestibuloplasty is periodontal surgery to the oral vestibule, aiming to restore vestibular depth with simultaneous enlargement of the keratinized gingiva. In this special clinical case, a split thickness flap was elevated at the first upper premolar and a xenogenic collagen matrix was adapted to the resulting recipient bed. LSCI was used to monitor the re- and neovascularization of the graft and the surrounding mucosa for one year. A protocol is introduced for the correct adjustment of microcirculation measurement in the oral mucosa, highlighting difficulties and possible failures.
The clinical case study presented demonstrated that &#8212; following the appropriate protocol &#8212; LSCI is a suitable and reliable method for following up microcirculation in a healing wound in the human oral mucosa and gives useful information on graft integration.

This study introduces a protocol for measuring microcirculation in human oral mucosa by laser speckle contrast imaging. The monitoring of wound healing after vestibuloplasty combined with a xenogenic collagen graft is presented on a clinical case.

הגישה של הרומן ניטור שתל כורוידאלית ב Gingiva אנושי

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids ...

Quantification of Cerebral Perfusion using Laser Speckle Imaging and Infarct Volume using MRI in a Pre-clinical Model of Posterior Circulation Stroke

Background: Basilar artery occlusion (BAO) is a subset of posterior circulation stroke that carries a mortality as high as 90%.&#160; The current clinical standard to diagnose ischemic stroke include computerized tomography (CT), CT angiography and perfusion and magnetic resonance imaging (MRI). Large animal pre-clinical models to accurately reflect the clinical disease as well as methods to assess stroke burden and evaluate treatments are lacking.
Methods: We describe a canine model of large vessel occlusion (LVO) stroke in the posterior circulation, and developed a laser speckle imaging (LSI) protocol to monitor perfusion changes in real time.&#160; We then utilized high b-value DWI (b=1800s/mm2) MRI to increase detection sensitivity. We also evaluated the ability of magnetic resonance angiography (MRA) to assess arterial occlusion and correlate with DSA. Finally, we verified infarct size from apparent diffusion coefficient (ADC) mapping with histology.&#160;
Results:&#160; Administration of thromboembolism occluded the basilar artery as tracked by DSA (n=7).&#160; &#160;LSI correlated with DSA, demonstrating a reduction in perfusion after stroke onset that persisted throughout the experiment, allowing us to monitor perfusion in real time.&#160; DWI with an optimized b-value for dogs illustrated the stroke volume and allowed us to derive ADC and magnetic resonance angiography (MRA) images. The MRA performed at the end of the experiment correlated with DSA performed after occlusion. Finally, stroke burden on MRI correlated with histology.
Conclusions: Our studies demonstrate real time perfusion imaging using LSI of a canine thromboembolic LVO model of posterior circulation stroke, which utilizes multimodal imaging important in the diagnosis and treatment of ischemic stroke.

A canine model of LVO stroke was utilized to develop laser speckle imaging to monitor cerebral perfusion in real-time.&#160; Diffusion-weighted MRI was optimized to image infarct volume utilizing a high b-value, enabling ADC and MRA, correlated with DSA at the time of stroke.&#160; Finally, ADC reconstructions correlated with histological findings.

Background: Basilar artery occlusion (BAO) is a subset of posterior circulation stroke that carries a mortality as high as 90%.&#160; The current clinical ...

Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for analyzing collateral arteries and leukocytes in arteriogenesis is ex vivo (immuno-) histological methodology. However, this technique does not allow the measurement of dynamic processes such as blood flow, shear stress, cell-cell interactions, and particle velocity. This paper presents a protocol to monitor in vivo processes in growing collateral arteries during arteriogenesis utilizing intravital imaging. The method described here is a reliable tool for dynamics measurement and offers a high-contrast analysis with minimal photo-cytotoxicity, provided by multiphoton excitation microscopy. Prior to analyzing growing collateral arteries, arteriogenesis was induced in the adductor muscle of mice by unilateral ligation of the femoral artery.
After the ligation, the preexisting collateral arteries started to grow due to increased shear stress. Twenty-four hours after surgery, the skin and subcutaneous fat above the collateral arteries were removed, constructing a pocket for further analyses. To visualize blood flow and immune cells during in vivo imaging, CD41-fluorescein isothiocyanate (FITC) (platelets) and CD45-phycoerythrin (PE) (leukocytes) antibodies were injected intravenously (i.v.) via a catheter placed in the tail vein of a mouse. This article introduces intravital multiphoton imaging as an alternative or in vivo complementation to the commonly used static ex vivo (immuno-) histological analyses to study processes relevant for arteriogenesis. In summary, this paper describes a novel and dynamic in vivo method to investigate immune cell trafficking, blood flow, and shear stress in a hindlimb model of arteriogenesis, which enhances evaluation possibilities notably.

The recruitment of leukocytes and platelets constitutes an essential component necessary for the effective growth of collateral arteries during arteriogenesis. Multiphoton microscopy is an efficient tool for tracking cell dynamics with high spatio-temporal resolution in vivo and less photo-toxicity to study leukocyte recruitment and extravasation during arteriogenesis.

הדמיה תוך-חיונית מולטיפוטון לניטור גיוס לויקוציטים במהלך דלקת עורקים במודל מורין גפיים אחוריות

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for ...