Name: using the sleeve technique in a mouse model of aortic transplantation - an instructional video
Uploaded: 2017-10-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video at JoVE.com

우리는 로마 Wieczorek에 그들의 우수한 편집, 피터 Kurdybacha 그리고 레온 데커 울 리 Heuter에 그들의 우수한 기술 지원 감사 하 고 싶습니다.

동물 주제와 관련 된 절차는 RWTH 아 헨 대학, AZ 84-02.04.2012.A234에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)에 의해 승인 했다.
 참고: 절차는 CD1 배경을 가진 성인 남성 강포한 유형 쥐를 사용 하 여 보여 줍니다. 음식, 전문된 수의 제어, 그리고 치료에 대 한 적절 한 액세스 보장 수술 전후 특수 실험실 단위에서 생쥐를 유지. 동물에서 구입 하는 경우 밖에 서 수술을 수행 하기 전에 일주일 순응 허용.
 1. 기증자의 준비 <ol><li>불 임 자료와 악기를 사용 하 여 감염을 피하기 위해 수술 하는 동안 멸 균 상태를 유지.</li>
	<li>볼륨 isoflurane와 얼굴 마스크를 통해 100% 산소에 의해 1.5%의 혼합물으로 각 마우스를 anesthetize. 운영 테이블에 모든 다리 부정사 위치에 테이프 플랫폼에 마우스를 하다. 마우스는 충분히 마 취 해야 뒷 발을 곤란 하 게 하 여 그 반사를 확인 합니다. 절차 동안 건조를 방지 하기 위해 눈에 안과 연 고를 배치.</li>
	<li>Depilatory 젤을 사용 하 여 복 부에서 모든 머리카락을 제거 하거나는 면도기를 사용 합니다. 무 균 조건 하에서 작업을 수행 합니다. 수술 용 멸 균 물과 액체의 교류와 함께 복 부를 소독.</li>
	<li>가 위 또는 메스 중간 복 부 절 개를 통해 기증자 대동맥을 제거합니다. 수동으로 오른쪽에 창 자를 철회. 부드럽게 수동으로 파우더 무료 장갑을 사용 하 여 측면 창 반영.
	<ol><li>창 촉촉한 유지 하는 식 염 수와 접촉 하는 거 즈의 조각 장소.</li>
		<li>멀리 핀셋으로 무딘 해 부를 사용 하 여 주변 조직에서 매우 신중 하 게 복 부 대동맥 해 부.</li>
		<li>핀셋으로 신장 동맥과 베 나 정 맥에서의 분기점 사이 대동맥의 세그먼트 분리.</li>
		<li>매우 신중 하 게 11-0 monofilament 하나의 봉합 사를 사용 하 여이 세그먼트의 모든 작은 가지 보안.</li>
		<li>대동맥을 제거 하기 전에 0.5 밀리 리터 (mL) 염 덤플링 50 U를 포함 하는 열 등 한 베 나 정 맥으로 주사.</li>
		<li>Exsanguinate 대동맥의 세그먼트를 제거한 후 기증자 동물 하자.</li>
		<li>린스 식 염 수와 완벽 하 게 이식 하 고 다음 차가운 식 염 수의 컨테이너에 즉시 전송.</li>
	</ol></li></ol> 2. 받는 사람의 준비 <ol><li>볼륨 isoflurane와 얼굴 마스크를 통해 100% 산소에 의해 1.5%의 혼합물으로 받는 사람 동물을 Anesthetize 다음 머리를 제거 하 고 소독 (제 1). 메스와 골반에 있는 칼에서 중순 라인 절 개 하 고 복 부 벽을 철회 합니다. 절차 동안 건조를 방지 하기 위해 눈에 안과 연 고를 배치.</li>
	<li>생리 식 염 수에 장 거 즈를 습 하 게 하 고 동물을 매우 부드럽게 치환 포장 &#39; s 오른쪽.</li>
	<li>Dissect infrarenal 대동맥 proximally 신장 동맥 사이 무료 및 핀셋으로 distally 분기.</li>
	<li>매우 신중 하 게 11-0 monofilament 하나의 봉합 사를 사용 하 여이 세그먼트의 모든 작은 가지 보안.</li>
	<li>단일 실크 봉합에 6-0와 대동맥의 인접 하 고 원심 부분을 클램프.</li>
	<li>는 클램프 사이의 중간에 대동맥을 분할 하 고 관개를 루멘 오픈 heparinized 염 분으로 잘라 끝.</li>
	<li>제대로 기증자와 받는 사람 (정렬 하 여 대동맥의 어떤 비틀림을 방지 하도록 하는 11-0 monofilament와 봉합 뒤 받는 선박에 삽입 먹이 그릇 엔드와 orthotopic 위치에는 이식 장소 그림 1) 10.</li> <li>신중 하 게는 합자는 문 합에의 한 검사를 실시 후 공개. 먼저 원심 클램프를 해제 합니다. 이 인접 고압 측을 풀어 놓기 이전 함께 벽을 잡고 낮은 압력에서 결과.</li>
	<li>Perfuse는 이식 즉시와 보이는 펄스에 대 한 확인. 부드럽게 실크의 잔해를 제거 합니다. 기증자와 받는 사람 대동맥 사이의 최적의 겹침 길이 1-2 m m.</li>
	<li>복 부 구멍에는 복 부 내용을 반환 하 고 전체를 닫습니다 실행 3-0 polyglycolic 산 봉합 된 상처.</li>
	<li>마우스 buprenorphine 줄 (0.05 mg/kg 체중을 피하 (SC)) 마 취 종료 되기 전에.</li>
	<li>두지 마십시오 동물 무인 완전히 식을 때까지. 통증 관리 치료 buprenophine 0.05 mg/kg 체중 관리 SC 작업 후 3 일 동안 하루에 세 번 기관 감독 기관에 의해 승인.</li>
	<li>조직 수확, anesthetize로 받는 사람 마우스 대 위에서 설명한 및 플러시 인산 염 버퍼 식 염 수 (PBS)와 선박 4% 포름알데히드/PBS, (pH = 7.4) 심장 빵 꾸 여. 이식 부드럽게 제거 합니다. 4% 포름알데히드/PBS에 야간 고정, 후 프로세스 표본 추가 및 파라핀에 포함.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-+invasive+in+vivo+analysis+of+a+murine+aortic+graft+using+high+resolution+ultrasound+microimaging.">Non- invasive in vivo analysis of a murine aortic graft using high resolution ultrasound microimaging.</a> Eur J Radiol. 81 (2), 244-249 (2012).</li><li>Daugherty, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+atherosclerosis.">Mouse models of atherosclerosis.</a> Am J Med Sci. 323 (1), 3-10 (2002).</li><li>Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+arteriosclerosis:+from+arterial+injuries+to+vascular+grafts.">Mouse models of arteriosclerosis: from arterial injuries to vascular grafts.</a> Am J Pathol. 165 (1), 1-10 (2004).</li><li>Daugherty, A., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+abdominal+aortic+aneurysms.">Mouse models of abdominal aortic aneurysms.</a> Arterioscler Thromb Vasc .Biol. 24 (3), 429-434 (2004).</li><li>Zernecke, A., Shagdarsuren, E., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+in+atherosclerosis:+an+update.">Chemokines in atherosclerosis: an update.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28 (11), 1897-1908 (2008).</li><li>Chereshnev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+heterotopic+aortic+arch+transplantation.">Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation.</a> J Surg Res. 111 (2), 171-176 (2003).</li><li>Koulack, J., McAlister, V. C., Giacomantonio, C. A., Bitter-Suermann, H., MacDonald, A. S., Lee, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Engelbrecht, G., Kahn, D., Duminy, F., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+rapid+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">New rapid technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 13 (6), 340-344 (1992).</li><li>Baxter, K., Hao, P. M., Howden, B. O., Saunder, A., Jablonski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+technique+of+abdominal+heart+transplantation+in+the+rat.">Modified technique of abdominal heart transplantation in the rat.</a> J Heart Lung Transplant. 17 (11), 1057-1064 (1998).</li><li>Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice:+a+new+model+of+allograft+arteriosclerosis.">Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis.</a> J Heart Lung Transplant. 18 (10), 946-951 (1999).</li><li>Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histopathology+of+microarterial+anastomoses:+end-to-end+versus+end-in-end+(sleeve)+technique.">Histopathology of microarterial anastomoses: end-to-end versus end-in-end (sleeve) technique.</a> J Hand Surg Am. 15, 619-625 (1990).</li><li>Charo, I. F., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+roles+of+chemokines+and+chemokine+receptors+in+inflammation.">The many roles of chemokines and chemokine receptors in inflammation.</a> N Engl J Med. 354 (6), 610-621 (2006).</li><li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+surgical+technique+for+the+establishment+of+a+murine+model+of+aortic+transplantation.">Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation.</a> Microsurgery. 18 (6), 368-371 (1998).</li><li>Guo, L., Agarwal, A., George, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice+for+the+study+of+vascular+disease.">Orthotopic aortic transplantation in mice for the study of vascular disease.</a> J Vis Exp. (69), e4338 (2012).</li></ol>

저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.

이 연구에 앞서 다양 한 다른 이식 모델 마우스에 철저 하 게 분석된3,6,7,10,,1314했다. 그것은 우리의 조건과 일치 하 고 기존의 엔드-투-엔드 봉합 방법에 비해 슬리브 문 합의 높은 신뢰성 대동맥 이식 하 여 소매 기술 수정 Dambrin 그 외 여러분 의 모델 선정 되었습니다. 1 , 10.
이 기술은 여러 가지에서 유리한 크로스-클램프 시간이 상당히 감소 수술 동안 대동맥에 손상을 최소화 이다. 혈전 증의 발생률이 낮은 그릇 구경 기증자와 받는 사람 사이에서 잠재적인 불일치를 피하고 외에 관찰 되었다. 위의 관찰 확인이 기술은 쥐에서 대동맥 이식 혈관 질병 조사에 매우 적합 합니다.
후속 연구에서 초음파 이식 후 8 주를 수행 했다, 중요 한 변경 감지 했다. 이 확인 대동맥 수술 동안에 손상을 최소한의1될 것 이라고 가정을 했다.
이 문서에서 제공 하는 이식 절차 모두 이식 무결성 및 그것의 기능에 아무런 장애를 보장 합니다. 따라서,이 실험적인 이식 모델 유전자 조작된 생쥐에서 퇴행 성 혈관 질환의 미래 분자 및 약리 수사를 위해 귀중 한 도구로 사용할 수 있습니다 결론 수 있습니다.
우리는 비디오 가이드가 간단한 arterio 동맥 모델의 사용을 설명 하는 교재로 작동할 수 그것은 혈관 병 리에 많은 중요 한 문제에 더 유익한 토론에 기여할 것입니다 믿습니다. 이 매우 빠른 문 합 방법 유전자 조작된 생쥐에서 혈관 질환 연구에 사용할 수 있습니다. 그것은 또한 이식 함께 동맥 모델에 수정으로 사용할 수 있습니다.
절차 동안 한계점이 있다. 봉합 자체의 배치 하는 것은 가장 중요 한 단계입니다. 외과 의사 기증자와 받는 사람의 적절 한 맞춤으로 대동맥의 어떤 비틀림을 방지 하는. 클램프 검사는 문 합 후 신중 하 게 제거 됩니다. 항상 먼저 함께 방출 이전에 인접 고압 측 벽을 잡고 낮은 압력의 결과로 원심 클램프를 공개 합니다. 방출의 순서를 따라 제대로의 결과 출혈 될 것 이다.

이전 연구에서 지적, 큰 관심 murine 대동맥 이식 모델 자체 이식으로 인 한 특정 혈관 응답 및 arteriogenic 환경 연결 특정 조직 요인 사이 차별을 허용 하는 지급 되었습니다. 1 , 2 , 3. 여기에 중요 한 역할을 담당 하는 주요 요인은 녹아웃, 유전자 변형 마우스의 가용성 이다. 식별 하 고 퇴행 성 혈관 질환, 동맥 경화, 동맥 류 형성4, 등의 개발과 관련 된 새로운 pathophysiological 경로 결정의 가능성을 제공 하는 이러한 모델 들의 참여 5.
그것은 내장 국 소 빈 혈 또는 reperfusion를 접목 하는 동안 부상을 위한 이식 혈관에 나타날 수 있습니다 지적 가치가 있다. 따라서, 특정 문제 이식 무결성 또는 수술 기간 동안 예기치 않은 염증 반응의 발생 제외할 수 없습니다 가능성이 제외 퇴행 성 혈관 질환3 에에서 병 태 생리 변화 ,45,,67. 소매 문 합 미만 1 밀리미터의 직경을 가진 혈관의 동맥 문 합에 대 한 대체 끝에 방법 이며 대동맥에 연속적으로 적응 시켰다는 쥐에 있는 신장과 심장 이식에 성공적으로 적용 된는 Dambrin 그 외 여러분 에 의해 쥐에 이식 8 , 9 , 10 , 11.
대동맥 손상 슬리브 이식 기법을 사용 하는 매우 낮은 기술 고장율, 평균 20 분 지속 그것 때문으로 최소화 됩니다. 우리의 이전 결과 소매 기술1을 사용 하 여 이식 후 isograft에는 vivo에서 의 우수한 기능 및 구조적 특성을 증명 하고있다. Dambrin 그 외 여러분 설명 후 짧은 학습 곡선 성공률은 78% 이상10. 혈전 증 등의 합병증은 드물다, 예 Engelbrecht 외. 쥐8신장 이식에서 소매 기술을 사용 하 여 혈전 증을 관찰 하지 않았다.
소매 anastomoses와 murine 대동맥 이식 모델 이식 선박에서 iso/이식 반응 연구를 신속 하 고 쉬운 도구입니다. 이 비디오에서는 우리의 실험실에서 실시 하는 대동맥 이식 절차를 보여 줍니다. 이 이식 모델 혈관 퇴행 성 질환의 기본 병 적인 메커니즘을 정의 하는 데 유용할 수 있습니다 그리고 분자 약리학 내정간섭12의 추가 평가에 기여할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>Halsey Needle Holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12001-13</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps -</td><td>Fine Science Tools</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Lexer-Baby Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14079-10</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Micro Needle Holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12060-01</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Scissors</td><td>Aesculap, Germany</td><td>Typ OC498R</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Suture Forceps</td><td>Geuder, Germany</td><td>19015</td><td></td></tr><tr><td>6-0 silk black (Silk)</td><td>Deknatel, Research Triangle Park NC, USA</td><td>18020-60- FST</td><td></td></tr><tr><td>11-0 monofilament (Ethilon)</td><td>Ethicon, Norderstedt, Germany</td><td>EH7438G</td><td></td></tr><tr><td>3-0 polyglycolic acid suture (Serafit)</td><td>Serag-Wiessner, Naila, Germany</td><td>60203214</td><td></td></tr><tr><td>Isofluorane</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% saline</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Any genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthene eye and nose cream</td><td>Bayer, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscop</td><td>Zeiss</td><td>Opmi MDO/S5</td><td></td></tr><tr><td>Vaporiser</td><td>Eickemeyer</td><td>TEC3</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound</td><td>Vevo, Canada</td><td>770,2100</td><td></td></tr></tbody></table>

using the sleeve technique in a mouse model of aortic transplantation - an instructional video

Orthotopic 대동맥 이식 슬리브 기술을 사용 하 여 단지 10-20%의 고장율과 대동맥에 부상을 줄일 수 있습니다. 시간 anastomose 슬리브 메서드를 사용 하 여 마우스에 대동맥을 짧고 쉽게 iso/여 보세요 이식의 연구를 허용 하는 20 분을 평균 했다. 다음 문서는 우리의 실험실에서 사용 하는 대동맥 이식 절차를 설명 합니다. 생쥐는 1.5% 볼륨 isoflurane와 얼굴 마스크를 통해 100% 산소의 혼합물으로 취 했다. 이 시점에서, 신장 동맥 및 그것의 분기 사이 대동맥의 세그먼트는 베 나 정 맥, 자유롭게 준비 및 clampedat에서 분리 된 단일 실크 봉합과 인접 하 고 원심 세그먼트. 대동맥의 제거, 이전 염 헤 파 린을 포함 하는 열 등 한 베 나 정 맥에 주입 됩니다. 대동맥은 클램프 사이 렸 그리고 염 분 덤플링을 솔루션 루멘 이용 되었다. Monofilament 봉합 소매 기술 orthotopic 위치에서 복 부 대동맥을 이식 하기 위해 사용 되었다.

혈전 증의 높은 위험 했지만 쥐 없이 관찰된 물리적 장애가 있는 15-30 분 이내 마 취에서 회복. 초음파 분석 수술 후 수행 하는 동안 사용 되었다. 연구에 사용 하는 야생 타입 마우스 전시 그들의 루멘의 크기 변경. 따라서, stenoses도 aneurysmal 형성 관찰 되었다. 이식 동물 전시 배 벽 (그림 2)의 패 개발 하지 못했습니다.
Immunohistology 등 기존의 얼룩 절차 상 패, 패턴의 부드러운 근육 세포 및 대 식 세포의 축적을 결정 하기 위해 사용할 수 있습니다. 우리의 연구는 조직학 immunohistochemical 얼룩이 지는 이식의 무결성을 테스트 하려면 접목 후 6 주를 수행 했다. 조직학 얼룩 (Hematoxylin와 (그가) 오신 immunohistochemical 얼룩 (부드러운 근육 걸 (SMA)와 대 식 세포 (MAC2)) (그림 3) 우리에 게 보여준 없고 안 감 그대로 내 피 세포, 평활 근 세포의 분포 패턴을 그대로 셀은 intima에 축적 이러한 결과 아무 중요 한 병 변 또는 셀 활성화 이식할된 선박 (그림 3)에서 검색 되었습니다 나타냅니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig1.jpg"> 
그림 1 : 기술 슬리브. 복 부 대동맥 슬리브 기술을 사용 하 여 이식 했다. 이 절차에서는 기증자의 대동맥 표면에 물린 먹이 그릇에 함께 orthotopic 위치에 배치 했다. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig2.jpg"> 
그림 2 : 자가 초음파 이미지. 이식 후 이식 (A), 그것의 3 차원 초음파 (B), B 모드 보기 (C) 6 주의 자가 (검 시) 보기의 예. 수술 후 후속 초음파를 사용 하 여 실시 했다. 그림 루멘 크기에서 변화 없이 이식의 patency를 보여준다. 또한, stenoses 또는 aneurysmal 형성 관찰 되었다. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig3.jpg"> 
그림 3 : 조직학 및 immunohistochemistry 이미지. 이식 후 6 주에 이식된 동물의 조직학 및 immunohistochemistry 대표 이미지. 아니 중요 한 병 변 조직학으로 이식된 aortas에서 관찰 되었다 (Hematoxylin 및 오신, 그는, 100 배 확대, 눈금 막대 = 50 µ m), immunohistochemical (부드러운 근육 걸 SMA (빨강), 또는 대 식 세포 MAC2 (녹색), 200 배 확대, 스케일 바 = 얼룩 25 µ m)입니다. 핵은 카운터 스테인드 DAPI에서 (파란색). <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54915/54915fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video at JoVE.com

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

우리는 orthotopic 대동맥 이식 모델 마우스에 슬리브 기술을 사용 하 여 현재. 혈관 질환의 연구에 사용할 수 있는 매우 빠른 문 합 방법 이다.

대동맥 이식-교육용 비디오의 마우스 모델에서 소매 기법을 사용 하 여

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

using-sleeve-technique-mouse-model-aortic-transplantation-an

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

8.9K 조회수.  Ruhr- University Bochum. 우리는 orthotopic 대동맥 이식 모델 마우스에 슬리브 기술을 사용 하 여 현재. 혈관 질환의 연구에 사용할 수 있는 매우 빠른 문 합 방법 이다.

비디오: Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

연구

의학

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

수정 커프 기술을 사용하여 쥐의 자궁 심장 이식 모델

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique was developed and reported in 2001 by Niimi. Described here are the techniques that have evolved over more than a decade in the hands of three surgeons (Plenter, Grazia, Pietra) in our center. These techniques are now being passed on to a younger generation of surgeons and researchers.
Based largely on the Niimi experience, the procedures used have evolved in the fine details - details which we will endeavor to relate here in such a way that others may be able to use this very useful model. Like Niimi, we have found that a video aid to learning is a priceless resource for the beginner.

The manuscript describes the steps required to perform the heterotopic heart transplant in the mouse.

쥐 이소성 심장 이식 기술

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to improve surgical efficiency. In our lab, we have optimized the cuff technique with two major steps. First, we used the inner tube technique to insert a temporary inner tube into the external jugular vein and carotid artery blood vessel to facilitate eversion of the vessel over the cuff. Second, we performed complete heterotopic cardiac transplantation through the collaboration of two experienced surgeons. These modifications effectively reduced the operation time to 25 minutes, with a success rate of 95%. In this report, we describe these procedures in detail and provide a supplemental video. We believe that this report on the improved cuff technique will offer practical guidance for murine heterotopic heart transplantation and will enhance the utility of this mouse model for basic research.

We introduce an inner tube approach to the cuff technique for mouse cervical heterotopic heart transplantation to help evert the vessel over the cuff. We found that cooperation between two experienced surgeons markedly shortens the operation time.

뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술의 최적화

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

면역학 및 감염병학

Mouse Heterotopic Cervical Cardiac Transplantation Utilizing Vascular Cuffs

Murine models of cardiac transplantation are frequently utilized to study ischemia-reperfusion injury, innate and adaptive immune responses after transplantation, and the impact of immunomodulatory therapies on graft rejection. Heterotopic cervical heart transplantation in mice was first described in 1991 using sutured anastomoses and subsequently modified to include cuff techniques. This modification allowed for improved success rates, and since then, there have been multiple reports that have proposed further technical improvements. However, translation into more widespread utilization remains limited due to the technical difficulty associated with graft anastomoses, which requires precision to achieve adequate length and caliber of the cuffs to avoid vascular anastomotic twisting or excessive tension, which can result in damage to the graft. The present protocol describes a modified technique for performing heterotopic cervical cardiac transplantation in mice which involves cuff placement on the recipient's common carotid artery and the donor's pulmonary artery in alignment with the direction of the blood flow.

Mouse cardiac transplantation models represent valuable research tools for studying transplantation immunology. The present protocol details mouse heterotopic cervical cardiac transplantation that involves the placement of cuffs on the recipient's common carotid artery and the donor's pulmonary artery trunk to allow for laminar blood flow.

혈관 수갑을 이용한 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식

Murine models of cardiac transplantation are frequently utilized to study ischemia-reperfusion injury, innate and adaptive immune responses after ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. However, only minor improvement in the long-term results of transplanted solid organs could be observed over the past decades. In this context, chronic allograft vasculopathy (CAV) still represents the leading cause of late organ failure in cardiac, renal and pulmonary transplantation.
Thus far, the underlying pathogenesis of CAV development remains unclear, explaining why effective treatment strategies are presently missing and emphasizing a need for relevant experimental models in order to study the underlying pathophysiology leading to CAV formation. The following protocol describes a murine heterotopic cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique. In this technique, a segment of the thoracic aorta is interpositioned in the right common carotid artery. With the use of the non-suture cuff technique, an easy to learn and reproducible model can be established, minimizing the possible heterogeneity of sutured vascular micro anastomoses.

Here, we present a protocol of heterotopic aortic transplantation in mice using the non-suture cuff technique in a cervical murine model. This model can be used to study the underlying pathology of chronic allograft vasculopathy (CAV) and can help evaluate new therapeutic agents in order to prevent its formation.

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

A Modified Cuff Technique for Mouse Cervical Heterotopic Heart Transplantation Model

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for investigating the mechanism of cardiac allograft rejection in preclinical studies because of their high homology with human genes. This understanding would help develop unique approaches to improving patients&#39; long-term survival treated with cardiac allografts. In a mouse model, abdominal donor heart implantation is commonly performed with an end-to-end&#160;anastomosis to the recipient&#39;s aorta and inferior vena cava using stitches. In this model, the donor&#39;s heart is implanted by end-to-end anastomosis to the recipient&#39;s carotid artery and jugular vein by the modified-Cuff technique. The transplantation surgery is performed without stitching and thus may increase the survival of the recipient since there is no interference with the blood supply and venous reflux of the lower body. This mouse model would help investigate the mechanisms underlying the immunological and pathological (acute/chronic) rejection of cardiac allografts.

In the present protocol, a mouse heart transplantation model is used for investigating the mechanism of cardiac allograft rejection. In this heterotopic heart transplantation model, operation efficiency is improved, and the survival of cardiac grafts is ensured by a cervical end-to-end anastomosis of heart implantation using a modified Cuff technique.

마우스 자궁경부 이종 심장 이식 모델을 위한 수정된 커프 기술

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for ...

Strategies for efficient Vascular Anastomosis in Mouse Liver transplantation(마우스 간 이식에서 효율적인 혈관 문합을 위한 전략)

Vascular Reconstruction with the Cuff Technique in Mouse Orthotopic Liver Transplantation

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. However, the technical challenges pose a barrier to utilizing this valuable experimental model and passing on these skills to the next generation. The most challenging aspect of this procedure is vascular reconstruction, including the portal vein (PV), infrahepatic inferior vena cava (IHIVC), and suprahepatic inferior vena cava. The use of plastic cuffs, rather than sutures, allows for smoother PV and IHIVC reconstruction. Vessels are reconstructed by attaching a cuff made from an intravenous catheter to the tip of the graft vessel and interposing the cuff into the recipient vessel. The two most crucial aspects are properly visualizing the inner lumen of the vessel and avoiding the use of excessive force. Our aim is to provide a technical overview of vascular reconstructions using the cuff technique in recipient surgery. These technical tips for the cuff technique are expected to help microsurgeons facilitate vascular reconstruction and advance their research.

저자 스포트라이트: 지방간 이식에서 한랭 허혈 및 온열 재관류 손상 탐구

This protocol provides technical information for vessel reconstruction using the cuff technique in mouse orthotopic liver transplantation.

Mouse Orthotopic Liver Transplantation에서 Cuff Technique을 사용한 혈관 재건

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. ...

대동맥 이식-교육용 비디오의 마우스 모델에서 소매 기법을 사용 하 여

요약

더 많은 비디오 탐색

이 비디오의 챕터

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

수정 커프 기술을 사용하여 쥐의 자궁 심장 이식 모델

쥐 이소성 심장 이식 기술

뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술의 최적화

혈관 수갑을 이용한 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

마우스 자궁경부 이종 심장 이식 모델을 위한 수정된 커프 기술

Mouse Orthotopic Liver Transplantation에서 Cuff Technique을 사용한 혈관 재건

Mouse Orthotopic Liver Transplantation에서 Cuff Technique을 사용한 혈관 재건

Mouse Orthotopic Liver Transplantation에서 Cuff Technique을 사용한 혈관 재건