ここで説明するフィラメントモデルでは、血流の完全な回復とそれが記録されている、マウスの間で、特に移動性脳卒中研究において、生産可能な流入を確保するための要件である。このモデルには、前に説明した他のストローク モデルと比較して 2 つの主な利点があります。頭蓋間術は必要なく、血管の完全な再灌流が達成される。
フィラメントモデルは、異なる動脈のプロセス操作を含む複雑な外科的介入である。これら全ての可視化と説明は、小さいが重要なステップであり、神経外科医の学習期間を加速させるかもしれない。熱毛布を接続して、37°Cの麻酔中に操作領域の温度とマウスの体温を維持します。
オートクレーブはさみと鉗子、70%エタノール溶液およびデブンサンテノールの目軟膏を準備し、綿とファイブOコーティング編組ポリエステルの縫合のいくつかの部分を、使用する準備ができておきます。切開部位を水分補給するために針なしで1ミリリットルの注射器に0.9%の生理食塩水を調製する。10マイクロリットルのピペットチップの先端を切断して、レーザードップラープローブ用のホルダーを準備します。
マウスを完全に麻酔したら、操作領域内の起こりやすい位置に置きます。直腸プローブを静かに挿入して、外科的処置全体の温度を監視します。手術部位を消毒した後、左耳と目の間にこの頭皮を切り取り、頭蓋骨を露出させる。
次に、頭蓋頭筋を切断して退断し、頭蓋骨の下にある複数の大脳動脈またはMCAを可視化する。左MCAの上部にレーザードップラープローブまたはファイバーを保持している先端の外側部分を接着剤で固定し、皮膚も接着するように皮膚を閉じます。硬化剤接着剤を2~3滴塗布して、処理をスピードアップします。
レーザードップラー繊維が接着されておらず、いつでも簡単にチップホルダーから取り外しできることを確認してください。マウスを上の位置に回し、その後、スナを麻酔コーンに入れ、足をテープで固定します。胸部を取り巻く皮膚や毛髪を消毒し、首に長い2センチの長い中線切開を行います。
鉗子を使用して皮膚下顎腺と胸骨腫筋を引き離します。リトラクターを使用して外科分野を露出させ、左共通の頸動脈またはCCAを見つける。CCAを血管神経に害を与えることなく、結合組織および周囲の神経から解放して解剖し、分岐前に一過性の結紮を行う。
外的頸動脈またはECAを解剖し、最も遠位の目に見える部分で永久的な結び目を結ぶ。ECAの下に別の縫合糸を置き、分岐の近くに置き、後で使用する緩い結び目を準備します。内部頸動脈またはICAを解剖し、その上に約5ミリメートルの分岐の上に微小血管クリップを置く。
迷走神経を傷めないようにしてください。その後、狭い結紮との間のECAに小さな穴をカットし、ECA全体を切断しないようにします。フィラメントを導入し、CCAに向かって進めます。
内腔の周りのECAのゆるい結紮を締めて、その位置のフィラメントを一時的に固定します。微小血管クリップを取り外し、出血を防ぎます。微小血管クリップを取り外した後、MCAの原点に達するまでICAを通してフィラメントを挿入します。
さらに、ECAの周りの結び目を引き締めることによって、この位置のフィラメントを固定します。フィラメント挿入前と後のレーザードップラー値を記録します。リトラクタを取り除き、創傷を縫合する前に骨腺下腺に胸骨筋を再配置する。
レーザードップラープローブを取り外し、1時間摂氏37度の回収室に動物を置きます。麻酔マスクのスナを使用して操作領域内の起こりやすい位置にマウスを置き、動物の足をテープで固定します。レーザードップラープローブをプローブホルダーに挿入します。
創傷縫合糸を取り除き、鉗子を使用して皮膚、顎下腺、胸腺腫筋を引き離します。リトラクターを使用して外科分野を露出させます。フィラメントを引き締めるECA縫合を緩め、そっとフィラメントを引っ張ります。
取り外し時にフィラメントのシリコーンゴムコーティングを損傷しないようにしてください。フィラメント除去の前後にレーザードップラー値を記録します。ECA縫合糸をしっかりと結び付け、レーザードップラー装置の脳血流の増加を確認します。
CCAからの分岐の前に一過性の結紮を開いて、完全な血流を回復させます。リトラクタを取り除き、創傷を縫合する前に骨腺下腺に胸骨筋を再配置する。その後、麻酔から回復するために1時間摂氏37度の回復室に動物を置きます。
回復後、マウスは温度制御された部屋のケージに戻り、ケージフロアの小さなペトリ皿にウェットフードペレットとヒドロゲルを追加して動物の世話をし、手術後3日目まで12時間ごとに鎮痛を注入します。フィラメントを除去した後にCCAの血流が回復すると、脳の完全な再灌流が起こり、これはヒト患者における機械的血栓切除術に成功した後に観察された状況と同様である。脳卒中動物は、複合および焦点神経スコアに有意な変化を示したが、偽動物と比較した場合の一般的な神経スコアでは示さなかった。
取り出された梗塞容積は、脳卒中誘導24時間後にコロナ直列脳部のクレゾール紫色染色を用いても行った。病変領域は、体性感覚および運動皮質、ならびに線条体のような皮質下構造を含む。梗塞の体積平均は61〜62ミリメートル平方メートルで、影響を受けた脳半球の48%を表す。
隣接する組織、特に迷走神経に損傷を与えることなく、CCA、ECAおよびRCAの適切な解剖を行うことが重要であり、すべての構造の良好な視覚化を有し、フィラメントを挿入し、MCA起源を閉塞することができる。
