כדי מודל מחלת ריאות בעכברים, סוכנים ניסיוניים ניתנים לעתים קרובות באמצעות הזרקה תוך-שפתית. גישה זו, לעומת זאת, אינה יכולה לפגוע באופן סלקטיבי בריאה אחת, וההתפלגות עשויה להיות אסימטרית בין הריאות. על ידי חיסון ריאה בודדת בעכבר הרדמה, אנחנו יכולים לנהל באופן חד צדדי סוכנים ניסיוניים.
עם שינוי, גישה זו עשויה לשמש דו-צדדית, שיפור הסימטריה של תצהיר על פני שתי הריאות. הכנת קטטר כולל ליטוש, angulation קל, תיוג הוא מרכיב מרכזי להצלחה. כמובן, לתרגל טכניקה זו היא גם הכרחית.
הדגמת ההליך תהיה סומיי ליאו, עוזרת מחקר מקצועית מהמעבדה שלי. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן, להשעות הרדמה, בן שמונה עד 10 שבועות, C57-שחור / 6 העכבר מן החותכות על קו תפר עטוף בכיוון סופי. אבטח את העכבר באופן רופף עם שתיים עד שלוש חתיכות וו, וסובב את הקלטת, תוך הימנעות מהגבלת אוורור, והדלק מאיר סיבים אופטיים דיודה פולט אור.
מקם את המפעיל מאחורי הפלטפורמה, גב אל העכבר. לכוון את האווז של המאירה שניים עד שלושה סנטימטרים מן העכבר, כך שהוא מדליק את אזור הגרון דרך העור. באמצעות מדפים סטריליים ביד הדומיננטית, למשוך את הלשון מתוך חלל הפה.
השתמש ביד הלא דומיננטית ובדיכוי הסטרילי כדי לשטח את שורש הלשון כדי לחשוף באופן נרחב את oropharynx. לאחר שחרור המדפים, השתמש ביד הדומיננטית כדי לצנרר את הקטטר המורחב לתוך קנה הנשימה דרך חלל הפה. אשר מיקום על ידי התבוננות אם הבועה במזרק נע למעלה ולמטה עם כל נשימה.
עבור cannulation אונה סלקטיבית של הריאה הימנית דיסטלית, לאחר צנרור תוך-מוחי, לסובב את לוח הפלסטיק 30 מעלות, ולהנחות את הרכזת של הקטטר במקביל קו האמצע של העכבר לעומק מבוסס משקל המתאים, כפי שצוין בטבלה. בעזרת קצה טעינת ג'ל, ספק 20 מיקרוליטר של צבע כחול 0.3% אוונס לקטטר, ואחריו 1 עד 2 אליקוטים של 100 מיקרוליטר של אוויר על ידי טפטפת זכוכית. לאחר מכן, למשוך את הקטטר, ולשמור על העכבר בעמדה במשך 30 שניות לפני הנחת החיה על שמיכה מחממת, עם ניטור עד החלמה מלאה.
עבור קנוניזציה סלקטיבית של הריאה השמאלית הדיסטלית, לאחר אינטובציה תוך-אצ'לית, סובב את לוח הפלסטיק מינוס 74 מעלות, וקדם בעדינות את הקטטר לברונצ'וס הימני הראשי תוך הצבת לחץ צנוע 90 מעלות כלפי מטה ולקראת מפת הספרים. לאחר צביעת מקטעי הריאה השמאליים התחתונים, סובבו את לוח הפלסטיק פחות מ-30 מעלות, וספקו 40 מיקרוליטרים של צבע כחול אוונס 0.3% עם קצה טעינת ג'ל. לאחר מכן, לספק אחד עד שני 100-300-microliter aliquots של אוויר באמצעות טפטף זכוכית, ולמשוך את הקטטר כדי לאפשר לעכבר להתאושש, כפי שהוכח.
עבור ניהול ריאות שלם נכון, לאחר צנרור תוך-רחף, סובב את לוח הפלסטיק ב-30 מעלות והנחה את הקטטר במקביל לקווי האמצע של העכבר, והגיע לעומקים הנחוצים לקנוניזציה ימנית של האונה. אשר את המראה של סימן tachypnea, ולסובב את העכבר מינוס 74 מעלות כדי לאפשר סיוע כבידה עבור אספקת סוכן. משוך את הקטטר למצב המתאים להמראה של הסופת mainstem הימנית, ולהבטיח כי שיפה של הקטטר פונה כלפי מטה.
לספק 30 microliters של 0.3% אוונס צבע כחול לריאות הימניות, ואחריו אחד עד שני 100-300 מיקרוליטר aliquots של אוויר. לאחר מכן, למשוך את הקטטר, ולאפשר לעכבר להתאושש. עבור ניהול ריאות שלם שמאלי, לאחר קנוניולציה תוך-אצ'יאלית, סובב את לוח הפלסטיק מינוס 74 מעלות, וקדם בעדינות את הקטטר לתוך הסמפנוס השמאלי הראשי תוך הצבת לחץ צנוע הן 90 מעלות כלפי מטה והן לכיוון ספר ההזנה.
אשר את הסימן לא tachypnea, ולסובב את העכבר 86 מעלות כדי לאפשר סיוע כבידה עם ניהול הסוכן. משוך את הקטטר לסופת mainstem השמאלית, ולסובב את ההיפוך של הקטטר כדי להתמודד עם הפנים כלפי מטה. לספק 30 microliters של 0.3% צבע כחול אוונס עם קצה טעינת ג'ל לריאות השמאליות, ואחריו אחד עד שני 100-300 מיקרוליטר aliquots של אוויר.
לאחר מכן, למשוך את הקטטר, כדי לאפשר לעכבר להתאושש, כפי שהודגם. אספקה דו-צדדית של FITC-dextran על ידי ניהול תוך-גולגולתי וסימטרי תוך-ברונכיאלי מובילה פלואורסצנטיות FITC פרנצ'ימלית ריאות אסימטרית עם ריכוזים יחסיים גדולים יותר ציין בריאה השמאלית. זה מרמז כי אספקת ריאות אסימטרית של סוכנים ניסיוניים לאחר ניהול תוך-תכלית אינה תוצאה של הצגה אסימטרית של סוכנים אלה לכל ברונכיוס mainstem אבל זה משלוח mainstem שווה מדולל על ידי הבדלים במשקל הריאות ובמסה.
ניהול תוך-ברונכיאלי מותאם מינון משפר את הסימטריה של אספקת סוכן פרנצ'ימלי ריאות. למרות תיקון זה, עם זאת, הטרוגניות מתמשכת עדיין נצפתה בתוך האונות השונות של הריאה הימנית. 21 ימים לאחר פגיעה פנימית bleomycin-induced ריאות פיברוטית, דלקת נצפתה בעיקר בריאה השמאלית, עם פחות פציעה בולטת בריאה הימנית.
לעומת זאת, ניהול בלומיצין תוך-ברונכיאלי מותאם מינון גורם לירידה קלה בפציעה בריאה השמאלית ולפגיעה מוגברת בריאה הימנית, כאשר הפציעה הגדולה ביותר ניכרת באונות האמצעיות והמיותרות. במהלך כל ניהול הריאות, אל תשכחו למשוך את הקטטר ולטפל במשופע של הקטטר עם הפנים כלפי מטה.
