Modèle murin de blessure à l’arme blanche pour l’étude de l’hémorragie et de l’inflammation dans les lésions cérébrales traumatiques

Nous sommes intéressés par le développement d’une méthode pour arrêter l’hémorragie et supprimer l’inflammation dans le TVI, nous avons donc établi un protocole pour créer facilement un modèle de masse TVI en utilisant uniquement une aiguille. Notre modèle TVI à blessure par arme blanche est bénéfique car il lubrifie les hémorragies et l’activation grise. Notre protocole présente trois avantages principaux par rapport aux autres techniques.

Aucun équipement ou outil spécifique n’est requis. Cela peut être fait facilement et rapidement, et la blessure est si petite qu’elle n’affecte pas le comportement de la souris, de sorte que n’importe qui peut le faire avec une reproductibilité élevée. Notre laboratoire se concentrera sur la communication des neurones, des cellules grises et des cellules gliales, ainsi que des parasites lors de la réparation des lésions cérébrales traumatiques.

La communication joue un rôle essentiel dans la réparation. Cependant, il n’est pas encore entièrement compris. Notre protocole est très utile pour analyser la communication.

Pour commencer, placez la souris anesthésiée sur sa face ventrale sur une serviette en papier. Vérifiez que la souris est profondément anesthésiée à l’aide d’un test de pincement des orteils. Désinfectez le site chirurgical en alternant trois fois chacune les injections de bétadine et de gommage à 70 % d’éthanol.

Maintenant, saisissez la peau occipitale avec une pince émoussée et faites une incision d’un à 1,5 millimètre de large pour exposer l’os occipital sans endommager le crâne ou un organe. Ensuite, ouvrez doucement et lentement l’incision pour observer la limite entre le cortex cérébral et le cervelet à travers le crâne. Pour effectuer une craniotomie chez la souris, créez un petit trou dans l’hémisphère droit de l’os occipital à l’aide d’une aiguille.

Tournez doucement l’aiguille pour faire un point d’insertion pour l’aiguilletage de la plaie par arme blanche, en prenant soin de ne pas endommager le parenchyme cérébral. Pour la plaie par arme blanche, insérez l’aiguille appropriée à partir du point d’insertion et poignardez le cortex cérébral le long de l’axe caudal rostral. Enfin, suturez l’incision cutanée à l’aide d’une suture en nylon 3-0 avec une aiguille de forme demi-ronde.

La plaie après l’intervention a été confirmée par microscopie. L’extravasation de l’IGG a atteint son apogée un jour après la blessure, suivie d’une récupération progressive et d’une réduction de l’intensité de la coloration à trois, cinq et sept jours. La fuite de colorant bleu d’Evan dans le parenchyme cérébral s’est produite immédiatement après la blessure, sa concentration atteignant un pic d’une heure.

La concentration de colorant a progressivement diminué après un et trois jours. L’accumulation maximale de microglies positives à IBA1 et d’astrocytes positifs à GFAP s’est produite respectivement cinq et trois jours après la blessure, leur présence diminuant de sept jours. Les cytokines inflammatoires, y compris le facteur de nécrose tumorale alpha, l’interleukine six et l’interleukine un bêta, ont montré un pic d’expression de l’ARNm un jour après la blessure, tandis que le facteur de croissance transformant bêta a atteint un pic trois jours après la blessure.