Notre recherche vise à comprendre comment l’œil prévient naturellement l’inflammation. Nos recherches ont montré que la voie du myécorn est essentielle pour supprimer l’inflammation dans l’œil et favoriser la survie cellulaire dans la rétine stressée. Cela suggère que l’inactivation de la voie du myécorne pourrait être bénéfique pour le traitement des maladies génératives rétiniennes.
Ce protocole normalise la pression intraoculaire avant le retrait de l’aiguille, réduisant ainsi les traumatismes des structures oculaires et limitant les lésions à la composante ischémie-reperfusion. Ce raffinement minimise la variabilité expérimentale causée par la manipulation physique, améliorant ainsi la précision de ce modèle. Notre recherche promeut le concept unique de thérapie au lieu de molécules neutralisantes pour atténuer les symptômes dans l’espoir que les cellules puissent survivre et revenir à la normale.
Nous nous sommes concentrés sur le changement de comportement des cellules impliquées dans la maladie. Cette approche a un fort potentiel pour apporter des avantages à long terme et une résistance à la récurrence des maladies chroniques, car une activité cellulaire normale est induite. Notre modèle a proposé une technique raffinée pour étudier les lésions d’ischémie-reperfusion dans l’œil de la souris.
Et cela peut offrir une représentation plus précise de la façon dont les structures intraoculaires réagiraient à une blessure due à une pression intraoculaire prolongée ou à une lésion de reperfusion. Pour commencer, préparez des seringues de solution saline stérile de chlorure de sodium à 0,9 % reliées à une ligne de perfusion et à un robinet avec une aiguille de calibre 30 attachée à l’extrémité de la ligne, une pour chaque souris, et placez-les à 120 centimètres au-dessus de la surface de la paillasse. Ensuite, rincez toutes les bulles d’air de la conduite.
Ensuite, créez un lit pour stabiliser la souris en coupant une dépression d’environ six centimètres sur trois centimètres dans une éponge et en la plaçant en toute sécurité dans un puits en polystyrène ou un autre récipient plat. Après avoir anesthésié la souris, dilatez l’iris avec une goutte de tropicamide à 1 % et attendez cinq minutes pour la dilatation. Ensuite, placez solidement la souris dans le lit d’éponge sous le microscope.
Appliquez une solution saline sur les yeux pour rincer les débris ou la fourrure de la surface de l’œil. À l’aide d’une pince non dentée, tenez doucement l’un des yeux. Ensuite, avec la ligne de perfusion fermée, canulez la chambre antérieure avec l’aiguille à environ deux millimètres du limbe.
Assurez-vous que l’aiguille perce la cornée perpendiculairement à la surface périphérique incurvée de la cornée, puis légèrement aplatie parallèlement au plan de l’iris. Tournez le robinet d’arrêt pour faire fonctionner la ligne de perfusion et vérifiez qu’il n’y a pas de fuite à travers la plaie cornéenne. Assurer une distension progressive de la cornée à mesure que la pression intraoculaire augmente.
À l’aide d’un tonomètre, vérifiez que la pression intraoculaire a atteint 90 à 100 millimètres de mercure. Fixez la ligne de perfusion avec du ruban adhésif, en veillant à ce que l’aiguille ne change pas de position et ne commence pas à fuir. Maintenant, appliquez une pommade ophtalmique telle que la bacitracine sur l’œil pour prévenir la sécheresse.
Placez la souris loin du microscope sous une lampe chauffante pour maintenir une température corporelle normale pendant 60 minutes. Après 60 minutes, remettez la souris dans le microscope. Abaissez la seringue de solution saline au niveau de la souris pour normaliser la pression intraoculaire.
Mesurez la pression intraoculaire avec le tonomètre pour vérifier qu’elle est proche de la normale, environ 20 millimètres de mercure. Une fois normalisé, retirez soigneusement l’aiguille, en évitant d’endommager le cristallin ou l’iris. Enduisez les yeux de la souris d’une pommade antibactérienne ophtalmique, telle qu’une pommade ophtalmique vétérinaire à la bacitracine.
Surveillez la souris sur une surface chauffée pendant une à deux heures jusqu’à ce qu’elle se remette complètement de l’anesthésie. Une fois complètement rétablie, remettez la souris dans sa cage. Au septième jour, les rétines présentaient des dommages et une perte cellulaires plus importants qu’au deuxième jour, indiquant une dégénérescence rétinienne plus sévère au fil du temps après une ischémie et une reperfusion.
Les scores histopathologiques individuels étaient plus élevés dans la plupart des couches de la rétine le septième jour par rapport au deuxième jour, montrant une augmentation des changements pathologiques au fil du temps. Les scores histologiques totaux étaient significativement plus élevés le septième jour que le deuxième, indiquant une progression marquée des lésions rétiniennes.
