Unsere Forschung konzentriert sich darauf, zu verstehen, wie das Auge Entzündungen auf natürliche Weise verhindert. Unsere Forschung hat gezeigt, dass der Myecorn-Signalweg essentiell ist, um Entzündungen im Auge zu unterdrücken und das Überleben der Zellen in der gestressten Netzhaut zu fördern. Dies deutet darauf hin, dass die Inaktivierung des Myecorn-Signalwegs für die Behandlung von generativen Netzhauterkrankungen von Vorteil sein könnte.
Dieses Protokoll normalisiert den Augeninnendruck vor der Nadelentnahme, reduziert das Trauma der Augenstrukturen und begrenzt die Verletzung der Ischämie-Reperfusionskomponente. Diese Verfeinerung minimiert die experimentelle Variabilität, die durch physikalische Manipulation verursacht wird, und erhöht die Genauigkeit dieses Modells. Unsere Forschung fördert das einzigartige Konzept der Therapie, anstatt Moleküle zu neutralisieren, um die Symptome zu lindern, in der Hoffnung, dass die Zellen überleben und zur Normalität zurückkehren können.
Wir konzentrierten uns darauf, das Verhalten von Zellen zu verändern, die an der Krankheit beteiligt sind. Dieser Ansatz hat ein großes Potenzial, langfristige Vorteile und Resistenz gegen das Wiederauftreten chronischer Krankheiten zu bieten, da die normale zelluläre Aktivität induziert wird. Unser Modell hat eine verfeinerte Technik zur Untersuchung von Ischämie-Reperfusionsschäden im Mausauge angeboten.
Und dies könnte eine genauere Darstellung dessen bieten, wie intraokulare Strukturen auf eine Verletzung durch anhaltenden Augeninnendruck oder durch eine Reperfusionsverletzung reagieren würden. Bereiten Sie zunächst Spritzen mit steriler 0,9%iger Natriumchlorid-Kochsalzlösung vor, die an eine Infusionsleitung angeschlossen sind, und einen Absperrhahn mit einer 30-Gauge-Nadel, die am Ende der Leitung befestigt ist, eine für jede Maus, und platzieren Sie sie 120 Zentimeter über der Tischoberfläche. Spülen Sie dann alle Luftblasen aus der Leitung.
Schaffen Sie als Nächstes ein Bett, um die Maus zu stabilisieren, indem Sie eine Vertiefung von etwa sechs mal drei Zentimetern in einen Schwamm schneiden und sicher in eine Styropormulde oder einen anderen flachen Behälter legen. Nachdem Sie die Maus betäubt haben, erweitern Sie die Iris mit einem Tropfen 1%Tropicamid und lassen Sie sie fünf Minuten dilatieren. Legen Sie die Maus dann sicher in das Schwammbett unter dem Mikroskop.
Tragen Sie Kochsalzlösung auf die Augen auf, um Schmutz oder Fell von der Augenoberfläche zu entfernen. Halten Sie mit einer nicht gezahnten Pinzette vorsichtig eine der Augen fest. Dann, bei geschlossener Infusionsleitung, kanülieren Sie die Vorderkammer mit der Nadel etwa zwei Millimeter vom Limbus entfernt.
Stellen Sie sicher, dass die Nadel die Hornhaut senkrecht zur peripheren gekrümmten Hornhautoberfläche durchsticht und dann parallel zur Ebene der Iris leicht abgeflacht wird. Drehen Sie den Absperrhahn, um die Infusionsleitung zu führen, und vergewissern Sie sich, dass keine Leckage durch die Hornhautwunde vorhanden ist. Sorgen Sie für eine allmähliche Dehnung der Hornhaut, wenn der Augeninnendruck ansteigt.
Überprüfen Sie mit einem Tonometer, ob der Augeninnendruck auf 90 bis 100 Millimeter Quecksilbersäule angestiegen ist. Sichern Sie die Infusionsleitung mit Klebeband und stellen Sie sicher, dass sich die Position der Nadel nicht ändert und undicht wird. Tragen Sie nun eine Augensalbe wie Bacitracin auf das Auge auf, um Trockenheit zu verhindern.
Legen Sie die Maus vom Mikroskop weg unter eine Heizlampe, um die normale Körpertemperatur 60 Minuten lang zu halten. Bringen Sie die Maus nach 60 Minuten wieder ans Mikroskop. Senken Sie die Kochsalzlösungsspritze auf das Niveau der Maus, um den Augeninnendruck zu normalisieren.
Messen Sie den Augeninnendruck mit dem Tonometer, um zu überprüfen, ob er nahe dem Normalwert liegt, etwa 20 Millimeter Quecksilbersäule. Entfernen Sie nach der Normalisierung vorsichtig die Nadel, um eine Beschädigung der Linse oder der Iris zu vermeiden. Beschichten Sie die Mausaugen mit einer antibakteriellen Augensalbe, wie z. B. Bacitracin Veterinär-Augensalbe.
Überwachen Sie die Maus ein bis zwei Stunden lang auf einer erhitzten Oberfläche, bis sie sich vollständig von der Narkose erholt hat. Sobald die Maus vollständig wiederhergestellt ist, bringen Sie sie wieder in ihren Käfig zurück. Die Netzhaut am siebten Tag zeigte im Vergleich zum zweiten Tag eine größere Zellschädigung und einen stärkeren Zellverlust, was auf eine schwerere Degeneration der Netzhaut im Laufe der Zeit nach Ischämie und Reperfusion hinweist.
Die individuellen histopathologischen Werte waren am siebten Tag in den meisten Schichten der Netzhaut höher als am zweiten Tag, was im Laufe der Zeit erhöhte pathologische Veränderungen zeigt. Die histologischen Gesamtwerte waren am siebten Tag signifikant höher als am zweiten Tag, was auf ein deutliches Fortschreiten der Netzhautschädigung hinweist.
