Biz personel Alfred tıbbi araştırma ve eğitim seçim bölgesi hayvan Hizmetleri (AMREP AS) takım onların yardım için ve bu çalışmada kullanılan fare bakımı ve Kraliçe Viktorya dönemine ait devletin altyapı operasyonel destek programı destek için teşekkür ederiz Hükümet.

Tüm deneyler açıklanan Alfred tıbbi araştırma eğitim seçim bölgesi hayvan Etik Komitesi tarafından (AMREP AEC) kabul edildi ve fareler Ulusal Sağlık ve tıbbi araştırma Konseyi (NHMRC), Avustralya talimatların doğrultusunda insana ilişkin bakım sağlanmıştır Hayvan deney. Hayvanlar onların reçete diyet ve su ad libitum idare ve 12 h ışık ve 12 h-karanlık döngüsü ile ısı kontrollü ortamında (~ 21-22 ° C) yer alır. Yedi hafta eski erkek fareler (bir C57Bl/6J arka plan üzerinde) ya da normal normal yemek diyet beslenen (enerji içerik 14.3 MJ/kg, kJ %76 karbonhidrat, %5 yağ, % 19 protein; oluşan tablo malzemeleri görmek) veya yağ beslenme yüksek grubu için yüksek yağlı diyet (HFD) () enerji 19 MJ/kg, kJ %36 karbonhidrat, % 43 yağ, % 21 protein, özel Feeds oluşan içerik) için 3 hafta. Metabolik izleme analizi bir istiridye diyet 3 hafta sonra gerçekleşti ise vücut ağırlığı ve vücut kompozisyonu ölçümleri bir EchoMRI makine kullanarak haftalık yapıldı.
1. vücut kompozisyon Analyzer yordamı
Not: En iyi şekilde çalışması için EchoMRI 4-in-1 Bu iletişim kuralında kullanılan hava sıcaklığı kararlı ve değil dalgalanıyor nerede bir oda içinde bulunması. İdeal bir konuma sahip bu sürekli izlenmelidir. Makine ve kesintileri iktidara taşıma de mümkünse kaçınılmalıdır. Güç kaynağı kesildi ve sistemin başlatılması gerekir, en az 2-3 h tekrar kullanmadan önce ısınmak makine için izin verin. Başlamadan önce doğru kişisel koruyucu ekipman var emin olun.
<ol><li>Fareler tarama öncesinde, vücut kompozisyon analyzer makinede bir sistem testi gerçekleştirin. Bu bir kalibrasyon standart (kanola yağı sistem test örneği (maliyet) araç duyarlığını test etmek ve onun doğruluğu hiçbir drift oldu emin olmak için adlandırılır) kullanarak içerir.<ol>
<li>Açık sistem bilgisayar yazılımı, Sistem Test araç çubuğu düğmesini tıklatın veya "Alt + Y" aynı anda basmak.</li>
		<li>Sistem başlatma bilgisayar tarafından getirilmeden önce (Bu durumda fare özel maliyeti) doğru maliyeti yerleştirildi bu sistemi ( Şekil 1) Portal içinde doğrulamak bir uyarı mektubu bekleyin. Bu gerçekten durumda olduğunu onayladıktan sonra tamamlamak için birkaç dakika sürer testi ile devam etmek için kabul edin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sistem testi geçtikten sonra ileri tarama ile devam edin.<ol>
<li>Sistem başlatma başarısız olursa, sistem sınama işlemini yineleyin.</li>
		<li>Makine (bir sapma olarak oluşan durumları gösteren) Aralık dışında olmaya devam ediyor, kalibrasyon durumu düzeltmek için gerekli olabilir. Bu istemleri izleyerek veya satın alma sırasında sağlanan kullanım kılavuzunda açıklandığı gibi tamamlayın. Sorun devam ederse, el ile3 denetleyin veya üreticinin destek ekibine sorunu bildirin ve daha fazla talimat aramak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fareler onları iken makine yer tutmak için bir küçük hayvan numune tutucu (uzun silindir) yerleştirin. Bunu yapmak için yer tutucu yatay olarak, fareyi kaldırıp ve silindir kafası açılış içine önce ekleyin. Silindir ve analiz için hazır altındaki faredir yavaş ve dikkatli sahibi dikey konuma getirin.</li>
	<li>Bir kez sahibi içinde fare hareket sırasında ölçüm dönemini sınırlandırmak için bir ayırıcı ekleyin. Bazı durumlarda, son derece etkin fareler ile senin parmak ucu ile yerde sınırlayıcı tutmak için gerekli olabilir. Not: stresi azaltmak için numune sahipleri onların ilk analiz önce yerleşimiyle fareler hakkında bilgi edinin. Fareler onlar karanlıkta hissediyorum gibi bir kırmızı renkli hayvan numune tutucu kullanılması da potansiyel stres tepkisi azaltabilir.</li>
	<li>İçinde belgili tanımlık bilgisayar yazılımı için verileri kaydetmek için bir klasör (klasör araç çubuğu) seçin ve bir dosya adı oluşturun.</li>
	<li>Gerekirse, tarama birincil birikimleri sayısını artırarak yağ ve yağsız ölçümlerde rasgele gürültü miktarını azaltmak. Bir kez yazılım başlatılır, birincil birikimleri genel günlük kullanım için önerilen varsayılan değer ayarlanır; Bu parametreleri değiştirmek için belirli bir neden olmadığı sürece, varsayılan duyarlık gerekli düzeyi kullanıcılara verecektir.</li>
	<li>Ücretsiz su ve toplam su için veri alma ilgi değil, su sahneden Hayır demek için sekmesini seçerek etkinleştirin. Böylece tarama süresini önemli ölçüde azaltmak ve üretilen işi artırmak.</li>
	<li>Tarama "tarama Başlat" seçerek veya klavyenin üzerindeki F5 tuşuna basarak başlatın. Hayvan ile ilgili tüm ilgili verileri girin (Örneğin, hayvan kimliği, vücut kitle, vb.) ve "ok" tuşuna basın veya yaklaşık 1 dakika sürer tarama başlamak için F5'e.</li>
	<li>Veri elde ettikten sonra fare makine içeren hayvan sahibi çıkarın ve onun kafes hayvan geri yerleştirin. Bütün hayvanlar taradıktan sonra verileri daha ayrıntılı bir çözümleme ve harmanlama için verin.</li>
	<li>Önce ve kullanımdan sonra üreticinin talimatlarına göre hayvan sahipleri iyice temizleyin. Bu sahipleri akrilik plastikten inşa edilir, onlar çatlama sahipleri ve/veya böylece kırılma olasılığı artmaktadır sahibinin hızlı bozulma neden olabilir izopropil alkol ve etil alkol kaçınılmalıdır. Bunun yerine, sıcak bulaşık yıkama su solüsyonu kullanabilir veya, daha da dezenfektan gerekiyorsa, F10 (at 1:125 seyreltme) veya diğer dezenfektan veya temizleme spreyleri ( Tablo malzemelerigörmek) kullanın ve sonra silin.</li>
</ol>2. metabolik hayvan sistem yordamı izleme
Not: ~ 2 h ve ısınmak için gereklidir. Makinenin kapatılmış, bu zirkon hücre 725 ° C'ye ısıtılmış izin vermek için açık olmalıdır Ayrıca biz genellikle fareler vücut kompozisyon analiz kısıtlama stres ile herhangi bir sorunları önlemek için izleme sistemi hayvan girerek gün önce bir yerleştirin.
<ol><li>Hayvan izleme sisteme bağlı bilgisayar açık ve kontrol programı açmak emin olun. "Oxymax yardımcı programı" seçeneği pompalar başlatmak için aracı menüsünden seçin.</li>
	<li>Su şişeleri uygun su ile doldurun, tartmak ve fareler sağlığını incelemek ve gıda organize etmek. Gıda alımı ölçüm sistemi içinde gıda pudralanmaya göz önünde bulundurun. Gıda hoppers yaylı platform ve ipucu gıda hopper karartıcı tarafından doldurun. Gıda hopper ve su şişesi yetecek kadaryemek ve suyumuz deneysel Tom'u son sağlamak için tamamen dolu olduğundan emin olun.</li>
	<li>Drierite/kurutucu durumunu kontrol edin; renk göstergesi kullanılıyorsa, bu mavi olmalı ve bu nedenle Kuru ama pembe/mor ise, bunu önemli nem absorbans olmuştur ve değiştirilmesi veya tepesinde.</li>
	<li>Amonyak tuzak ve soda kireç durumunu denetleyin ve gerekirse değiştirin. Amonyak tuzak bağlıysa ne zaman ikinci tuzak bir renk değişikliği belirtileri görüntüler, bir defada iki birincisinin yerini. CO2 ofset bir artış da soda kireç yerine gerek anlamına. Not: Kurutucu fırın kurutulmuş ve yeniden kullanılabilir, ancak her zaman taze kullanmak sistem üreticisinden önerileri uygulayın.</li>
	<li>Odaları montajı. Bunu yapmak için gıda hopper bakiyesine yeri sonra odası eklenen odası katında olur delikli platformu ile üzerine yerleştirin. Dikkatle odasında fareyi getirin ve sistem ön kapağını takın ve Klipler geri ve güvenli su şişesi konumlandırma ve tespitleme önce. Önlem olarak tüm odası kapakları, fare ve su (Şekil 2A-D) yeniden denetleyin. Not: muayene ediliyor fareler boyutuna bağlı olarak, fareler yiyecek ama onlar doğrudan besleyici üstünde uyuyabilir yeterli alanı erişimi gıda hopper yukarıdaki alanlarda yüksekliğini ayarlamak gerekli olabilir.</li>
	<li>Bu gaz sensörler her deneme önce ayarlanması önerilir gibi sistemi kalibre.<ol>
<li>Bir gaz bilinen kompozisyon (% 0.5 CO2, %20,5 O2, dengesi azot) kullanın. Kalibrasyon gaz tankı sistem yolu ile bir regülatör ve hortum bağlamak. Açmak ve tank çıkış basıncı 5-10 psişik okuma olun. Not: Bazı sistemlerde ikinci bir tank, hortum ve regülatör "mahsup" bir gaz olarak saf azot kullanımı için olacaktır. Ameliyat sistemi yerine soda kireç CO2 serbest hava oluşturmak için kullanır.</li>
		<li>O2 ve CO2 sensörleri ayarlamak için yordamları izleyin. "Kalibrasyon" Araçlar menüsünden seçin ve sırayla O2 ve CO2kalibre. Örnek 1) ayarlama önce emin olmak ve başvuru akar 0.400 LPM, 2) zirkon O2 sensör sıcaklık 725 ° C (± 1 ° C), 3) örnek ve referans daha kuru ve hava pompaları açık olduğundan ve 4) kalibrasyon gaz takılı ve açık olduğundan.</li>
		<li>Gerekirse, ne zaman O2 sensör kalibrasyonu biraz mahsup denetim ön zirkon oksijen sensörünün 1,0000 (± 0.0002) bir O2 oranı değerini elde etmek için ayarlayın. (Yeşil font bilgisayar ekranında yazılım görüntüsündeki vurgulanmış) kabul edilebilir sınırlar içinde olduğundan emin olmak için bu.</li>
		<li>Sonra başarılı O2 ve CO2 sensör kalibrasyonu, Kalibrasyon gaz silindir ve hortum düzenleyici kesin. Kalibrasyon sonra O2 başvuru hava (atmosferik) için 20.92 (± 00.02) okumalısınız. Kalibrasyon tolerans dışında yineleyin ve sorun giderme kılavuzları üretici bakın. Bu aksi taktirde daha fazla talimat için üreticiye başvurun.</li>
	</ol></li>
	<li>Deneysel kurulum ile devam edin. "Deneysel dosyasını açın" deney menüsünden seçin. (Örneğin, fare) uygun şablonu seçin. Deney menüde "Kur" altında kaydedilmesi gereken deneme parametrelerini tanımla (Örneğin, fare kimliği, ağırlık, Grup, vb) herhangi bir odaları kullanılmadığı seçeneğini temizleyin ve kaydedilmesi için deney konumunu seçin.</li>
	<li>Ölçekler ölçme gıda alımı Eğer şeytan ve deney menüsünden "Çalıştır"'ı seçerek veri yakalamayı başlatmak emin olun. Zaman fenotip, hayvan yalıtım ve sistem kullanım kurumsal kurallara bağlı olarak farklı uzunlukları için yakalanan verileri. Not: bizim ellerimizde deneme rutin olarak 48 saat için ilk 24 h acclimatisation yeni çevre ve ikinci 24 saat veri çözümlemesi için kullanılan olarak kullanılan ile çalıştırılır. Veri toplama dönemi ne kadar araştırmacı onların fareler tek başına barındırılıyor ve hayvan etik onay bağımlı tutmak istiyor üzerinde temel alır. Alternatif olarak, hükümler varsa, fareler olabilir sisteme konuyor önce odalarında acclimatised ve bağlı. 12 odası sistemi kullanılırken her odası yaklaşık her 13 dakikada ölçülür.</li>
	<li>Düzenli olarak kontrol edin ve fareler hayvan refahı sağlamak için sistemdeki uygun veri toplanan iken ve elde edilen sonuçları izleyebilirsiniz. Herhangi bir sorun bu aşamada tespit ve düzeltilmesi mümkün olabilir. Ne zaman onlar are içinde belgili tanımlık sistem her sabah ve akşam her fare kontrol edin.</li>
	<li>Gerçek zamanlı oksijen tüketimi, RER ve enerji harcama açısından her fare için toplanan veriler için veri dosya sayfasının en üstündeki metabolik sekmesini kontrol edin. Bu arada, sonları ışınla ve gıda tüketim verileri aktivite ve besleme sekmelerde sırasıyla bulunabilir. "O2 içinde" çevresinde okuma onay 20,90-20.94, "CO2 " içinde olan 0.040 - 0.050, RER 0,7 ile 1 arasında ve akış hızı 0.5 - 0.6 L/dk sabit.</li>
	<li>Düzenli aralıklarla kontrol fareler yiyecek ve su erişiminiz ve onlar her tüketiyorlar. Onlar sıkıntı delikli döşeme, kazma gibi belirtileri gösteren değil emin olun. Ayrıca, görüntülenen sonuçları izlemek.</li>
	<li>Tahsis edilen deneysel süre bitiminde "Dur" deney menüden seçin ve sonuçları dışa aktarabilirsiniz (CSV dosyaları, Dosya > Dışa Aktar > oluşturmak konu CSV'ın) analiz için.</li>
	<li>Fareler sağlığını incelemek, onları tartmak ve ev onların kafes dönün.<ol>
<li>Fareler doğru her diğer ayrılıktan sonra düşman olmak, birlikte tekrar yer almaktadır bir kez çok izlemek.</li>
		<li>Kafesleri sökmeye, aşırı yemek hoppers kaldırmak ve herhangi bir dışkı, idrar ve kafesleri gıdalardan ipucu. Şişe ve yudumlayanlar seyreltilmiş T-bac çözümde daldırın ıslatın ve sulandırılmış çamaşır suyu çözümündeki diğer bileşenler temiz. Temiz su ile durulayın ve hava kuru bırakın.</li>
	</ol></li>
	<li>Yazılımı ile metabolik parametreleri hesaplayın. Yazılım denklemler son verileri çıkış4sağlamak için bir dizi kullanır. Oksijen tüketimi ve karbon dioksit üretim hesaplanması için: oksijen tüketimi: VO2 (LPM)V =benO2i - VoO2o; Karbondioksit üretim: VCO2 (LPM)V =oCO2o-VbenCO2i Nerede:Ben V = giriş havalandırma oranı (LPM), Vo çıkış havalandırma oranı (LPM), O2i = O2 konsantrasyonu, giriş, O2o = O2 konsantrasyonu, çıkış, CO2i = CO2 = giriş, CO2o konsantrasyonu CO2 konsantrasyonu, çıkış =. RER hesaplanması için: RER = VCO2 / VO2. Protein oksidasyon değil ölçüldü ve bu nedenle RER bunun için ayarlandı değil unutmayın. Enerji harcaması hesaplanması için: enerji harcaması: CV = 3.815 + 1.232* RER Isı (Kcal/h)) CV = * VO2. Nerede: CV kalorifik değeri (sıcaklık ve oksijen tüketim hacmi arasındaki ilişki) olduğunu. Bu "öğeleri of Bilim Graham Lusk tarafından oluşan Lusk tablo adı verilen beslenme" türetilir.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Chen, W., Wilson, J. L., Khaksari, M., Cowley, M. A., Enriori, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+fat+analyzed+by+DEXA+scan+reflects+visceral+body+fat+and+improves+the+phenotype+description+and+the+assessment+of+metabolic+risk+in+mice.">Abdominal fat analyzed by DEXA scan reflects visceral body fat and improves the phenotype description and the assessment of metabolic risk in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 303 (5), E635-E643 (2012).</li><li>Kovner, I., Taicher, G. Z., Mitchell, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calibration+and+validation+of+EchoMRI+whole+body+composition+analysis+based+on+chemical+analysis+of+piglets,+in+comparison+with+the+same+for+DXA.">Calibration and validation of EchoMRI whole body composition analysis based on chemical analysis of piglets, in comparison with the same for DXA.</a> Int J Body Compos Res. 8 (1), 17-29 (2010).</li><li>EchoMRI. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Software User Manual: Whole body composition analyzer. , (2016).</li><li>Columbus Instruments. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Oxymax for Windows User Manual. , (2014).</li><li>Tschop, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guide+to+analysis+of+mouse+energy+metabolism.">A guide to analysis of mouse energy metabolism.</a> Nat Methods. 9 (1), 57-63 (2011).</li><li>Speakman, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+energy+metabolism+in+the+mouse+-+theoretical,+practical,+and+analytical+considerations.">Measuring energy metabolism in the mouse - theoretical, practical, and analytical considerations.</a> Front Physiol. 4, (2013).</li><li>Swoap, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vagal+tone+dominates+autonomic+control+of+mouse+heart+rate+at+thermoneutrality.">Vagal tone dominates autonomic control of mouse heart rate at thermoneutrality.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 294 (4), H1581-H1588 (2008).</li><li>Tian, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermoneutral+housing+accelerates+metabolic+inflammation+to+potentiate+atherosclerosis+but+not+insulin+resistance.">Thermoneutral housing accelerates metabolic inflammation to potentiate atherosclerosis but not insulin resistance.</a> Cell Metab. 23 (1), 165-178 (2016).</li><li>Giles, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermoneutral+housing+exacerbates+nonalcoholic+fatty+liver+disease+in+mice+and+allows+for+sex-independent+disease+modeling.">Thermoneutral housing exacerbates nonalcoholic fatty liver disease in mice and allows for sex-independent disease modeling.</a> Nat Med. 23 (7), 829-838 (2017).</li><li>Lee, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+type+2+innate+lymphoid+cells+regulate+beige+fat+biogenesis.">Activated type 2 innate lymphoid cells regulate beige fat biogenesis.</a> Cell. 160 (1-2), 74-87 (2015).</li><li>Kusminski, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MitoNEET-driven+alterations+in+adipocyte+mitochondrial+activity+reveal+a+crucial+adaptive+process+that+preserves+insulin+sensitivity+in+obesity.">MitoNEET-driven alterations in adipocyte mitochondrial activity reveal a crucial adaptive process that preserves insulin sensitivity in obesity.</a> Nat Med. 18 (10), 1539-1549 (2012).</li><li>Judex, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+adiposity+in+small+rodents+using+micro-CT.">Quantification of adiposity in small rodents using micro-CT.</a> Methods. 50 (1), 14-19 (2010).</li><li>Chaurasia, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+ceramides+regulate+subcutaneous+adipose+browning,+inflammation,+and+metabolism.">Adipocyte ceramides regulate subcutaneous adipose browning, inflammation, and metabolism.</a> Cell Metab. 24 (6), 820-834 (2016).</li><li>Matthews, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6-deficient+mice+develop+hepatic+inflammation+and+systemic+insulin+resistance.">Interleukin-6-deficient mice develop hepatic inflammation and systemic insulin resistance.</a> Diabetologia. 53 (11), 2431-2441 (2010).</li><li>Tschop, M., Smiley, D. L., Heiman, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ghrelin+induces+adiposity+in+rodents.">Ghrelin induces adiposity in rodents.</a> Nature. 407 (6806), 908-913 (2000).</li><li>Garcia, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mature-onset+obesity+in+interleukin-1+receptor+I+knockout+mice.">Mature-onset obesity in interleukin-1 receptor I knockout mice.</a> Diabetes. 55 (5), 1205-1213 (2006).</li><li>Kowalski, G. M., Bruce, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+regulation+of+glucose+metabolism:+Implications+and+considerations+for+the+assessment+of+glucose+homeostasis+in+rodents.">The regulation of glucose metabolism: Implications and considerations for the assessment of glucose homeostasis in rodents.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 307 (10), E859-E871 (2014).</li><li>McGuinness, O. P., Ayala, J. E., Laughlin, M. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+experiment+in+centralized+mouse+phenotyping:+the+Vanderbilt+experience+and+recommendations+for+evaluating+glucose+homeostasis+in+the+mouse.">NIH experiment in centralized mouse phenotyping: the Vanderbilt experience and recommendations for evaluating glucose homeostasis in the mouse.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 297 (4), E849-E855 (2009).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Kritik adımlar
Burada açıklanan protokoller hangi ölçü vücut kompozisyonu için yollar ve vücut kompozisyonu analiz ve metabolik bir hayvan izleme sistemi kullanarak farelerde çeşitli metabolik parametreleri için bir örnek sağlar. Her iki teknikleri için bunu en iyi şekilde işleme makinaları ve araştırmacı vücut kompozisyon analiz için bir sistem testi uygular ve metabolik bir bilinen gaz kompozisyon için ayarlamanın yanı sıra gerekiyor bunu yapmak için emin olmak kritik öneme sahip donatım kullanmadan hayvan izleme sistemi önce. Bu sonuçları ve makine ile olası sorunlarını tespit etmek için fırsat büyük tutarlılığını garanti eder.
Veri metabolik hayvan izleme deneyleri için normalleştirilmiş yolu da tekniği elde edilen sonuçlar geçerliliğini sağlamak hayati önem taşımaktadır. Temsilcisi sonuçlarımızda (Şekil 4A-E) belirtildiği gibi VO2 farklı şekillerde bir dizi rapor edilebilir: vücut kitle fare göre mutlak oranını (L/dak), (mL/kg * min), veya yağsız vücut kitle (mL/kgLBM göre * min) bu verileri (örneğin elde edilen bir vücut kompozisyon Çözümleyicisi) olup olmadığını. Fenotip bağlı olarak, değerleri herhangi bir olası önyargı kural belirli bir yolu normalize etmek daha uygun olabilir. Örneğin, bir hayvanın vücut kitle arttı kullanılabilir ve oksijen tüketmek mümkün daha fazla doku sahip oldukları ve doğal olarak onların enerji harcaması yüksektir. Toplam vücut için normalize kitle olabilir en iyi seçenek kitle, birim başına oksijen tüketiminde azalma gözlem doğru önyargı gibi dokuların oksijen tüketimi farklı olmayabilir olsa bile. Vücut ağırlığı için normalize alternatif olarak, bir fare yağsız vücut kitle normale. Yağsız doku kitle oksijen tüketimi için öncelikle sorumlu olduğunu ve yağsız kitle genellikle değiştirilmemiş veya sadece VO2 veri ifade daha temsili bir şekilde alçakgönüllülükle Deneysel gruplar, bu şekilde normalleştirme arasında farklı olabilir. Yağsız kitle bölme tüm ile farklı metabolik oranları, birçok farklı dokuların oluşur ve sonuç olarak bu şekilde normalleştirme uygun olmamak veya herhangi bir bilgi sağlar unutulmamalıdır hangi yağsız kitle bileşenin sürüş değiştirin. Ayrıca, metabolizma yağ kitle bileşeni katkısını dışarı kuralları.
Bu sorunları göz önüne alındığında, istatistiksel olarak tabanlı alternatif bir yöntem de önerilen5,6oldu. () ANCOVA Kovaryans Analizi) bir değişkeni (Örneğin, enerji harcaması) karşılaştırmasını sağlar bir istatistiksel test birden çok grupları arasında diğer faktörleri düzeltmek ya da değişken olarak adlandırılan covariates. Vücut ağırlığı gibi bu şekilde faktörler, yağ kitlesi ve yağsız kütle enerji harcaması etkileyen değişkenler olarak dahil edilebilir, ama aslında ANCOVA içinde birden çok değişken kullanma olasılığı da dahil olmak üzere kendi belirli varsayımlar6, hatta bu yöntemi vardır sürece birbirinden bağımsız değişkenler geçersiz. Verilen ve normale mükemmel veya evrensel olarak kabul edilen tek yolu gibi görünüyor VO2 veya enerji harcama verileri sunmak, görüntülemek ve okuyucuya fenotip en net resim vermek için yolu bir dizi verileri sunmak uygun olabilir. Fiziksel aktivite düzeyleri oksijen tüketimini artırabilir ve bu yüzden etkinlik fenotipleri (bir artmak ya da azalmak) olan hayvanlarda aynı zamanda hesap/Eğer bu-sorumlu tamamen veya kısmen belirlemek için hareket değişiklikleri için normalize etmek gerekli olabilir VO2herhangi bir değişiklik için hesap.
Değişiklikler ve sorun giderme
Bu protokol için görüntülenen temsilcisi sonuçları 21-22 ° c bir oda sıcaklığında yapılan deneylerde elde Bir fare thermoneutral bölgenin yaklaşık 30 ° C arasında bu yüzden bir geleneksel hayvan evde 20-22 ° C-insan konfor için ayarla sıcaklık ile termal stres altında bir fare koymak. Bu sayaç için sigara titreyerek termojenezdeki logosuna 2 kat artış enerji harcaması 20 ° c ile 30 ° C7' de yer alan karşılaştırıldığında yer alan fareler arasında bir yukarı çıkan bu soğuk sıcaklıklarda devreye girer. Farelerin çevre konut bu deneyler için önemli bir göz gibi ateroskleroz8 ve yüksek yağlı diyet kaynaklı konut thermoneutrality, farelerin bazı koşullar gelişimi kazara gösterilmiştir gibidir Non alkolik yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD) patogenezinde9. Ortam sıcaklığında bu nedenle de önemli bir göz izleme sistemi, bir fenotip belirli sıcaklıklarda bulunabilir ancak diğerleri de,-ebil değil nokta hangi için potansiyel bir mekanizma olarak metabolik bir hayvan deneyler olduğunda eylem. Böyle bir senaryo nereye termojenezdeki soğutucu koşulları10altında büyük bir artış bu dokuların büyük bir miktar sağlar işe bej yağ aktivasyonu içerir bir fenotip olabilir. Böylece, o kurmak bu geçerli bu deneyler ve doğru metabolik durumu modeli doğru bir tasviri almak için birden çok çevre sıcaklık altında deney için açıklanan çevre değiştirmek gerekli olabilir. Teknik hatalar nedeniyle sorun giderme için doğrudan öğretim için üreticilerine başvurun gerekli olabilir. Vücut kompozisyonu analiz bu tip sorunlar varsa bu maliyet karşı 25 taramalar çalışır bir tekrar tarar testi gerçekleştirmek için tavsiye edilir. Şirket teşhis için bu bilgiye ihtiyaç duyar. Sorunlar ortaya çıkarsa, benzer şekilde metabolik hayvan izleme sistemi ile sistem iyi çalıştı son kez veri dosyaları ve dosyaların ne zaman konularda ortaya üzerinden böylece destek olası tanı toplamak.
Sınırlamaları
Vücut kompozisyonu analiz tüm vücut yağ birikimi üzerinde mükemmel veri sağlarken, bölgesel yağ depoları belirlenmesi için izin vermez. Bu obezite araştırma alanında tüm yağ yağ birikmiş konumu ile aynı olduğu ve özellikle önemli olan fonksiyonel özellikleri önemlidir. Nitekim, koruyucu etkileri subkutan yağ depoları (veya metabolik olarak sağlıklı yağ) açıklanan11olmuştur. Mikro bilgisayarlı tomografi (mikro-CT) subkutan ve viseral yağ12arasında manyetik rezonans görüntüleme (MRG) analiz13mümkün olduğunca ayırt edebilirsiniz. Bu tekniklerin kullanılması daha fazla yağ birikimi sitede bilgi sağlayabilir. İzleme sistemi aynı zamanda metabolik hayvan kendi sınırlamaları vardır. Toplam günlük enerji harcaması ölçülebilir iken, sistem enerji harcaması kadar farklı bileşenler arasında yüksek beklentileri karşılayan bir sey yapmaz. Bir daha fazla sistem obezite sistemleri, gıda/enerji alımı değişiklikler bağımsız olarak bile bu tür üzerinden tespit enerji harcaması ölçülebilir bir azalma olmadan geliştirebilirsiniz mümkün olduğunu kısıtlamasıdır. Çalışmalar önemli ağırlık neden için önemli olan enerji harcaması, küçük düşüşler uzun vadede kazanç, sağlam metabolik tür sistemlerde kısa vadeli14,15tespit edilemez göstermiştir, 16. Obezite olası katkıda bulunabileceğini enerji harcaması küçük farklılıkları algılamak için biz bu yöntemi bir örnek çalışma olarak göstermek için geçerli çalışma odasında bir n 6 grup başına kullanmış olmakla birlikte, pek çok daha fazla fare5gerektirir. Bu sistemler ve daha uzun bir süre boyunca bu tür çalışmalar gerçekleştirmesini algılama çözünürlüğü gelişmeler bu küçük ama önemli değişiklikleri algılamak için yetenek yardımcı olacak. Gıda alımı ölçümü açısından, biz genellikle gözlemledim 24 h gıda alımı metabolik hayvan izleme sistemi içinde yer alan farelerde eve kafes içinde gözlenen daha düşük, yukarıda açıklanan nedenlerden dolayı büyük olasılıkla. Bu nedenle, bu sistemde gıda alımı izleme özelliğine ek olarak, biz Ayrıca gıda alımı farelerin ev kafeslerde değerlendirmek. Bu sadece nerede fareler belirli deneysel gruplardan ayrı ayrı yer alan bir durumda yapılabilir iken, devamlı günlük değerlendirme izin avantajına sahiptir. Araştırmacı sadece gıda miktarı her zaman belgili tanımlık kafes dağınık yiyecek için muhasebe günün belirli bir zamanda hopper ağırlığında ve sonra bu miktarı fareler kafeste mevcut sayısı tarafından tüketilen gıda böler.
Gelecek uygulamaları
Bu inceleme içinde yüksek yağ ölçüm vücut kompozisyonu ve metabolik parametreleri yararlı, bu ekipmanların kullanımı uzak bu araştırma alanı sınırlı nerede bir hastalık durumu örneği olarak besleme yoluyla elde obezite kullanmış iken. Bu tekniklerin kullanılması aynı zamanda şeker hastalığı gibi hastalıkları, kardiyovasküler hastalık, Yaş ile ilgili mücadele, zaaf, kanser kaşeksi, kas dystrophies ve lipodistrofi okurken değerlidir. Satın alma sırasında ilk maliyetleri gibi altyapı hatırı sayılır, birden çok ekipman kullanma yeteneğini ve tıbbi araştırma çeşitli alanları bu ilk maliyet azaltıcı etkendir. Ayrıca, devam eden reaktif ve tüketim maliyeti bu makineler için en az vardır; Ancak, koruyucu bakım ve hizmet olarak kabul ve gerekir için bütçelenen.
Sadece yağsız kitle vücut kompozisyon analizi elde edilen izleme sistemi metabolik hayvandan elde edilen oksijen tüketimi için bir önemli normalleştirme faktörü gibi yağsız kitle belirlenmesi de uyuşturucu/test dozlarda normalleştirmek için kullanılabilir. Örneğin, metabolik çalışmalarda bir mayi veya oral glikoz tolerans testi (GTT) veya bir mayi insülin tolerans testi (ITT) gerçekleştirmek için sıradan olduğunu. Bu testleri bir glikoz yük elden veya insülin yanıt için bir fare yeteneği inceleyin. Kan şekeri yanıt olarak bu testler değişiklikler tüm vücut glukoz ve insülin hoşgörü modelindeki düzeyde bilgi sağlar. Geleneksel olarak, bu testler yönetilen glukoz ve insülin bolus fare vücut ağırlığı başına ilaç. Modelleri obezite yağ kitlesi yağsız kitle üzerinde biriktikçe daha fazla glikoz aldıkları gibi ancak, vücut ağırlığı dozaj ağır modeli doğru bir GTT glikoz intoleransı önyargı. Glikoz sonrası prandial devlet17, çoğunluğu atmayın karaciğer, kas iskelet ve beyin, organ yağsız kitle ölçüm ve nadiren bileşenleridir veya hafif çoğu modelleri değişiklik nedeniyle gerçeğini bu. Bunun tersi olarak, bir ITT içinde vücut ağırlığı için ilaç ne zaman daha fazla insülin alacak daha ağır bir modeli tamamen büyük bir miktar aldığı için insülin etkileri düşürücü glikoz daha duyarlı görünebilir. Bu nedenle, araştırmacı vücut kompozisyon veri erişimi varsa, yağsız kitle böyle dozaj hesaplamalar18için tüm vücut kitle karşı en uygun ölçü olabilir. Bu daha da alarak, yağsız kitle veri vücut kompozisyon analizinden elde Eğer hariç yağ kütlesinin yağsız kitle için hesabına ihtiyaç ortaya çıktığında deneysel ilaç doz için de kullanılabilir. Başka bir uygulama izleme sistemi metabolik hayvan bu değil tartışıldı veya bu el yazması gösterdi böylece metabolik parametreleri burada tartışılan kapalı Motorlu Koşu bandı sistemine de sırasında ölçülebilir ekleme egzersiz.
Bu derlemede açıklanan yordamları vücut kompozisyonu ve farelerde çeşitli metabolik parametreleri tanımlamak için kullanılabilir. Bu önlemlerin bir çeşitli için araştırma alanları tabidir ve bir fenotip karakterizasyonu için önemli bilgiler sağlar. Bu yöntemler alınan verileri de temel mekanizmaları belirli bir metabolik fenotip sürüş doğru kanıt sağlayabilir. Daha fazla geliştirme ve iyileştirme bu teknolojilerin araştırmacıların bulguları tedavi sonuçları doğru ilerlemeye olanak sağlar.

Metabolizma normal hücresel, organ ve tüm vücut Fizyoloji birçok açıdan destekler. Sonuç olarak, çeşitli patolojileri ortamda değişiklikler metabolizma doğrudan altta yatan durumuna katkıda bulunabilir veya bir yan etkisi patolojinin olumsuz etkilenebilir. Geleneksel olarak, metabolik araştırma ve çalışmalar içine enerji dengesi obezite ve insülin direnci, ön şeker hastalığı, gibi ilgili koşulları alanında glikoz intoleransı, kalp-damar hastalıkları ve Diyabet konsantre. Bu araştırma bu koşullar Dünya çapında ve bireysel, toplumsal, artan yaygınlığı verilen garanti ve ekonomik maliyeti bu koşullar indirebilmek. Bu nedenle, hedef obezite için yeni tedavi ve önleme stratejileri geliştirme dünya çapında araştırma laboratuarlarında devam eden bir hedeftir ve preklinik fare modelleri ağır bu çalışmalar için güvenerek.
Fareler ağırlığında ağırlık kazanç veya kayıp güvenilir bir değerlendirme sağlamasına karşın, tüm vücut kompozisyon (yağ kitlesi, yağsız kitle, ücretsiz su gibi kürk ve pençeleri gibi diğer bileşenleri) makyaj farklı bileşenleri bir dökümünü sağlamaz. Fare ölmüş olduğunu bir kez yağ yastıkları çalışmalar tamamlandığında, tartma farklı yağ depoları doğru bir ölçü sağlar ancak yalnızca veri için bir tek zaman noktası sağlayabilir. Sonuç olarak, obezite geliştirme süresi, önemli ölçüde artan hayvan sayıları, süresi ve maliyeti üzerinden araştırmak için birden çok tabur kayıt genellikle gereklidir. Dual enerji x-ışını Absorpsiyometri (DEXA) vücut yağ ve yağsız doku içeriği değerlendirmek için bir yaklaşım sağlar ve araştırmacı bir boyuna moda verileri elde etmek izin verir. Ancak, yordamı fareler imzalat1olmak ister ve anestezi tekrarlanan nöbetleri yağ dokusu birikimi etkisi veya metabolik regülasyon diğer yönleri etkisi. EchoMRI nükleer manyetik rezonans relaxometry yağ ve yağsız kütle, ücretsiz su ve toplam su içerik ölçmek için kullanır. Bu süre, genlik ve oluşturulan radyo frekans belirleme ve miktar her doku türünün sağlayan kayma dağıtım farklılıkları ile farklı doku bileşenleri arasındaki kontrast oluşturulması nedeniyle ulaşılabilir olduğunu. Bu teknik, non-invaziv, hızlı, basit, hiçbir anestezi veya radyasyon için ve önemlisi, olumlu kimyasal analiz2karşı doğrulandı olarak avantajlıdır.
Bir anahtar obezite ve ilgili araştırma enerji denge denklemi noktadır. Yağ birikimi tamamen (gıda alımı) enerji enerji (enerji harcaması) dışarı karşı daha karmaşık olmakla birlikte, onlar ölçmek için çok önemli faktörlerdir. Günlük enerji harcaması dört farklı bileşenleri toplamı olduğunu: (1) Bazal enerji harcaması (istirahat metabolizma hızı); (2 enerji harcaması gıda tüketim ısı termikli etkisi nedeniyle; (3) termoregülasyon için gerekli enerji; ve (4) enerji fiziksel faaliyete geçirdi. Enerji harcaması ısı üretir gibi ısı üretim (doğrudan Kalorimetre da bilinir) bir hayvan tarafından ölçme enerji harcaması değerlendirmek için kullanılabilir. Alternatif olarak, ölçüm esinlenerek ve O2 konsantrasyonları süresi ve CO2tüm vücut O2 tüketim ve CO2 üretim, belirlenmesi için sağlayan, dolaylı olarak (dolaylı ölçmek için bir yol olarak kullanılabilir Kalorimetre) üretim ısı ve sonuç olarak enerji harcaması hesaplamak. Gıda alımı artış veya azalma enerji harcaması fareler kilo alımı için yatkınlık ve bu parametreler değişiklikleri gözlemleri muhtemel mekanizmaları belirli modeller obezite eylem yararlı bilgiler sağlayabilir. Bir ilgili metabolik ilgi solunum değişim oranı (RER), substrat/metabolizma ve enerji üretmek için kullanılan geçiyor yakıt (Yani, karbonhidrat veya fat) oranı bir göstergesidir parametresidir. Sonuç olarak, fiziksel aktivite düzeyleri, O2 tüketimi, RER ve enerji harcaması ile birlikte gıda alımı (tüketilen enerji) ölçümü bir organizmanın metabolik profili geniş bir anlayış sağlar. Bu tür veri toplamak için bir yöntem izleme sistemi (istiridye), hangi enerji harcaması ölçmek için dolaylı Kalorimetre yöntemi dayanmaktadır ve fiziksel aktivite düzeyleri (ışın belirleme ek yeteneklere sahiptir kapsamlı laboratuvar hayvanı kullanmaktır sonları) ve gıda alımı ölçekleri ile ölçüm odanın içine dahil.
Bu protokol için fareler ve metabolizma yönlerini ölçmek için bir metabolik hayvan izleme sistemi vücut kompozisyonu değerlendirmek için bir vücut kompozisyon analiz kullanımı bir düz ileri tanımını girin. Konuları ve kısıtlamaları bu teknikler için analiz, yorum ve veri gösterimi önerilen yöntemlerin yanı sıra tartışılacaktır.

<table><tbody><tr><td>4 in 1 system</td><td>EchoMRI</td><td>4 in 1 system</td><td>Whole body composition analyser</td></tr><tr><td>Canola oil test sample (COSTS)</td><td>EchoMRI</td><td>Mouse-specific (contact company for cat number)</td><td></td></tr><tr><td>Animal specimen holder&amp;nbsp;</td><td>EchoMRI</td><td>103-E56100R</td><td></td></tr><tr><td>Delimiter&amp;nbsp;</td><td>EchoMRI</td><td>600-E56100D</td><td></td></tr><tr><td>12 chamber system</td><td>Columbus Instruments</td><td>Custom built</td><td>Metabolic Caging System; includes control program</td></tr><tr><td>Drierite</td><td>Fisher Scientific</td><td>238988</td><td>CLAMS consumable</td></tr><tr><td>Calibration gas tank</td><td>Air Liquide</td><td>Mixed to order</td><td>Gas calibration (0.5% CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;, 20.5% O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;, balance nitrogen).&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Normal chow diet</td><td>Specialty Feeds</td><td>Irradiated mouse and rat diet</td><td></td></tr><tr><td>High fat diet</td><td>Specialty Feeds</td><td>SF04-001</td><td></td></tr><tr><td>Balance</td><td>Mettler Toledo</td><td>PL202-S</td><td>Balance for weighing mice</td></tr><tr><td>TexQ Disinfectant spray</td><td>TexWipe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hydrogen Peroxide cleaning solution</td><td>TexWipe</td><td>TX684</td><td></td></tr></tbody></table>

body composition and metabolic caging analysis in high fat fed mice

Vücut kompozisyonu (yağlı veya yağsız kitle) değişiklik, tüm vücut oksijen tüketimi, enerji harcaması ve substrat kullanımı gibi metabolik parametreleri ve gıda alımı ve fiziksel aktivite gibi davranışlar-ebilmek sağlamak önemli bilgiler ile ilgili olarak hastalığın temel mekanizmaları. Vücut kompozisyonu ve metabolizma obezite ve onun sonraki sekel gelişimi için önemi göz önüne alındığında, bu parametreler doğru önlemler önceden klinik araştırma ayarında yapmak gereklidir. Son birkaç on yıl ele teknolojisindeki bu önlemlerin bir non-invaziv ve boyuna moda kemirgen modellerinde türetmek mümkün kılmıştır. Sonuç olarak, genetik manipülasyon (örneğin nakavt veya transgenik fareler, viral knock-down veya genlerin overexpression), deneysel ilaç/bileşik tarama ve diyet yanıtı değerlendirirken metabolizma gittiyseniz yararlı kanıtlamış, davranış ya da fiziksel aktivite müdahaleler. Burada, vücut kompozisyonu ve metabolik parametreleri izleme sistemi farelerde chow beslemeli ve yüksek yağlı diyet beslenen hayvan kullanarak ölçmek için kullanılan iletişim kurallarını açıklar.

Şekil 3 ' te görülen tipik bir değişiklik yüksek yağlı beslenme, üzerine vücut kompozisyonu parametrelerine EchoMRI yolu ile ölçülen gibi sonuçları görüntüleyin. Satır taban çizgisi herhangi bir parametre (Şekil 3A-F) ölçülen hiçbir fark vardı. Ancak, yüksek yağ besleme sadece 1 hafta sonra vücut ağırlığı, yağ kitlesi ve yağ kitle yüzdesi HFD grubunda (Şekil 3A,B,D) önemli bir artış oldu. Bu tedbirler için iki grup arasındaki farklar büyüklüğü 3 hafta diyet müdahale üzerinde artmaya devam etmiştir. Yağsız kitle, ücretsiz su ve toplam su içeriği (Şekil 3 c,E,F) herhangi bir zamanda noktada gruplar arasında farklı değil. Ayrıca yemek çalışma döneminde (Şekil 3A) kilo devam etti fareler beslenir ve bu yağsız kitle (Şekil 3 c) nedeniyle bir artış olduğunu yerine yağ kitlesi artırmak (3B rakam) görülebilir.
Şekil 4' te görüldüğü gibi yüksek yağlı beslenme üç hafta izleme sistemi metabolik hayvan tespit gibi değişiklikler bir dizi yol açtı. Vücut ağırlığı için ayarlandığında değil VO2 fareler (Şekil 4A) beslenen ağır yüksek yağ içinde önemli ölçüde daha yüksek. Özellikle, iki farklı sonuçlar normalleştirme VO2 iki farklı faktörler ile sonuçlandı. Normalleştirme standart chow arasında hiçbir fark VO2 yol açtı toplam vücut ağırlığı için beslenen ve normalleştirme yağsız kitle için önemli bir fark (Şekil 4B,C) üretilen yüksek yağ fareler beslenir. Bu sonuçlar kitle değişkenleri tarafından önemli ölçüde bölünerek VO2 veri normalleştirme sonuçları etkilenir ve bu şekilde ifade edilir zaman VO2 verileri yorumlarken dikkat edilmelidir gösterilmektedir. VO2 hızlı konusunda ayrıntılı bilgi için bkz: veri ve farklı parametreler için normalize etkileri mükemmel tartışma Tschop, vd. 5 fare enerji metabolizması analizinde, onların rehber içinde Tschop ve meslektaşları öner ortak varyans (ANCOVA) etkileri vücut ağırlığı veya enerji harcaması vücut kompozisyonu istatistiksel olarak sorgulamaya ve gıda alımı veri analizi kullanımı . Bu durumda, bir ANCOVA covariate, vücut ağırlığı kullanarak Şekil 4A, gösterilen veri performans istatistiksel olarak anlamlı bir fark var arasında normal chow ve böylece bir kez vücut ağırlığı için muhasebe, orada olduğunu belirten HFD, ortaya çıkarır oksijen tüketimi gruplar arasında fark yoktur. Bu sonuç kolayca Şekil 4 diçinde gösterildiği gibi bir scatterplot olarak VO2 vücut ağırlığı karşı komplo zaman görüntülenmeyecektir. VO2 vücut ağırlığı (Şekil 4 d) karşı komplo VO2 veri daha fazla oksijen tüketen daha ağır hayvanlarla yalan ile ilgili olarak vücut ağırlığı, ortak bir satırda gösterir. Not, VO2 yağsız kitle karşı komplo VO2 veri yağsız kitle (4E rakam) ile ilgili olarak iki ayrı satıra yalan gösterir.
RER fareler, beslenen yüksek yağ düşük yağ kullanımı ne zaman yüksek yağlı diyet (Şekil 5A) fed karbonhidrat kullanımı üzerinde gösteren. Enerji harcaması (ısı) normalleştirme olmadan ağır hayvanlarda, büyük olasılıkla bir kez vücut ağırlığı (Şekil 5C) normalleştirilmiş daha metabolik olarak aktif doku (Şekil 5B), kaybetmiş olmanın bu farkı ile sahip hayvanlar nedeniyle artış olmuştur. Ayrıca VO2, RER ve enerji harcama artışları ile karşılaştırıldığında fareler daha aktif olduğunda ışık-siklet karanlık döngüsünde unutmayın. Bu farklılıklar farelerde ortaya klasik günlük değişiklikler metabolizması temsil eder. Bu örnekte ise, biz 12 h bloklar halinde verileri ayrıldı, daha küçük zaman dönemini içine daha fazla veri bölümü da yararlı olabilir. Fiziksel aktivite düzeyleri de enerji harcaması için katkıda bir faktördür. Bunlar bir düşüş hareketi fareler (Şekil 5 d) beslenen yüksek yağ obez fenotip sürücü olmadığını düşündüren gruplar arasında da farklı değildin.
Enerji dengesi denklemin diğer tarafında tüketilen ve vücut girer enerji miktarıdır. Metabolizma bu yönü de bakmak için izleme sistemi ise metabolik hayvan fareler tüketilen gıda miktarı analiz ettik. Şekil 6Aiçinde gözlemlediği gibi fareler aynı miktarı ağırlıkça veya vücut ağırlığı (Şekil 6B) normalleştirilmiş ölçülen yemek yedi. (Yeniden ANCOVA vücut ağırlığı gıda alımı üzerinde etkisini değerlendirmek için kullanılabilir.) Gıda alımı vücut ağırlığı için normalleştirme enerji harcaması da ağırlık, böylece her iki tarafında enerji denklemi dengede tutmak için normalleştirilmiş Eğer düşünmeye önemli bir adım olabilir. Gıda aynı miktarı fareler yemek yerken hesabına enerji yoğunluğu her kullanılan diyetler için önemlidir. Zaman bu faktör dikkate alarak, fareler üzerinde daha fazla enerji (Şekil 6C) tüketen HFD gözlemlemek ve bu deneylerden bu obez fenotip sevk olasılığı yüksektir. Bu fareler daha fazla enerji, alıyor ama orantılı olarak daha fazla enerji sokmaksızın değil, onların obezite atfedilen bu yana enerji depolama birimine, .
İstatistik
Tüm verileri bu kağıt kadar ortalama ± standart hata ortalamaya (SEM) sunulmaktadır. İstatistiksel anlamlılık p kuruldu < 0,05. * p belirtir < 0,05, ** p gösterir < 0,01, *** p gösterir < 0,001 ve n = 6 grup başına belirtilmediği sürece. Müfettişler Diyet grubu müdahale diyetler renk farklılığı nedeniyle kör koyamadık. Fareler hangi diyet olarak onlar verildi rastgele seçilmiştir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57280/57280fig1.jpg"> Resim 1 : Fare maliyeti ve fareler vücut kompozisyon analiz içinde içeren küçük hayvan numune tutucu doğru yerleşimini. Kalibrasyon standart (maliyeti) kullanarak bir sistem testi gerçekleştirmek veya küçük hayvan numune tutucu içinde farelerin taramak için her gantry sistemi içinde yer için. Kırmızı oklar, hangi fareler makine gantry girerek bulunan olacak silindir gösterir.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57280/57280fig2.jpg"> Resim 2 : Bireysel odaları montajı. A) gıda hopper denge ortasına yerleştirin. B) platform her odası ve yer odasına hopper üzerinde yerleştirin. C) fareler odasında tek tek yerleştirin ve kapağı güvenli. D) su şişe yerleştirin ve sıkıştırın.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57280/57280fig3.jpg"> Şekil 3 : Kompozisyon analizi yüksek yağlı diyet 3 hafta boyunca vücut. A) vücut ağırlığı, B) Yağ kütlesi, C) Yalın kitle, D) yağ kitle yüzde, E) ücretsiz su içeriği, ve F) toplam su içeriği. Daireler normal yemek diyet temsil, kareler HFD temsil eder. <a href="/files/ftp_upload/57280/57280fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57280/57280fig4.jpg"> Şekil 4 : Metabolik parametreleri ilgili diyetler 3 hafta sonra metabolik hayvan izleme sistemi deneylerden elde edilen. Fareler salonları için 48 h, ilk 24 h alışma hareket ile yer. İkinci 24 h dan elde edilen veriler analiz ve bu rakamlar sundu. A) ham VO2 fiyatlar, B) VO2 vücut ağırlığı için normalleştirilmiş C) VO2 normalleştirilmiş yağsız kitle için D) scatterplot ayarsız VO2 (Toplam 24 saat dönemi) için vücut ağırlığı, t ve E) ayarsız VO2 yağsız kitle için. A-C Normal yemek diyet beyaz çubuklar gösterir, siyah çubuklar yüksek yağlı diyet gösterir. D-E Daireler normal yemek diyet temsil, kareler HFD temsil eder. <a href="/files/ftp_upload/57280/57280fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57280/57280fig5.jpg"> Şekil 5 : A) solunum değişim oranı (RER), B) ısı (enerji harcaması), ve C) ısı vücut ağırlığı için normalleştirilmiş. D) aktivite düzeyine X ve Y eni ve Z ışını sonları ayaktan toplamı olarak hesaplanır. Beyaz çubuklar normal yemek diyet gösterir; siyah çubuklar HFD gösterir.
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57280/57280fig6.jpg"> Şekil 6 : Gıda alımı veri elde sisteminde son 24 h için. A) gram, gıda alımı B) gıda alımı normalleştirilmiş için vücut ağırlığı ve C) hesaplanan enerji alımı. n = 4-5 (3 fareler hariç onların gıda ile büyük bir karışıklık yapmak nedeniyle). Beyaz çubuklar normal yemek diyet gösterir; siyah çubuklar HFD gösterir. <a href="/files/ftp_upload/57280/57280fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Body Composition and Metabolic Caging Analysis in High Fat Fed Mice at JoVE.com

Body Composition and Metabolic Caging Analysis in High Fat Fed Mice

Vücut kompozisyonu ve metabolik Caging Analizi yüksek yağ Fed farelerde

Bu iletişim kuralı bir vücut kompozisyon analiz ve metabolik hayvan izleme sistemi vücut kompozisyonu ve farelerde metabolik parametreleri tanımlamak için kullanımını açıklar. Yüksek yağlı beslenme tarafından indüklenen bir obezite modeli örnek olarak bu tekniklerin uygulanması için kullanılır.

Alterations to body composition (fat or lean mass), metabolic parameters such as whole-body oxygen consumption, energy expenditure, and substrate ...

body-composition-and-metabolic-caging-analysis-in-high-fat-fed-mice

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

15.4K Görüntüleme.  Baker Heart and Diabetes Institute. Bu iletişim kuralı bir vücut kompozisyon analiz ve metabolik hayvan izleme sistemi vücut kompozisyonu ve farelerde metabolik parametreleri tanımlamak için kullanımını açıklar. Yüksek yağlı beslenme tarafından indüklenen bir obezite modeli örnek olarak bu tekniklerin uygulanması için kullanılır.

Video: Body Composition and Metabolic Caging Analysis in High Fat Fed Mice

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent studies demonstrate that environmental enrichment decreases adiposity, increases energy expenditure, resists diet induced obesity, and causes cancer remission and inhibition in mice. EE typically consists of larger living space, a variety of &#8216;toys&#8217; to interact with, running wheels, and can include a number of other novel environmental changes. All of this fosters a more complex social engagement, cognitive and physical stimulations. Importantly, the toy location and type of toy is changed regularly, which encourages the mice to adapt to a frequently changing and novel environment. Many variables can be manipulated in EE to promote health effects in mice. Thus these approaches are difficult to control and must be properly managed to successfully replicate the associated phenotypes. Therefore, the goal of this video is to demonstrate how EE is properly set up and maintained to assure a complex, challenging, and controlled environment so that other researchers can easily reproduce the protective effects of EE against obesity and cancer.

Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

Bir Zenginleştirilmiş Ortamında Konut Fareler için Protokol

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

Davranış

Optimized Analysis of In Vivo and In Vitro Hepatic Steatosis

Establishing a system of procedures to qualitatively and quantitatively characterize in vivo and in vitro hepatic steatosis is important for metabolic study in the liver. Here, numerous assays are described to comprehensively measure the phenotype and parameters of hepatic steatosis in mouse and hepatocyte models. 
Combining the physiological, histological, and biochemical methods, this system can be used to assess the progress of hepatic steatosis. In vivo, the measurements of body weight and nuclear magnetic resonance (NMR) provide a general understanding of mice in a non-invasive manner. Hematoxylin and Eosin (H&amp;E) and Oil Red O staining determine the histological morphology and lipid deposition of liver tissue under nutrient overload conditions, such as high-fat diet feeding. Next, the total lipid contents are isolated by chloroform/methanol extraction, which are followed by a biochemical analysis for triglyceride and cholesterol. Moreover, mouse primary hepatocytes are treated with high glucose plus insulin to stimulate lipid accumulation, an efficient in vitro model to mimic diet-induced hyperglycemia and hyperinsulinemia in vivo. Then, the lipid deposition is measured by Oil Red O staining and chloroform/methanol extraction. Oil Red O staining determines intuitive hepatic steatotic phenotypes, while the lipid extraction analysis determines the parameters that can be analyzed statistically. The present protocols are of interest to scientists in the fields of fatty liver diseases, insulin resistance, and type 2 diabetes.

Optimized Analysis of In Vivo and In Vitro Hepatic Steatosis

Here, optimized methods to generate in vivo and in vitro models of hepatic steatosis and to analyze the steatotic phenotypes and related physiological parameters are described.

Optimize Analizi<em&gt; İn Vivo</em&gt; ve<em&gt; İn Vitro</em&gt; Karaciğer Steatoz

Establishing a system of procedures to qualitatively and quantitatively characterize in vivo and in vitro hepatic steatosis is important for metabolic ...

Tıp

Study of In Vivo Glucose Metabolism in High-fat Diet-fed Mice Using Oral Glucose Tolerance Test (OGTT) and Insulin Tolerance Test (ITT)

Obesity represents the most important single risk factor in the pathogenesis of type 2 diabetes, a disease which is characterized by a resistance to insulin-stimulated glucose uptake and a gross decompensation of systemic glucose metabolism. Despite considerable progress in the understanding of glucose metabolism, the molecular mechanisms of its regulation in health and disease remain under-investigated, while novel approaches to prevent and treat diabetes are urgently needed. Diet derived glucose stimulates the pancreatic secretion of insulin, which serves as the principal regulator of cellular anabolic processes during the fed-state and thus balances blood glucose levels to maintain systemic energy status. Chronic overfeeding triggers meta-inflammation, which leads to alterations in peripheral insulin receptor-associated signaling and thus reduces the sensitivity to insulin-mediated glucose disposal. These events ultimately result in elevated fasting glucose and insulin levels as well as a reduction in glucose tolerance, which in turn serve as important indicators of insulin resistance. Here, we present a protocol for the generation and metabolic characterization of high-fat diet (HFD)-fed mice as a frequently used model of diet-induced insulin resistance. We illustrate in detail the oral glucose tolerance test (OGTT), which monitors the peripheral disposal of an orally administered glucose load and insulin secretion over time. Additionally, we present a protocol for the insulin tolerance test (ITT) to monitor whole-body insulin action. Together, these methods and their downstream applications represent powerful tools to characterize the general metabolic phenotype of mice as well as to specifically assess alterations in glucose metabolism. They may be especially useful in the broad research field of insulin resistance, diabetes and obesity to provide a better understanding of pathogenesis as well as to test the effects of therapeutic interventions.

Study of In Vivo Glucose Metabolism in High-fat Diet-fed Mice Using Oral Glucose Tolerance Test OGTT and Insulin Tolerance Test ITT

The current article describes the generation and metabolic characterization of high-fat diet-fed mice as a model of diet-induced insulin resistance and obesity. It further features detailed protocols to perform the oral glucose tolerance test and the insulin tolerance test, monitoring whole-body alterations of glucose metabolism in vivo.

Vivo glikoz metabolizması farelerde Oral glukoz tolerans testi (OGTT) ve insülin tolerans testi (ITT) kullanarak yüksek yağlı diyet beslenen incelenmesi

Obesity represents the most important single risk factor in the pathogenesis of type 2 diabetes, a disease which is characterized by a resistance to ...

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

The nematode C. elegans has emerged as an important model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as it relates to human obesity and its associated pathologies. Several previous methodologies developed for the visualization of C. elegans triglyceride-rich fat stores have proven to be erroneous, highlighting cellular compartments other than lipid droplets. Other methods require specialized equipment, are time-consuming, or yield inconsistent results. We introduce a rapid, reproducible, fixative-based Nile red staining method for the accurate and rapid detection of neutral lipid droplets in C. elegans. A short fixation step in 40% isopropanol makes animals completely permeable to Nile red, which is then used to stain animals. Spectral properties of this lipophilic dye allow it to strongly and selectively fluoresce in the yellow-green spectrum only when in a lipid-rich environment, but not in more polar environments. Thus, lipid droplets can be visualized on a fluorescent microscope equipped with simple GFP imaging capability after only a brief Nile red staining step in isopropanol. The speed, affordability, and reproducibility of this protocol make it ideally suited for high throughput screens. We also demonstrate a paired method for the biochemical determination of triglycerides and phospholipids using gas chromatography mass-spectrometry. This more rigorous protocol should be used as confirmation of results obtained from the Nile red microscopic lipid determination. We anticipate that these techniques will become new standards in the field of C. elegans metabolic research.

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

We present robust biochemical and microscopic methods for studying Caenorhabditis elegans lipid stores. A rapid, simple, fixing-staining procedure for fluorescent lipid droplet imaging leverages the spectral properties of the lipophilic dye Nile red. We then present biochemical measurement of triglycerides and phospholipids using solid phase extraction and gas chromatography-mass spectrometry.

Fat Kütle Biyokimyasal ve Yüksek Verimli Mikroskobik Değerlendirme<em&gt; Caenorhabditis Elegans</em

The nematode C. elegans has emerged as an important  model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as  it relates to human ...

Biyoloji

Palatable Western-style Cafeteria Diet as a Reliable Method for Modeling Diet-induced Obesity in Rodents

Obesity is rapidly increasing in incidence in developed and developing countries and is known to induce or exacerbate many diseases.&#160;The health burden of obesity and its comorbid conditions highlight the need for better understanding of its pathogenesis, yet ethical constraints limit studies in humans. To this end externally valid models of obesity in laboratory animals are essential for the understanding of being overweight and obesity.&#160;While many species have been used to model the range of changes that accompany obesity in humans, rodents are most commonly used. Our laboratory has developed a western-style cafeteria diet that consistently leads to considerable weight gain and markers of metabolic disease in rodents. The diet exposes rodents to a variety of highly palatable foods to induce hyperphagia, modeling the modern western food environment. This diet rapidly induces weight gain and body fat accumulation in rats allowing for the study of effects of overeating and obesity. While the cafeteria diet may not provide the same control over macronutrient and micronutrient profile as purified high-fat or high-fat, high-sugar diets, the cafeteria diet typically induces a more severe metabolic phenotype than that observed with purified diets and is more in line with metabolic disturbances observed in the overweight and obese human population.

This protocol describes the use of a highly palatable, western-style cafeteria diet to model overeating and obesity in rodents. Here, we provide a detailed outline of food selection, preparation and measurement, and explain methodological factors that assist in generating a robust and reproducible phenotype.

Kemirgenlerde Diyetkaynaklı Obezitemodellemeiçin Güvenilir Bir Yöntem olarak Lezzetli Batı tarzı Kafeterya Diyet

Obesity is rapidly increasing in incidence in developed and developing countries and is known to induce or exacerbate many diseases.&#160;The health ...

Vinyl Chloride and High-Fat Diet as a Model of Environment and Obesity Interaction

Vinyl chloride (VC), an abundant environmental contaminant, causes steatohepatitis at high levels, but is considered safe at lower levels. Although several studies have investigated the role of VC as a direct hepatotoxicant, the concept that VC modifies sensitivity of the liver to other factors, such as nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) caused by high-fat diet (HFD) is novel. This protocol describes an exposure paradigm to evaluate the effects of chronic, low-level exposure to VC. Mice are acclimated to low-fat or high-fat diet one week prior to the beginning of the inhalation exposure and remain on these diets throughout the experiment. Mice are exposed to VC (sub-OSHA level: &#60;1 ppm) or room air in inhalation chambers for 6 hours/day, 5 days/week, for up to 12 weeks. Animals are monitored weekly for body weight gain and food consumption. This model of VC exposure causes no overt liver injury with VC inhalation alone. However, the combination of VC and HFD significantly enhances liver disease. A technical advantage of this co-exposure model is the whole-body exposure, without restraint. Moreover, the conditions more closely resemble a very common human situation of a combined exposure to VC with underlying nonalcoholic fatty liver disease and therefore support the novel hypothesis that VC is an environmental risk factor for the development of liver damage as a complication of obesity (i.e., NAFLD). This work challenges the paradigm that the current exposure limits of VC (occupational and environmental) are safe. The use of this model can shed new light and concern on the risks of VC exposure. This model of toxicant-induced liver injury can be used for other volatile organic compounds and to study other interactions that may impact the liver and other organ systems.

The goal of this protocol was to develop a murine model of low-level toxicant exposure that does not cause overt liver injury but rather exacerbates pre-existing liver damage. This paradigm better recapitulates human exposure and the subtle changes that occur upon exposure to toxicant concentrations that are considered safe.

Çevre ve Obezite Etkileşimi Modeli Olarak Vinil Klorür ve Yüksek Yağlı Diyet

Vinyl chloride (VC), an abundant environmental contaminant, causes steatohepatitis at high levels, but is considered safe at lower levels. Although ...

Assessing Whole-Body Lipid-Handling Capacity in Mice

Assessing lipid metabolism is a cornerstone of evaluating metabolic function, and it is considered essential for in vivo metabolism studies. Lipids are a class of many different molecules with many pathways involved in their synthesis and metabolism. A starting point for evaluating lipid hemostasis for nutrition and obesity research is needed. This paper describes three easy and accessible methods that require little expertise or practice to master, and that can be adapted by most labs to screen for lipid-metabolism abnormalities in mice. These methods are (1) measuring several fasting serum lipid molecules using commercial kits (2) assaying for dietary lipid-handling capability through an oral intralipid tolerance test, and (3) evaluating the response to a pharmaceutical compound, CL 316,243, in mice. Together, these methods will provide a high-level overview of lipid handling capability in mice.

This paper provides three easy and accessible assays for assessing lipid metabolism in mice.

Farelerde Tüm Vücut Lipid Taşıma Kapasitesinin Değerlendirilmesi

Assessing lipid metabolism is a cornerstone of evaluating metabolic function, and it is considered essential for in vivo metabolism studies. Lipids are a ...

Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, uncoupling of metabolism to generate heat, and secretion of adipokines to regulate whole-body homeostasis and immune responses. Emerging research is identifying important regional differences in the developmental, molecular, and functional profiles of adipocytes located in discrete depots throughout the body. Different properties of the depots are medically relevant since metabolic diseases often demonstrate depot-specific effects. This protocol will provide investigators with a detailed anatomic atlas and dissection guide for the reproducible and accurate identification and excision of diverse mouse adipose tissues. Standardized dissection of discrete adipose depots will allow detailed comparisons of their molecular and metabolic characteristics and contributions to local and systemic pathologic states under various nutritional and environmental conditions.

Adipocytes exist in discrete depots and have diverse roles within their unique microenvironments. As regional differences in adipocyte character and function are uncovered, standardized identification and isolation of depots is crucial for advancement of the field. Herein, we present a detailed protocol for the excision of various mouse adipose depots.

Çeşitli fare Adipose depoları tanımlama ve diseksiyon

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, ...

Assessment of the Metabolic Effects of Isocaloric 2:1 Intermittent Fasting in Mice

Intermittent fasting (IF), a dietary intervention involving periodic energy restriction, has been considered to provide numerous benefits and counteract metabolic abnormalities. So far, different types of IF models with varying durations of fasting and feeding periods have been documented. However, interpreting the outcomes is challenging, as many of these models involve multifactorial contributions from both time- and calorie-restriction strategies. For example, the alternate day fasting model, often used as a rodent IF regimen, can result in underfeeding, suggesting that health benefits from this intervention are likely mediated via both caloric restriction and fasting-refeeding cycles. Recently, it has been successfully demonstrated that 2:1 IF, comprising 1 day of fasting followed by 2 days of feeding, can provide protection against diet-induced obesity and metabolic improvements without a reduction in overall caloric intake. Presented here is a protocol of this isocaloric 2:1 IF intervention in mice. Also described is a pair-feeding (PF) protocol required to examine a mouse model with altered eating behaviors, such as hyperphagia. Using the 2:1 IF regimen, it is demonstrated that isocaloric IF leads to reduced body weight gain, improved glucose homeostasis, and elevated energy expenditure. Thus, this regimen may be useful to investigate the health impacts of IF on various disease conditions.

The current article describes a detailed protocol for isocaloric 2:1 intermittent fasting to protect and treat against obesity and impaired glucose metabolism in wild-type and ob/ob mice.

Farelerde Izokalorik 2:1 Aralıklı Orucun Metabolik Etkilerinin Değerlendirilmesi

Intermittent fasting (IF), a dietary intervention involving periodic energy restriction, has been considered to provide numerous benefits and counteract ...

Determining Basal Energy Expenditure and the Capacity of Thermogenic Adipocytes to Expend Energy in Obese Mice

Energy expenditure measurements are necessary to understand how changes in metabolism can lead to obesity. Basal energy expenditure can be determined in mice by measuring whole-body oxygen consumption, CO2 production, and physical activity using metabolic cages. Thermogenic brown/beige adipocytes (BA) contribute significantly to rodent energy expenditure, particularly at low ambient temperatures. Here, measurements of basal energy expenditure and total BA capacity to expend energy in obese mice are described in two detailed protocols: the first explaining how to set up the assay to measure basal energy expenditure using analysis of covariance (ANCOVA), a necessary analysis given that energy expenditure co-varies with body mass. The second protocol describes how to measure BA energy expenditure capacity in vivo in mice. This procedure involves anesthesia, needed to limit expenditure caused by physical activity, followed by the injection of beta3-adrenergic agonist, CL-316,243, which activates energy expenditure in BA. These two protocols and their limitations are described in sufficient detail to allow a successful first experiment.

This manuscript describes a protocol to measure the basal metabolic rate and the oxidative capacity of thermogenic adipocytes in obese mice.

Bazal Enerji Harcamasının Ve Termojenik Adipositlerin Obez Farelerde Enerji Harcama Kapasitesinin Belirlenmesi

Energy expenditure measurements are necessary to understand how changes in metabolism can lead to obesity. Basal energy expenditure can be determined in ...

Vücut kompozisyonu ve metabolik Caging Analizi yüksek yağ Fed farelerde

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler