The authors have no acknowledgements.

NOT: Tüm hayvan prosedürleri Cincinnati Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) ve (NIH Yayın No Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu uyarınca onayı ile yapıldı . 85-23) 1996 Revize. 1. Euthanize ve Fare sterilize <ol><li> Izofluran bir supratheraputic dozunu içeren bir açılır kutu içinde fare yerleştirin ve etkisi nefes sağlar. Fare ötenazi sonra, kutudan çıkarın. </li><li> Cervically ötenazi ikinci aracı olarak yerinden. </li><li> % 70 etanol ile hayvan temizleyerek fare dış yüzeyini sterilize edin. </li></ol> 2. Kimlik ve Üç Farklı Yağ Depoları izolasyonu <ol><li> Kahverengi Yağ Dokusu (BAT) İzolasyon: <ol><li> Emin kürk epidermal ve dermal laye ile kesme yardımcı olmak için alkol temizliği ıslak olduğundan emin olunrs. </li><li> Masanın karşı sırtını bir yatar pozisyonda fare yerleştirin. </li><li> Sadece forseps, asansör ile diyafram altında cilt tut ve makasla kesilirken. </li><li> Periton maruz fare çevresi enine kesin. </li><li> Farenin üst yarısını deglove ile kelebek şeklinde BAT deposu ortaya koymaktadır. Bir yandan alt uzantıları ve karın tutun ve baş yukarı doğru çekerek cildi. </li><li> Masaya eğilimli konumlandırılmış böylece fareyi yönlendirin. Saçlı maruz depo kontamine dikkatli olun. </li><li> Temiz cerrahi aletler ve eldiven taze çifti değişiklik. </li><li> Skapula ve ilgili depo bulun. Dikkatle kelebek üstünde herhangi bir yüzeysel beyaz adipoz kaldırmak ve daha sonra interskapular kahverengi yağ kelebek teşrih. Yakından kahverengi yağ ile ilişkili kas önlemek için dikkatli olun. NOT: Bir diseksiyon mikroskop kullanımı w kaldırılması için tavsiye edilirHite yağ, aynı zamanda, scapulalar kahverengi adipoz ayrılmasında. </li><li> Yağ depo çıkarın ve 2 ml&#39;lik bir mikrosantrifüj tüpüne aktarılır. </li><li> RNA ya da bir protein ekstrakte edilir edilecekse, -80 ° C&#39;de, sıvı azotun ve mağaza içine daldırma ile doku dondurma. Bozulmasını önlemek için bir kerede örnek dondurun. Kültürleme Eğer, DMEF-12 doku kapak ve tüm örnekler kültür (ek bilgi) için tahsil edilene kadar buz üzerinde ayarlayın. </li></ol></li><li> Subkutan Yağ Dokusu (SQ) izolasyonu, Beyaz Yağ Dokusu Depo (WAT): <ol><li> Yağ depoları arasında değil çapraz kontaminasyona olarak eldiven taze çifti koyun. </li><li> Inguinal, fare alt yarısını de-gloving&#39;i üçgen SQ depoları Reveal. Bir yandan üst uzantıları ve toraks tutun ve diğer elinizle ayak aşağı doğru çekerek cildi. </li><li> Saçlı maruz depo kontamine dikkatli olurken bir yatar pozisyonda fare yönlendirin. </li><li> Temiz Surgicaeldiven taze çifti l aletleri ve değişim. </li><li> Dikkatle SQ yağ üçgenleri incelemek. Yağ, meme bezleri komşu, kas ile örnek kontamine veya herhangi damarları keserek ve kanla kontamine örnek için dikkatli olun. NOT: Sınırlar açıkça tanımlanmış değilse, bir diseksiyon mikroskop kullanılması tavsiye edilir. </li><li> Yağ depoları çıkarın ve 2 ml mikrosantrifüj tüpler transfer. </li><li> RNA ya da bir protein ekstrakte edilir edilecekse, -80 ° C&#39;de, sıvı azotun ve mağaza içine daldırma ile doku dondurma. Bozulmasını önlemek için bir kerede örnek dondurun. </li><li> Boyama için, düzeltmek veya OCT embed. Kültürleme Eğer, DMEF-12 doku kapak ve tüm örnekler kültür (ek bilgi) için tahsil edilene kadar buz üzerinde ayarlayın. </li></ol></li><li> Gonadal Fat bir Visseral Yağ Dokusu (KDV) ve Beyaz Yağ Dokusu (WAT) Depo İzolasyonu: <ol><li> Yağ depoları arasında değil çapraz kontaminasyona olarak eldiven taze çifti koyun. </li><li> Sci ilessors doğrudan diyafram altında, enine periton kesti. Koronal karın organları açığa rektum ortasına kadar diyaframdan periton kesin. </li><li> Testisler veya yumurtalıkların bulun ve kadınlarda epididimal erkeklerde adipoz veya gonadal adipoz olarak bilinen ekli beyaz yağ dokusu, tespit. </li><li> Eldiven taze çifti Temiz cerrahi aletler ve değişim </li><li> Dikkatle testis, epididim ve vas deferensler epididimal yağ depolarını hem teşrih. Ya da kadın, eğer dikkatle yumurtalıkların hem gonadal yağ yastıkları incelemek. </li><li> Yağ depoları çıkarın ve 2 ml mikrosantrifüj tüpler aktarabilirsiniz. </li><li> RNA ya da bir protein ekstrakte edilir edilecekse, -80 ° C&#39;de, sıvı azotun ve mağaza içine daldırma ile doku dondurma. Bozulmasını önlemek için bir kerede örnek dondurun. </li><li> Boyama için, düzeltmek veya OCT embed. Kültürleme Eğer, DMEF-12 doku kapak ve tüm örnekler kültür (ek bilgi) için tahsil edilene kadar buz üzerinde ayarlayın. </li&gt; </ol></li></ol> Perivasküler Yağ Doku 3. izolasyonu (PVAT) <ol><li> Kalp İzolasyonu: <ol><li> Dışa genişletilmiş üst ve alt uzantıları ile bir yatar pozisyonda fare yatıyordu. </li><li> Cerrahi bant kullanarak Güvenli uzantıları. </li><li> Yukarıda listelenen fareyi yerleştirdikten sonra, forseps ile kılıç şeklinde süreci kaldırarak gerilim yaratmak. Göğüs boşluğunun alt kısmını açığa diyafram aracılığıyla yatay kesin. </li><li> Kılıç şeklinde süreci kaldırarak, gerginlik korurken, sadece sternum tarafına, kafasına doğru superiorda göğüs kafesi kesti. </li><li> Klavikula sadece alt göğüs kafesi Pick up ve her iki yönde aksillada doğru dışarı klavikula alt uzunluğu boyunca kesilmiş. göğüs boşluğu ve içeriği (kalp, akciğerler, vb) şimdi açıkça görülebilir olmalıdır. </li><li> Steril ga kullanarak gereksiz kan ve sıvı göğüs boşluğu temizleyinUZE sıvıyı emmek için. Toplama organları veya gemiler (ek bilgi) bol emin olunuz. </li><li> Alan sıvı temizlendikten sonra, kalbin daha iyi poz sağlayan, akciğerler kaldırmak için bronşlar ve takılarak gemilerin kesti. </li></ol></li><li> Yerelleştirme ve Eksizyon Aort ve Perivasküler Yağ Dokusu (PVAT): <ol><li> Karaciğer, mide, dalak, pankreas, bağırsak ve kolon: iyi aort alt bölümlerini tanımlamak için aşağıdaki organları çıkarın. </li><li> İlk mide ve yemek borusu belirlenmesi ile başlar. Vücuttan mideyi boşaltmak için gastro-özofageal kavşakta yemek borusu kesin. </li><li> Sonraki, bağırsakları ve çevredeki mezentere belirlemek. O aort böbrek kısmına çok yakından yatıyor ardından &quot;bağırsak çalıştırın.&quot;, Mezenterden ile yüzeysel Cut </li><li> Kolon mümkün olduğunca rektum kadar yakın özgür kesin. Böylece, fare mide, bağırsak ve kolon kurtararak. </li><li> Tekrartutturma mezenteri ve damarları aracılığıyla keserek mide, bağırsak, kolon, pankreas ve dalak hareket ettirin. pankreas ve dalak mide, bağırsak ve kolon ücretsiz gelmelidir. </li><li> Tüm lobları kaldırmak, mezentere hepatik venler ile kesme ve takarak karaciğer çıkarın. </li><li> Visseral tabaka kesip ve yağ böbrekleri çevreliyor. Aortun farklı kesimleri için coğrafi işaretler olarak hizmet etmek in vivo aorta bağlı böbrekleri bırakın. </li><li> Steril 1x PBS ile bölgeyi durulayın ve bir steril gazlı bez ile emilim bütün sıvıyı çıkarın. </li><li> Mikro-makas ve mikro-forseps kullanarak, omurga dorsal eki ve yemek borusu onun ventral eki aort ayırın. </li><li> Aşağıdaki ve iliak bölgede çatallanma kalbinde kökenli inen aorta aorta uzunluğunu ayırarak aort izole edin. </li><li> Belirlemek ve subklavian damarları izole. Bu gemiler yalıtmakAort kök boyundan daha iyi kalp aort kavşak ve kök maruz. </li><li> Sonra timus çıkarın kalbin hareketini sağlayan, brakiyosefalik arter, sol karotis arter ve sol subklavian arter kesti. </li><li> Bir diseksiyon mikroskobu yardımıyla, aort çevreleyen perivasküler adipoz dokusu (PVAT) katmanı görüntüleyin. </li><li> Sıkıştırmayın veya PVAT sıkmak, yavaşça mikro-forseps ile aortadan PVAT şekilde çekmeyin büyük özen. Yavaşça diyafram nerede sadece üstün torakal bölgede başlayan mikro-makas ile aorta PVAT eki kesti. NOT: A diseksiyon mikroskop tavsiye edilir. </li><li> Aort geminin iliak çatallanma sadece üstün bulunan İnfrarenal aort bölgesinde, terbiye, bu sürecini aortun tüm uzunluğu tekrarlayın. </li><li> Aortik ark PVAT isteniyorsa, daha az c PVAT kaldırmak için aynı yöntem kullanılırkemer urvature. </li><li> 2 ml mikrosantrifüj tüpü (lar) içine PVAT numuneler. </li><li> RNA ya da bir protein ekstrakte edilir edilecekse, -80 ° C&#39;de, sıvı azotun ve mağaza içine daldırma ile doku dondurma. Bozulmasını önlemek için bir kerede örnek dondurun. Kültürleme Eğer, DMEF-12 doku kapak ve tüm örnekler kültür (ek bilgi) için tahsil edilene kadar buz üzerinde ayarlayın. NOT: Kapsamlı bir yağ depo analizi ilgilenen varsa ek yağ depoları dikkate şunlardır: retroperitoneal, mezenterik, omentum, perikard ve popliteal. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+in+the+United+States,+2009-2010.">Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010.</a> NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).</li><li>Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+and+trends+in+the+distribution+of+body+mass+index+among+US+adults,+1999-2010.">Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index among US adults, 1999-2010.</a> 307 (5), 491-497 (2012).</li><li>Cawley, J., Meyerhoefer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+medical+care+costs+of+obesity:+an+instrumental+variables+approach.">The medical care costs of obesity: an instrumental variables approach.</a> Journal of Health Economics. 31 (1), 219-230 (2012).</li><li>Marder, W., Chang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Childhood+Obesity:+Costs,+Treatment+Patterns,+Disparities+in+Care,+and+Prevalent+Medical+Conditions.">Childhood Obesity: Costs, Treatment Patterns, Disparities in Care, and Prevalent Medical Conditions.</a> Thomson Medstat Research Brief. , (2006).</li><li>Cortez, M., Carmo, L. S., Rogero, M. M., Borelli, P., Fock, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-fat+diet+increases+IL-1,+IL-6,+and+TNF-&#945;+production+by+increasing+NF-&#954;B+and+attenuating+PPAR-&#947;+expression+in+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells.">A high-fat diet increases IL-1, IL-6, and TNF-&#945; production by increasing NF-&#954;B and attenuating PPAR-&#947; expression in bone marrow mesenchymal stem cells.</a> Inflammation. 36 (2), 379-386 (2013).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Hung, C. M., Sparks, C. A., Tang, Y., Li, H., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTEN+loss+in+the+Myf5+lineage+redistributes+body+fat+and+reveals+subsets+of+white+adipocytes+that+arise+from+Myf5+precursors.">PTEN loss in the Myf5 lineage redistributes body fat and reveals subsets of white adipocytes that arise from Myf5 precursors.</a> Cell Metab. 16 (3), 348-362 (2012).</li><li>Sethi, J. K., Vidal-Puig, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thematic+review+series:+adipocyte+biology.+Adipose+tissue+function+and+plasticity+orchestrate+nutritional+adaptation.">Thematic review series: adipocyte biology. Adipose tissue function and plasticity orchestrate nutritional adaptation.</a> J Lipid Res. 48 (6), 1253-1262 (2007).</li><li>Aarsland, A., Chinkes, D., Wolfe, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+and+whole-body+fat+synthesis+in+humans+during+carbohydrate+overfeeding.">Hepatic and whole-body fat synthesis in humans during carbohydrate overfeeding.</a> Am J Clin Nutr. 65 (6), 1774-1782 (1997).</li><li>Park, A., Kim, W. K., Bae, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinction+of+white,+beige+and+brown+adipocytes+derived+from+mesenchymal+stem+cells.">Distinction of white, beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells.</a> World J. Stem Cells. 6 (1), 33-42 (2014).</li><li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beige+adipocytes+are+a+distinct+type+of+thermogenic+fat+cell+in+mouse+and.">Beige adipocytes are a distinct type of thermogenic fat cell in mouse and.</a> 150 (2), 366-376 (2012).</li><li>Giralt, M., Villarroya, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White,+brown,+beige/brite:+different+adipose+cells+for+different+functions.">White, brown, beige/brite: different adipose cells for different functions.</a> Endocrinology. 154 (9), 2992-3000 (2013).</li><li>Casteilla, L., P&#233;nicaud, L., Cousin, B., Calise, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+an+adipose+tissue+depot+for+sampling:+factors+in+selection+and+depot+specificity.">Choosing an adipose tissue depot for sampling: factors in selection and depot specificity.</a> Methods Mol. Biol. 456, 23-38 (2008).</li><li>Grant, R., Youm, Y. H., Ravussin, A., Dixit, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+adipose+tissue+leukocytosis+in+obesity.">Quantification of adipose tissue leukocytosis in obesity.</a> Methods Mol. Biol. 1040, 195-209 (2013).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests or other conflicts of interest.

Obezite morbidite büyük bir ev sahibi ve adipoz tam olarak anlaşılmış değildir oynadığı rolün tam bir anlayış yol açabilir; adipoz alanında nedenle devam araştırma gereklidir. Hayvan modelleri, özellikle fare modelleri hastalıklar ve potansiyel ilaç tedavilerinin test ilerlemesinde ilk araştırma için idealdir. Bu modelleri kullanarak, kesin izolasyon ve yağ depolarında eksizyonu yağ etkilenen hastalıkların patolojisi çalışmada son derece önemli ve gerekli bir araçtır. Adipoz depolarına ilişkin literatürde, metabolik davranış ve yağ depolarında arasındaki varyasyon, yanı sıra anatomik yerleri ile ilgili literatürün önemli bir miktar var. Ancak, özellikle, lokalize belirlemek ve bu depoları izole etmek için nasıl bir derinlemesine bir yöntem sağlamak azdır. Adipoz mevcut izolasyon yöntemleri gözden dayanarak, protokoller t küçük bir alt kümesi olduğunuşapka, bir defada bir veya iki depoları izole nasıl metodoloji sağlamak. Bununla birlikte, diseksiyon ve kontaminasyon en az bir miktarı ile çok sayıda depo yanı sıra adresleri toplanmış örneklerin incelenmesi çeşitli yöntemler izolasyonu sağlayan bir hızlı bir teknik bu protokol 13-14 için ayırt edicidir. Bu metodoloji kapsamında, hayati numune izolasyonu ve saflık için önemli olan birkaç adım vardır. Saç ve kirleri çıkarmak için sık sık araçları, eldiven ve yüzeyleri temizleme depo bulaşmasını önlemek için bir zorunluluk adımdır. Deglove için periton maruz fare çevresi enine cilt keserken, çok derinden kesme önlemek için hayati önem taşımaktadır. Periton Kesme çok zor deglove yapacak ve örnek kontaminasyon potansiyelini artıracaktır. SQ yağ depolarını eksize zaman reklamın herhangi eksize önce depo üçgen sınırlarını belirlemek için hayati önem taşımaktadıripose. Ayrıca, dikkatli keser kas önlemek için yapılan ve damarlar, bezleri ve yağ bitişik olmalıdır. Bu alternatif yağ, glandüler dokusu, kas veya kandan numune kirlenmesini önleyecektir. izolasyon ve bu yöntem ve diğer benzer yöntemlerle yağ depoları, eksizyonu başlıca sınırlama bazı depoların sınırlarının belirlenmesiyle bulunabilir. Nedeniyle subkutan depoları gibi depolarında kötü tanımlanmış sınırlar için, komşu adipoz gelen kirlenme küçük bir miktar eksik izolasyon zor olabilir. Başka bir sınırlama vasküler ilişkili depolarında ek deneyler için toplanan yeterli doku sağlanması bulunabilir. Bu ayırma işlemi bölgesi ve hayvan ile ilişkili diyet bağlı olsa da, bu sınırlama, bazen, örneğin bir araya gerektirir. Yağ deposu yalıtılmıştır sonra, bir dizi analiz için de kullanılabilir. adipoz kullanmak olabilirBöyle bir protein ekspresyonu, enzim etkinliği ve gen ekspresyon analizi gibi moleküler genetik araştırmaları d. Ayrıca, bir in vitro çalışmalar birincil hücre hattı için adipositleri ayırabilirsiniz. Ölümsüzleştirilmiş hücre çizgileri aynı zamanda, ancak ölümsüz hücrelerin, birincil izole edilmiş hücre hatları olarak güvenilir değildir, in vitro çalışmalar için de kullanılabilir. Son olarak, yağ, sabit veya lökosit filtrelemesine protein lokalizasyonu gibi adiposit morfolojisinin karakterizasyonu tespit etmek histolojik inceleme için OCT dondurulabilir.

Yağ nedeniyle 20. yüzyılın son birkaç on yıl içinde obezite en dramatik artış, medya spot kayda değer bir görünüm getirmişti. Obezite anda yetişkinlerin üçte biri ve Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde (ABD) 1 çocuk ve ergenlerin% 17 daha fazla etkiler. Tüm etnik grupları Kapsayan, obezite salgını çevreleyen istatistiksel araştırma Meksikalı Amerikalılar (% 40.4), tüm İspanyollar (% 39.1), ve olmayan kıyasla İspanyol olmayan siyahlar obezite (% 49.5) en yüksek yaşa göre düzeltilmiş oranına sahip olduğunu göstermiştir Hispanik beyazlar (% 34.3) 2. Obezitenin ekonomik etkisi de sağlık sistemi için büyüyen bir husustur. 2012 yılında, 2005 yılında ABD&#39;de obezite için bakım yıllık tıbbi maliyeti 190.200.000.000 $, genel tıbbi harcama bütçesinin yaklaşık% 21 olduğu tahmin edilmiştir. Ne yazık ki, çocukluk çağı obezitesi tek başına doğrudan tıbbi maliyetler 14 milyar dolar sorumlu olduğu tahmin edilmiştir. İstatistiksel olarak, bu ortalama tıbbi maliyeti olduğu tespit edildiobezite ile bireylerin bu morbidite 3-5 olmayanlara göre daha yüksek 2741 $ bir yıl oldu. Tip 2 diyabet, dislipidemi, kardiyovasküler hastalıklar, kanser, kas iskelet bozuklukları ve kronik inflamasyon: Obezite gibi durumların çeşitli için önemli bir risk faktörüdür. Obezite derinden metabolik sendrom ve diğer kronik hastalıkların 6-8 patogenezi bağlıdır. Obezite ve diğer yandaş arasında böyle sert ve olumsuz bağlantıları ile, bilimsel araştırma daha güncel salgın ve adipoz oynadığı çeşitli ve önemli rolleri anlamak için dikkat odaklanmıştır. Tarihsel, yağ dokusu önemsiz kabul edildi ve basit bir dolgu dokusu gibi sadece görülüyordu. Metabolizma, hormon regülasyonu, inflamasyon, koruma ve izolasyon 9: Şu anda, yağ vücudun işlevi birçok temel rol oynamaya gösterilmiştir. Yağ dokusu öncelikle oluşuradipositler de perisitler, endotel hücreleri, monositler, makrofajlar ve pluripotent kök hücrelerin 8 içerir. Yağ dokusu farklı depolarda vücuda dağılır. ana depolar deri altından, kas içinden, deri altından bulunan ve içgüdüsel 10 edilebilir. Yağ depolar bozuklukları 8 obeziteye bir depo belirli duyarlılık göstermiştir ve ilgili olan depo belirli metabolik profillerin sahip olduğu gösterilmiştir. Geleneksel, adipoz doku iki ana gruba sınıflandırılmıştır: beyaz yağ dokusu (WAT) ve kahverengi adipoz doku (BAT); Son literatür gösterir, ancak üçüncü bir grup varlıkları brite veya bej adipoz 11 vaftiz. Adipoz doku farklı renkler, morfolojileri, metabolik fonksiyonları, biyokimyasal özellikleri ve ifade 10 genetik modellerine sahip olduğu gösterilmiştir. WAT içinde Adipositler tek, büyük lipit damlacık ve mitokondri değişken miktarlarda bulunmaktadır. WATbaskın olarak vücudun deri altına ve visseral yerlerde bulunur. Birincil enerji depolama ve organ koruma alanı olarak WAT çalışır. BAT Adipositler bir multiloküler morfoloji ve bol mitokondri var. BAT öncelikle boyun ve göğüs büyük kan damarlarının yanı sıra, skapula 12 yer almaktadır. Thermogenesis 7 düzenleyen enerji sokmaksızın davranışları BAT öncelikle çalışır. Brite veya bej yağ BAT benzer bir morfoloji ve ifade paylaşmaya gösterilmiştir fakat beyaz adipositlerden 11 kaynaklandığı tespit edilmiştir. Bu yazıda anlatılan cerrahi yöntem gibi faktörler farklı etkilerini analiz etmek kapasitesine sahip araştırmacılar sunar: çevre, ilaç ve genetik, adipoz var; de yararlı veya zararlı rol adipoz hastalığı ve genel sağlık oynar gibi. Aynı zamanda, bir yol sağlayarak tespit ve adipoz dokuda farklı izole etmek içindaha izin depoları arasındaki biyokimyasal ilişkiler ve farklılıklar anlamak. Bu vücut içindeki konumu, işlev ve yağ arasındaki ilişkinin belirlenmesinde yardımcı olabilir. Bu tarif edilen yöntem, in vitro çalışmalar için brüt görselleştirme, gen ekspresyon analizi, protein ifadesi analizi, histolojik ve birincil hücre hatlarının izolasyonu için araçlar sağlayarak gerçekleştirir. Şu anda farklı yağ depoları, yanı sıra anatomik yerlerde metabolik davranışı içgörü sağlayan birçok makaleleri vardır; ama özellikle, lokalize belirlemek ve bu depoları izole etmek için nasıl bir derinlemesine bir yöntem vermeyin. Bu durum bunların cerrahi, bir veya iki depo 13-14 bir izolat için tasarlanan diğerleri yöntemlerine göre diseksiyon ve kontaminasyon en az bir miktar ile birden fazla depo izolasyonu sağlayan bir hassas bir teknik sağlamaktadır. Bu protokolün amacı sağlamaktırBirden fazla anatomik bölgelerden yağ depoları farklı tiplerinin belirlenmesi ve izolasyonu için kesin bir metot.

<table><tbody><tr><td>Isoflurane</td><td>Med-Vet International</td><td>#RXISO-250</td><td></td></tr><tr><td>70% Ethanol</td><td>Fisher</td><td>07-678-001</td><td></td></tr><tr><td>DMEF-12</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D-6421</td><td>Warm in waterbath before putting on tissue.</td></tr><tr><td>2 ml Microcentrifuge tubes</td><td>Midsci</td><td>MCT-200-C-S</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate buffered saline</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td></td></tr></tbody></table>

localization, identification, and excision of murine adipose depots

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 reached a staggering sum of $190.2 billion in direct medical costs alone. Obesity is a major risk factor for a wide host of diseases. Historically, little was known regarding adipose and its major and essential functions in the body. Brown and white adipose are the two main types of adipose but current literature has identified a new type of fat called brite or beige adipose. Research has shown that adipose depots have specific metabolic profiles and certain depots allow for a propensity for obesity and other related disorders. The goal of this protocol is to provide researchers the capacity to identify and excise adipose depots that will allow for the analysis of different factorial effects on adipose; as well as the beneficial or detrimental role adipose plays in disease and overall health. Isolation and excision of adipose depots allows investigators to look at gross morphological changes as well as histological changes. The adipose isolated can also be used for molecular studies to evaluate transcriptional and translational change or for in vitro experimentation to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to other published techniques due to the design allowing for isolation of multiple depots with simplicity and minimal contamination.

Kimlik ve kasık deri altı yağ, interskapular kahverengi adipoz, viseral adipoz epididim (Şekil 1), yanı sıra aort arkı perivasküler adipoz, torakal aort adipoz, böbreküstü aort adipoz ve infrarenal aort adipoz lokalizasyonu (Şekil 2) kullanılarak başarıyla gerçekleştirilmiştir açıklanan cerrahi yöntem. BAT ve WAT örnekler arasında histolojik muayene ve farklılaşma pozitif boyanan (Şekil 3) hematoksilen ve eozin (H &amp; E) ile değerlendirildi. Hücre ölümü meydana getiren DFFA gibi efektör bir (CIDEA) ve diğer yağ özel markörler her şeyden önce izole edilir ve kesilmiş depolar için ölçüldü adiponektin (AdipoQ), peroksisom proliferatörü ile aktive edilen reseptör gama (PPAR-γ), RNA seviyelerinin analizi (veriler gösterilmemiştir). Derialtı adipositlerinde ve perivasküler adipositlere İlköğretim hücre hatları kültür ve preadiposit gelen farklı idi<html> başarılı bir şekilde mikro-dizi analizi için kullanılan adipositler s. adipositlerin dönüştürülür kültürlenmiş Preadipositler Yağ Kırmızı O boyamasıyla (Şekil 4) ile teyit edilmiştir. Başarılı izolasyon, kültür ve adipositlerin farklılaşmasının in vitro çalışmalarda kullanım için elde edilmiş ve protein aktivitesi, başarılı bir şekilde ölçülmüştür. Matris metaloprotease-2 (MMP2) enzimatik aktivitesi kontrole kıyasla tedavi grubundaki ölçülmüştür. MMP2 aktivitesi zimografi (Şekil 5) ile bir primer perivasküler adiposit doğrultusunda in situ ölçülmüştür. <img alt="Şekil 1," src="/files/ftp_upload/52174/52174fig1display.jpg" /> Şekil C57BL / 6 erkek fare yağ depoları 1. Anatomik yerleri. (A) interskapular kahverengi adipoz yağ depo. (B) Kasık deri altı yağ yağ depo. (C) viseral yağ epididim yağ deposu.w.jove.com/files/ftp_upload/52174/52174fig1highres.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52174/52174fig2display.jpg" /> Şekil bir C57BL / 6 erkek fare PVAT depoları 2. Anatomik yerleri. (A) Aort ark perivasküler yağ depo. (B) Torasik aort perivasküler yağ depo. (C) Böbreküstü aort perivasküler yağ depo. (D) Infrarenal aort perivasküler yağ depo. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/52174/52174fig2highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52174/52174fig3display.jpg" width="700" /> BAT ve WAT adipoz Şekil 3. H &amp; E boyama. (A) &#39;H<html> 8; 40X büyütmede WAT adipoz olan, parafin C57BL / 6 erkek fare örneği sabit paraformaldehite E boyama sabit paraformaldehid (B) H &amp; E boyama, 40X büyütmede BAT parafin C57BL / 6 erkek fare örneği.. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/52174/52174fig3highres.jpg" target="_blank">tıklayınız Burada bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için.</a> <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52174/52174fig4display.jpg" width="700" /> Kültürlü PVAT preadipositlerin ve adipositlerin 4. Yağ Kırmızı O boyama Şekil. Faz kontrast ile 20X büyütmede farklılaşma başlangıçta kültüre aort perivasküler preadipositlerin (A) Petrol Kırmızı O boyama. (B) faz kontrast ile 20X büyütmede farklılaşma 5 gün sonra kültür aort perivasküler adipositlere Yağ Kırmızı O boyama.es / ftp_upload / 52.174 / 52174fig3highres.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52174/52174fig5display.jpg" /> Perivasküler yağ dokusundan izole edilmiş farklı adipositler, Şekil 5. Zymography, * p &lt;0.01 kontrol ile karşılaştırıldığında, muamele edilmemiş (kontrol) hücreleri ile karşılaştırıldığında tedavi sonrası serbest MMP2 bir azalmış aktivite gösterdi.

Watch this Scientific Journal Video about Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots at JoVE.com

Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

Nedeniyle obezite ve diğer yandaş arasındaki şiddetli ve negatif bağlantı, rol adipoz araştırma hastalığında oynadığı ve genel sağlık garantilidir. Biz izolasyon ve yerinde kullanarak adipoz çalışması için izin yağ depolarında eksizyonu ve in vitro yöntemler bir protokol mevcut.

Yerelleştirme, Kimlik ve Eksizyon Kemirgen Yağ depolarının

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 ...

localization-identification-and-excision-of-murine-adipose-depots

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

40.9K Görüntüleme.  University of Cincinnati College of Medicine.  Nedeniyle obezite ve diğer yandaş arasındaki şiddetli ve negatif bağlantı, rol adipoz araştırma hastalığında oynadığı ve genel sağlık garantilidir. Biz izolasyon ve yerinde kullanarak adipoz çalışması için izin yağ depolarında eksizyonu ve in vitro yöntemler bir protokol mevcut. 

Video: Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix (ECM) remodeling. In vivo, ECM-rich environment consisting of fibrillar collagens provides a structural support to adipose tissues during the progression and regression of obesity. Physiological ECM remodeling mediated by matrix metalloproteinases (MMPs) plays a major role in regulating adipose tissue size and function1,2. The loss of physiological collagenolytic ECM remodeling may lead to excessive collagen accumulation (tissue fibrosis), macrophage infiltration, and ultimately, a loss of metabolic homeostasis including insulin resistance3,4. When a phenotypic change of the adipose tissue is observed in gene-targeted mouse models, isolating primary ASCs from fat depots for in vitro studies is an effective approach to define the role of the specific gene in regulating the function of ASCs. In the following, we define an immunomagnetic separation of Sca1high ASCs.

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells ASCs

We present the techniques required to isolate the stromal vascular fraction (SVF) from mouse inguinal (subcutaneous) and perigonadal (visceral) adipose tissue depots to assess their gene expression and collagenolytic activity. This method includes the enrichment of Sca1high adipose-derived stem cells (ASCs) using immunomagnetic cell separation.

Yağ Deposu özgü SCA1 ve İmmunomanyetik Ayırma<sup&gt; yüksek</sup&gt; Yağ türetilmiş Kök Hücreler (TSK)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Gelişim Biyolojisi

Preparation, Administration, and Assessment of In Vivo Tissue-Specific Cellular Uptake of Fluorescent Dye-Labeled Liposomes

There is a growing interest in using liposomes to deliver compounds in vivo particularly for targeted treatment approaches. Depending on the liposome formulation, liposomes may be preferentially taken up by different cell types in the body. This may influence the efficacy of the therapeutic particle as progression of different diseases is tissue- and cell-type-specific. In this protocol, we present one method for synthesizing and fluorescently labeling liposomes using DSPC, cholesterol, and PEG-2000 DSPE and the lipid dye DiD as a fluorescent label. This protocol also presents an approach for delivering liposomes in vivo and assessing cell-specific uptake of liposomes using flow cytometry. This approach can be used to determine the types of cells that take up liposomes and quantify the distribution and proportion of liposome-uptake across cell types and tissues. While not mentioned in this protocol, additional assays such as immunofluorescence and single-cell fluorescence imaging on a cytometer will strengthen any findings or conclusions made as they permit assessment of intracellular staining. Protocols may also need to be adapted depending on the tissue(s) of interest.

The goal of this protocol is to synthesize fluorescently-labeled liposomes and use flow cytometry to identify in vivo localization of liposomes at a cellular level.

Floresan Boya Etiketli Lipozomların İn Vivo Dokuya Özgü Hücresel Alımının Hazırlanması, Uygulanması ve Değerlendirilmesi

There is a growing interest in using liposomes to deliver compounds in vivo particularly for targeted treatment approaches. Depending on the liposome ...

Biyomühendislik

Isolation of Adipogenic and Fibro-Inflammatory Stromal Cell Subpopulations from Murine Intra-Abdominal Adipose Depots

The stromal-vascular fraction (SVF) of white adipose tissue (WAT) is remarkably heterogeneous and consists of numerous cell types that contribute functionally to the expansion and remodeling of WAT in adulthood. A tremendous barrier to studying the implications of this cellular heterogeneity is the inability to readily isolate functionally distinct cell subpopulations from WAT SVF for in vitro and in vivo analyses. Single-cell sequencing technology has recently identified functionally distinct fibro-inflammatory and adipogenic PDGFR&#946;+ perivascular cell subpopulations in intra-abdominal WAT depots of adult mice. Fibro-inflammatory progenitors (termed, &#8220;FIPs&#8221;) are non-adipogenic collagen producing cells that can exert a pro-inflammatory phenotype. PDGFR&#946;+ adipocyte precursor cells (APCs) are highly adipogenic both in vitro and in vivo upon cell transplantation. Here, we describe multiple methods for the isolation of these stromal cell subpopulations from murine intra-abdominal WAT depots. FIPs and APCs can be isolated by fluorescence-activated cell sorting (FACS) or by taking advantage of biotinylated antibody-based immunomagnetic bead technology. Isolated cells can be used for molecular and functional analysis. Studying the functional properties of stromal cell subpopulation in isolation will expand our current knowledge of adipose tissue remodeling under physiological or pathological conditions on the cellular level.

This protocol describes the technical approach to isolate adipogenic and fibro-inflammatory stromal cell subpopulations from murine intra-abdominal white adipose tissue (WAT) depots by fluorescence-activated cell sorting or immunomagnetic bead separation.

Murin İntraabdominal Yağ Depolarından Adipojenik ve Fibroinflamatuar Stromal Hücre Alt Popülasyonlarının İzolasyonu

The stromal-vascular fraction (SVF) of white adipose tissue (WAT) is remarkably heterogeneous and consists of numerous cell types that contribute ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Lymphatic and Blood Network Analysis During Obesity

Lymphatic collecting vessels and lymph nodes are inevitably embedded in adipose tissue. The physiological significance of this observation remains still not elucidated. However, obesity is characterized by impaired lymphatic function and increased vessel permeability. Inversely, lymphatic dysfunction induces obesity in mice, suggesting a significant interplay between lymphatic vessels and the adipose tissue. Therefore, understanding factors leading to lymphatic dysfunction might open new therapeutic windows to prevent obesity and associated comorbidities. The first step in this process requires a precise and detailed visualization of the lymphatic network in healthy and inflamed adipose tissue. Here, we describe a rapid, inexpensive, and efficient method that allows to label and analyze lymphatic and blood vessels. This approach takes advantage of the skin-draining brachial lymph node localization within the subcutaneous adipose tissue. The lymphatic arborization of this tissue can be revealed by injecting fluorochrome-conjugated lectins subcutaneously. Moreover, the in vivo labeling approach provides a way to evaluate lymphatic vessel density and functions. Coupled to blood vessel, adipocyte and immune cell staining, the protocol allows for high-resolution mapping of the subcutaneous adipose tissue by 3D imaging.

Obesity is a growing global public health issue. It has been previously associated with lymphatic dysfunction, suggesting a vital crosstalk between the adipose tissue and the lymphatic system. Here, we propose an accessible methodology allowing the distinct labeling of blood and lymphatic vasculatures within the subcutaneous adipose tissue.

Lymphatic collecting vessels and lymph nodes are inevitably embedded in adipose tissue. The physiological significance of this observation remains still ...

Tıp

Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, uncoupling of metabolism to generate heat, and secretion of adipokines to regulate whole-body homeostasis and immune responses. Emerging research is identifying important regional differences in the developmental, molecular, and functional profiles of adipocytes located in discrete depots throughout the body. Different properties of the depots are medically relevant since metabolic diseases often demonstrate depot-specific effects. This protocol will provide investigators with a detailed anatomic atlas and dissection guide for the reproducible and accurate identification and excision of diverse mouse adipose tissues. Standardized dissection of discrete adipose depots will allow detailed comparisons of their molecular and metabolic characteristics and contributions to local and systemic pathologic states under various nutritional and environmental conditions.

Adipocytes exist in discrete depots and have diverse roles within their unique microenvironments. As regional differences in adipocyte character and function are uncovered, standardized identification and isolation of depots is crucial for advancement of the field. Herein, we present a detailed protocol for the excision of various mouse adipose depots.

Çeşitli fare Adipose depoları tanımlama ve diseksiyon

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, ...

Biyoloji

Isolation and Identification of Vascular Endothelial Cells from Distinct Adipose Depots for Downstream Applications

Vascular endothelial cells lining the wall of the vascular system play important roles in a variety of physiological processes, including vascular tone regulation, barrier functions, and angiogenesis. Endothelial cell dysfunction is a hallmark predictor and major driver for the progression of severe cardiovascular diseases, yet the underlying mechanisms remain poorly understood. The ability to isolate and perform analyses on endothelial cells from various vascular beds in their native form will give insight into the processes of cardiovascular disease. This protocol presents the procedure for the dissection of mouse subcutaneous and mesenteric adipose tissues, followed by isolation of their respective arterial vasculature. The isolated arteries are then digested using a specific cocktail of digestive enzymes focused on liberating functionally viable endothelial cells. The digested tissue is assessed by flow cytometry analysis using CD31+/CD45&#8722; cells as markers for positive endothelial cell identification. Cells can be sorted for immediate downstream functional assays or used to generate primary cell lines. The technique of isolating and digesting arteries from different vascular beds will provide options for researchers to evaluate freshly isolated vascular cells&#160;from arteries of interest and allow them to perform a wide range of functional tests on specific cell types.

This protocol details a method for the dissection of mouse adipose depots and the isolation and digestion of respective arteries to liberate and then identify the endothelial cell population. Freshly isolated cells used in downstream applications will advance the understanding of vascular cell biology and the mechanisms of vascular dysfunction.

Vasküler Endotel Hücrelerinin Aşağı Akış Uygulamaları için Farklı Yağ Depolarından İzolasyonu ve Tanımlanması

Vascular endothelial cells lining the wall of the vascular system play important roles in a variety of physiological processes, including vascular tone ...

Murin Beyaz Yağ Dokusunun Yarı Otomatik İzolasyonu

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their mechanisms. Immortalized white preadipocyte cell lines are publicly available and widely used. However, the emergence of beige adipocytes in white adipose tissue in response to external cues is difficult to recapitulate to the full extent using publicly available white adipocyte cell lines. Isolation of the stromal vascular fraction (SVF) from murine adipose tissue is commonly executed to obtain primary preadipocytes and perform adipocyte differentiation. However, mincing and collagenase digestion of adipose tissue by hand can result in experimental variation and is prone to contamination. Here, we present a modified semi-automated protocol that utilizes a tissue dissociator for collagenase digestion to achieve easier isolation of the SVF, with the aim of reducing experimental variation, reducing contamination, and increasing reproducibility. The obtained preadipocytes and differentiated adipocytes can be used for functional and mechanistic analyses.

Yazar Spotlight: Murin Beyaz Yağ Dokusundan Stromal Vasküler Fraksiyonun Bir Doku Ayrıştırıcı Kullanılarak Yarı Otomatik İzolasyonu  

This protocol describes the semi-automated isolation of the stromal vascular fraction (SVF) from murine adipose tissue to obtain preadipocytes and achieve adipocyte differentiation in vitro. Using a tissue dissociator for collagenase digestion reduces experimental variation and increases reproducibility.

Bir Doku Dissosiyatör Kullanarak Stromal Vasküler Fraksiyonun Murin Beyaz Yağ Dokusundan Yarı Otomatik İzolasyonu

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...

Farelerde scBAT'ın Morfolojik ve Moleküler Karakterizasyonu

Dissection, Histological Processing, and Gene Expression Analysis of Murine Supraclavicular Brown Adipose Tissue

Brown adipose tissue (BAT)-mediated thermogenesis plays an important role in the regulation of metabolism, and its morphology and function can be greatly impacted by environmental stimuli in mice and humans. Currently, murine interscapular BAT (iBAT), which is located between two scapulae in the upper dorsal flank of mice, is the main BAT depot used by research laboratories to study BAT function. Recently, a few previously unknown BAT depots were identified in mice, including one analogous to human supraclavicular brown adipose tissue. Unlike iBAT, murine supraclavicular brown adipose tissue (scBAT) is situated in the intermediate layer of the neck and thus cannot be accessed as readily.
To facilitate the study of newly identified mouse scBAT, presented herein is a protocol detailing the steps to dissect intact scBAT from postnatal and adult mice. Due to scBAT&#39;s small size relative to other adipose depots, procedures have been modified and optimized specifically for processing scBAT. Among these modifications is the use of a dissecting microscope during tissue collection to increase the precision and homogenization of frozen scBAT samples to raise the efficiency of subsequent qPCR analysis. With these optimizations, the identification of, morphological appearance of, and molecular characterization of the scBAT can be determined in mice.

Yazar Gündemi: Genetik Analiz için Supraklaviküler Kahverengi Yağ Dokusu Ekstraksiyonunun Optimize Edilmesi

Here, we provide a practical procedure for dissecting and performing histological and gene expression analyses of murine supraclavicular brown adipose tissue.

Murin Supraklaviküler Kahverengi Yağ Dokusunun Diseksiyonu, Histolojik İşlemi ve Gen Ekspresyon Analizi

Brown adipose tissue (BAT)-mediated thermogenesis plays an important role in the regulation of metabolism, and its morphology and function can be greatly ...

Yerelleştirme, Kimlik ve Eksizyon Kemirgen Yağ depolarının

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Yağ Deposu özgü SCA1 ve İmmunomanyetik Ayırma

Floresan Boya Etiketli Lipozomların İn Vivo Dokuya Özgü Hücresel Alımının Hazırlanması, Uygulanması ve Değerlendirilmesi

Murin İntraabdominal Yağ Depolarından Adipojenik ve Fibroinflamatuar Stromal Hücre Alt Popülasyonlarının İzolasyonu

Lymphatic and Blood Network Analysis During Obesity

Çeşitli fare Adipose depoları tanımlama ve diseksiyon

Vasküler Endotel Hücrelerinin Aşağı Akış Uygulamaları için Farklı Yağ Depolarından İzolasyonu ve Tanımlanması

Bir Doku Dissosiyatör Kullanarak Stromal Vasküler Fraksiyonun Murin Beyaz Yağ Dokusundan Yarı Otomatik İzolasyonu

Bir Doku Dissosiyatör Kullanarak Stromal Vasküler Fraksiyonun Murin Beyaz Yağ Dokusundan Yarı Otomatik İzolasyonu

Bir Doku Dissosiyatör Kullanarak Stromal Vasküler Fraksiyonun Murin Beyaz Yağ Dokusundan Yarı Otomatik İzolasyonu

Murin Supraklaviküler Kahverengi Yağ Dokusunun Diseksiyonu, Histolojik İşlemi ve Gen Ekspresyon Analizi