Хирургическая модель одноступенчатых тканеинженерных уротелиальных трубок у минипигов

Для начала заведите взрослого геттингенского мини-пига за 12 часов до операции. После выполнения стандартной нижней срединной лапаротомии у свиньи, находящейся под наркозом, подтяните межбрюшинный мочевой пузырь к ране. Теперь проведите профилактический гемостаз на передней стенке мочевого пузыря, а также надрежьте мышцу детрузора при диатермии.

Затем разрежьте ножницами внутренний слой слизистой оболочки, чтобы иссечь сегмент мочевого пузыря со всей стенкой. Закройте стенку мочевого пузыря быстро рассасывающимся плетеным беговым швом, оставив при этом проксимальное отверстие в один квадратный сантиметр. Тщательно рассеките слой слизистой оболочки резецированного образца в стерильных условиях и измельчите образец слизистой оболочки в микрографты размером в один квадратный миллиметр для заделки каркаса.

С помощью щипцов поместите частицы слизистой оболочки на подогнанную биоразлагаемую сетку с соотношением расширения один к шести. Поместите сетку с микрографтами вверх внутрь прямоугольной стальной формы, заполненной раствором коллагена. После застывания наденьте гидрогель на нейлоновую сетку, лежащую на перфорированной стальной пластине, и аккуратно снимите форму.

Изгоните воду из гидрогеля, поместив поверх геля капроновую сетку, а затем стальную пластину, а затем пассивно сожмите 120-граммовым грузом, помещенным поверх стальной пластины, на пять минут. После сжатия аккуратно снимите груз и капроновую сетку. Теперь трансплантат готов к хирургическому вмешательству.

Сверните сплющенный каркас вокруг биоразлагаемого стента так, чтобы микротрансплантаты были обращены к стенту, и зашите каркас на месте в продольном направлении с помощью медленно рассасывающегося монофиламентного бегущего шва. Зафиксируйте антеградную пробку для клизмы толстой кишки внутри просвета стента, пришить стент к колпачку двумя или тремя прерывистыми нерассасывающимися швами. После завершения каркаса анастомозируйте трубчатую конструкцию к оставшемуся отверстию на передней стенке мочевого пузыря с помощью медленно рассасывающегося монофиламентного бегущего шва.

Затяните анастомоз кисетным швом и перевяжите дистальный конец кондуита. Соберите брюшинный лоскут из лобковой связки и залатайте трубчатый каркас в продольном направлении бегущим, медленно рассасывающимся монофиламентным швом. Введите физиологический раствор через уретральный катетер, чтобы подтвердить проходимость анастомоза.

Тупо рассеките трансфасциальный канал латерально к средней линии рядом с каудальной молочной железой с правой стороны. Поместите кабелепровод в подкожный карман и отметьте его нерассасывающимися швами на уровне кожи. После закрытия передней мышечной фасции мышцы живота закройте кожу нерезорбируемым монофиламентным беговым швом.

По истечении шести недель наблюдения осмотрите просвет кондуита с помощью эндоскопии на предмет непрерывности и эпителиальной выстилки. Проведите компьютерную томографию с контрастным усилением для обеспечения проходимости кондуита. После шести недель наблюдения микроскопическая оценка ткани каркаса не выявила никаких признаков отторжения хозяина или инфекции, а трубчатый каркас оставался открытым и беспрепятственным.

Гистологические исследования показали стратифицированный люминальный эпителий уротелиального происхождения, покрывающий весь каркас, с остатками армирующих биоматериалов, которые все еще видны через шесть недель.