Modello chirurgico per tubi uroteliali di ingegneria tissutale a stadio singolo in minipig

Per iniziare, digiunare un maialino di Gottingen adulto 12 ore prima dell'intervento. Dopo aver eseguito una laparotomia standard della linea mediana inferiore su un maiale anestetizzato, tirare la vescica urinaria interperitoneale verso la ferita. Ora, eseguire l'emostasi profilattica sulla parete anteriore della vescica e incidere il muscolo detrusore con la diatermia.

Quindi, tagliare lo strato mucoso interno con le forbici per asportare un segmento vescicale a parete intera. Chiudere la parete vescicale con una sutura da corsa intrecciata a rapido riassorbimento, lasciando un'apertura prossimale di un centimetro quadrato. Sezionare con cura lo strato mucoso del campione resecato in condizioni sterili e tritare il campione mucoso in micro innesti di un millimetro quadrato per l'inclusione dell'impalcatura.

Usando una pinza, posizionare le particelle di mucosa su una rete biodegradabile montata con un rapporto di espansione da uno a sei. Posizionare la rete con i micro innesti rivolti verso l'alto all'interno di uno stampo rettangolare in acciaio riempito con soluzione di collagene. Dopo la solidificazione, far scivolare l'idrogel su una rete di nylon appoggiata su una piastra di acciaio forata e rimuovere delicatamente lo stampo.

Espellere l'acqua dall'idrogel posizionando una rete di nylon, quindi una piastra d'acciaio sopra il gel, quindi comprimere passivamente con un peso di 120 grammi posto sopra la piastra d'acciaio per cinque minuti. Dopo la compressione, rimuovere delicatamente il peso e la rete di nylon. Ora, l'innesto è pronto per la manipolazione chirurgica.

Arrotolare l'impalcatura appiattita attorno a uno stent biodegradabile con i micro innesti rivolti verso lo stent e suturare l'impalcatura in posizione longitudinalmente con una sutura in monofilamento a lento riassorbimento. Fissare un tappo per clistere del colon anterogrado all'interno del lume dello stent suturando lo stent al cappuccio con due o tre suture interrotte non riassorbibili. Dopo aver completato l'impalcatura, anastomosi il costrutto tubulare fino all'apertura rimanente sulla parete anteriore della vescica con una sutura in monofilamento riassorbibile lento.

Stringere l'anastomosi con una sutura per il cordino della borsa e legare l'estremità distale del condotto. Prelevare un lembo peritoneale dal legamento pubocavescicale e rattoppare longitudinalmente l'impalcatura tubulare con una sutura monofilamento riassorbibile lenta e in esecuzione. Iniettare soluzione salina attraverso il catetere uretrale per confermare la pervietà anastomotica.

Sezionare senza mezzi termini un canale trans fasciale lateralmente alla linea mediana vicino alla ghiandola mammaria caudale sul lato destro. Posizionare il condotto in una tasca sottocutanea e contrassegnare il condotto con suture a livello cutaneo non riassorbibili. Dopo aver chiuso la fascia muscolare anteriore del muscolo addominale, chiudere la pelle con una sutura da corsa monofilamento non riassorbibile.

Al termine di sei settimane di osservazione, ispezionare il lume del condotto mediante endoscopia per verificare la continuità e il rivestimento epiteliale. Eseguire la tomografia computerizzata con mezzo di contrasto per garantire la pervietà del condotto. Dopo sei settimane di osservazione, la valutazione microscopica del tessuto dello scaffold non ha rivelato segni di rigetto o infezione dell'ospite e lo scaffold tubulare è rimasto pervio e non ostruito.

Le valutazioni istologiche hanno mostrato un epitelio luminale stratificato di origine uroteliale che copriva l'intera impalcatura con resti dei biomateriali di rinforzo ancora visibili dopo sei settimane.