본 연구는 자폐 스펙트럼 장애(ASD)의 병태생리학에 초점을 맞추고 있습니다. 구체적으로, ASD와 관련된 분자 메커니즘과 행동 장애의 원인에 대해 살펴봅니다. 여기에는 ASD와 관련된 특정 치료가 포함되며 ASD로 고통받는 개인의 삶을 개선할 것입니다.
우리 연구의 과제 중 하나는 ASD 관련 행동에 대한 연구를 개선하고 다른 실험실 간에 이를 전달하는 것입니다. 서로 다른 실험실마다 행동 평가를 수행하는 방법에 많은 차이가 있으며, 이는 치료를 현장으로 발전시키는 데 큰 문제입니다. 따라서 우리는 우리의 프로토콜을 통해 이러한 발전과 전 세계 실험실 간의 의사 소통에 도움이 되기를 바랍니다.
그루밍 및 3챔버 테스트 프로토콜을 최적화하고 세부화함으로써 연구자들이 ASD 마우스 모델에서 신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과를 얻기 위해 신뢰할 수 있는 일관된 프레임워크를 구축합니다. 이러한 표준화는 다양한 실험실의 연구 결과에 대한 더 나은 협력과 해석을 촉진하여 ASD에 대한 더 나은 이해와 잠재적 치료법의 개발로 이어질 것입니다. 본 연구실은 자폐증과 유사한 행동에서 세포 유형별 번역 과정을 설명하는 데 관심이 있습니다.
또한 메트포르민과 같은 ASD 마우스 모델의 잠재적인 치료 응용 분야도 연구했습니다. 시작하려면 희미한 조명을 켭니다. 테이블을 청소하고 방을 설정하십시오.
새 침구를 얇게 깔아 각 테스트 케이지를 준비합니다. 테이블 위에 하나 또는 두 개의 케이지를 놓고 흰색 플라스틱 블라인더로 서로 분리하고 실내 환경을 분리합니다. 그런 다음 각 케이지 앞에 카메라를 배치하여 테스트 마우스를 캡처합니다.
케이지를 천 시트로 덮고 모든 마우스를 실내로 옮겨 이송 과정에서 스트레스를 받지 않도록 합니다. 쥐를 시험장에 넣으면 시트를 제거합니다. 실험을 시작하기 전에 조명을 어둡게 하는 방에 최소 30분 동안 그대로 두십시오.
테스트를 시작할 때 마우스 식별 번호와 테스트 정보를 화이트보드에 적어 둡니다. 테스트 마우스를 새 침구와 함께 케이지에 넣습니다. 기록을 시작하고 테스트 마우스를 테스트 케이지에 넣습니다.
20분 녹음 세션 동안 회의실을 나갑니다. 20분 후 객실로 돌아갑니다. 화이트보드를 카메라에 대고 녹화를 중지합니다.
테스트 마우스를 가정용 케이지에 다시 넣고 실험을 반복합니다. 실험이 끝나면 쥐를 수용실로 되돌려 보냅니다. 자가 그루밍 테스트는 대조군 마우스에 비해 Eif4ebp2 녹아웃 마우스에서 그루밍 시간이 증가한 것으로 나타났습니다.
Eif4ebp2 녹아웃 마우스는 대조군 마우스보다 그루밍 시합이 훨씬 더 많았습니다. 시작하려면 테이블을 청소하고 희미한 조명을 켭니다. 프라이버시 블라인드로 둘러싸인 테이블 위에 3 챔버 플렉시 글라스 기기를 놓습니다.
하나의 카메라를 머리 위에 놓고 세 개의 챔버가 모두 카메라의 녹화 프레임에 있는지 확인합니다. 그런 다음 테스트 마우스와 낯선 마우스를 실내로 옮기고 이송 과정에서 케이지를 천 시트로 덮습니다. 방에 있으면 시트를 제거하십시오.
실험을 시작하기 전에 쥐를 어두운 조명으로 최소 30분 동안 방에 두십시오. 습관화하는 동안 3개의 챔버를 비워 두십시오. 테스트 마우스를 선택한 후 화이트보드에 식별 번호를 적습니다.
슬라이딩 도어가 닫힌 상태로 유지되는 동안 테스트 마우스를 중앙 구획에 놓습니다. 문을 열고 녹음을 시작하여 실험용 쥐가 10분 동안 세 개의 빈 방을 탐험할 수 있게 하세요. 10분 후 방으로 돌아갑니다.
테스트 마우스를 중앙 수납부로 부드럽게 안내하고 슬라이딩 도어를 닫습니다. 화이트보드를 표시하고 카메라를 중지합니다. 각 챔버의 모서리에서 대각선으로 서로 마주보고 있는 왼쪽 및 오른쪽 챔버에 두 개의 와이어 케이지를 배치합니다.
케이지와 챔버 벽 사이의 거리를 측정합니다. 케이지가 챔버 도어를 직접 향하지 않도록 합니다. 낯선 마우스 하나를 선택하여 와이어 케이지 중 하나에 넣고 다른 케이지는 비워 둡니다.
테스트를 시작하려면 방을 떠나기 전에 녹음을 누르고 두 슬라이딩 도어를 모두 제거하십시오. 실험 쥐가 한 방에 있는 빈 철사 우리를, 다른 방에 있는 낯선 쥐가 있는 우리를 10분 동안 탐험하게 합니다. 10분 후 방으로 돌아갑니다.
화이트보드를 카메라에 표시하고 녹화를 종료합니다. 마우스를 중앙 수납부에 다시 끼우고 상호 연결된 도어를 닫습니다. 이전에 비어 있던 와이어 케이지에 한 번도 본 적이 없는 새 마우스를 놓습니다.
녹음을 시작하고 상호 연결된 도어를 열어 테스트 마우스가 방을 떠나기 전에 10분 동안 장치를 탐색할 수 있도록 합니다. 테스트 마우스는 10분 동안 이전에 만난 S1 마우스와 새로 도입된 S2 마우스가 있는 두 개의 와이어 케이지를 탐색합니다. 10분 후 방으로 돌아갑니다.
화이트보드를 카메라에 표시하고 녹화를 마칩니다. 모든 쥐를 집 우리로 되돌립니다. 냄새가 나지 않는 소독제를 사용하여 챔버와 와이어 케이지를 철저히 청소하고 다음 실험 전에 장치를 건조시킵니다.
실험이 끝나면 쥐를 사육 시설로 되돌려 보냅니다. 생쥐는 새로운 무생물보다 S1과 상호 작용하는 것을 선호했습니다. 마찬가지로, C57BL/6J 마우스는 익숙한 S1보다 새로 도입된 S2에 더 많은 관심을 보였습니다.
