Name: quantification of neurovascular protection following repetitive hypoxic preconditioning and transient middle cerebral artery occlusion in mice
Uploaded: 2015-05-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
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Special thanks to the Gidday lab for their work in developing the RHP protocol, as well as the Neuro-Models Facility (UTSW) for their assistance in the tMCAo surgeries. This work was supported by grants from the American Heart Association (AMS), The Haggerty Center for Brain Injury and Repair (UTSW; AMS), and The Spastic Paralysis Research Foundation of the Illinois-Eastern Iowa District of Kiwanis International (JMG).

The authors have nothing to disclose.

전신 저산소증 마우스 (즉, 2 시간 11 % O 2)에 하나의 노출은 &quot;일시적으로&quot;짧은 지속되는 저산소 전처리 도전에 후생 유전 학적 반응을 의미하는 결과 tMCAO, 29 일부터 뇌를 보호하고, 기준 표현형 내에서 복원 일. 저산소 전처리 자극의 반복 프리젠 테이션은 크게 신경 표현형의 기간을 연장. 6 많은 연구는 반복적 인 자극 열차의 빈도, 규모 및 기간이 응답의 중요한 결정 요인이라는 것을 보여 주었다. 예를 들어, 단순히 동일한 강도 및 저산소증의 지속 시간 (2 시간 11 % 산소) 주당 3 회 (MWF)이 2 이상의 결과 tMCAO 6에서 신경 혈관 보호를위한 치료 창을 확장하지 않은 주 그러나이 장기 유도하기에 충분 하였다 반복 망막 용어 허혈성 허용. (30) 흥미롭게도, 비록 전신 저산소증 (5 노출 5 시간 8 % O 2 &lt;/ 서브&gt;) 5 저산소 노출를 3 일 간격 배치 된 경우 신경이 끊어졌습니다 6 일 간격 삼일 마지막 저산소 노출 후 유도 된 결과 tMCAO 보호 간격. (31)이 차이에 대한 이유는 불분명하지만,로 인해되었을 수도 있습니다 이 프로토콜 및 / 또는 중증도의 저산소 도전 간의 불충분 한 복구 시간에 심한 저산소증의 상대 지속 기간. 부상을 유발하지 않으면 서 주파수, 크기 및 기간의 도메인에서 반복적 저산소 도전의 부족, 적정에서, 관용의 개발에 중요한 것, 조직 특이 아마도 종 특이 효과를 언급 할 필요가 없을 것입니다. 8 %의 6 시간은 O (2)는 해마 신경 세포 사멸을 유도하지만, 예를 들어, RHP 노광들의 3/9은 4 시간 동안 8 % O 2에 노출을 포함한다. (32) 따라서, 관련하여 RHP 프로토콜에 대한 엄격한 준수가 있어야 기간과 내생을 유도하는 저산소 노출의 정도보호. 전처리에 의한 보호에 일주기 리듬의 잠재적 인 효과가 더 탐사를 필요로하지만, 특정 집단에 대한 하루 중 같은 시간에 33 수행 우완 노출은 잠재적 교란 효과의 위험을 줄일 수 있습니다. 용량 - 반응 및 유효성의 측면에서, 초점 선 중 가장 강력한 RHP 매개 보호 건강한 쥐 면역 표현형을 나타낼 RHP가 처리 될 때 결과 tMCAO은을 (한번에 최종 저산소 노출 3 다음의 이주를 유도했을 때 발생한 허혈 손상의 유무). (7)이 2 주 시점이 최대 다른 급성 중추 신경계 손상에 대한 보호, 또는 다른 기관 시스템에서의 기간과 일치하지 않을 수 있습니다. 모두 우완 프로토콜 및 후생 유전 학적 반응의 시간적 특징은, 의심 할 여지없이 각각의 새로운 번역 사용하기에 최적화가 필요합니다. 결과 tMCAO 절차의 큰 한계 중 하나는 경색 VO의 불균일 분포lumes이 대표 데이터 세트에 의해 도시 된 바와 같이. 윌리스, leptomeningeal 문합,과 등의 담보 접합의 원에 의해 제공되는 측부 순환이 일관 경색 볼륨으로 이어질 수 있습니다. (34) 변화를 쥐의 다른 균주에 윌리스의 원뿐만 아니라 후방 통신 동맥의 존재 및 개통, 25 사이 35은 상기 그룹 내 경색 볼륨의 일관성을 감소시킬 수있다. 견고한 샘플 크기 및 복제는 종종 결정적 결과를 생성하는 데 필요한 전력을 공급하고 이에 따라 이후의 실험 디자인에 포함되어야한다. 뇌졸중 유도하는 다른 방법은, 예컨대 버 횡 두개골에 구멍 또는 MCA의 원위 지점 photothrombosis 통해 주 MCA 분기 폐색로서 특히 원위 국소 허혈성 방법들은 종종 행정 용적 변화가 적은 생산. 그들은 동시 세포 외 및 세포 내 부종을 생산으로 Photothrombotic 스트로크는, 그러나, 제한적 phenomenoN 사람에서 허혈성 뇌졸중에 보이지 않는. 36 반대로, tMCAos 인해 중간 대뇌 동맥의 폐색으로 발생하는 인간의 모든 스트로크의 60 % 이상으로 임상에 더 직접적으로 적용 할 수있다. (37) 마지막으로, 결과 tMCAO 동안 사용 된 마취, 이소 플루 란 , 이소 플루 란 레벨 사이 수술 및 치료 및 치료 실험군 간의 일치해야이 신경을 고려하는 것이 가능하게 될 수있다. 신경을 유도하는 38에 도시 한 잠재 신경 보호 효과를 줄이기 위해 &lt;3 %로 유지되었다. 39 시간은 또한 TTC 염색 공정에서 중요하다. 4 시간 내지 7 일마다 변동 TTC 염색 허혈 후에 수행 될 수있는 시간에 대한 스트로크 문헌에서 큰 변동이있을지라도 졸중은 18,40 TTC 염색 대부분 뇌졸중 후 24 ~ 48 시간에 발생해야 일관되고 명확하게 묘사 경색 볼륨. TTC의 경색 볼륨은 꿀벌이N 뇌졸중 후 24 시간을 안정하지만 48 시간 후, 허혈성 뇌에 대 식세포의 유입이, TTC와 뇌 조직의 염색이 바로 희생을 따라야 또한 경색 볼륨 어렵다. 14,40을 정의합니다 발견. 염색을 지연 이유로 인해 동물의 죽음이 아닌 뇌경색으로 인한 증가 된 미토콘드리아 죽음의 얼룩의 품질을 감소합니다. 뇌 블레이드 삽입 중에 습하게 유지되지 않는 경우 사망 미토콘드리아에서 유사한 증가가 발생한다. 이 프로토콜은 명확 TTC 염색법으로 경색 분석의 장점을 도시 한 반면, 다른 면역 조직 얼룩은 다음 결과 tMCAO 경색 용적을 정량하기 위해 사용될 수있다. 크레 실 바이올렛 또는 플루오로 옥 염색이 희생 후 얼룩 덜 엄격한 시간 요구 사항을 가지고 있지만,이 고전 얼룩 저온 유지 장치 또는 마이크로톰에 의해 얻어진 매우 얇은 부분을 필요로하며, 따라서 통합 요약 및 분석을위한 더 많은 시간을 필요로한다. (14) 또한, 세인트주어진 뇌 경색 량 및 BBB 무결성 간의 직접 비교의 가능성을 제거한다 (15) 등이 개발로 AINS는 BBB 중단의 EB 정량과 함께 사용될 수 없다. 그것은 순수한 흰색 볼륨 반대로 통상적 핑크색을 나타내 동물 RHP 처리 주목해야한다. 6 RHP - 처리 된 마우스에서 경색의 유실을 방지하기 위해, 우리는 반대로 더 핑크 건강한 조직 초래 TTC 대한 짧은 염색 기간을 사용 어두운 빨강. 에반스 블루 처리는 또한 순수한 흰색 경색이 프로토콜에 제시된 이중 정량 염색 어렵다 경색 영역을 어둡게 할 수 있습니다. 내 및 그룹 사이 EB 정량과 비교하기 위해서, 모든 동물은 EB 상당 순환 시간을 거쳐야. 기타 EB 바로 다음 재관류를 주입 EB 최대 72 시간, 41 또는 4 시간 후 결과 tMCAO가 alternativ로, 4 시간 동안 (15)를 순환하는 순환 할 수있다전자의 방법. 파쇄 BBB 교차 및 뇌 조직에 진입 EB의 양은 주입 시간에서 희생 시간 알부민 - 결합 된 염료의 적분 누적을 나타낸다. 따라서, 본 문서에 기재된 방법은 22 및 24 시간의 재관류 간의 정확한 시간에 BBB의 상태를 알 수 및 이전 또는 이후 개구 또는 배리어의 폐쇄를 놓칠 수있다. 반대로, 왕 동부 등에 의해 이용 방법. 72 시간 그 삼일 후 스트로크 시간 동안 BBB 상태의 모든 변경 사항을 포함, 뇌졸중을 다음과 같은 사항에 대해 BBB의 상태를 보여 (42) 어느 프로토콜이 좋든 나쁘입니다.; 짧은 순환 시간을 사용하여 BBB의 일시적 개방을 &quot;실종&quot;의 위험이 남아 있지만, 그것은 연구자가 BBB의 병태 생리의 특정 시간 기능을 확인하고 다음과 같이, 다른 방법으로 페어링 할 수 있습니다. 기타 intracardially 1 분 transcardial 관류 후 EB 주입함으로써 TTC 및 EB를 결합했다. (18) 그러나,이 충족HOD 일관성 결과를 생성하고 상기 프로토콜보다 훨씬 더 복잡한 과정이다. 우완의 가장 유망한 미래 방향 중 하나는 다른 질병 상태에이 전처리 프로토콜의 번역 응용 프로그램입니다. 간헐적 노출 저산소 허혈 이외 염증성 CNS 조건에서 보호 것으로 밝혀졌다. 알츠하이머 병의 쥐 모델에서, 기압 성 저산소증에 4 시간 매일 노출 2 주 메모리 유지 및 베타 - 아밀로이드의 뇌내 주사 후 대뇌 피질의 신경 세포의 손실의 손상을 감소시켰다. 43 간헐적 저산소증 (기압 성 저산소증에 15 시간 매일 노출 2 주 )도 L-buthionine- [S, R] -sulfoximine (L-BSO) 주입, 선조체 도파민 전송을 손상 파킨슨의 모델 다음 쥐의 보호 것으로 밝혀졌다. (44) 그러나, 알츠하이머와 파킨슨의이 모델은 조사 단기 효과우완에 의해 유도 된 장기 신경을 조사 저산소 전처리. 43, 44은 연구를위한 유익한 향후 방향 일 수있다. 또한, RHP에 의해 유도 된 신경은 EB 분석 할 수있는 알츠하이머 병의 마우스 모델에서 개선 BBB 무결성을 연장 할 수있다. (45) 듀얼 (TTC) 및 EB 분석이 더 유용 파킨슨 모델이 될 것이다는 선조체 병변 (46)과 BBB를 유도로 각각 TTC 48, EB, 49 정량화 될 수 붕괴, 47. 전반적 RHP는 고유 장기 소염 및 신경 보호 효과를 유도로 큰 병진 전위 전처리의 간단 강력한 형태이다. TTC 및 EB의 이중 정량화 쉽게 미토콘드리아 장애, 세포 사멸 및 BBB 누설 관련된 다른 질환 상태에 적용 할 수있다.

성인 장애와 사망의 네 번째 주요 원인의 주요 원인으로, 뇌졸중은 미국의 성인 인구가 직면 한 가장 쇠약 질병 상태 중 하나입니다. 뇌졸중의 1 동물 모델은 허혈 손상을 감소시키는 새로운 방법과 실험 조사 허용 졸중 회복을 개선시킨다. 등의 중개 연구에 대한 하나의 새로운 길을 사전 조정된다. 전처리는 후속하는, 더 심한 부상으로부터 손상을 줄이기 위해 비 손상 자극의 의도적 인 사용이다.이 저산소 전처리는 생체 내 및 시험 관내 연구에서 모두 스트로크에 대한 보호를 제공하는 뇌의다면 발현 변화를 생성하는 것으로 나타났다 . (3) 그러나, 저산소증에 하나의 노출은 성인 쥐에서 허혈에 대한 허용 오차 미만의 72 시간을 유도, 단기 신경을 제공합니다., 린 등 기압 성 저산소증에 14 시간 매일 노출의 4도 네 후 주. FO싶게 그 신경은 일주. 5 반복 저산소 전처리 (RHP) 지속 하였다는 주파수, 기간, 저산소 노출의 강도의 확률 적 변화에 의해 특징입니다. 단일 전처리 도전 달리 RHP 쥐 여덟 주까지 지속 cerebroprotective 표현형을 유도한다. 6 RHP 최종 저산소 노출 후 주 경색 부피, 혈액 - 뇌 장벽 (BBB) ​​장애, 혈관 염증 및 백혈구 diapedesis 감소 . RHP 구체적 허혈성 반구에서 B 세포 개체군을 유지하면서, T 세포, 단핵 세포 및 대식 세포 개체군을 감소시켜 허혈성 뇌의 염증을 감소시켰다.도 7은 실제로 RHP 뇌졸중을 포함한 모든 CNS 부상 전에 마우스의 면역 표현형을 유도. RHP 처리 건강한 쥐로부터 분리 RHP 처리 B 세포는 항원 제시 및 항체 생산의 하향 조절 모두에, 고유 항 염증 표현형을 나타내었다.염증성 적응성 면역 기전에 전체적인 감소뿐만 아니라 특정 CNS 염증성 질환에 대한 내인성 면역 억제를 유도하기 위하여 RHP에게 우수한 방법론하게 할뿐만 아니라 염증성 병태를 포함 전신성 상해 또는 질병 모델. 우완는 과도 중간 대뇌 동맥 폐색 (결과 tMCAO) 다음 경색 볼륨 및 BBB 중단을 모두 줄일 수 있습니다. 이러한 일반적으로 사용되는 결과 tMCAO 같이 뇌졸중 동물 모델은 극적 뇌졸중 병태 생리에 대한 이해뿐만 아니라, 더욱 효과적인 neurotherapeutics의 디자인을 향상시킬 수있다. 우선 고이즈미 총리 등의 알에 의해 개발., 1986 년, 8 결과 tMCAO 절차는 설치류에서 뇌졸중 및 재관류 다음과 같은 염증을 조사하기위한 바람직한 방법 중 하나를 유도하는 널리 사용되는 방법이다. 결과 tMCAO위한 방법들이 발전함에 따라, 실리콘 코팅 된 섬유의 최근 이용은 또 다른 모델 9,10 &lt;비교 지주막 하 출혈의 위험을 줄일/ SUP&gt; 불행하게도 결과 tMCAO 자주 경색 볼륨에 다양한 변화를 생산 불구하고, 신뢰성을 향상시킬 수있다. 11-13 이러한 연구의 대부분은 2,3,5- 트리 페닐 클로라이드 (TTC)로 염색하여 관상 뇌 부분에서 경색 영역을 서술 고려 경색 정량 금 표준은 선명한, 복제 가능한 결과를 생성하기위한 간단하고 저렴한 방법이기 때문이다. TTC는 미토콘드리아에 존재하는 탈수소 효소의 기판 역할을합니다. 뇌 조각은 TTC 용액에 노출되면 포르 마잔의 비 수용성 감소 제품, 가능한 미토콘드리아에 깊은 붉은 색 침전 경우, TTC는 선택적으로 살아있는 세포로 촬영됩니다. 때문에 허혈성 조직에서 미토콘드리아 기능 장애의,이 조직 손상과 건강한 조직의 분화를 허용, 흰색 남아있다. (14) 우완 또한 허혈성 반구에서 BBB 중단을 줄일 수 있습니다. (6) 따라서, BBB 무결성의 이중 정량화 같은 B 내에서TTC 기반 경색 볼륨과 비는 내인성 보호의 전체 효과에 대한 유용한 정보, 치료 및 치료 동물에서 BBB 중단 및 경색 사이의 잠재적 인 인과 관계를 제공 할 것 15 결정. 뇌졸중 이차 중단 BBB,,를 통해 말초 혈액의 유입은 궁극적으로 허혈성 뇌졸중 환자에서 감염과 사망률의 비율을 증가, 허혈성 반구에 백혈구 인구, 염증성 사이토 카인, 산화 스트레스, vasogenic 부종, 출혈성 변환을 증가 . 16,17 동물 모델에서 BBB 중단을 측정하는 일반적인 방법은 뇌에 에반스 청 (EB) 염색 누설 정량화 통해서이다. 15,18-21 EB 선택적 알부민, 구형 단백질 혈청에 결합 (MW = 65 kDa의) 즉 손상되지 않은 동물에 BBB를 통과하지 않습니다. (22) 허혈성 뇌졸중에 이어, EB는 뇌를 침투, 광학 밀도 withi의 측정을 허용, 620 nm에서 형광을N 관류 부상 실질. (22) 광학 밀도는 EB는 (rongeur)로하여 사후 대뇌 피질의 혈관에서 세척 된 BBB의 투과성에 직접적으로 비례한다. EB 관리와 동물 TTC 염색 뇌의 즉각적인 처리와 함께, 경색 볼륨과 BBB 중단을 모두 효과적으로 정량화 할 수있다. 이것은 신경 상해 및 BBB 붕괴가 뇌졸중 후 뇌의 프로세스가 수반되지임을 인식하여야한다, 그래서 23,24 희생의 시간의 선택은 중요한 고려 사항이다. 다음 프로토콜 RHP 방법, 임시 동맥 폐색을 유발 결과 tMCAO 방법 자세히 모델링 인간 환자에서 중간 대뇌 동맥 폐색, 신경 및 혈관 뇌졸중 손상 엔드 포인트를 결정하는 이중 조직 학적 방법. TTC는 전체 경색 부피의 정량화를 허용 세포사 누적 조직 손상을 측정매화, EB는 BBB 손상의 반구 정량을 제공한다.

<table><tbody><tr><td>Flowmeters, regulators</td><td>VetEquip, Inc</td><td>Specialty order</td><td>Four flowmeters are attached to 6.0 mm flexible PVC tubing which connects to the inlet port on each induction chamber with a plastic female connector. These flowmeters are bolted to a 6.5&quot; x 1&quot; x 1&quot; metal bar. This metal bar is bolted to a MI-246-P pressure gauge with a DISS outlet. This pressure gauge and flowmeter equipment can be attached to each new gas cylinder with a wrench.</td></tr><tr><td>21% O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; tank</td><td>AirGas</td><td>OX USP200</td><td></td></tr><tr><td>11% O&lt;sub&gt;2 &lt;/sub&gt;tank</td><td>AirGas</td><td>Specialty order</td><td></td></tr><tr><td>8% O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; tank&amp;nbsp;</td><td>AirGas</td><td>Specialty order</td><td></td></tr><tr><td>15 L induction chambers</td><td>VetEquip</td><td>941454</td><td></td></tr><tr><td>Moor Laber Dopper Flow&amp;nbsp;</td><td>Moor Instruments&amp;nbsp;</td><td>moorVMS-LDF1-HP</td><td>0.8 mm diameter probe&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>High Intensity Illuminator&amp;nbsp;</td><td>Nikon</td><td>NI-150</td><td></td></tr><tr><td>Zoom Stereo Microscope&amp;nbsp;</td><td>NIkon</td><td>SMZ800</td><td>Other surgical microscopes may be used.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Kent Scientific Right Temperature CODA</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>Discontinued</td><td>Recommended replacement is PhysioSuite with RightTemp Temperature Monitoring and Homeothermic Control (Kent Scientific, #PS-RT).</td></tr><tr><td>Hovabator Incubator</td><td>Stromberg&#039;s</td><td>2362-E</td><td>Our model is the 2362N. 2362E is a later model and includes an electronic thermostat.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>V010 Anesthesia system&amp;nbsp;</td><td>VetEquip</td><td>901807</td><td>Includes: ten foot high-pressure oxygen hose, frame, flowmeter, oxygen flush assembly, vaporizer, breathing circuit, chamber, nosecones, waste gas evacuation tubing and two VapoGuard filters</td></tr><tr><td>250 ml isoflurane&amp;nbsp;</td><td>Butler Schein</td><td>NDC-11695</td><td></td></tr><tr><td>D-6 Vet Trim Animal Cordless Trimmer&amp;nbsp;</td><td>Andis&amp;nbsp;</td><td>#23905</td><td>Replacement blades are available from Andis (#23995)</td></tr><tr><td>Betadine&amp;nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-898-867&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Q-tips</td><td>Multiple sellers&amp;nbsp;</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Gauze Pads</td><td>Fisher Scientific</td><td>67622</td><td></td></tr><tr><td>Surgical drape</td><td>Fisher Scientific</td><td>GM300&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Silk Sutures&amp;nbsp;</td><td>Look/Div Surgical Specialties</td><td>SP115</td><td></td></tr><tr><td>Nylon Sutures</td><td>Look/Div Surgical Specialties</td><td>SP185</td><td></td></tr><tr><td>Durmont #5 forceps (2)&amp;nbsp;</td><td>Fine Science Tools&amp;nbsp;</td><td>11251-35</td><td>Angled 45&amp;deg;</td></tr><tr><td>Surgical Scissors</td><td>Fine Science Tools&amp;nbsp;</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>3 mm Vannas</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS600177</td><td>Straight blade</td></tr><tr><td>Hartman Hemostats&amp;nbsp;</td><td>Fine Scientific Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Occluding filaments</td><td>Washington University</td><td>Specialty order</td><td>Filaments are silicone coated at Washington Univeristy and provided to UTSW facilities for a fee.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Evans Blue</td><td>Sigma Aldritch</td><td>E2129-10G</td><td></td></tr><tr><td>Filter Paper&amp;nbsp;</td><td>Sigma Aldritch</td><td>WHA1001150</td><td>150 mm, circles, Grade 1&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Weigh Boats</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-202-101</td><td>2.5&quot; diameter</td></tr><tr><td>0.9% Sodium Chloride Injection USP&amp;nbsp;</td><td>Baxter Pharmaceutics&amp;nbsp;</td><td>2B1321</td><td></td></tr><tr><td>0.3 cc insulin syringe with 29 gauge needle</td><td>Becton Dickinson Labware</td><td>309301</td><td></td></tr><tr><td>Flat bottom restrainer&amp;nbsp;</td><td>Braintree Scientific&amp;nbsp;</td><td>FB&amp;nbsp;M</td><td>2.0&quot; diameter</td></tr><tr><td>TTC</td><td>Sigma</td><td>T8877</td><td></td></tr><tr><td>10x PBS, pH 7.4</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP399-20</td><td></td></tr><tr><td>Water Bath</td><td>Multiple sellers&amp;nbsp;</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td>Scintillation tubes with TTC may be manually held under running warm water as an alternative to the water bath.</td></tr><tr><td>Styrofoam board</td><td>Multiple sellers&amp;nbsp;</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Large Syringe Kit</td><td>PumpSystems Inc</td><td>P-SYRKIT-LG</td><td></td></tr><tr><td>Perfusion Pump</td><td>PumpSystems Inc</td><td>NE-300&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>60 cc syringe</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9203256</td><td></td></tr><tr><td>27 gauge winged infusion set</td><td>Kawasumi Laboratories, Inc</td><td>D3K1-25G 1</td><td></td></tr><tr><td>20 ml scintillation vial</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-367-126</td><td></td></tr><tr><td>Stainless steel spatula</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-373-25A</td><td></td></tr><tr><td>Alto acrylic 1.0 mm mouse brain, coronal</td><td>CellPoint Scientific&amp;nbsp;</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>0.21 mm stainless steel blades, 25 pk</td><td>CellPoint Scientific&amp;nbsp;</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td>Reusable cryostat blades are an inexpensive alternative.</td></tr><tr><td>4% paraformaldehyde</td><td>Santa Cruz Biotechnology&amp;nbsp;</td><td>SC-281692</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost microscope slides&amp;nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>HP Scanjet G4050</td><td>Multiple sellers&amp;nbsp;</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td>Other commercial scanners are suitable for this step in the protocol.</td></tr><tr><td>ImageJ&amp;nbsp;</td><td>National Institute of Health</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Analytical Balance</td><td>Mettler Toledo&amp;nbsp;</td><td>XSE 205U</td><td></td></tr><tr><td>Precision Compact Oven&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Thermo Scientific&amp;nbsp;</td><td>PR305225M</td><td></td></tr><tr><td>1.7 ml microcentrifuge tubes (Eppendorfs)</td><td>Denville Scientific&amp;nbsp;</td><td>C2170</td><td></td></tr><tr><td>Formamide</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP228-100</td><td></td></tr><tr><td>96-well plates</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-200-9</td><td></td></tr><tr><td>Epoch Microplate Spectrophotometer&amp;nbsp;</td><td>BioTek&amp;nbsp;</td><td>Catalog number not available&amp;nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

quantification of neurovascular protection following repetitive hypoxic preconditioning and transient middle cerebral artery occlusion in mice

뇌졸중의 실험 동물 모델은 스트로크의 병리를 이해하고보다 효과적인 치료 전략을 개발하기위한 매우 중요한 도구입니다. 반복적 저산소 전처리 (RHP) 대 이주 프로토콜 국소 허혈성 뇌졸중의 쥐 모델에서 중추 신경계 (CNS) 상해에 대하여 장기간 보호를 유도한다. 우완 두 기간 (2 ~ 4 시간)와 강도 (8 %와 11 % O 2)에 따라 다릅니다 저산소증 9 확률 적 노출로 구성되어 있습니다. 우완는 내인성 중추 신경계 보호 표현형의 장기 유도를 제안, 경색 볼륨, 혈액 - 뇌 장벽 (BBB)​​ 중단 및 저산소증에 마지막 노출 다음 주 이후 행정 염증 반응을 감소시킨다. 경색 볼륨 및 BBB 중단의 이중 정량 방법은 우완 또는 다른 추정 neuroprotectants와 생쥐의 신경 혈관 보호 기능을 평가하는데 효과적이다. 성인 남성 스위스 웹스터 마우스는 21 % O로 우완 또는 기간 - 상응하는 노출에 의해 미리 조정했다 <suB&gt; 2 (즉, 실내 공기). 60 분 과도 중간 대뇌 동맥 폐색 (결과 tMCAO)은 최종 저산소 노출 다음 이주을 유도 하였다. 폐쇄 및 재관류 모두 두개 레이저 도플러 flowmetry에 의해 확인되었다. 재관류 후 스물 두 시간, 에반스 블루 (EB)를 정맥 꼬리 정맥 주사를 통해 투여 하였다. 2 시간 후, 동물을 이소 플루 란과 과량 뇌 섹션에 의해 희생시켰다은 2,3,5- 트리 페닐 테트라 졸륨 클로라이드 (TTC)로 염색 하였다. 경색 볼륨은 정량 하였다. 다음으로, EB는 결과 tMCAO 후 BBB 중단을 결정하기 위해 48 시간 동안 조직으로부터 추출 하였다. 요약하면, RHP 다른 CNS 기반 및 전신성 염증성 질환 상태에 대한 병진 전위, 마우스에서 스트로크 부상 장기 내인성 신경 혈관 보호를 유도하기 위해, 최소한의 비용으로 복제 할 수있는 단순한 프로토콜이다.

이 연구는 연령 10 주 우완으로 무작위 배정의 시작에 있었다 (N = 10) (25) 남성 스위스 웹스터 마우스 또는 21 % O 2 (N = 15) 그룹을 포함. 2 주 최종 우완 노출 후, 수술은 눈을 멀게 그룹으로 수행하고 일 사이에 카운터. 결과 tMCAO 다음, 1 마우스는 수술 후 회복 중 사망하고 재관류 CBF 기준을 충족하지 않았기 때문에 1 마우스는 연구에서 제외되었다. 모두 제외 마우스는 21 % O 2 군에서 있었다. 에 따라 지침 도착, 28 표 2는 수술 매개 변수를 보여줍니다. 간접 경색 볼륨, 반구 부종 (즉, 부종), 그리고 에반스 블루 (EB) extravasations는 모든 데이터가 짝 T-테스트 (평균, 표준 편차가 표시)로 분석 하였다. 그림 2에 표시되며, 아웃 라이어는 거짓 검색 속도 검출 4 이상 값을 제거 1 % (을 Graphpad 프리즘), 이하 (2 21 %, RHP 2)에서 EB 데이터 세트. 2 처리 된 마우스 (62.6 ± 42.6 mm 3)에 비해 거의 절반 (33.9 ± 23.0 mm 3)에 의해 경색 볼륨을 감소하지만,이 차이는 비 유의 하였다 = 0.10). 그러나, 선험적 전력 분석은 아웃 라이어가 제거 된 후 우리는 우완 처리 된 마우스와 달성하지 않았다 필요 N = 10 당 그룹을 예측했다. 이것은 미래의 사용을 RHP 실험 설계에서 고려되어야한다. 반구 부종에 RHP의 효과가 없었다, 부종. 6 우완 처리 된 마우스와 동일시 될 수있는 TTC 볼륨 분석에서 파생 메트릭을 정규화 허혈성 반구 내에서 BBB 중단의 감소 추세 (P = 0.05) 전시 반대측 반구. 그림 2D는 모두 치료 그룹에 대한 EB 누출에 대한 값의 범위를 보여줍니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/52675/52675fig1.jpg" /><br/&gt; 그림 1 :. 맞춤 설계 우완 챔버 상단 패널에는 최대 4 개의 챔버 공기 흐름의 개별 모니터링을위한 맞춤형 유량계를 나타낸다. 공기 차단 성 튜브 유량계를 떠나고 하부 패널 (15)에 L 유도 챔버의 입구 포트에 연결되어 도시된다. RHP는 공기 순환을 허용하는 동안 출구 포트는 열려 있습니다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/52675/52675fig2.jpg" /> 그림 2.. RHP가 경색 볼륨 및 BBB 중단 RHP (A)는 대조군 마우스와 비교하여 46 % 경색 부피 감소를 줄일 수 있지만 TTC 데이터로부터 유도 반구 부종에 미치는 영향 (B)가 (C)와 동일한 동물에서, RHP는 BBB 중단을 감소 (p = 0.05) 반대쪽 반구 정규화 누출. (D) 주제 TTC 얼룩을 모두 RHP 처리 및 21 % O 2에서 에반스 블루에 의해 정의 된 바와 같은 </sUB는&gt; 각 샘플 아래에 표시 경색 볼륨과 에반스 블루 누수 대응 제어 마우스를 -exposed. 표시된 값은 평균이다 + 표준 편차.

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Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

This protocol describes repetitive hypoxic preconditioning, or brief exposures to systemic hypoxia that reduce infarct volumes and blood-brain barrier disruption following transient middle cerebral artery occlusion in mice. It also details dual quantification of infarct volume and blood-brain barrier disruption after stroke to assess the efficacy of neurovascular protection.

마우스의 반복 저산소 전처리 및 과도 중간 대뇌 동맥 폐쇄 후 신경 혈관 보호의 정량화

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

quantification-neurovascular-protection-following-repetitive-hypoxic

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

13.7K 조회수.  University of Texas Southwestern Medical Center. This protocol describes repetitive hypoxic preconditioning, or brief exposures to systemic hypoxia that reduce infarct volumes and blood-brain barrier disruption following transient middle cerebral artery occlusion in mice. It also details dual quantification of infarct volume and blood-brain barrier disruption after stroke to assess the efficacy of neurovascular protection.

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Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a subsequent damaging ischemic insult. We have established bilateral common carotid artery occlusion as a preconditioning stimulus to induce early ischemic tolerance to transient focal cerebral ischemia in C57Bl6/J mice. In this video, we will demonstrate the methodology used for this study.

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning (PC) &#x2013; a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a subsequent damaging ischemic insult. We established bilateral common carotid artery occlusion (BCCAO) as a preconditioning stimulus to induce early ischemic tolerance (IT) to transient focal cerebral ischemia (induced by middle cerebral artery occlusion, MCAO) in C57Bl6/J mice.

초점 대뇌 국소 빈혈에 조기 허혈성 공차를 유도하기 위해 적절한 전처리 자극으로 양측 경동맥 동맥 폐색

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

연구

의학

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ischemia produces damage to specific brain regions shown to be highly sensitive to ischemia 1. Hippocampal neurons have higher sensitivity to ischemic insults compared to other cell populations, and specifically, the CA1 region of the hippocampus is particularly vulnerable to ischemia/reperfusion 2.
The design of therapeutic interventions, or study of mechanisms involved in cerebral damage, requires a model that produces damage similar to the clinical condition and in a reproducible manner. Bilateral carotid vessel occlusion with hypotension (2VOH) is a model that produces reversible forebrain ischemia, emulating the cerebral events that can occur during cardiac arrest and resuscitation. We describe a model modified from Smith et al. (1984) 2, as first presented in its current form in Sanderson, et al. (2008) 3, which produces reproducible injury to selectively vulnerable brain regions 3-6. The reliability of this model is dictated by precise control of systemic blood pressure during applied hypotension, the duration of ischemia, close temperature control, a specific anesthesia regimen, and diligent post-operative care. An 8-minute ischemic insult produces cell death of CA1 hippocampal neurons that progresses over the course of 6 to 24 hr of reperfusion, while less vulnerable brain regions are spared. This progressive cell death is easily quantified after 7-14 days of reperfusion, as a near complete loss of CA1 neurons is evident at this time.
In addition to this brain injury model, we present a method for CA1 damage quantification using a simple, yet thorough, methodology. Importantly, quantification can be accomplished using a simple camera-mounted microscope, and a free ImageJ (NIH) software plugin, obviating the need for cost-prohibitive stereology software programs and a motorized microscopic stage for damage assessment.

Bilateral carotid occlusion coupled with systemic hypotension produces global brain ischemia in the rat, resulting in damage to the hippocampus with reproducible severity. Animal subjects are impaired with predictable patterns of brain damage, they recover expediently, and mortality rates are comparatively low.

2 혈관 폐색 / 저혈압 : 세계적인 두뇌 국소 빈혈의 쥐 모델

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of motor and cognitive disabilities. Its high prevalence poses a serious health burden, as stroke is among the principal causes of long-term disability and death worldwide1. Recovery of neuronal function is, in most cases, only partial. So far, treatment options are very limited, in particular due to the narrow time window for thrombolysis2,3. Determining methods to accelerate recovery from stroke remains a prime medical goal; however, this has been hampered by insufficient mechanistic insights into the recovery process. Experimental stroke researchers frequently employ rodent models of focal cerebral ischemia. Beyond the acute phase, stroke research is increasingly focused on the sub-acute and chronic phase following cerebral ischemia. Most stroke researchers apply permanent or transient occlusion of the MCA in mice or rats. In patients, occlusions of the MCA are among the most frequent causes of ischemic stroke4. Besides proximal occlusion of the MCA using the filament model, surgical occlusion of the distal MCA is probably the most frequently used model in experimental stroke research5. Occlusion of a distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA branch typically spares the striatum and primarily affects the neocortex. Vessel occlusion can be permanent or transient. High reproducibility of lesion volume and very low mortality rates with respect to the long-term outcome are the main advantages of this model. Here, we demonstrate how to perform a chronic cranial window (CW) preparation lateral to the sagittal sinus, and afterwards how to surgically induce a distal stroke underneath the window using a craniotomy approach. This approach can be applied for sequential imaging of acute and chronic changes following ischemia via epi-illuminating, confocal laser scanning, and two-photon intravital microscopy.

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Surgical occlusion of a distal middle cerebral artery branch (MCAo) is a frequently used model in experimental stroke research. This manuscript describes the basic technique of permanent MCAo, combined with the insertion of a lateral cranial window, which offers the opportunity for longitudinal intravital microscopy in mice.

측면 만성 두개골 창 준비 활성화<em&gt; 생체</em&gt; 마우스의 말초 중간 대뇌 동맥 폐색에 따라 관측

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

신경과학

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ischemic in origin and occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA). Currently the only Food and Drug Administration (FDA) approved drug for the treatment of this devastating disease is tissue plasminogen activator (tPA). However, tPA has a small therapeutic window for administration (3 - 6 hr), and is only effective in 4% of the patients who actually receive it. Current research focuses on understanding the pathophysiology of stroke in order to find potential therapeutic targets. Thus, reliable models are crucial, and the MCA occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) is deemed to be the most clinically relevant surgical model of ischemic stroke, and is fairly non-invasive and easily reproducible. Typically the MCAo model is used with rodents, especially with mice due to all the genetic variations available for this species. Here we describe (and present in the video) how to successfully perform the MCAo model (with reperfusion) in mice to generate reliable and reproducible data.

In order to understand the pathophysiology of stroke, it is important to use reliable models. This paper will describe one of the most frequently used stroke models in mice, termed the middle cerebral artery occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) with reperfusion.

마우스의 중간 대뇌 동맥 폐색 및 재관류 유도 스트로크에 대한 수술 적 접근

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of stroke on tissue injury and to evaluate the effectiveness of therapeutic interventions, several experimental models in a variety of species were developed. They include complete global cerebral ischemia, incomplete global ischemia, focal cerebral ischemia, and multifocal cerebral ischemia. The model described in this protocol is based on the middle cerebral artery occlusion (MCAO) and is related to the focal ischemia category. This technique produces consistent focal ischemia in a strictly defined region of the hemisphere and is less invasive than other methods. The procedure described is performed on mice, given the availability of several genetic variants and the high number of tests standardized for mice to aid in the behavioral and neurodeficit evaluation.

We describe a mouse model of stroke induced by the occlusion of the middle cerebral artery using a silicone coated suture. The protocol can be applied to induce permanent occlusion or a temporary ischemia, followed by reperfusion.

경색 지역의 중간 동맥 폐색 기술 및 시각화를 사용하여 마우스의 허혈성 뇌졸중 및 허혈 - 재관류 유도

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...

Experimental Models to Study the Neuroprotection of Acidic Postconditioning Against Cerebral Ischemia

Stroke is one of the leading causes of mortality and disability worldwide, with limited therapeutic approaches. As an endogenous strategy for neuroprotection, postconditioning treatments have proven to be promising therapies against cerebral ischemia. However, complicated procedures and potential safety issues limit their clinical application. To overcome these disadvantages, we have developed acidic postconditioning (APC) as a therapy for experimental focal cerebral ischemia. APC refers to the mild acidosis treatment by inhaling CO2 during reperfusion following ischemia. Here we present two models to execute APC in vitro and in vivo, respectively. The oxygen-glucose deprivation (OGD) treatment of mice and the corticostriatal occlusion and middle cerebral artery occlusion (MCAO) of mice were employed to mimic cerebral ischemia. APC can be simply achieved by transferring brain slices to acidic buffer bubbled with 20% CO2, or by mice inhaling 20% CO2. APC showed significant protective effects against cerebral ischemia, as reflected by tissue viability and brain infarct volume.

Acidic postconditioning protects against cerebral ischemia. Here we present two models to execute APC. They are achieved respectively by transferring corticostriatal slices to acidic buffer after oxygen-glucose deprivation in vitro and by inhaling 20% CO2 after middle cerebral artery occlusion in vivo.

대뇌 허혈에 대한 산성 후행 조절의 신경 보호를 연구하기위한 실험 모델

Stroke is one of the leading causes of mortality and disability worldwide, with limited therapeutic approaches. As an endogenous strategy for ...

Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model

Ischemia followed by reperfusion of cerebral blood flow after a stroke leads to the death of nerve cells and loss of brain tissue. The most commonly used animal model for studying stroke is the middle cerebral artery occlusion (MCAO) model. Previous research studies have reported different infarct sizes even when the same experimental animal species was used under similar MCAO conditions. Therefore, we developed an improved experimental method to address this discrepancy. Mice were subjected to MCAO using a filament as the occlusion material to mimic human stroke conditions and filament thickness was optimized to establish more reproducible infarction volume. Mice treated with a methanol extract of Glycyrrhizae Radix et Rhizome (GRex) following stroke induction showed a significantly decreased total infarction volume and increased number of surviving cells relative to the untreated control group. This modified experimental protocol successfully and reproducibly demonstrated the beneficial effect of GRex on ischemic stroke.

In this study, we modify an existing experimental method to obtain more reproducible results, by establishing a middle cerebral artery occlusion (MCAO) mouse model. Oral administration of Glycyrrhizae Radix et Rhizome (GR) methanol extract (GRex), following stroke induction, significantly decreased total infarction volume relative to the untreated control group.

Glycyrrhizae 기 수의 신경 보호 효과 평가 외 Rhizoma 과도 중간 대뇌 동맥 폐색 마우스 모델을 사용 하 여 추출

Ischemia followed by reperfusion of cerebral blood flow after a stroke leads to the death of nerve cells and loss of brain tissue. The most commonly used ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse model is useful for investigating the pathophysiology of cerebral ischemia-reperfusion and determining potential therapeutic strategies for patients with stroke. Variations in the anatomy of the circle of Willis of C57BL/6 mice affects their infarct volume after cerebral-ischemia-induced injury. Studies have indicated that distal MCA occlusion (MCAO) can overcome this problem and result in a stable infarct size. In this study, we establish a two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion through the interruption of the blood flow to the right MCA. We distally ligate the right MCA and right common carotid artery (CCA) and restore blood flow after a certain period of ischemia. This ischemia-reperfusion injury induces an infarct of stable size and a behavioral deficit. Peripheral immune cells infiltrate the ischemic brain within the 24 h infiltration period. Additionally, the neuronal loss in the cortical area is less for a longer reperfusion duration. Therefore, this two-vessel occlusion model is suitable for investigating the immune response and neuronal recovery during the reperfusion period after cerebral ischemia.

A mouse model of cerebral ischemia-reperfusion is established to investigate the pathophysiology of stroke. We distally ligate the right middle cerebral artery and right common carotid artery and restore blood flow after 10 or 40 min of ischemia.

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. To investigate pathological mechanisms of retinal ischemia, relevant experimental models need to be developed. Anatomically, a main retinal blood supplying vessel is the ophthalmic artery (OpA) and OpA originates from the internal carotid artery of the common carotid artery (CCA). Thus, disruption of CCA could effectively cause retinal ischemia. Here, we established a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion (tBCCAO) to tie the right CCA with 6-0 silk sutures and to occlude the left CCA transiently for 2 seconds via a clamp, and showed that tBCCAO could induce acute retinal ischemia leading to retinal dysfunction. The current method reduces reliance on surgical instruments by only using surgical needles and a clamp, shortens occlusion time to minimize unexpected animal death, which is often seen in mouse models of middle cerebral artery occlusion, and maintains reproducibility of common retinal ischemic findings. The model can be utilized to investigate the pathophysiology of ischemic retinopathies in mice and further can be used for in vivo drug screening.

Here, we describe a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion using simple sutures and a clamp. This model can be useful for understanding the pathological mechanisms of retinal ischemia caused by cardiovascular abnormalities.

과도 양측 공통 경동맥 폐색에 의해 유도된 허혈성 망막 손상의 뮤린 모델

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

중뇌동맥의 폐색에 의한 일과성 대뇌허혈의 모델

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

저자 스포트라이트: 중뇌동맥 폐색 모델을 통한 허혈성 뇌졸중 손상 평가 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

뇌졸중의 일시적인 중뇌동맥 폐색 모델

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...