この作品は、日本学術振興会、CNRS、日本学術振興会科研費助成番号 26860858、ナリシゲ神経科学研究助成の年度 2013年研究交流によって支えられました。有用な議論、夫妻真理子原田芝と塩谷恭子に感謝します。優れたテクニカル サポート恵美田中律子真希、睦坂本マリ古田をありがとうございます。

実験動物の世話と国立脳と循環器病センター、吹田、日本の利用委員会によって承認されたプロトコルに従ってすべての実験を行った。
1. 動植物 MIUH 手術のための材料を準備しなさい
<ol><li>17、妊娠日タイミング妊娠ラットを準備、すなわち胚日 17 (E17)。ダムの平均体重が 307.0 ± 40.7 g (平均 ± SD、 n = 9)。</li>
	<li>金属マイクロ コイル; を準備します。内径 0.24 mm、ゴールド コーティングのスチール製。</li>
	<li>材料表に従ってすべての材料を準備します。</li>
</ol>2. MIUH 手術を準備します。
<ol><li>ラットの配置のための 37 ° C で加熱パッドをウォーム アップします。</li>
	<li>加熱パッドでの滅菌のおむつを配置します。</li>
	<li>37 ° c 水のお風呂で暖かく滅菌生理食塩水</li>
</ol>3. MIUH 手術を行う
<ol><li>無菌条件下での手術の手順を実行します。コイル、鉗子、使用前に 70% アルコールで針を消毒します。滅菌手袋を使用し、時折エタノール スプレーを適用することで消毒します。</li>
	<li>麻酔誘導ボックスにラットを配置します。ボックス (約 5 分) に 4% イソフルランをご紹介します。</li>
	<li>後動物誘導ボックスで麻酔をかけられ徹底的に仰臥位で加熱パッドに滅菌のおむつにラットを配置します。つま先ピンチへの応答の欠乏によって麻酔の深さを確認します。鼻の円錐形を 1.5 から 2.0 パーセント イソフルランを維持します。</li>
	<li>骨盤のアーチ部にへそから腹部脱毛泡を適用します。数分後脱毛泡ペーパー タオルで拭き取ってください。髭剃りは、脱毛フォームの代用として使えます。</li>
	<li>皮膚の depilated 領域にヨード消毒液に浸したガーゼを適用します。</li>
	<li>外科的切開部以外の腹部をカバーする円形開口手術用覆布を配置します。ガーゼのいくつかの部分は、ドレープの代用として使えます。</li>
	<li>手術用メスによる切開約 2.5 cm を作るおへそに向かってまっすぐに恥骨の上端から下腹部に長い。下にある筋層切開を行います。</li>
	<li>滅菌ガーゼのドレープ、開口部の周りのいくつかの部分を置き、温めた生理食塩水とガーゼが濡れています。</li>
	<li>切開部から子宮角の部分が出てくるので、そっと、腹部の両方の側面を押してください。</li>
	<li>70% エタノールで外科医の手を消毒します。</li>
	<li>軽く引いて全体の子宮角腹腔内から手動で鉗子を使用せず。手術用鉗子を使用してお勧めできません、彼らは簡単に変わったり、強く圧縮することにより壊れやすい子宮、胎児血管を損傷があります。</li>
	<li>湿らせたガーゼに子宮角を配置します。</li>
	<li>その他の子宮角の同じ手順を実行します。</li>
	<li>胎児の数をカウントします。</li>
	<li>手術中に子宮を温かくウェット保つために頻繁温めた生理食塩水を適用します。<ol>
<li>それはあまりにも多くの生理食塩水を吸収したときは、おむつを変更します。安定性を維持するために 70% のエタノールとヨウ素の器械のヒント消毒手袋を繰り返します。器械の滅菌のヒントから非滅菌の指を保つことが重要です。</li>
	</ol>
</li>
	<li>顕微鏡下で卵巣と子宮動脈の主なアーケードの近位の部分を識別します。 注: それは胎盤に枝からメインのアーケードを区別するために重要です。子宮角の反転時外科手術より簡単かもしれないことに注意してください。時折、アーケードの非常に近位の部分にコイルを適用することは難しいため、腹腔内の奥深くに位置し、胎盤に動脈が非常にアーケードの近位部分の近くにあります。この場合、コイルは、オフのプロセス最初のブランチ フォーク後アーケードの部分に適用できます。</li>
	<li>鉗子とそれと平行に走る静脈から動脈を分離し、それらの間のスペースを作る。</li>
	<li>動脈の下に文字列 (絹縫合糸 4.0、5 cm の長さ) の作品を配置します。</li>
	<li>動脈を持ち上げたし、壊れやすい静脈から分離、鉗子で文字列の両端を持ち上げます。</li>
	<li>一方で微細鉗子で、病巣の端を持ち、リフトの動脈 (図 2.1) の横にある病巣を配置します。</li>
	<li>リフトの動脈を回転するには、動脈周囲病巣をラップする、病巣の周りの文字列を使用します。動脈動脈 (図 2.2) 周りのコイルを回転するよりもコイルの周りを回転する方が簡単です。</li>
	<li>(コイルがある 5 ターン) 動脈 3 または 4 回転を回転した後、他の端にコイルを開催するサイトを変更します。動脈鉗子でラップされているコイルのエッジを保持します。その文字列リフト動脈コイルの反対側のサイトを変更します。動脈コイルの周りを回転させるので、コイル完全に (5 ターン) ラップ動脈 (図 2.3、2.4)。</li>
	<li>文字列を削除します。</li>
	<li>他の 3 つの動脈の同じ手順を実行します。</li>
	<li>メモ子宮に生理食塩水を温めた頻繁に適用することが重要になります。胎児の死亡率が増加し、低体温症に対する神経保護作用があります。</li>
	<li>腹腔内に子宮角をそっと返します。鉗子で腹壁切開の端を持ち上げる簡単にこの手順をすることができます。</li>
	<li>スティッチ腹部の筋肉と、スティッチ縫合糸 (絹糸 4.0) で腹部の皮膚。それぞれのスティッチ、すなわち単一縫合後縫合糸を結ぶ。</li>
	<li>外科的切開のあちこちにヨード消毒液に浸したガーゼを適用します。</li>
	<li>皮下に 0.5 mg/kg 体重で鎮痛剤メロキシカムを管理します。</li>
	<li>30 分温めケージでの回復を可能にします。チェック動物完全に目を覚まし、ケージの周りに移動する場合は、ホーム ケージに戻ります。</li>
</ol>

<ol>
	<li>Ohshima, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+intrauterine+hypoperfusion+reproduces+neurodevelopmental+disorders+observed+in+prematurity.">Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity.</a> Sci Rep. 6, 39377 (2016).</li><li>Anderson, P., Doyle, L. W., Victorian Infant Collaborative Study, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioral+outcomes+of+school-age+children+born+extremely+low+birth+weight+or+very+preterm+in+the+1990s.">Neurobehavioral outcomes of school-age children born extremely low birth weight or very preterm in the 1990s.</a> JAMA. 289 (24), 3264-3272 (2003).</li><li>Levine, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+childhood+neurodevelopment+after+intrauterine+growth+restriction:+a+systematic+review.">Early childhood neurodevelopment after intrauterine growth restriction: a systematic review.</a> Pediatrics. 135 (1), 126-141 (2015).</li><li>Sucksdorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preterm+Birth+and+Poor+Fetal+Growth+as+Risk+Factors+of+Attention-Deficit/+Hyperactivity+Disorder.">Preterm Birth and Poor Fetal Growth as Risk Factors of Attention-Deficit/ Hyperactivity Disorder.</a> Pediatrics. 136 (3), e599-e608 (2015).</li><li>Volpe, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+injury+in+premature+infants:+a+complex+amalgam+of+destructive+and+developmental+disturbances.">Brain injury in premature infants: a complex amalgam of destructive and developmental disturbances.</a> Lancet Neurol. 8 (1), 110-124 (2009).</li><li>Nardozza, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+growth+restriction:+current+knowledge.">Fetal growth restriction: current knowledge.</a> Arch Gynecol Obstet. 295 (5), 1061-1077 (2017).</li><li>Chang, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preterm+birth+and+the+role+of+neuroprotection.">Preterm birth and the role of neuroprotection.</a> Bmj. 350, g6661 (2015).</li><li>Coq, J. O., Delcour, M., Massicotte, V. S., Baud, O., Barbe, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prenatal+ischemia+deteriorates+white+matter,+brain+organization,+and+function:+implications+for+prematurity+and+cerebral+palsy.">Prenatal ischemia deteriorates white matter, brain organization, and function: implications for prematurity and cerebral palsy.</a> Dev Med Child Neurol. 58, 7-11 (2016).</li><li>Jantzie, L. L., Corbett, C. J., Firl, D. J., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+Erythropoietin+Mitigates+Impaired+Cerebral+Cortical+Development+Following+Subplate+Loss+from+Prenatal+Hypoxia-Ischemia.">Postnatal Erythropoietin Mitigates Impaired Cerebral Cortical Development Following Subplate Loss from Prenatal Hypoxia-Ischemia.</a> Cereb Cortex. 25 (9), 2683-2695 (2015).</li><li>Kubo, K. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+impaired+neuronal+migration+with+cognitive+deficits+in+extremely+preterm+infants.">Association of impaired neuronal migration with cognitive deficits in extremely preterm infants.</a> JCI Insight. 2 (10), (2017).</li><li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+musculoskeletal+and+locomotor+alterations+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia.">Mild musculoskeletal and locomotor alterations in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Int J Dev Neurosci. 29 (6), 593-607 (2011).</li><li>Gilbert, J. S., Babcock, S. A., Granger, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+produced+by+reduced+uterine+perfusion+in+pregnant+rats+is+associated+with+increased+soluble+fms-like+tyrosine+kinase-1+expression.">Hypertension produced by reduced uterine perfusion in pregnant rats is associated with increased soluble fms-like tyrosine kinase-1 expression.</a> Hypertension. 50 (6), 1142-1147 (2007).</li><li>Granger, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+uterine+perfusion+pressure+(RUPP)+model+for+studying+cardiovascular-renal+dysfunction+in+response+to+placental+ischemia.">Reduced uterine perfusion pressure (RUPP) model for studying cardiovascular-renal dysfunction in response to placental ischemia.</a> Methods Mol Med. 122, 383-392 (2006).</li><li>Mazur, M., Miller, R. H., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+erythropoietin+treatment+mitigates+neural+cell+loss+after+systemic+prenatal+hypoxic-ischemic+injury.">Postnatal erythropoietin treatment mitigates neural cell loss after systemic prenatal hypoxic-ischemic injury.</a> J Neurosurg Pediatr. 6 (3), 206-221 (2010).</li><li>Olivier, P., Baud, O., Evrard, P., Gressens, P., Verney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prenatal+ischemia+and+white+matter+damage+in+rats.">Prenatal ischemia and white matter damage in rats.</a> J Neuropathol Exp Neurol. 64 (11), 998-1006 (2005).</li><li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+induced+by+graded+prenatal+systemic+hypoxic-ischemic+insults+in+rats.">Developmental changes induced by graded prenatal systemic hypoxic-ischemic insults in rats.</a> Neurobiol Dis. 18 (3), 568-581 (2005).</li><li>Rice, D., Barone, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+periods+of+vulnerability+for+the+developing+nervous+system:+evidence+from+humans+and+animal+models.">Critical periods of vulnerability for the developing nervous system: evidence from humans and animal models.</a> Environ Health Perspect. 108, 511-533 (2000).</li><li>Basilious, A., Yager, J., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurological+outcomes+of+animal+models+of+uterine+artery+ligation+and+relevance+to+human+intrauterine+growth+restriction:+a+systematic+review.">Neurological outcomes of animal models of uterine artery ligation and relevance to human intrauterine growth restriction: a systematic review.</a> Dev Med Child Neurol. 57 (5), 420-430 (2015).</li><li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroanatomical,+sensorimotor+and+cognitive+deficits+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia.">Neuroanatomical, sensorimotor and cognitive deficits in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Brain Pathol. 22 (1), 1-16 (2012).</li></ol>

著者が明らかに何もありません。

両方の子宮角の卵巣と子宮動脈栓塞狭窄は、すべての胎盤と胎児の一貫性と再現性のある子宮血流の低下を生成します。血流の低下のレベルは、異なる内径マイクロ コイルを使用して変更できます。マイクロ コイル内径 0.24 mm を持つ動脈狭窄したダムから生まれた仔は、IUGR と早産 (詳細については参考 1 を参照) を示しています。子犬は、早産児にみられる症状のような神経解剖学的および行動の変化を示します。これらの神経解剖学的変化、心室の拡大、皮質と脳梁の間伐や脳重量がない明白なセル損失または嚢胞性病変1の減少があります。行動の変化を観察、遅延が含まれます新生児反射、減らされた筋肉強さおよび自発1に変更します。
子宮内の虚血を研究に基づいて重症虚血再灌流と短い期間にわたって動物モデルは頻繁に使用される10,11。卵巣と子宮動脈から形成された動脈アーケードの両端がクリッピングすると、ブロックされている (胎盤と胎児を含む) 子宮角への血液供給が完全に停止します。したがって、クリップの継続時間が短い、する必要があります。 または胎児が死にます。しかし、臨床の現場でその長期にわたる軽度低灌流は、1 時間以内に子宮と完全な回復への血流の急激な封鎖ではなくより頻繁発生可能性があります推測された.
縫合結紮子宮動脈、両側卵巣動脈と大動脈の間のいくつかの内部空間の葉のクリッピングを含むそれらのアーケードの 1 つまたは両方の端を含む齧歯動物モデルは軽度延長ののみ利用可能なモデルをされています。子宮血流の低下13,14,16,19,20。これらの結紮とクリッピング モデルすなわち低再現性を持って、いくつか胎児のみが存続し、血流の低下に苦しみます。子宮頸部と腟に近い位置にある胎児を受けるに対し子宮角の上部すなわち、卵巣に最も近い位置胎児は深遠な虚血に服従する縫合結紮によって卵巣動脈で血液の流れがブロックされると、最小限または12を供給する血液の減少がないです。
プロトコルで 3 つの重要な手順があります。卵巣と子宮動脈の主なアーケードの近位部分を識別することは不可欠です。主な動脈アーケードは、胎盤に多数の枝を持っています。いくつかのこれらの分岐動脈直径の大きい、時々 主要な動脈とほぼ同じ大きさ。したがって、いくつかの他の分枝動脈の中から主要な動脈を区別する混乱することができます。主な動脈アーケードは直径が大きくないことに注意してください。アーケードの横に流れる静脈は動脈よりも直径の数倍大きいです。動脈は、手術の刺激への応答を締めつけにより、狭く、さらになるかもしれません。それと一緒に実行している静脈から動脈を分離する、繊細な作業です。動脈の外膜はアーケードの大半を通じて静脈と連絡を密に、です。静脈出血簡単に鉗子で触れたときこと注意してください。暖かいウェット子宮を維持することです重要です;さもなければ、ダムと胎児苦しむことがありますストレスや、脱水症、何人の胎児は配信前に失われる可能性があります。このコイル狭窄モデル技法の制限が必要な長い手術時間です。約 60 分の期間は、4 つのコイルを適用することによって手術を完了する必要です。この長い手術時間は胎児とダムに追加ストレスを引き起こす可能性があります。
本稿で提示したモデルは MIUH の関連性と再現性の高いモデルで、最も臨床的に考えます。このモデルにより IUGR の MIUH の時間と縦方向の影響の評価。

子宮内の成長の制限 (IUGR) (として知られている胎児発育制限) 児 (出生体重 <妊娠年齢の 10 パーセンタイル)、(< 妊娠 37 週で生まれた)、早産や低出産 (< 2500 g) の重量を占めるすべての新生児2,3のほぼ 10%。これらの幼児の多くは脳性麻痺および発達障害 (注意欠陥/多動性障害 (ADHD) や学習障害など) 3,4,5などの神経学的な問題を呈する。それらの条件の類似性とその病因と成果の違いがあります。IUGR の病因は、多因子性と胎盤機能不全子宮内血流の低下に関連付けられている、非異常胎児7の最も一般的な原因と見なされます。早産の病因は多因子同様、絨毛羊膜炎、最も頻繁な原因8。
脳の発達に軽度子宮内低灌流 (MIUH) の影響は不明です。現在子宮内低灌流/虚血の利用可能な動物モデルは主に重度の低灌流や虚血再灌流9,10,11の有無のグラデーションの明度を含みます。臨床設定でただし、MIUH の場合はそのような厳しい条件を含むものよりもはるかに頻繁に考慮されます。MIUH の現在利用できるモデルは、いずれか、子宮または卵巣動脈および両側卵巣動脈と大動脈の開存性12,13を持つクリップを含む齧歯動物モデルの縫合結紮を含む齧歯動物モデル 14,15,16,17。これらのモデルの欠点の 1 つは深遠な低灌流と胎児から子宮動脈アーケード内での胎児の位置によっては、ほぼ無傷の血流と胎児に至るまで、広範な間胎児変動と卵巣動脈。これらのモデルの別の欠点は誕生後各胎児の位置を区別することはできません。したがって、研究者は生れの後個々 の子犬で経験した子宮内血流の低下の重症度を区別できません。
複数の動脈狭窄1を含む MIUH のラットのモデルを開発しました。ラッピングの卵巣と子宮動脈周囲 0.24 mm の内径の金属マイクロ コイルにより、狭窄がない閉塞、血管 (図 1)。重要なしかし、軽度の減少を誘導する胚日 17 (人間18胚週間 20-25 に相当) に両側の子宮および卵巣動脈、子宮を供給する動脈の近位部でこれらのマイクロ コイルの適用胎盤と胎児への血流。コイルが子宮を供給すべての 4 つの動脈に適用された後、血流の減少はほとんど同じそれぞれの胎盤と胎児の間で。胎児死亡率は 20% 未満です。子犬は、通常よりも 1 〜 2 日以前 (萌芽期日 21-22) 自然分娩で生まれています。展示大幅低出生重み1ほとんどすべての子犬が生まれています。1明白な組織に損傷を与えることがなく、灰色および白い問題のボリュームが減少します。子犬を呈する新生児反射、筋肉の弱さ、および変更された自発1取得が遅れて。このモデルは臨床徴候や症状、IUGR; 途中で生まれる子供を模倣します。子供生まれた早産展示削減グレーと白質容積白質傷害6、存在の有無、神経学的な開発のマイルス トーンを遅延 ADHD 3,5; など行動上の問題が生じるIUGR 児では、最小限の神経解剖学的変化を展示し、運動・認知の遅延4,7など障害の神経学的な開発のリスクが高い。早産・ IUGR は、条件が異なるが、2 つの条件、すなわち完全言葉の妊娠期間前に未熟な脳に侮辱の基本的なメカニズムを共有します。

<table><tbody><tr><td>Stereomicroscope</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane anesthesia machine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia induction box</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heating pad</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Diaper 30x40 cm</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Depilatory foam or shaver</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Iodine disinfectant solution</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gauze 10x20 cm&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgical drape 45x45 cm with a round opening 5 cm in diameter</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spray bottle with ethanol for disinfection</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cotton swab</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forceps with large blunt tips</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forceps with angled fine tips</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scissors</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgical scalpel, blade size is 27mm long (no.10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japan)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgical suture needle</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metal microcoils; inner diameter 0.24 mm, made from gold-coated steel (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japan)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Silk suture 4-0</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sterile saline (0.9% sodium chloride)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heating water bath</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plastic syringes (50ml) and needles (18G)</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

a rat model of mild intrauterine hypoperfusion with microcoil stenosis

子宮内の血流の低下/虚血は子宮内/胎児の成長阻害、早産、低出生体重の主要な原因の一つです。重度の子宮内の虚血のいずれかのモデルまたは子宮内低灌流のグラデーションの明度を持つモデルではこの現象のほとんどの研究を行った。制服軽度子宮内低灌流 (MIUH) のモデルの研究が行われていません。2 つのモデルは、MIUH の研究に使用されている: 子宮および卵巣動脈と動脈アーケードのいずれかの側の縫合結紮に基づくモデルを形成し、両側卵巣動脈と大動脈の開存性を持つクリップに基づく非定常モデル。これら 2 つの齧歯動物モデル MIUH いくつかの制限があります、すべての胎児が子宮角の位置によって MIUH にさらされるなど。MIUH モデルでは、すべての胎児が子宮内低灌流の対等なレベルにさらされます。MIUH は、すべて 4 動脈、子宮をすなわち、餌両側子宮および卵巣動脈の狭窄によって達成されました。
栄養動脈を包んだ金属マイクロ コイルによる動脈の狭窄。マイクロ コイルを制御、最適化、および非常に少しの間動物変動と低死亡率減少した血流を再現することができましたと動脈狭窄を生産、したがって正確な評価を有効にします。0.24 mm の内径マイクロ コイルを用いて, 胎盤と胎児の血流だった穏やか (胎盤の前狭窄レベルから約 30%) 減少します。MIUH モデルの子孫は、明確に神経学的な解剖学的および行動テスト結果の長期的な変化を示します。

すなわち、子宮を栄養動脈、両側の子宮および卵巣動脈のすべてにマイクロ コイルを適用した後すべての胎児が低灌流の対等なレベルにさらされます。0.24 mm の内径のマイクロ コイルのアプリケーションを引き起こすそれにより胎盤と胎児への血流の軽度低下を引き起こすそれらの動脈の狭窄 (図 3; 胎盤で前狭窄レベルから約 30% を参照してください詳細については 1 を参照)。ダムから生まれた子犬は、IUGR (表 1) を示しています。
ダムは、手術後、数日中に性的と思われます。それ以外は、ダム顕著な合併症を提示していない、手術後 1 週間で完全に回復。ダムは配信後に長い時間のために生きることが (死亡率は観察のための 0% 期間)、看護師の子犬に。コイルは、同じ場所に残ります。
テーブル 1。身体の重み (生後 0 日、P0) 出生時と日 P6 8 だった胚日 29 (E29) に相当します。いいえ手術群で子犬を生まれた E23、偽手術群では 1 日早く (E22); を生まれたに対し1 2 日前 (E21-22) 自然分娩で生まれた軽度子宮内低灌流 (MIUH) 群。したがって、E29 ました P6 P8 に子犬の妊娠期間によります。(n = 8-14 グループごとに、各セックスと時間の各ポイントのために) *P < なし手術対 0.01 制御グループとして偽手術群。一方通行 ANOVA、テューキー Kramer テストが続きます。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56723/56723fig1.jpg"> 図 1。子宮の解剖学的動脈システムのスキーマします。両側の卵巣と子宮動脈の動脈を上流の周り 4 マイクロ コイルを設置されました。点線の矢印は、動脈血の流れの方向を示します。この図は、私たちの前の文書1から変更されています。<a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56723/56723fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56723/56723fig2.jpg"> 図 2。動脈をコイルのアプリケーションの例です。1. 文字列で動脈を持ち上げます。横動脈栓塞を配置します。2、病巣周囲の動脈を回転によって、病巣は動脈周囲ラップされます。3 (コイルが 5 ターン) 動脈 3 または 4 回転を回転した後、他の端にコイルを開催するサイトを変更します。一緒に鉗子を用いた動脈コイルのエッジを保持します。その文字列リフト動脈コイルの反対側のサイトを変更します。4. コイル周辺動脈の回転、コイル完全に (5 ターン) ラップ動脈。<a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56723/56723fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56723/56723fig3.jpg"> 図 3。子宮の代表的な画像制作レーザー レーザースペックル血流計1.この画像は、コイル狭窄が左の卵巣と子宮動脈で実行された後に左子宮角が右、減少した血流を示します。*: アーケードの卵巣と子宮動脈の狭窄がコイルの場所上部のアスタリスクは卵巣動脈の近位部に対応し、低いものが子宮動脈の近位部分に相当します。点線は、左子宮角の卵巣と子宮動脈のアーケードを示します。赤みを帯びた色は、青みがかった色を示す以下の血流に対しより多くの血流を示します。<a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56723/56723fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

Watch this Scientific Journal Video about A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis at JoVE.com

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

軽度子宮内血流の低下は、17 日ラットの子宮および卵巣動脈を包んだ金属マイクロ コイルを動脈狭窄によって製作されました。この手順は、出生前の低灌流と子宮内胎児発育制限を生産しました。

栓塞狭窄軽度子宮内血流の低下のモデルラット

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

a-rat-model-of-mild-intrauterine-hypoperfusion-with-microcoil-stenosis

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Neuroscience

10.2K ビュー.  National Cerebral and Cardiovascular Center. 軽度子宮内血流の低下は、17 日ラットの子宮および卵巣動脈を包んだ金属マイクロ コイルを動脈狭窄によって製作されました。この手順は、出生前の低灌流と子宮内胎児発育制限を生産しました。

ビデオ: A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

The Hypoxic Ischemic Encephalopathy Model of Perinatal Ischemia

Hypoxic-Ischemic Encephalopathy (HIE) is the consequence of systemic asphyxia occurring at birth. Twenty five percent of neonates with HIE develop severe and permanent neuropsychological sequelae, including mental retardation, cerebral palsy, and epilepsy. The outcomes of HIE are devastating and permanent, making it critical to identify and develop therapeutic strategies to reduce brain injury in newborns with HIE. To that end, the neonatal rat model for hypoxic-ischemic brain injury has been developed to model this human condition. The HIE model was first validated by Vannucci et al 1 and has since been extensively used to identify mechanisms of brain injury resulting from perinatal hypoxia-ischemia 2 and to test potential therapeutic interventions 3,4. The HIE model is a two step process and involves the ligation of the left common carotid artery followed by exposure to a hypoxic environment. Cerebral blood flow (CBF) in the hemisphere ipsilateral to the ligated carotid artery does not decrease because of the collateral blood flow via the circle of Willis; however with lower oxygen tension, the CBF in the ipsilateral hemisphere decreases significantly and results in unilateral ischemic injury. The use of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to stain and identify ischemic brain tissue was originally developed for adult models of rodent cerebral ischemia 5, and is used to evaluate the extent of cerebral infarctin at early time points up to 72 hours after the ischemic event 6. In this video, we demonstrate the hypoxic-ischemic injury model in postnatal rat brain and the evaluation of the infarct size using TTC staining.

The postnatal rat model for hypoxic-ischemic brain injury is a well-established model of human neonatal hypoxic ischemic encephalopathy (HIE). In this article, we describe the model of HIE in post-natal rat pups.

周産期虚血低酸素虚血性脳症モデル

Hypoxic-Ischemic Encephalopathy (HIE) is the consequence of systemic asphyxia occurring at birth. Twenty five percent of neonates with HIE develop severe ...

生物学

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ultrasound and fetal echocardiography. Increasingly, these imaging modalities are being employed clinically to examine cardiac function and assess wellbeing in utero, thereby guiding timing of birth decisions. Here, we used a rabbit model of IUGR that allows analysis of cardiac function in a clinically relevant way. Using isoflurane induced anesthesia, IUGR is surgically created at gestational age day 25 by performing a laparotomy, exposing the bicornuate uterus and then ligating 40-50% of uteroplacental vessels supplying each gestational sac in a single uterine horn. The other horn in the rabbit bicornuate uterus serves as internal control fetuses. Then, after recovery at gestational age day 30 (full term), the same rabbit undergoes examination of fetal cardiac function. Anesthesia is induced with ketamine and xylazine intramuscularly, then maintained by a continuous intravenous infusion of ketamine and xylazine to minimize iatrogenic effects on fetal cardiac function. A repeat laparotomy is performed to expose each gestational sac and a microultrasound examination (VisualSonics VEVO 2100) of fetal cardiac function is performed. Placental insufficiency is evident by a raised pulsatility index or an absent or reversed end diastolic flow of the umbilical artery Doppler waveform. The ductus venosus and middle cerebral artery Doppler is then examined. Fetal echocardiography is performed by recording B mode, M mode and flow velocity waveforms in lateral and apical views. Offline calculations determine standard M-mode cardiac variables, tricuspid and mitral annular plane systolic excursion, speckle tracking and strain analysis, modified myocardial performance index and vascular flow velocity waveforms of interest. This small animal model of IUGR therefore affords examination of in utero cardiac function that is consistent with current clinical practice and is therefore useful in a translational research setting.

We describe examination of fetal cardiac function with contemporary functional fetal echocardiography and fetoplacental Doppler ultrasound using the VisualSonics VEVO 2100 microultrasound in a surgically induced model of intrauterine fetal growth restriction in a rabbit.

胎児心エコー検査と子宮内発育制限のウサギモデルにおけるパルス波ドップラー超音波

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

医学

Transuterine Fetal Tracheal Occlusion Model in Mice

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). Following TO, retention of the secreted epithelial fluid increases luminal pressure and induces lung growth. Various animal models have been defined to understand the pathophysiology of CDH and TO. All have their own advantages and disadvantages such as the difficulty of the technique, the size of the animal, cost, high mortality rates, and the availability of genetic tools. Herein, a novel transuterine model of murine fetal TO is described. Pregnant mice were anesthetized, and the uterus exposed via a midline laparotomy. The trachea of selected fetuses were ligated with a single transuterine suture placed behind the trachea, one carotid artery, and one jugular vein. The dam was closed and allowed to recover. Fetuses were collected just before parturition. Lung to body weight ratio in TO fetuses was higher than that in control fetuses. This model provides researchers with a new tool to study the impact of both TO and increased luminal pressure on lung development.

Various animal models of congenital diaphragmatic hernia and fetal tracheal occlusion present advantages and disadvantages regarding ethical issues, cost, surgical difficulty, size, survival rates, and availability of genetic tools. This model provides a new tool to study the impact of both tracheal occlusion and increased luminal pressure on lung development.

マウスにおける胎児の気管咬合モデル

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). ...

発生生物学

Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis

Deep vein thrombosis (DVT) and its devastating complication, pulmonary embolism, are a severe health problem with high mortality. Mechanisms of thrombus formation in veins remain obscure. Lack of mobility (e.g., after surgery or long-haul flights) is one of the main factors leading to DVT. The pathophysiological consequence of the lack of mobility is blood flow stagnation in venous valves. Here, a model is described that mimics such flow disturbance as a thrombosis-driving factor. In this model, partial flow restriction (stenosis) in the inferior vena cava (IVC) is created. Closure of about 90% of the IVC lumen for 48 h results in development of thrombi structurally similar to those in humans. The similarities are: i) most of the thrombus volume is red, i.e., consists of red blood cells and fibrin, ii) presence of a white part (lines of Zahn), iii) non-denuded endothelial monolayer, iv) elevated plasma D-Dimer levels, and v) possibility to prevent thrombosis by low molecular weight heparin. Limitations include variable size of thrombi and the fact that a certain percentage of wild-type mice (0 - 35%) may not produce a thrombus. In addition to visual observation and measurement, thrombi may be visualized by non-invasive technologies, such as ultrasonography, which allows for monitoring the dynamics of thrombus development. At shorter time points (1 - 6 h), intravital microscopy may be applied to directly observe events (e.g., recruitment of cells to the vessel wall) preceding thrombus formation. Use of this method by several teams around the world has made it possible to uncover basic mechanisms of DVT initiation and identify potential targets that might be beneficial for its prevention.

We describe here stenosis in the inferior vena cava as a murine model of deep vein thrombosis. This model recapitulates blood flow restriction, one of the major triggers of venous thrombosis in humans.

下大静脈狭窄: 深部静脈血栓症のマウスモデル

Deep vein thrombosis (DVT) and its devastating complication, pulmonary embolism, are a severe health problem with high mortality. Mechanisms of thrombus ...

免疫・感染学

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature and mature brain. Stroke occurs commonly in the perinatal period in humans, and transient ischemia-reperfusion is the most common form of stroke in neonates. The reperfusion phase is a critical component of injury progression, which occurs over a period of days to weeks, and of the endogenous response to injury. This postnatal day 10 (p10) rat model of transient middle cerebral artery occlusion (tMCAO) creates a unilateral, non-hemorrhagic focal ischemia-reperfusion injury that can be utilized to study the mechanisms of focal injury and repair in the full-term-equivalent brain. The injury pattern that is produced by tMCAO is consistent and highly reproducible and can be confirmed with MRI or histological analyses. The severity of injury can be manipulated through changes in occlusion time and other methods that will be discussed.

Neonatal stroke is a significant cause of early brain injury requiring a translational model with consistent focal injury patterns and high reproducibility in order to enable study. This study describes the detailed surgical procedure for creating a non-hemorrhagic, unilateral focal ischemia-reperfusion injury in full-term-equivalent rodents.

P10ラットにおける新生児脳卒中の一過性中大脳動脈閉塞モデル

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ligation of the inferior vena cava (IVC) in the outflow of the fistula, mimicking central venous stenosis. Technical aspects of this model are introduced. The aorta and IVC are exposed, following an abdominal incision. The infra-renal aorta and IVC are dissected for proximal clamping, and the distal aorta is exposed for puncture. The IVC at the midpoint between the left renal vein and the aortic bifurcation is carefully dissected to place an 8-0 suture beneath the IVC. After clamping the aorta and IVC, an AVF is created by puncturing the infra-renal aorta through both walls into the IVC with a 25 G needle, followed by ligating a 22 G intra-venous (IV) catheter and IVC together. The catheter is then removed, creating a reproducible venous stenosis without occlusion. The aorta and IVC are unclamped after confirming primary hemostasis. This novel model of central vein stenosis is easy to perform, reproducible, and will facilitate studies on AVF failure.

An aortocaval fistula was created by puncturing the murine infra-renal aorta through both walls into the inferior vena cava and was followed by creation of a stenosis in its outflow via partial ligation of the inferior vena cava. This reproducible model can be used to study central venous stenosis.

流出狭窄を伴う大軌道瘻を用した中枢静脈狭窄のマウスモデル

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Real-Time Assessment of Spinal Cord Microperfusion in a Porcine Model of Ischemia/Reperfusion

Spinal cord injury is a devastating complication of aortic repair. Despite developments for the prevention and treatment of spinal cord injury, its incidence is still considerably high and therefore, influences patient outcome. Microcirculation plays a key role in tissue perfusion and oxygen supply and is often dissociated from macrohemodynamics. Thus, direct evaluation of spinal cord microcirculation is essential for the development of microcirculation-targeted therapies and the evaluation of existing approaches in regard to spinal cord microcirculation. However, most of the methods do not provide real-time assessment of spinal cord microcirculation. The aim of this study is to describe a standardized protocol for real-time spinal cord microcirculatory evaluation using laser-Doppler needle probes directly inserted in the spinal cord. We used a porcine model of ischemia/reperfusion to induce deterioration of the spinal cord microcirculation. In addition, a fluorescent microsphere injection technique was used. Initially, animals were anesthetized and mechanically ventilated. Thereafter, laser-Doppler needle probe insertion was performed, followed by the placement of cerebrospinal fluid drainage. A median sternotomy was performed for exposure of the descending aorta to perform aortic cross-clamping. Ischemia/reperfusion was induced by supra-celiac aortic cross-clamping for a total of 48 min, followed by reperfusion and hemodynamic stabilization. Laser-Doppler Flux was performed in parallel with macrohemodynamic evaluation. In addition, automated cerebrospinal fluid drainage was used to maintain a stable cerebrospinal pressure. After completion of the protocol, animals were sacrificed, and the spinal cord was harvested for histopathological and microsphere analysis. The protocol reveals the feasibility of spinal cord microperfusion measurements using laser-Doppler probes and shows a marked decrease during ischemia as well as recovery after reperfusion. Results showed comparable behavior to fluorescent microsphere evaluation. In conclusion, this new protocol might provide a useful large animal model for future studies using real-time spinal cord microperfusion assessment in ischemia/reperfusion conditions.

Spinal cord microcirculation plays a pivotal role in spinal cord injury. Most methods do not allow real-time assessment of spinal cord microcirculation, which is essential for the development of microcirculation-targeted therapies. Here, we propose a protocol using Laser-Doppler-Flow Needle probes in a large animal model of ischemia/reperfusion.

イシュ血症/再灌流の豚モデルにおける脊髄微小灌流のリアルタイム評価

Spinal cord injury is a devastating complication of aortic repair. Despite developments for the prevention and treatment of spinal cord injury, its ...

Myocardial Infarction by Percutaneous Embolization Coil Deployment in a Swine Model

Myocardial infarction (MI) is the leading cause of mortality worldwide. Despite the use of evidence-based treatments, including coronary revascularization and cardiovascular drugs, a significant proportion of patients develop pathological left-ventricular remodeling and progressive heart failure following MI. Therefore, new therapeutic options, such as cellular and gene therapies, among others, have been developed to repair and regenerate injured myocardium. In this context, animal models of MI are crucial in exploring the safety and efficacy of these experimental therapies before clinical translation. Large animal models such as swine are preferred over smaller ones due to the high similarity of swine and human hearts in terms of coronary artery anatomy, cardiac kinetics, and the post-MI healing process. Here, we aimed to describe an MI model in pig by permanent coil deployment. Briefly, it comprises a percutaneous selective coronary artery cannulation through retrograde femoral access. Following coronary angiography, the coil is deployed at the target branch under fluoroscopic guidance. Finally, complete occlusion is confirmed by repeated coronary angiography. This approach is feasible, highly reproducible, and emulates the pathogenesis of human non-revascularized MI, avoiding the traditional open-chest surgery and the subsequent postoperative inflammation. Depending on the time of follow-up, the technique is suitable for acute, sub-acute, or chronic MI models.

Myocardial infarction (MI) animal models that emulate the natural process of the disease in humans are crucial to understanding pathophysiological mechanisms and testing the safety and efficacy of new emergent therapies. Here, we describe an MI swine model created by deploying a percutaneous embolization coil.

豚モデルにおける経皮塞栓コイル展開による心筋梗塞

Myocardial infarction (MI) is the leading cause of mortality worldwide. Despite the use of evidence-based treatments, including coronary revascularization ...

Early Pathological and Magnetic Resonance Detection of Cerebral Injury Using a Rat Model of Neonatal Hypoxic Ischemic Encephalopathy

Perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) is an acute disease that may afflict newborns, resulting in variable long- and short-term neurodevelopmental outcomes. Early diagnosis is critical to identifying infants who may benefit from intervention; however, early diagnosis relies heavily on clinical criteria. No molecular or radiological tests have shown promise in detecting early cerebral injury. Studies have shown that magnetic resonance imaging (MRI) can show changes in both blood flow/ischemia and metabolic disruption. However, they have all been used to evaluate the secondary phase of the disease (&gt;12 h) after the onset of the injury. Early diagnosis is critical to rapidly starting therapeutic hypothermia in eligible infants, which is currently recommended to be initiated within 6 h of birth. The rat model of hypoxic-ischemic injury was developed in 1981 and has been validated and used extensively to study changes in brain perfusion, cerebral injury markers, and morphology. However, it has primarily been used as a "late model", evaluating injury several days after the initial ischemic insult. The model has been known to have poor sensitivity in evaluating reliable and reproducible early cerebral changes. The objective of this study was to develop a reliable model to study early gross morphological and radiological markers of HIE using pathological staining and cerebral magnetic resonance imaging/magnetic resonance spectroscopy.

The present protocol describes a rodent model of newborn hypoxic-ischemic injury for identifying early changes in cerebral tissue by gross morphology and magnetic resonance imaging. This has benefits over existing models, which can be used to study late injury but do not allow the evaluation of reproducible early changes.

Perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) is an acute disease that may afflict newborns, resulting in variable long- and short-term ...

圧力過負荷誘発性心不全を研究するための上行大動脈バンディング

A Minimally Invasive Model of Aortic Stenosis in Swine

Large animal models of heart failure play an essential role in the development of new therapeutic interventions due to their size and physiological similarities to humans. Efforts have been dedicated to creating a model of pressure-overload induced heart failure, and ascending aortic banding while still supra-coronary and not a perfect mimic of aortic stenosis in humans, closely resembling the human condition.
The purpose of this study is to demonstrate a minimally invasive approach to induce left ventricular pressure overload by placing an aortic band, precisely calibrated with percutaneously introduced high-fidelity pressure sensors. This method represents a refinement of the surgical procedure (3Rs), resulting in homogenous trans-stenotic gradients and reduced intragroup variability. Additionally, it enables swift and uneventful animal recovery, leading to minimal mortality rates. Throughout the study, animals were followed for up to 2 months after surgery, employing transthoracic echocardiography and pressure-volume loop analysis. However, longer follow-up periods can be achieved if desired. This large animal model proves valuable for testing new drugs, particularly those targeting hypertrophy and the structural and functional alterations associated with left ventricular pressure overload.

著者スポットライト:信頼性と再現性のある心血管研究のための低侵襲大動物モデルの開発 

This protocol describes a minimally invasive surgical procedure for ascending aortic banding in swine.

ブタの大動脈弁狭窄症の低侵襲モデル

Large animal models of heart failure play an essential role in the development of new therapeutic interventions due to their size and physiological ...