Sviluppo di un modello di lesione della cuffia dei rotatori di tipo cronico di coniglio per lo studio della fibrosi e della degenerazione grassa muscolare

Questo protocollo dimostra una tecnica chirurgica complessa per indurre una lesione della cuffia dei rotatori di tipo cronico nei conigli ed è utile nello studio della patogenesi della cuffia dei rotatori e nello sviluppo di terapie rigenerative. I conigli sono modelli animali di taglia medio-grande che sono facili da alloggiare logisticamente, manipolare chirurgicamente e mostrano alti livelli di degenerazione grassa del muscolo della cuffia dei rotatori quando feriti, simili agli esseri umani. Il modello di lesione sottoscapolare mostrato qui è anatomicamente analogo al complesso muscolare del tendine osseo sovraspinato, una delle unità della cuffia dei rotatori più frequentemente lesionate.

Per iniziare, preparare la finestra chirurgica rasando il sito di incisione previsto di un coniglio anestetizzato. Utilizzando dei cotton fioc, pulire l'area con tre applicazioni alternate di Betadine e alcol al 70% con movimenti circolari. Somministrare 20 milligrammi per chilogrammo di cefalexina per via intramuscolare come agente anti-infettivo profilattico.

Fai un'incisione cutanea di tre o quattro centimetri al di sotto della clavicola, dividi l'intervallo deltopettorale usando una forbice e ritrai per accedere alla spalla. Per localizzare l'unità tendinea del muscolo sottoscapolare, identificare prima il muscolo coracobrachiale. Quindi identificare il tendine sottoscapolare e inserire una pinza ad angolo retto per esporre l'intero tendine al suo inserimento sulla tuberosità minore dell'omero.

Isolare il tendine del muscolo sottoscapolare. Dopo aver somministrato l'analgesico pre-operatorio localmente vicino al sito di transezione, avvolgere l'unità tendinea del muscolo sottoscapolare in un tubo penrose a base di silicone per prevenire l'adesione indesiderata ai tessuti circostanti e favorire il successivo recupero dei tessuti. Per indurre la lesione, creare una transezione a tutto spessore in corrispondenza della giunzione del tendine muscolare utilizzando un bisturi chirurgico numero 11.

Se necessario, fermare l'emorragia esercitando pressione con un pezzo di garza e utilizzare soluzione fisiologica per irrigare la ferita secondo necessità. Per chiudere la ferita, utilizzare una sutura 4-0 all'acido poliglicolico per riapprossimare il tessuto muscolare deltoide e una sutura 4-0 in nylon o seta per chiudere la ferita cutanea, seguita dalla pulizia della ferita. Somministrare 0,03 milligrammi per chilogrammo di buprenorfina per via sottocutanea come analgesico una volta subito dopo l'intervento chirurgico e due volte al giorno per le successive 48 ore.

L'analisi istologica del modello di lesione della cuffia dei rotatori di tipo cronico a quattro settimane è mostrata in questa figura. La colorazione H&E ha confermato la perdita di cellularità e organizzazione muscolare, che è stata sostituita con un gran numero di adipociti nei muscoli sottoscapolari danneggiati rispetto al gruppo di controllo. La quantificazione della percentuale di accumulo di grasso muscolare danneggiato è presentata in questa figura.

La colorazione tricromica di Masson ha anche confermato l'atrofia muscolare e la disposizione disorganizzata delle fibre di collagene nei muscoli sottoscapolari danneggiati rispetto al gruppo di controllo. La quantificazione della proporzione di tessuto muscolare e fibrotico è mostrata in questa figura. La valutazione ha mostrato una riduzione della cellularità muscolare per i muscoli sottoscapolari lesionati rispetto al gruppo di controllo.

Un alto grado di fibrosi è stato osservato anche nei muscoli sottoscapolari lesionati. L'identificazione del tendine sottoscapolare e l'avvolgimento dell'unità tendinea del muscolo sottoscapolare in un tubo penrose sono i passaggi più importanti di questa procedura. A seguito di questa procedura, può essere applicato un intervento terapeutico.

In questo caso, le analisi qui descritte, insieme a un'ulteriore miografia o analisi del cammino, possono essere utilizzate per valutare l'esito dell'intervento. Questa tecnica è fondamentale per aiutare i ricercatori nello studio della fisiopatologia della cuffia dei rotatori, oltre a facilitare lo sviluppo di nuove terapie per la riparazione e la rigenerazione dei tendini muscolari.