Desarrollo de un modelo de lesión crónica del manguito rotador de conejo para el estudio de la fibrosis y la degeneración grasa muscular

Este protocolo demuestra una técnica quirúrgica compleja para inducir una lesión crónica del manguito rotador en conejos, y es útil para estudiar la patogénesis del manguito rotador y desarrollar terapias regenerativas. Los conejos son modelos animales medianos a grandes que son fáciles de alojar logísticamente, manipular quirúrgicamente y muestran altos niveles de degeneración grasa del músculo del manguito rotador cuando se lesionan, similar a los humanos. El modelo de lesión subescapular que se muestra aquí es anatómicamente análogo al complejo muscular del tendón óseo supraespinoso, una de las unidades del manguito rotador que se lesionan con mayor frecuencia.

Para comenzar, prepare la ventana quirúrgica afeitando el sitio de incisión previsto de un conejo anestesiado. Con hisopos de algodón, limpie el área con tres aplicaciones alternas de Betadine y alcohol al 70% con movimientos circulares. Administrar 20 miligramos por kilogramo de cefalexina por vía intramuscular como agente antiinfeccioso profiláctico.

Haga una incisión de tres a cuatro centímetros en la piel por debajo de la clavícula, divida el intervalo deltopectoral con una tijera y retraiga para acceder al hombro. Para localizar la unidad tendinosa del músculo subescapular, primero identifique el músculo coracobraquial. A continuación, identifique el tendón subescapular e inserte una pinza en ángulo recto para exponer todo el tendón en su inserción en la tuberosidad menor del húmero.

Aísla el tendón del músculo subescapular. Después de administrar analgésico prequirúrgico localmente cerca del sitio de la transección, envuelva la unidad tendinosa del músculo subescapular en un tubo de Penrose a base de silicona para evitar la unión no deseada a los tejidos circundantes y ayudar a la posterior recuperación del tejido. Para inducir una lesión, cree una transección de espesor completo en la unión músculo-tendinosa con un bisturí quirúrgico número 11.

Cuando sea necesario, detenga el sangrado aplicando presión con un trozo de gasa y use solución salina para irrigar la herida según sea necesario. Para cerrar la herida, use una sutura de ácido poliglicólico 4-0 para reaproximar el tejido muscular deltoides y una sutura de nailon o seda 4-0 para cerrar la herida de la piel, seguida de una limpieza de la herida. Administrar 0,03 miligramos por kilogramo de buprenorfina por vía subcutánea como analgésico una vez inmediatamente después de la cirugía y dos veces al día durante las siguientes 48 horas.

En esta figura se muestra el análisis histológico del modelo de lesión crónica del manguito rotador a las cuatro semanas. La tinción de H&E confirmó la pérdida de celularidad y organización muscular, que fue reemplazada por un gran número de adipocitos en los músculos subescapulares lesionados en relación con el grupo control. En esta figura se presenta la cuantificación del porcentaje de acumulación de grasa muscular lesionada.

La tinción tricrómica de Masson también confirmó la atrofia muscular y la disposición desorganizada de las fibras de colágeno en los músculos subescapulares lesionados en relación con el grupo de control. La cuantificación de la proporción de tejido muscular y fibrótico se muestra en esta figura. La evaluación mostró una reducción en la celularidad muscular de los músculos subescapulares lesionados en relación con el grupo control.

También se observó un alto grado de fibrosis en los músculos subescapulares lesionados. La identificación del tendón subescapular y la envoltura de la unidad del tendón del músculo subescapular en un tubo de Penrose son los pasos más importantes de este procedimiento. Después de este procedimiento, se puede aplicar una intervención terapéutica.

En este caso, los análisis descritos aquí, junto con la miografía adicional o el análisis de la marcha, se pueden utilizar para evaluar el resultado de la intervención. Esta técnica es crucial para ayudar a los investigadores en el estudio de la fisiopatología del manguito rotador, así como para facilitar el desarrollo de nuevas terapias para la reparación y regeneración de los tendones musculares.