Il nostro metodo fornisce un modello per indagare come le emozioni vengono digerite simulando il processo di digestione in una singola goccia di aquas, che viene coperta da emulsionante e immersa in fase oleosa. Possiamo valutare l'impatto di diversi emulsionanti e l'azione di diversi componenti digestivi e progettare interfacce in grado di resistere o ritardare la digestione in diverse posizioni all'interno del tratto gastrointestinale. Possiamo misurare la tensione interfacciale in C2 durante l'intero processo di digestione simulato e l'elasticità e la viscosità dello strato interfacciale alla fine della fase di digestione.
Le concentrazioni e le condizioni della digestione possono essere adattate alle esigenze dell'esperimento, e questo può essere applicato sequenzialmente, o contemporaneamente permettendo di valutare sinergismo ed effetti cumulativi. E lavoriamo con una singola goccia, quindi abbiamo bisogno di una quantità molto bassa di campione, e abbiamo un controllo ad alta precisione delle variabili sperimentali. Abbiamo applicato questa tecnica per progettare una strategia per prendere il sopravvento.
Uno di questi approcci è quello di progettare nello strato fossile che ritira o riceve il processo di lipolisi. Un altro approccio è l'uso di innovatori della lipasi e abbiamo studiato il meccanismo d'azione interfacciale della lipasi. Questo dispositivo è stato originariamente sviluppato per studiare la digestione in vitro.
Tuttavia, può essere utilizzato per lo studio mono e l'interazione con i lipidi, e può anche essere applicato per studiare automaticamente la microconcentrazione critica. La tecnica sperimentale è accessibile. Un ricercatore manuale è stato addestrato a usarlo in una settimana.
È necessario pulire accuratamente l'apparecchiatura e purificare i campioni e l'olio per prevenire la presenza di contaminanti attivi superficiali. È necessario acquisire familiarità con il computer del software e imparare a controllare le luci e la posizione delle capacità e sbarazzarsi di minuscole bolle. Per iniziare, goccia d'acqua formale per controllare la tensione superficiale dell'acqua a temperatura ambiente.
Imposta la densità differenziale dell'acqua dell'aria nella finestra di dialogo a sinistra e misura la tensione superficiale in tempo reale. per cinque minuti. Riempire la cuvetta pulita con almeno 0,002 litri di olio vegetale pulito e posizionarla nel supporto della cuvetta nella cella termostatica.
Impostare la densità differenziale all'acqua dell'olio vegetale e iniettare 40 microlitri ad una velocità di 0,5 microlitri al secondo. Misurare la tensione in tempo reale ogni secondo fino alla fine dell'iniezione. Questo è un semplice processo dinamico.
Quindi, salvare i dati e tracciare la tensione interfacciale in funzione del volume delle goccioline e di una scheda tecnica. Verificare che l'intervallo di volume delle gocce fornisca un valore per la tensione interfacciale indipendente dal volume delle gocce per l'acqua pulita. Tracciare l'area interfacciale in funzione del volume delle gocce.
Questa curva verrà utilizzata in seguito per abbinare il volume con l'area interfacciale corrispondente. Con la siringa sinistra, iniettare il volume entro l'intervallo di tensione interfacciale costante e registrare la tensione interfacciale per cinque minuti. Questo per verificare l'assenza di componenti tensioattivi nel sistema.
Per eseguire il controllo iniziale, iniettare circa 10 microlitri della soluzione emulsionante nel capillare per la formazione di gocce e registrare l'assorbimento in un'area interfacciale costante di circa 20 millimetri quadrati per un'ora. I valori esatti di volume e area possono essere ottenuti dalla curva di calibrazione tracciata in precedenza. Programmare la reologia diluitiva impostando l'ampiezza dell'oscillazione a 1,25 microlitri nel periodo a 10 secondi.
Quindi programmare l'assorbimento nell'area interfacciale selezionata per 10 secondi. Successivamente, per registrare il programma di digestione gastrica l'assorbimento nell'area interfacciale selezionata per 10 secondi. Riempire la siringa sinistra con il liquido della valvola due.
Iniettare 125 microlitri dalla valvola due a cinque microlitri al secondo con la siringa sinistra e contemporaneamente estrarre lo stesso volume alla stessa velocità con la siringa destra. Questa è una visualizzazione del processo di scambio di sottofase dell'acqua con il blu di metilene. Scaricare la siringa destra per uscire dalla valvola otto e caricare nuovamente la siringa sinistra con il liquido della valvola due.
Ripetere questi due passaggi 10 volte per assicurare lo scambio completo della sottofase con liquido e valvola due ed enzimi gastrici. Quindi, registrare l'assorbimento nell'area interfacciale selezionata per un'ora e registrare la reologia diluitiva come mostrato in precedenza. Per registrare la digestione intestinale dopo aver registrato l'assorbimento nell'area interfacciale selezionata, riempire la siringa sinistra con liquido dalla valvola tre e seguire gli stessi passaggi mostrati in precedenza per registrare la digestione gastrica.
Allo stesso modo, per registrare il desorbimento, dopo aver registrato l'assorbimento nell'area interfacciale selezionata, riempire la siringa sinistra con il liquido della valvola cinque e ripetere il resto dei passaggi utilizzati per registrare la digestione gastrica. Riempire i tubi della microcentrifuga con il mezzo di digestione artificiale e collegare ciascuno di essi alla rispettiva valvola tramite il tubo corrispondente. Riempire il tubo nelle valvole da due a otto pulendo dalla valvola due, dalla valvola tre, dalla valvola quattro e dalla valvola cinque fino all'uscita esterna che è la valvola otto.
Riempire il tubo nella valvola uno pulendo dalla valvola uno alla valvola sei capillari cinque volte. Posizionare il capillare nella fase oleosa e caricare la siringa sinistra con la valvola uno. Inizia a elaborare in sequenza il controllo iniziale della digestione gastrica, della digestione intestinale e del desorbimento, salvando i dati alla fine di ogni processo.
I risultati sperimentali ottenuti per la digestione gastrica degli emulsionanti sono mostrati in queste figure. Qui viene presentata la proteolisi gastrica dell'albumina sierica umana. I mezzi digestivi vengono applicati mediante scambio di sottofasi con soluzioni a 37 gradi Celsius.
Qui il blu rappresenta il tampone iniziale con proteine e il rosso rappresenta SGF semplificato con pepsina. Durante lo scambio di sottofase con SGF semplificato e pepsina, la tensione interfacciale aumenta a causa dell'idrolisi della proteina, che diluisce lo strato proteico iniziale. L'immagine grafica rappresenta la lipolisi gastrica della pectina di agrumi.
Qui, il blu rappresenta il buffer iniziale con pectina di agrumi, il giallo rappresenta SGF semplificato con lipasi gastrica e il grigio rappresenta SGF semplificato. Lo scambio di sottofasi con la lipasi gastrica diminuisce la tensione superficiale mentre lo scambio di sottofasi con SGF semplificato, fornisce una risposta nulla della tensione interfacciale. Di seguito è riportato un esempio dei profili di digestione intestinale.
Assorbimento, desorbimento, profili di sali biologici, lipasi e lipasi più sali biliari in SIF semplificato a 37 gradi Celsius sono presentati qui. L'immagine grafica mostra l'evoluzione della tensione interfacciale per lipolisi di due varianti di plueronic F127 e F68. Una forte diminuzione può essere osservata nella tensione interfacciale dovuta all'assorbimento di lipasi e sali biliari e alla produzione di acidi grassi liberi su film interfacciali precedentemente formati di F68 e F127 all'interfaccia olio.
La fase di desorbimento mostra lo scambio di sottofase con SIF semplificato da sali biliari, F68 e F127. Profilo di digestione in vitro del film assorbito da AS48 all'interfaccia aria-acqua nei film di albumina sierica umana e bovina all'interfaccia olio-acqua. Le immagini rappresentative mostrano la tensione interfacciale, l'elasticità della dilatazione e la viscosità di dilatazione della digestione in vitro del film assorbito dalla beta lattoglobulina all'interfaccia olio-acqua.
I parametri di dilatazione sono stati misurati a 1 hertz, 0,1 hertz e 0,01 hertz dopo che l'interfaccia digerita è stata equilibrata in ogni passaggio. È importante abbinare le sfere quando si programma il processo con i corrispondenti tubi di centrifuga, capillare o asse, l'evoluzione della distribuzione del sito di caduta, quindi, la mobilità elettroforetica imposta un potenziale di goccioline e l'acido grasso libero amminico produce nella lipolisi offre informazioni complementari alla corrispondenza con i risultati della tensione interfacciale. Questa tecnica fornisce strati interfacciali con diversi profili di digeribilità per fornire nutrienti e farmaci in diverse posizioni all'interno del tratto gastrointestinale e anche per sviluppare nuovi sistemi di incapsulamento.
