אורגניזמים מראים מגוון עצום בצורתם. אנו מתעניינים מאוד במנגנונים המולקולריים והתאית העומדים בבסיס היווצרות, גיוון והתפתחות של צורות אלה. כדי להבין זאת, חקרנו כיצד התאים שנקבעו על ידי הגורל יוצרים את הצורה הסופית של הרגל הבוגרת בדרוזופילה.
באמצעות הדמיה חיה, מצאנו התנהגות מפתיעה באופן בלתי צפוי של תאים. במהלך היווצרות הצורה הסופית של הרגל, תאי האפיתל יצרו באופן זמני את המבנה המיוחד כפי שקראנו למבנה דמוי הפרתנון. נראה כי מבנה זה הוא מאפיין כללי של תאי אפיתל כשהם מבססים את צורתם הסופית להדמיה חיה לטווח ארוך בשלב הגולם, חשוב להסיר את הגולם תוך שמירה על לחות.
השיטה שלנו, המשתמשת בכלי עם תחתית זכוכית וטיפת מים, היא יציבה, אמינה וקלה לטיפול, גם למתחילים. התוצאות שלנו מדגימות שתאים עוברים שינויי צורה דינמיים בלתי צפויים במהלך תהליך היווצרות הצורה הסופית. כדי להבין במדויק את מנגנוני היווצרות הצורה הסופית, חיוני לתפוס היטב את השינויים המתמשכים בצורת התא ולחקור את המנגנונים מאחורי שינויים אלה וחשיבותם למורפוגנזה.
השאלות הבאות שאנו רוצים להתייחס אליהן הן כיצד המבנה דמוי הפרתנון נוצר באופן ארעי, וכיצד הוא תורם להיווצרות הצורה העדינה יותר. כדי להתחיל, אספו גלמים לבנים של הזן הרצוי של Drosophila melanogaster מבקבוקונים והניחו אותם בכלים או בבקבוקונים ריקים באמצעות מכחול. דגרו על הגלמים הלבנים שנאספו בטמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס למשך 14 שעות לפחות עד שיגיעו לשלב הרצוי לתצפית.
בעזרת מברשת ספוגה במים מזוקקים, הסר בזהירות דבק ומזון זבוב מעל פני הגולם. לאחר מכן הניחו את הגלמים הנקיים על מגבוני ניקוי והשאירו אותם למשך מספר דקות לייבוש. כעת חבר חתיכת סרט דו צדדי למגלשת זכוכית והניח את הגלמים המיובשים על הסרט הדו-צדדי כשהצד הגחוני פונה כלפי מטה.
בעזרת מברשת צבע מיובשת, דחפו בעדינות את הצד הגבי של הגלמים כדי לשפר את ההידבקות לסרט הדו-צדדי. תחת מיקרוסקופ סטריאו, השתמש בזוג מלקחיים כדי לפתוח בזהירות את האופרקולום של הגולם. הכניסו קצה אחד של המלקחיים לחלל שבין הגולם לגולם מקצה האופרקולום הפתוח.
לאחר מכן בעזרת המלקחיים, אחוז בגולם ומשוך אותו החוצה עד שהוא נפתח. הרם את שברי הגולם הקרועים והדבק אותם לסרט הדו-צדדי. כדי להתחיל, הכינו את רגל הגולם של Drosophila melanogaster להדמיה.
בהתאם לעדשה המשמשת, מרחו מיקרוליטר אחד של מים מזוקקים או שמן סיליקון על תחתית כלי תחתית זכוכית. לאחר מכן יש להשרות מברשת במים מזוקקים ולגרוף בעדינות את הגולם. מניחים את הגולם כשצד הגחון פונה כלפי מטה על המים המזוקקים או שמן הסיליקון שבצלחת.
בעזרת מיקרופיפטה מוסיפים 10 מיקרוליטר מים מזוקקים ליד קצה חלק הזכוכית של המנה. בעזרת מזרק מורחים עיגול של שומן סיליקון סביב קצה חלק הזכוכית של המנה. לאחר מכן הניחו החלקת כיסוי על שומן הסיליקון כדי לאטום את המנה.
לאחר הפעלת המיקרוסקופ והתוכנה הקונפוקלית, הנח את צלחת הזכוכית התחתונה עם הגולם על במת המיקרוסקופ ודמיין את אזור העניין הרצוי. תאי האפיתל בטרסוס יצרו הקרנות בסיסיות אפיקובזאליות וחיבורים בסיסיים, המזכירים את הפרתנון בין 16 שעות ל-27.5 שעות לאחר היווצרות הגולם. ירידה הדרגתית בעובי האפיתל נצפתה בין 41 שעות ל-60 שעות לאחר היווצרות הגולם, גם לאחר שמתאר רקמת הרגל הפך מוגדר יותר.
