פרוטוקול זה נותן לנו הבנה טובה יותר של מה דגים רוצים, על ידי התבוננות בחירות שהם עושים לגבי העדפות בית הגידול, וזה היסוד לרווחתם. פרוטוקול זה יכול בקלות להיות מותאם להסתכל על מגוון רחב של גורמים סביבתיים שונים, כולל חצץ לעומת מצע חולי, לחיות לעומת צמחי פלסטיק, או אפילו על פני מינים ימיים שונים. כדי להקים מנגנון העדפה, השתמש במיכל ניסיוני עשוי פלסטיק לבן אטום, מחולק לארבעה אזורים עם קירות עשויים אקריליק, קבוע במקום עם איטום סיליקון.
מניחים את חומרי ההעשרה המתאימים לכל אזור בהתאם לפרמטרים הספציפיים של בית הגידול שיש לבדוק. לדוגמה, כוללים מצעים חוליים לעומת סלעיים, צמחים מלאכותיים לעומת מקלטים, או זרימת מים לעומת צמחים מלאכותיים. אם זרימת המים תשמש כ ופרמטר של עניין, הנח משאבות קטנות לאספקת סילוני מים למיכל והגדר את המשאבות במהירות מסוימת, כך שהן יספקו זרימה קבועה ומכוונת של מים המבוססת על האקולוגיה והיסטוריית החיים של מינים בעלי עניין.
באמצע מיכל הניסוי, יש ארנה מרכזית שבה המזון יועבר. הגישה לארנה המרכזית מכל אזור צריכה להיות דרך פתח קטן בקירות המפרידים שהוא גדול מספיק, עבור המינים המעניינים, לנוע בין האזורים ללא הפרעה, אך קטן מספיק כדי להפחית את כל הרמזים החזותיים שהדגים עלולים לחוות באזורים אחרים. מניחים ביו-פילטר ותנור בכל פינה של המיכל מחוץ לאזור הניסוי, כדי לא להפריע לזרימת המים ולהבטיח טמפרטורת מים קבועה בכל האזורים.
הגדר את כל טנקים ניסיוניים נוספים כמו חלל מכתיב, להבטיח כי כל הטנקים לשכפל יש תנאים אחידים. מניחים מצלמות על חצובה, ישירות מעל כל מיכל ניסיוני, כך שכל האזורים נראים לעין. לאחר אישור כי כרטיסי הזיכרון יש מספיק מקום להקלטה, להגדיר את תאורת החדר על הדרגתי 12 שעות, אור / כהה, מחזור כדי לדמות זריחה ושקיעה.
ולהגדיר את טמפרטורת המים ל 25, בתוספת או מינוס מעלות צלזיוס אחת. שמור את הדגים במיכלים הביתה כאשר הם לא נבדקים. ביום הניסוי, השתמש בשתי רשתות כדי ללכוד במהירות את כל דגי המבחן מהמיכלים הביתיים שלהם, והצב אותם בזירה המרכזית של הטנק הניסיוני תוך 30 שניות מהתפס.
בימים 1 עד 4, הדגים יבלו זמן בהסתגלות ובחקר האזורים השונים. אל תאסוף נתונים בימים אלה. במהלך ההתאקלמות, לבצע בדיקות איכות מים סדירות, החלפת המים אם התגלו בעיות כלשהן.
כדי להאכיל את הדגים, השתמש בטבעת מזון צף, המחוברת לקיר הזירה המרכזית על פני המים, כדי לספק מזון דגים פתיתים לדגים. לאחר 30 דקות של גישה לליביאטום, השתמשו ברשת טבילה כדי להסיר את שאריות המזון מהמיכל. בימים 5 עד 7, הפעל את המצלמות, והקליט התנהגויות דגים במשך שעתיים לאחר כל האכלה מתוכננת בבוקר ואחר הצהריים.
ביום השמיני, השתמש ברשת המטבל כדי להעביר את כל הדגים בחזרה למיכלים הביתיים שלהם. תלוי כמה מים sump זמין, להחליף לפחות שליש מהמים, במיכל הניסיוני, עם מים sump טריים כדי להפחית את כל ההשפעות של הורמוני לחץ על הדגים משכפלים הבאים. לאחר מכן, הקימו את מיכלי הניסוי בהתאם ללוח הזמנים של סיבוב האזור באותו שבוע, והתחלו בתהליך הבדיקה עם קבוצת דגים חדשה.
בסוף כל יום הקלטה, הורד את הסרטונים למחשב. ולהשתמש בתוכנת וידאו כדי לספור באופן ידני את מספר הדגים בכל אזור, במרווחי זמן של חמש דקות, בכל תקופת הקלטה של שעתיים. כדי לנתח העדפות בתי גידול, חשב את המספר הממוצע של דגים לכל אזור עבור כל מיכל שכפול.
לקבלת ציון העדפה לשימוש במבנה, חישבו את מדד ההעדפות של Jacobs באמצעות הנוסחה כפי שצוין. קחו למשל דג שנכנס לאזור, כאשר כל גופו של הדג חוצה את הפתח בין האזורים. כדי לקבוע אם יש שינויים בקצב המעבר של הדגים בין אזורים, במהלך תקופת תצפית, לחשב את מספר הפעמים שדג נכנס לכל אזור מהזירה המרכזית, מחולק במספר הדגים הכולל בחמש הדקות הראשונות והאחרונה של כל תקופת תצפית.
וחשב קצב החלפה התחלתי ו ממוצע גימור עבור כל מיכל שכפול. באמצעות תוכנה סטטיסטית, לבצע ניתוח סטטיסטי רלוונטי, כגון ANOVA חד-כיוון, עם מדד העדפה כמו המשתנה התלוי ואת האזור כמשתנה מנבא, ו- t-test מזווג על קצב מתג ממוצע ההתחלה והגמר עבור כל טנק. כדי להשוות כל אזור לאזור זה לזה, החל את מבחן ההשוואה המרובים של Tukey לאחר הוק.
בניסוי מייצג זה, דג הזברה הפגין את ההעדפה הגבוהה ביותר לאזור המועשר והזרימה, ונמנע מהזרימה בלבד ומזהמים רגילים, ובילתה זמן רב יותר בזירה המרכזית. בנוסף, דגי הזברה נעו בין אזורי הגידול השונים לעתים קרובות יותר בתחילת תקופת התצפית מאשר בסוף. זה קריטי כי תנאים אחידים, כגון רעש חיצוני, או תנועה, כימיית מים, או רמות האור נשמרים על פני מיכלים לשכפל.
בדיקות העדפה משתרעות על הניסיון להבין כיצד היבטים שונים של ההעשרה הסביבתית משפיעים על החלטותיו של הפרט. אבל גם שימושי למחקרי העשרה סביבתיים השוואתיים.
