Name: isolated hepatic perfusion as a treatment for liver metastases of uveal melanoma
Uploaded: 2015-01-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 52 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma at JoVE.com

Lennart Wiman (photographer) is acknowledged for excellent video recording.

חולים ובלבד שנכתבו הסכמה מדעת והמחקר אושר על ידי המועצה לביקורת האתית האזורית באוניברסיטת גטבורג. 1. הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את כל המעקב (ECG, שרוול למדידת לחץ דם) 17. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר אפידורלי בנמוך לרמת בית חזה באמצע 17. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרום להרדמה עם propofol 2 מ&quot;ג / קילוגרם, 150 מיקרוגרם של פנטניל, ומ&quot;ג Rocuronium 0.6 / קילוגרם דרך צנתר ורידים היקפי הוכנס בעבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Preoxygenate וצנרר המטופל. לשמור על הרדמה עם sevoflurane, חמצן ואוויר 17. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר לום כפול מרכזי ורידים ועורקים קטטר. לנטר את לחץ CVP ועורקים 17. </li></ol> 2. בידוד של הכבד וCannulation של כלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נהל 100 IE / קילוגרם של הפרין ולתת טיפול מונע באנטיביוטיקה (למשל, 160 מ&quot;ג של Trimethoprim ו -800 מ&quot;ג sulfamethoxazole). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בטכניקת Seldinger מלעורית, מקום קטטר 17 Fr בוריד הירך וקטטר Fr 15 בוריד הצוואר החיצוני 18. ודא את עמדותיהם של הצנתרים על ידי שיקוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע laparotomy על ידי חתך בצורת אות L מתהליך xiphoid את קו האמצע ולאחר מכן הוארך עד חתך subcostal תקין 19. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שאין גרורות נוספות-כבד קיימות בבטן על ידי בדיקה ומישוש מלא. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם כל נגעים חשודים נמצאים, ודא ממאירות בסעיף קפוא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסיים את ההליך אם יש ראיות של ביטוי extrahepatic (adenopathy periaortal, גרורות בבטן). בלוטות הלימפה בhepatis פורטה אינה נחשבת אחת מתוויות נגד. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגייס את הכבד על ידי חלוקת רצועת falciform, הרצועה משולשת ימין ועל השמאל ואת הרצועה כלילית 19. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את cavalוריד החל מורידי הכליות עד הסרעפת עם קשירה של ורידי יובל retroperitoneal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את וריד הכליה תקין ולמקם את לולאת כלי סביבו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את וריד האשכים תקין. לנתח את זה למשך 5-10 סנטימטר. מניחים תפר תיק-חוט סביב הכניסה לוריד caval. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מייתר distally על וריד האשכים. בעזרת מספריים, לפתוח את וריד 3-5 סנטימטר אשכים מוריד caval. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר מחוזק חוט Fr 18 דרך וריד האשכים תקין ומקום הקצה retrohepatically מעל ורידי הכליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מייתר סביב וריד האשכים כדי לאבטח את עמדת קטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא את שובו של דם דרך קטטר. Heparinize קטטר 18. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את רצועת hepatoduodenal ולדמיין את העורק המשותף כבד, עורק gastroduodenal ועורק כבד התקין. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלי מקום לולאות סביב arte הכבד הנפוץר&quot;י ועורק gastrodoudenal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את וריד השער ולמקם את לולאת כלי סביבו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את שאר הרצועות המכילות את צינור מרה המשותף וכוללים את כל זה בלולאת כלי שיט. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את עורק gastroduodenal עם כלי הלולאה. לאחר להפריע את זרימת הדם, עושה חתך באמצעות מספריים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר Fr 8-12 עם הקצה שלה לעורק הכבד התקין. לאבטח את העמדה עם מייתר סביב עורק gastroduodenal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא החזרת דם בקטטר ולאחר מכן heparinize זה 18. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ראש מערכת זלוף עם יחידה אחת של אריתרוציטים ארוזים, של אלבומין 100 מיליליטר (50 גר &#39;/ ל&#39;), של Tribonat (סודיום ביקרבונט), 2500 יחידות של הפרין (5,000 IE / מיליליטר) 100 מיליליטר ו- 250 מיליליטר של crystalloids. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את העורקים וורידי הצנתרים caval למערכת זלוף בהיקף של מכונה ריאה לב מצוידת במשאבת הרים ולא דודogether עם מערכות מאגר, oxygenator וצינורות ורידים מסוג חד פעמי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את הצנתרים הצוואר הירך וחיצוניים לvenovenous העוקפת בהיקף של משאבה צנטריפוגלית המשאבה, יחד עם יחידת חימום ולהתחיל עוקף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השלם את הבידוד של הכבד על ידי הידוק חוסם עורק Rumel סביב וריד caval infrahepatically מעל ורידי הכליות ומהדק את וריד caval suprahepatically באמצעות מהדק כלי דם Klintmalm. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדק חוסם עורק Rumel סביב צינור מרה המשותף, וריד השער ווריד הכליה הימני ולבסוף מהדק את העורק הכבד באמצעות מהדק כלי דם. </li></ol></li></ol> 3. זלוף <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל זלוף ולנטר את רמת הדם במאגר הוורידים באופן ידני. התאם את קצב הזרימה עד שהגיעה לרמה של מצב יציב, בדרך כלל קצב זרימה בין 500-1,200 מיליליטר / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח בדיקות thermistor לאונות ימין ושמאל כבד ואחד ישירות לצנתר העורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחממים את perfusate מכוון בטמפרטורת כבד היעד של 40 מעלות צלסיוס לשמור על טמפרטורה זו לאורך זלוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח בדיקה נצנץ על הראש עוקף משאבת venovenous. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכייל את מערכת ניטור הדליפה, על ידי הזרקת מנה קטנה של 99m Tc-אלבומין 10 MBq (1 מיליליטר) למחזור הדם המערכתי ולרשום את הפעילות הבסיסית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק פי עשרה מינון גבוה יותר, 100 99m MBq Tc-אלבומין (1 מיליליטר), ליחידת זלוף הכבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקליט כל דליפה ממערכת זלוף למחזור המערכתי כתוצאה מגידול בפעילות שנמדד על ידי הבדיקה הנצנץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקליט כל דליפה מהמחזור המערכתי למערכת זלוף כגידול בהיקף במאגר הוורידים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר מצב יציב של קצב הזרימה הוקם, אין דליפה היא בהווה ובטמפרטורת הכבד הגיעה 40 ° C, להזריק melphalan במינון של1 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף למערכת זלוף מחולק לשתי מנות ניתנו 30 דקות זה מזה. </li></ol> 4. סיים את זלוף ולהסיר קטטרים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 60 דקות של זלוף, רוקן את perfusate מהמערכת ולהשקות את הכבד עם 1,000 מיליליטר של גְבִישָׁן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוספת יחידה אחת של אריתרוציטים ארוזים ליחידת זלוף, להחדיר לתוך הכבד ולאחר מכן להפסיק זלוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחרר את מהדק Klintmalm והחוסם עורק Rumel מוריד caval. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחרר את חוסם עורקים Rumel מרצועת hepatoduodenal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המייתר מעורק gastroduodenal. הסר את הקטטר ולקשור את הכלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחרר את המהדק מהעורק הכבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הקטטר מוריד האשכים ולקשור את הכלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעצור את Veno-ורידים העוקפים המשאבה ונתק את הצינורות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את הבטן עם תפר fascial רצוף ולאחר מכן תפר עור intracutaneous. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את גatheters בורידי הצוואר הירך וחיצוניים ולהפעיל לחץ מקומי במשך 5 דקות. </li></ol> 5. לאחר ניתוח טיפול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Extubate המטופל ולהעביר ליחידה לטיפול לאחר ניתוח למשך 24 שעות. שמור ניטור לחץ ורידים מרכזי ולחץ דם עורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעביר את החולה למחלקת כירורגית לטיפוסי של 3-7 ימים של טיפול שלאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך עם הפרין הנמוך משקל מולקולרי (LMWH) במינון של 5000 / יום IE עבור הסכום כולל של 4 שבועות. </li></ol>

<ol>
	<li>Virgili, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+uveal+melanoma+in+Europe.">Incidence of uveal melanoma in Europe.</a> Ophthalmology. 114 (12), 2309-2315 (2007).</li><li>Pereira, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+and+emerging+treatment+options+for+uveal+melanoma.">Current and emerging treatment options for uveal melanoma.</a> Clinical Ophthalmology. 7, 1669-1682 (2013).</li><li>Bergman, L., Nilsson, B., Lundell, G., Lundell, M., Seregard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ruthenium+brachytherapy+for+uveal+melanoma,+1979-2003:+survival+and+functional+outcomes+in+the+Swedish+population.">Ruthenium brachytherapy for uveal melanoma, 1979-2003: survival and functional outcomes in the Swedish population.</a> Ophthalmology. 112 (5), 834-840 (2005).</li><li>Diener-West, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+metastatic+disease+after+enrollment+in+the+COMS+trials+for+treatment+of+choroidal+melanoma:+Collaborative+Ocular+Melanoma+Study+Group+Report+No.+26.">Development of metastatic disease after enrollment in the COMS trials for treatment of choroidal melanoma: Collaborative Ocular Melanoma Study Group Report No. 26.</a> Archives of Ophthalmology. 123 (12), 1639-1643 (2005).</li><li>Kujala, E., Makitie, T., Kivela, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Very+long-term+prognosis+of+patients+with+malignant+uveal+melanoma.">Very long-term prognosis of patients with malignant uveal melanoma.</a> Investigative Ophthalmology &#38; Visual Science. 44 (11), 4651-4659 (2003).</li><li>Bedikian, A. Y., Papadopoulos, N., Plager, C., Eton, O., Ring, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+II+evaluation+of+temozolomide+in+metastatic+choroidal+melanoma.">Phase II evaluation of temozolomide in metastatic choroidal melanoma.</a> Melanoma Research. 13 (3), 303-306 (2003).</li><li>Kivela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=vincristine,+lomustine+and+dacarbazine+(BOLD)+in+combination+with+recombinant+interferon+alpha-2b+for+metastatic+uveal+melanoma.">vincristine, lomustine and dacarbazine (BOLD) in combination with recombinant interferon alpha-2b for metastatic uveal melanoma.</a> European Journal Of Cancer. 39 (8), 1115-1120 (2003).</li><li>Schmittel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+II+trial+of+cisplatin,+gemcitabine+and+treosulfan+in+patients+with+metastatic+uveal+melanoma.">Phase II trial of cisplatin, gemcitabine and treosulfan in patients with metastatic uveal melanoma.</a> Melanoma Research. 15 (3), 205-207 (2005).</li><li>Leyvraz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+intra-arterial+versus+intravenous+fotemustine+in+patients+with+liver+metastases+from+uveal+melanoma+(EORTC+18021):+a+multicentric+randomized+trial.">Hepatic intra-arterial versus intravenous fotemustine in patients with liver metastases from uveal melanoma (EORTC 18021): a multicentric randomized trial.</a> Annals Of Oncology : Official Journal Of The European Society for Medical Oncology / ESMO. 25 (3), 742-746 (2014).</li><li>Huppert, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transarterial+chemoembolization+of+liver+metastases+in+patients+with+uveal+melanoma.">Transarterial chemoembolization of liver metastases in patients with uveal melanoma.</a> European Journal Of Radiology. 74 (3), 38-44 (2010).</li><li>Klingenstein, A., Haug, A. R., Zech, C. J., Schaller, U. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radioembolization+as+locoregional+therapy+of+hepatic+metastases+in+uveal+melanoma+patients.">Radioembolization as locoregional therapy of hepatic metastases in uveal melanoma patients.</a> Cardiovascular and Interventional Radiology. 36 (1), 158-165 (2013).</li><li>Mariani, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+liver+metastases+from+uveal+melanoma:+16+years'+experience+at+the+Institut+Curie.">Surgical management of liver metastases from uveal melanoma: 16 years' experience at the Institut Curie.</a> European Journal Of Surgical Oncology : The Journal Of The European Society Of Surgical Oncology And The British Association of Surgical Oncology. 35 (11), 1192-1197 (2009).</li><li>Ausman, R. K., Aust, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+perfusion+of+the+liver+with+HN2.">Isolated perfusion of the liver with HN2.</a> Surgical Forum. 10, 77-79 (1960).</li><li>Dahl, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+hyperthermia+and+chemotherapy.">Interaction of hyperthermia and chemotherapy.</a> Recent results in cancer research. Fortschritte der Krebsforschung. Progres Dans Les Recherches Sur Le Cancer. 107, 157-169 (1988).</li><li>Barker, W. C., Andrich, M. P., Alexander, H. R., Fraker, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+intraoperative+external+monitoring+of+perfusate+leak+using+iodine-131+human+serum+albumin+during+isolated+perfusion+of+the+liver+and+limbs.">Continuous intraoperative external monitoring of perfusate leak using iodine-131 human serum albumin during isolated perfusion of the liver and limbs.</a> European Journal Of Nuclear Medicine. 22 (11), 1242-1248 (1995).</li><li>Olofsson, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hepatic+perfusion+for+ocular+melanoma+metastasis:+registry+data+suggests+a+survival+benefit.">Isolated hepatic perfusion for ocular melanoma metastasis: registry data suggests a survival benefit.</a> Annals of Surgical Oncology. 21 (2), 466-472 (2014).</li><li>Redai, I., Emond, J., Brentjens, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic+considerations+during+liver+surgery.">Anesthetic considerations during liver surgery.</a> The Surgical Clinics of North America. 84, 401-411 (2004).</li><li>Sakai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insertion+and+management+of+percutaneous+veno-venous+bypass+cannula+for+liver+transplantation:+a+reference+for+transplant+anesthesiologists.">Insertion and management of percutaneous veno-venous bypass cannula for liver transplantation: a reference for transplant anesthesiologists.</a> Clinical Transplantation. 24 (5), 585-591 (2010).</li><li>Skandalakis, J. E., Skandalakis, L. J., Skandalakis, P. N., Mirilas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+surgical+anatomy.">Hepatic surgical anatomy.</a> The Surgical Clinics of North America. 84 (2), 413-435 (1016).</li><li>Alexander, H. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+phase+I-II+study+of+isolated+hepatic+perfusion+using+melphalan+with+or+without+tumor+necrosis+factor+for+patients+with+ocular+melanoma+metastatic+to+liver.">A phase I-II study of isolated hepatic perfusion using melphalan with or without tumor necrosis factor for patients with ocular melanoma metastatic to liver.</a> Clinical Cancer Research : An Official Journal Of The American Association for Cancer Research. 6 (8), 3062-3070 (2000).</li><li>Alexander, H. R., Jr, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperthermic+isolated+hepatic+perfusion+using+melphalan+for+patients+with+ocular+melanoma+metastatic+to+liver.">Hyperthermic isolated hepatic perfusion using melphalan for patients with ocular melanoma metastatic to liver.</a> Clinical Cancer Research : An Official Journal Of The American Association For Cancer Research. 9 (17), 6343-6349 (2003).</li><li>Rizell, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hepatic+perfusion+for+liver+metastases+of+malignant+melanoma.">Isolated hepatic perfusion for liver metastases of malignant melanoma.</a> Melanoma research. 18 (2), 120-126 (2008).</li><li>Iersel, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hepatic+perfusion+with+200+mg+melphalan+for+advanced+noncolorectal+liver+metastases.">Isolated hepatic perfusion with 200 mg melphalan for advanced noncolorectal liver metastases.</a> Annals of Surgical Oncology. 15 (7), 1891-1898 (2008).</li><li>Carvajal, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+selumetinib+vs+chemotherapy+on+progression-free+survival+in+uveal+melanoma:+a+randomized+clinical+trial.">Effect of selumetinib vs chemotherapy on progression-free survival in uveal melanoma: a randomized clinical trial.</a> JAMA : the Journal Of The American Medical Association. 311 (23), 2397-2405 (2014).</li><li>Sharma, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+arterial+chemoembolization+for+management+of+metastatic+melanoma.">Hepatic arterial chemoembolization for management of metastatic melanoma.</a> AJR. American Journal Of Roentgenology. 190 (1), 99-104 (2008).</li><li>Eldredge-Hindy, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yttrium-90+Microsphere+Brachytherapy+for+Liver+Metastases+From+Uveal+Melanoma:+Clinical+Outcomes+and+the+Predictive+Value+of+Fluorodeoxyglucose+Positron+Emission+Tomography.">Yttrium-90 Microsphere Brachytherapy for Liver Metastases From Uveal Melanoma: Clinical Outcomes and the Predictive Value of Fluorodeoxyglucose Positron Emission Tomography.</a> American Journal Of Clinical Oncology. , (2014).</li><li>Etten, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hypoxic+hepatic+perfusion+with+orthograde+or+retrograde+flow+in+patients+with+irresectable+liver+metastases+using+percutaneous+balloon+catheter+techniques:+a+phase+I+and+II+study.">Isolated hypoxic hepatic perfusion with orthograde or retrograde flow in patients with irresectable liver metastases using percutaneous balloon catheter techniques: a phase I and II study.</a> Annals of Surgical Oncology. 11 (6), 598-605 (2004).</li><li>Ku, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+adriamycin-removal+following+hepatic+artery+infusion:+use+of+direct+hemoperfusion+combined+with+veno-venous+bypass.">Extracorporeal adriamycin-removal following hepatic artery infusion: use of direct hemoperfusion combined with veno-venous bypass.</a> Nihon Geka Gakkai Zasshi. 90 (10), 1758-1764 (1989).</li><li>Curley, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+arterial+infusion+chemotherapy+with+complete+hepatic+venous+isolation+and+extracorporeal+chemofiltration:+a+feasibility+study+of+a+novel+system.">Hepatic arterial infusion chemotherapy with complete hepatic venous isolation and extracorporeal chemofiltration: a feasibility study of a novel system.</a> Anti-Cancer Drugs. 2 (2), 175-183 (1991).</li><li>Beheshti, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+isolated+liver+perfusion+for+treatment+of+hepatic+malignancy:+preliminary+report.">Percutaneous isolated liver perfusion for treatment of hepatic malignancy: preliminary report.</a> Journal of Vascular And Interventional Radiology : JVIR. 3 (3), 453-458 (1992).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

חולים עם מלנומה גרורתית הענביה כמה אפשרויות טיפוליות. כימותרפיה 6, אימונותרפיה 23 וטיפול ממוקד 24 לא הצליחה להראות OS המשופרת. לחולים עם גרורות בכבד כמה, כריתת כבד היא אופציה 12. טיפולים אחרים כוללים כימותרפיה תוך-עורקי כבד (HIA) 9, כימואמבוליזציה transarterial (TACE) 25 וטיפול סלקטיבי פנימי קרינה (SIRT) 26. IHP הוא התערבות כירורגית גדולה ומורכבת, ומאז הדיווח הראשון על ידי Ausman חלו התפתחויות רבות בטכניקה הניתוחית. בשנת 2004, ואן אטן ועמיתים דיווחו על התוצאות הקליניות הראשונות בטכניקת זלוף כבד חוסר חמצן המבודד (IHHP) 27. בתחילת 1990, שלוש קבוצות עצמאיות פיתחו מערכת percutaneous רומן זלוף הכבד (PHP) באמצעות chemofiltration extracorporeal 28-30. אין מחקריםהשוואת טכניקות אלה לIHP בוצעו. לא נראה הדיווחים עד כה לא להיות לטובת כל טכניקה ספציפית. בחירת מטופל היא בעל חשיבות גבוהה לטיפול זה. מאז הוא טיפול מקומי, לא צריך להיות שום עדות למחל extrahepatic. בשל הסיכון לפתח אי ספיקת כבד, לא יותר מ -50% מכבד הנפח צריכים להיות מוחלפים על ידי גידול 22. חולים צריכים להיות מצב טוב ביצועים (ECOG 0-1) ולא נשימה האחד lung-, כליה או מחלת כבד שעלול להגביר את הסיכון לתחלואה חמורה לאחר ניתוח. בניסוי בשלב II האחרון מהקבוצה שלנו, חציון הישרדות של 26 חודשים הוצגה, רומזת יתרון הישרדות פוטנציאלי של 14 חודשים בהשוואה לקבוצת ביקורת 16. כדי לאמת את הממצא הזה, ניסוי בשלב III אקראי רב-מרכזי בין IHP ואלטרנטיביים לטיפול הטוב ביותר (BAC) החל לאחרונה בסקנדינביה (משפט סקנדיום, מספר ClinicalTrials: NCT01,785,316). טיפול BAC עשוי לכלול את כל אפשרויות אחרות לטיפול, קיימות או ניסיוניות, עם הרעיון שעל צולב אסורה מBAC לקבוצת IHP. קריטריונים להכללה כוללות גרורות בכבד ביופסיה אימתה ואין עדות לגידול ביטויים חוץ-כבדית על ידי PET-CT. נקודת הסיום הראשונית היא הישרדות כוללת לאחר 24 חודשים עם נקודות קצה משניים כוללים שיעור תגובה, הישרדות ללא התקדמות מחלה ובאיכות החיים. ההכללה המתוכננת היא 78 חולים במהלך 5 שנים. לסיכום, עדיין קיימת שום טיפול שבשלב III של ניסויים הראו שום הישרדות כוללת ממושכת בחולים עם גרורות בכבד מלנומה של הענביה. IHP הוא טיפול אזורי מעניין ומבטיח שבו יתרונות פוטנציאליים בהישרדות כרגע נחקרים במחקר אקראי (משפט סקנדיום).

מלנומה של הענביה הוא הגידול ממאיר התוך עיני הראשוני הנפוץ ביותר במבוגרים, עם השכיחות הגבוהה ביותר להיות באוכלוסיות קווקזי 1. טיפול מקומי מורכב מהקרנות enucleation או שלט מקומי 2,3. ללא קשר לטיפול מקומי, המחלה גרורתית סופו של דבר לפתח בכ 35-50% מהחולים 4,5. הכבד הוא האתר הנפוץ ביותר של גרורות וכ -50% מהחולים עם גרורות בכבד הנוכחיים מבודדים. חציון ההישרדות הכוללת (OS) לחולים עם גרורות בכבד היא 6-12 חודשים 4. כמה אסטרטגיות טיפול מערכתיות ואזוריות שונות נחקרו, אך שיעורי הישרדות לא השתפרו 2. טיפול בכימותרפיה מערכתית, שניהם חומר אחד (או Dacarbazine temozolomide 6) או טיפול משולב (משטר BOLD 7, gemcitabine עם treosulfan 8), מציג את שיעורי תגובה של פחות מ10%. כימותרפיה תוך-עורקים כבדית (HIA) הראתה שיעור מעט גבוה יותר הכולל תגובה בהשוואה לכימותרפיה מערכתית, אך אין עלייה בהישרדות כוללת 9. כימואמבוליזציה Transarterial (TACE) עם ציספלטין וקרבופלטין הראתה תגובה חלקית ב -57% מהחולים עם חציון הישרדות של 9 חודשים 10. הקרנות פנימיות סלקטיבית (SIRT) הראו תגובה חלקית ב -62% מהחולים עם חציון הישרדות של 7 חודשים 11. במחקר שנערך על כריתת כבד, כולל 255 חולים, הישרדות כוללת של 14 חודשים דווחה; ב -76 החולים שבו כריתה מלאה מיקרוסקופי הייתה אפשרית, ההישרדות הייתה 27 חודשים 12. זלוף המבודד בכבד (IHP) הוא אפשרות טיפול אזורית, שפותחה במקור על ידי ריאן וAusman. הרציונל מאחורי הטכניקה הוא לבודד ניתוח וינקב את הכבד עם מינון גבוה של סוכן כימותרפיות, תוך הימנעות מערכתית לxicity 13. בנוסף, היפרתרמיה מקביל מתווכת ספיגה מוגברת של הסוכן כימותרפיות על ידי שינויים בזרימת דם גידול וחדירות קרום תא 14. בידוד של כלי דם מלא הוא אישר עם טכניקה נותב רדיואקטיבית באמצעות Tc-99 שכותרתו אלבומין בסרום אנושי 15. מחקר השלב II רטרוספקטיבי הראה יתרון הישרדות פוטנציאלי של 14 חודשים (26 לעומת 12 חודשים) לחולים שעברו IHP בהשוואה לניצולים הארוכים ביותר עם ​​גרורות בכבד מלנומה של הענביה בשוודיה 16. כאן אנו מציגים את הטכניקה של IHP בסקירה קצרה של תוצאות הנוכחיות ונקודתי מבט לעתיד.

<table><tbody><tr><td>Wire re-inforced catethers</td><td>Medtronic Inc, Minnesota, USA</td><td></td><td>12-18Fr</td></tr><tr><td>St&amp;ouml;ckert S5</td><td>Sorin Group, Mirandola, Italy</td><td></td><td>Heart-lung machine</td></tr><tr><td>Rotaflow</td><td>Maquet, Jostra Medizintechnik AG, Hirrlingen, Germany</td><td></td><td>Centrifugal pump</td></tr><tr><td>HU 35</td><td>Maquet cardiopulmonary AG, Hirrlingen, Germany</td><td></td><td>Heater unit</td></tr><tr><td>Flexbumin 200 g/l</td><td>Baxter Medical AB, Kista, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tribonat</td><td>Fresenius Kabi AB, Uppsala, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin LEO, 5000 IE/ml</td><td>LEO Pharma AB, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ringer Acetate</td><td>Baxter Medical AB, Kista, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vasculosis</td><td>Cis-Bio International, Gif-Sur-Yvette, France</td><td></td><td>99mTc-albumin</td></tr><tr><td>MedicView</td><td>SystemData AB, Gothenburg, Sweden</td><td></td><td>Leakage monitoring system</td></tr><tr><td>Alkeran</td><td>Aspen Europe GmbH, Bad Oldesloe, Germany</td><td></td><td>melphalan</td></tr></tbody></table>

isolated hepatic perfusion as a treatment for liver metastases of uveal melanoma

זלוף הכבד המבודד (IHP) הוא הליך שבי הכבד מבודד בניתוח וperfused עם ריכוז גבוה של melphalan הסוכן כימותרפיות. בקצרה, ההליך מתחיל בהגדרה של מעקף Veno-ורידי percutaneous מוריד הירך לוריד הצוואר החיצוני. באמצעות laparotomy, צנתרים ואז הוכנסו לעורק כבד התקין ווריד caval. וריד השער ווריד caval, שניהם מֵעַל וinfrahepatically, לאחר מכן הידק. העורקים וורידי הצנתרים מחוברים למכונה לב ריאה והכבד הוא perfused עם melphalan (1 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף) במשך 60 דקות. בדרך זו ניתן באופן מקומי תנקב כבד עם מינון גבוה של סוכן כימותרפיות, ללא דליפה למחזור המערכתי. במחקרים קודמים בם חולים עם גרורות בכבד מבודדים של מלנומה של הענביה, שיעור תגובה כולל של 33-100% וחציון הישרדות בין 9 ל 13 חודשים,כבר דיווח. המטרה של פרוטוקול זה היא לתת תיאור ברור של איך לבצע את ההליך ולדון IHP כאפשרות טיפול בגרורות בכבד של מלנומה של הענביה.

דיווח ראשוני כלל 22 חולים שטופלו במלפלן עם או בלי TNF-alpha. התוצאות הראו שיעור תגובה כולל של 62%, ובם שני חולים עם CR (10%), וחציון הישרדות כוללת של 11 חודשים 20. מחקר שלאחר מכן דיווח על התוצאות של 29 חולים עוקבים שטופלו באמצעות melphalan לבד. התוצאה הייתה דומה מאוד עם 62% תגובה כוללת ובכלל זה 10% תגובה מלאה וחציון הישרדות של 12 חודשים 21. במחקר שנערך על ידי Rizell et al., 20 חולים עם מלנומה של הענביה נכללו. החולים חולקו לשלוש תקופות זמן שונות, והתוצאות הראו ירידה בתמותה מ -27% ל -0% עקב בחירת מטופל משופרת ופיתוח טכני 22. הידע על IHP מתבסס בעיקר על סדרת מוסד קטנה יותר למפרע אחת, והתוצאות שפורסמו שמותיהם מופיעות בטבלה 1. בלסיכום, שיעור התגובה הכולל הוא 33-100%, כולל 0-20% שיעור תגובה מלא. התמותה לאחר הניתוח היא 6% וחציון ההישרדות היא 12 חודשים. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מחבר </td><td> n </td><td> סוג </td><td> אור </td><td> CR </td><td> חציון הישרדות </td><td> תמותה </td></tr><tr><td> אלכסנדר et al. 2,000 </td><td> 22 </td><td> IHP </td><td> 62% </td><td> 10% </td><td> 11 חודשים </td><td> 5% </td></tr><tr><td> אלכסנדר et al. 2,003 </td><td> 29 </td><td> IHP </td><td> 62% </td><td> 10% </td><td> 12 חודשים </td><td> 0% </td></tr><tr><td> Noter et al. 2,003 </td><td> 8 </td><td> IHP </td><td> 50% </td><td> 0% </td><td> 10 חודשים </td><td> 0% </td></tr><tr><td> Pingpank et al. 2005 </td><td> 10 </td><td> PHP </td><td> 50% </td><td> 20% </td><td> N / A </td><td> 0% </td></tr><tr><td> Rizell et al. 2,008 </td><td> 27 </td><td> IHP </td><td> 70% </td><td> 7% </td><td> 13 חודשים </td><td> 22% </td></tr><tr><td> Verhoef et al. 2,008 </td><td> 4 </td><td> IHHP </td><td> 100% </td><td> 0% </td><td> 9 חודשים </td><td> 0% </td></tr><tr><td> ואן Iersel et al. 2,008 </td><td> 12 </td><td> IHP </td><td> 33% </td><td> 0% </td><td> 10 חודשים </td><td> 0% </td></tr><tr><td> ואן אטן et al. 2,009 </td><td> 8 </td><td> IHHP </td><td> 37% </td><td> 0% </td><td> 11 חודשים </td><td> 0% </td></tr><tr><td> ממוצע משוקלל </td><td> 120 </td><td></td><td> 59% </td><td> 7% </td><td> 12 חודשים </td><td> 6% </td></tr><tr><td> Olofsson et al. </td><td> 34 </td><td> IHP </td><td> 68% </td><td> 12% </td><td> 24 חודשים60; </td><td> 0% </td></tr></tbody></table> טבלת 1:. תוצאות של זלוף הכבד המבודד פרסומים עם תוצאות קליניות דיווחו לחולים עם גרורות בכבד מבודדים שטופלו בשיטות שונות של זלוף הכבד המבודד. אור = שיעור תגובה כולל; CR = תגובה מלאה; IHP = זלוף הכבד המבודד; IHHP = מבודד זלוף כבד חוסר חמצן; PHP = זלוף הכבד percutaneous; N / A = לא זמין. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/52490/52490fig1.jpg" /> איור 1:. תמונה סכמטי של Veno-ורידי מערכת זלוף המערכת העוקפת והקו האדום מייצג את הצנתר בעורק הכבד וכחול אחד מייצג את הצנתר בוריד caval. הם מחוברים למערכת זלוף בהיקף של oxygenator, משאבת הרים והסקה. הקווים השחורים מייצגים את Veno-venous מערכת עוקפת מחוברת למשאבת הרים.

Watch this Scientific Journal Video about Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma at JoVE.com

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Here, we present a protocol how to perform an isolated liver perfusion (IHP) with melphalan and we also discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

כבדית זלוף המבודד לטיפול בכבד גרורות של מלנומה של הענביה

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

isolated-hepatic-perfusion-as-treatment-for-liver-metastases-uveal

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

13.3K Views.  Institute of Clinical Sciences. Here, we present a protocol how to perform an isolated liver perfusion (IHP) with melphalan and we also discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

Video: Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Murine Model of Metastatic Liver Tumors in the Setting of Ischemia Reperfusion Injury

Liver ischemia and reperfusion (I/R) injury, a common clinical challenge, remains an inevitable pathophysiological process that has been shown to induce multiple tissue and organ damage. Despite recent advances and therapeutic approaches, the overall morbidity has remained unsatisfactory especially in patients with underlying parenchymal abnormalities. In the context of aggressive cancer growth and metastasis, surgical I/R is suspected to be the promoter regulating tumor recurrence. This article aims to describe a clinically relevant murine model of liver I/R and colorectal liver metastasis. In doing so, we aim to assist other investigators in establishing and perfecting this model for their routine research practice to better understand the effects of liver I/R on promoting liver metastases.

We describe in detail a clinically relevant colorectal cancer liver metastases (CRLM) tumor model and the influence of liver ischemia reperfusion (I/R) in tumor growth and metastasis. This model can help to better understand the mechanisms underlying surgery-induced promotion of liver metastatic growth.

מודל מורנה של גידולים גרורות בכבד בהגדרה של איסכמיה Reperfusion פציעה

Liver ischemia and reperfusion (I/R) injury, a common clinical challenge, remains an inevitable pathophysiological process that has been shown to induce ...

Cancer Research

Generation of a Liver Orthotopic Human Uveal Melanoma Xenograft Platform in Immunodeficient Mice

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more representative models to study human cancers in immunodeficient mice than traditional established human cell lines in vitro. Recently, orthotopically implanted patient-derived tumor xenograft (PDX) models in mice have been developed to better replicate features of patient tumors. A liver orthotopic xenograft mouse model is expected to be a useful cancer research platform, providing insights into tumor biology and drug therapy. However, liver orthotopic tumor implantation is generally complicated. Here we describe our protocols for the orthotopic implantation of patient-derived liver-metastatic uveal melanoma tumors. We cultured human liver metastatic uveal melanoma cell lines into immunodeficient mice. The protocols can result in consistently high technical success rates using either a surgical orthotopic implantation technique with chunks of patient-derived uveal melanoma tumor or a needle injection technique with cultured human cell line. We also describe protocols for CT scanning to detect interior liver tumors and for re-implantation techniques using cryopreserved tumors to achieve re-engraftment. Together, these protocols provide a better platform for liver orthotopic tumor mouse models of liver metastatic uveal melanoma in translational research.

Orthotopic human liver metastatic uveal melanoma xenograft mouse models were created using surgical orthotopic implantation techniques with patient-derived tumor chunk and needle injection techniques with cultured human uveal melanoma cell lines.

הדור של מלנומה האדם Uveal האנושי פלטפורמת Xהשתל בעכברים חיסוני

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more ...

Portal Vein Injection of Colorectal Cancer Organoids to Study the Liver Metastasis Stroma

Hepatic metastasis of colorectal cancer (CRC) is a leading cause of cancer-related death. Cancer-associated fibroblasts (CAFs), a major component of the tumor microenvironment, play a crucial role in metastatic CRC progression and predict poor patient prognosis. However, there is a lack of satisfactory mouse models to study the crosstalk between metastatic cancer cells and CAFs. Here, we present a method to investigate how liver metastasis progression is regulated by the metastatic niche and possibly could be restrained by stroma-directed therapy. Portal vein injection of CRC organoids generated a desmoplastic reaction, which faithfully recapitulated the fibroblast-rich histology of human CRC liver metastases. This model was tissue-specific with a higher tumor burden in the liver when compared to an intra-splenic injection model, simplifying mouse survival analyses. By injecting luciferase-expressing tumor organoids, tumor growth kinetics could be monitored by in vivo imaging. Moreover, this preclinical model provides a useful platform to assess the efficacy of therapeutics targeting the tumor mesenchyme. We describe methods to examine whether adeno-associated virus-mediated delivery of a tumor-inhibiting stromal gene to hepatocytes could remodel the tumor microenvironment and improve mouse survival. This approach enables the development and assessment of novel therapeutic strategies to inhibit hepatic metastasis of CRC.

Portal vein injection of colorectal cancer (CRC) organoids generates stroma-rich liver metastasis. This mouse model of CRC hepatic metastasis represents a useful tool to study tumor-stroma interactions and develop novel stroma-directed therapeutics such as adeno-associated virus-mediated gene therapies.

הזרקת וריד פורטל של אורגנואידים לסרטן המעי הגס לחקר סטרומה גרורות בכבד

Hepatic metastasis of colorectal cancer (CRC) is a leading cause of cancer-related death. Cancer-associated fibroblasts (CAFs), a major component of the ...

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for liver transplantation die without receiving an organ transplant or are delisted for disease progression. One strategy to increase the donor pool is the utilization of marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or donation after cardiac death (DCD). The current preservation technique of cold static storage is only poorly tolerated by marginal livers resulting in significant organ damage. In addition, cold static organ storage does not allow graft assessment or repair prior to transplantation.
These shortcomings of cold static preservation have triggered an interest in warm perfused organ preservation to reduce cold ischemic injury, assess liver grafts during preservation, and explore the opportunity to repair marginal livers prior to transplantation. The optimal pressure and flow conditions, perfusion temperature, composition of the perfusion solution and the need for an oxygen carrier has been controversial in the past.
In spite of promising results in several animal studies, the complexity and the costs have prevented a broader clinical application so far. Recently, with enhanced technology and a better understanding of liver physiology during ex vivo perfusion the outcome of warm liver perfusion has improved and consistently good results can be achieved.
This paper will provide information about liver retrieval, storage techniques, and isolated liver perfusion in pigs. We will illustrate a) the requirements to ensure sufficient oxygen supply to the organ, b) technical considerations about the perfusion machine and the perfusion solution, and c) biochemical aspects of isolated organs.

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

Marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or livers retrieved after cardiac death (DCD) tolerate conventional, cold static storage only poorly. We developed a novel model of subnormothermic ex vivo liver perfusion for preservation, assessment, and repair of marginal liver grafts prior to transplantation.

טכניקה של Subnormothermic<em&gt; Ex Vivo</em&gt; הכבד זלוף לאחסון, ההערכה, ותיקון שתלי כבד שולי

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for ...

Implantation and Evaluation of Melanoma in the Murine Choroid via Optical Coherence Tomography

Establishing experimental choroidal melanoma models is challenging in terms of the ability to induce tumors at the correct localization. In addition, difficulties in observing posterior choroidal melanoma in vivo limit tumor location and growth evaluation in real-time. The approach described here optimizes techniques for establishing choroidal melanoma in mice via a multi-step sub-choroidal B16LS9 cell injection procedure. To enable precision in injecting into the small dimensions of the mouse uvea, the complete procedure is performed under a microscope. First, a conjunctival peritomy is formed in the dorsal-temporal area of the eye. Then, a tract into the sub-choroidal space is created by inserting a needle through the exposed sclera. This is followed by the insertion of a blunt needle into the tract and the injection of melanoma cells into the choroid. Immediately after injection, noninvasive optical coherence tomography (OCT) imaging is utilized to determine tumor location and progress. Retinal detachment is evaluated as a predictor of tumor site and size. The presented method enables the reproducible induction of choroid-localized melanoma in mice and the live imaging of tumor growth evaluation. As such, it provides a valuable tool for studying intraocular tumors.

Implantation and Evaluation of Melanoma in the Murine Choroid via Optical Coherence Tomography

The present protocol describes the implantation and evaluation of melanoma in the murine choroid utilizing optical coherence tomography.

השתלה והערכה של מלנומה בכורואיד מורין באמצעות טומוגרפיה קוהרנטית אופטית

Establishing experimental choroidal melanoma models is challenging in terms of the ability to induce tumors at the correct localization. In addition, ...

Percutaneous Hepatic Perfusion (PHP) with Melphalan as a Treatment for Unresectable Metastases Confined to the Liver

Unresectable liver metastases of colorectal cancer can be treated with systemic chemotherapy, aiming to limit the disease, extend survival or turn unresectable metastases into resectable ones. Some patients however, suffer from side effects or progression under systemic treatment. For patients with metastasized uveal melanoma there are no standard systemic therapy options. For patients without extrahepatic disease, isolated liver perfusion (IHP) may enable local disease control with limited systemic side effects. Previously, this was performed during open surgery with satisfying results, but morbidity and mortality related to the open procedure, prohibited a widespread application. Therefore, percutaneous hepatic perfusion (PHP) with simultaneous chemofiltration was developed. Besides decreasing morbidity and mortality, this procedure can be repeated, hopefully leading to a higher response rate and improved survival (by local control of disease). During PHP, catheters are placed in the proper hepatic artery, to infuse the chemotherapeutic agent, and in the inferior caval vein to aspirate the chemosaturated blood returning through the hepatic veins. The caval vein catheter is a double balloon catheter that prohibits leakage into the systemic circulation. The blood returning from the hepatic veins is aspirated through the catheter fenestrations and then perfused through an extra-corporeal filtration system. After filtration, the blood is returned to the patient by a third catheter in the right internal jugular vein. During PHP a high dose of melphalan is infused into the liver, which is toxic and would lead to life threatening complications when administered systemically. Because of the significant hemodynamic instability resulting from the combination of caval vein occlusion and chemofiltration, hemodynamic monitoring and hemodynamic support is of paramount importance during this complex procedure.

Percutaneous Hepatic Perfusion PHP with Melphalan as a Treatment for Unresectable Metastases Confined to the Liver

In this manuscript, we describe percutaneous isolated hepatic perfusion with simultaneous chemofiltration as treatment for unresectable liver metastases. This procedure is performed under general anaesthesia in the angiosuite by an experienced team, consisting of an interventional radiologist, a clinical perfusionist and anaesthesiologist.

Percutaneous כבדית זלוף (PHP) עם תרופה כטיפול גרורות נתיחות המרותק אל הכבד

Unresectable liver metastases of colorectal cancer can be treated with systemic chemotherapy, aiming to limit the disease, extend survival or turn ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the silicone compound, via a 26 G catheter, into the portal or hepatic vein. After silicone injection, organs were explanted and prepared for ex-vivo micro-CT (&#181;CT) scanning. The silicone injection procedure is technically challenging. Achieving a successful outcome requires extensive microsurgical experience from the surgeon. One of the challenges of this procedure involves determining the adequate perfusion rate for the silicone compound. The perfusion rate for the silicone compound needs to be defined based on the hemodynamic of the vascular system of interest. Inappropriate perfusion rate can lead to an incomplete perfusion, artificial dilation and rupturing of vascular trees.
The 3D reconstruction of the vascular system was based on CT scans and was achieved using preclinical software such as HepaVision. The quality of the reconstructed vascular tree was directly related to the quality of silicone perfusion. Subsequently computed vascular parameters indicative of vascular growth, such as total vascular volume, were calculated based on the vascular reconstructions. Contrasting the vascular tree with silicone allowed for subsequent histological work-up of the specimen after &#181;CT scanning. The specimen can be subjected to serial sectioning, histological analysis and whole slide scanning, and thereafter to 3D reconstruction of the vascular trees based on histological images. This is the prerequisite for the detection of molecular events and their distribution with respect to the vascular tree. This modified silicone injection procedure can also be used to visualize and reconstruct the vascular systems of other organs. This technique has the potential to be extensively applied to studies concerning vascular anatomy and growth in various animal and disease models.

Tools used for visualizing vascular regeneration require methods for contrasting the vascular trees. This film demonstrated a delicate injection technique used to achieve optimal contrasting of the vascular trees and illustrate the potential benefits resulting from a detailed analysis of the resulting specimen using &#181;CT and histological serial sections.

ויזואליזציה של התחדשות כלי דם Parenchymal לאחר 70% חלקיות כריתה בעכברים נורמליים

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been introduced as a method to evaluate and modify organ function. NEVLP has many advantages in comparison to hypothermic and subnormothermic perfusion including reduced preservation injury, restoration of normal organ function under physiologic conditions, assessment of organ performance, and as a platform for organ repair, remodeling, and modification. Both murine and porcine NEVLP models have been described. We demonstrate a rat model of NEVLP and use this model to show one of its important applications &#8212; the use of a therapeutic molecule added to liver perfusate. Catalase is an endogenous reactive oxygen species (ROS) scavenger and has been demonstrated to decrease ischemia-reperfusion in the eye, brain, and lung. Pegylation has been shown to target catalase to the endothelium. Here, we added pegylated-catalase (PEG-CAT) to the base perfusate and demonstrated its ability to mitigate liver preservation injury. An advantage of our rodent NEVLP model is that it is inexpensive in comparison to larger animal models. A limitation of this study is that it does not currently include post-perfusion liver transplantation. Therefore, prediction of the function of the organ post-transplantation cannot be made with certainty. However, the rat liver transplant model is well established and certainly could be used in conjunction with this model. In conclusion, we have demonstrated an inexpensive, simple, easily replicable NEVLP model using rats. Applications of this model can include testing novel perfusates and perfusate additives, testing software designed for organ evaluation, and experiments designed to repair organs.

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant liver donor shortage, and criteria for liver donors have been expanded. Normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been developed to evaluate and modify organ function. This study demonstrates a rat model of NEVLP and tests the ability of pegylated-catalase, to mitigate liver preservation injury.

מודל בעלי חיים קטנים של זלוף הכבד Normothermic Vivo לשעבר

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Isolation of Regenerating Hepatocytes after Partial Hepatectomy in Mice

Partial hepatectomy has been widely used to investigate liver regeneration in mice, but the isolation of high yields of viable hepatocytes for downstream single-cell applications is challenging. A marked accumulation of lipids within regenerating hepatocytes is observed during the first 2 days of normal liver regeneration in mice. This so-called transient regeneration-associated steatosis (TRAS) is temporary but partially overlaps the major proliferative phase. Density-gradient purification is the backbone of most existing protocols for the isolation of primary hepatocytes. As gradient purification relies on the density and size of cells, it separates non-steatotic from steatotic hepatocyte populations. Therefore, fatty hepatocytes often are lost, yielding non-representative hepatocyte fractions. 
The presented protocol describes an easy and reliable method for the in vivo isolation of regenerating hepatocytes regardless of their lipid content. Hepatocytes from male C57BL/6 mice are isolated 24-48 h after hepatectomy by a classic two-step collagenase perfusion approach. A standard peristaltic pump drives the warmed solutions via the catheterized inferior vena cava into the remnant, using a retrograde perfusion technique with outflow through the portal vein. Hepatocytes are dissociated by collagenase for their release from the Glisson's capsule. After washing and careful centrifugation, the hepatocytes can be used for any downstream analyses. In conclusion, this paper describes a straightforward and reproducible technique for the isolation of a representative population of regenerating hepatocytes after partial hepatectomy in mice. The method may also aid the study of fatty liver disease.

Lipid-laden hepatocytes are inherent to liver regeneration but are usually lost upon density-gradient centrifugation. Here, we present an optimized cell isolation protocol that retains steatotic hepatocytes, yielding representative populations of regenerating hepatocytes after partial hepatectomy in mice.

בידוד של הפטוציטים מתחדשים לאחר כריתת כבד חלקית בעכברים

Partial hepatectomy has been widely used to investigate liver regeneration in mice, but the isolation of high yields of viable hepatocytes for downstream ...

Development and Validation of a Porcine Ex Situ Isolated Liver Perfusion Model 

Porcine Normothermic Isolated Liver Perfusion

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine livers are anatomically and physiologically close to humans, with similar organ size and bile composition. NMP preserves the liver graft at near-to-physiological conditions by recirculating a warm, oxygenated, and nutrient-enriched red blood cell-based perfusate through the liver vasculature. NMP can be used to study ischemia-reperfusion injury, preserve a liver ex situ before transplantation, assess the liver's function prior to implantation, and provide a platform for organ repair and regeneration. Alternatively, NMP with a whole blood-based perfusate can be used to mimic transplantation. Nevertheless, this model is labor-intensive, technically challenging, and carries a high financial cost.
In this porcine NMP model, we use warm ischemic damaged livers (corresponding to donation after circulatory death). First, general anesthesia with mechanical ventilation is initiated, followed by the induction of warm ischemia by clamping the thoracic aorta for 60 min. Cannulas inserted in the abdominal aorta and portal vein allow flush-out of the liver with cold preservation solution. The flushed-out blood is washed with a cell saver to obtain concentrated red blood cells. Following hepatectomy, cannulas are inserted in the portal vein, hepatic artery, and infra-hepatic vena cava and connected to a closed perfusion circuit primed with a plasma expander and red blood cells. A hollow fiber oxygenator is included in the circuit and coupled to a heat exchanger to maintain a pO2 of 70-100 mmHg at 38 &#176;C. NMP is achieved by a continuous flow directly through the artery and via a venous reservoir through the portal vein. Flows, pressures, and blood gas values are continuously monitored. To evaluate the liver injury, perfusate and tissue are sampled at predefined time points; bile is collected via a cannula in the common bile duct.

The porcine model of liver normothermic machine perfusion (NMP), described here, can be successfully used to study NMP as a preservation strategy, a tool for viability assessment, and a platform for organ repair. It holds a high translational value, however it is technically challenging and labor-intensive.

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine ...