ראיות ניסיוניות וקליניות מראות כי דיספרסיה אצמיה בכבד יכול להגביר את היווצרות של מוקדים גרורתיים על ידי הפצת תאים סרטניים ואת הצמיחה של מחלה מיקרומטסטטית. מודל מורין רבייה זה מאפשר את המחקר הרלוונטי הן של הקמת גרורות והן את הצמיחה של גידול קיים בתוך הכבד. ניתוחי כבד, דימום והלם זיהומי קשורים כולם לתרשים איסלנדמיה בכבד, והם יכולים להשפיע על צמיחת המחלה גרורתית.
טכניקות אלה מאפשרות לחקור תופעות אלה במאמץ לאבחן טוב יותר ולמנוע את ההשפעה המפגיעה של נגיף הקשה על גידולים בסביבה קלינית. לאחר אישור חוסר תגובה קמצוץ בוהן בעכבר זכר C57 שחור 6 בן 8 עד 12 שבועות, לחטא את העור חשוף דופן הבטן עם קרצוף povidone-יוד ולהשתמש מלקחי שיניים כדי להרים את העור. באמצעות אזמל כירורגי, לעשות חתך קו האמצע בעור ולהרים את שריר הבטן ואת peritoneum כדי להקל על יצירת חתך קו אמצע שלושה סנטימטרים כדי לחשוף את תכולת הבטן.
לאחר הנחת המוסטט משני צידי החתך ותחת תהליך xiphoid, למשוך ולהקליט את הזנב כלפי מטה כדי להאריך את הבטן ולהשתמש מוליקטור קצה כותנה סטרילית שישה אינץ להפריד ולחשוף את הטחול מרמת השומן בלבלב. לאחר מכן, מערבולת ההשעיה תא הסרטן של עניין כדי לנטרל את כל גושי התאים לטעון את התאים לתוך מזרק אינסולין 0.5 מיליליטר מצויד מחט 28-מד. לאט ובזהירות להזריק 100 microliters של תאים לתוך קצה הטחול, הצבת קצה כותנה סמוך לצד של ניקור המחט כדי לספוג כל שפיכת גידול אפשרי לתוך חלל הצפור תוך הוספת לחץ עדין כדי לייצב את הטחול במהלך ההזרקה.
זריקה מוצלחת תהיה ניכרת על ידי שינוי בצבע הכבד. כאשר כל התאים נמסרו, מניחים חתיכת גזה סטרילית ספוגה PBS מעל האזור המנותחת ומ מניחים את העכבר על משטח חימום במשך 15 דקות כדי לאפשר לתאי הסרטן להסתובב בתוך המערכת. כדי לגרום לפגיעה באיסקמיה ובהתרשכות, השתמש בשני קצות כותנה לחים כדי להזיז בעדינות את המעי מהחלל כדי לחשוף את וריד הפורטל ולנחות את העכבר תחת מיקרוסקופ ניתוח.
הרם את החציון והשאיר אונות כבד בצד שמאל נגד הסרעפת. מניחים צמר גפן לח קטן בין האונה החציונית לבין האונה הצדדית הימנית כדי ליצור מספיק מקום להידוק ולהעביר בזהירות מלקחיים של הספינה מאחורי שלישיית הפורטל, ובעזרת מלקחיים של הספינה, השתמשו בחתיכה של 10 ס"מ של תפר פוליפרופילן 4-0 כדי לעבור מאחור ולהרים את שלישיית הפורטל. השתמש במוליך מלחצי מיקרו-סריפין עם מנעול כדי למקם מהדק מיקרו-וסקולרי על האונות השמאליות והחציון של הכבד כדי לבודד את כל המבנים בטריאדת הפורטל.
כאשר blanching הוא ציין, להסיר את תפר פוליפרופילן 4-0 צמר גפן קטן ולהחזיר בזהירות את המעי לחלל הבטן. מכסים את דופן הבטן בחתיכה חדשה של גזה ספוגה PBS ומכסים את הגזה בניילון נצמד כדי למזער את אובדן האידוי. לאחר מכן מניחים את העכבר בחזרה על משטח החימום במשך 60 דקות.
לאורך כל מרווח הזמן האיסכמי, דמיינו את הבלאנקינג החיוור של האונות המדיאליות, המדיאליות השמאליות והצלביות הימניות כדי לאשר ראיות לפגיעה באיסכמיה. בתום תקופת הפציעה, הסר את המהדק. כדי לבצע כריתת טחול, בזהירות להרים את הטחול עם ממטרים חלקים ולהשתמש במכשיר צרוב כף יד כדי לצרוב את כלי הדם הטחול כדי למנוע דימום מוגזם.
חותכים את כלי הדם בחלק הנצרב כדי להסיר את הטחול ומיד להשתמש 4-0 תפרים פוליפרופילן כדי לסגור את חתכי השריר והעור בתבנית תפר דו שכבתית. ואז למקם את העכבר בחזרה לתוך הכלוב הביתי שלה עם ניטור עד החלמה מלאה. מתח כירורגי מגדיל באופן משמעותי את כמות micrometastases הוקמה מראש בתוך הכבד.
הבדל זה נצפה גם שבועיים לאחר רפרפוזיה קשה בהשוואה לעכברים שאינם איסקימיה reperfused. לחץ דם חוץ-כבד והזרקת תאים סרטניים יכולים להיות מושפעים חום החדר וכדאיות התא, לכן יש לדאוג לשלוט במשתנים אלה. טכניקה זו מקלה על חקר ההשפעות של מתח כירורגי ופגיעה בכבד על הצמיחה של מחלה גרורתית.
זה יעזור לחוקרים להבין טוב יותר את התופעה של גידול הנגרמת על ידי ניתוח.
