El estudio investiga los efectos cardioprotectores de Munziq sobre la lesión de perfusión miocárdica en ratas, particularmente aquellas con fluidos corporales anormales. Nuestro objetivo es determinar si el pretratamiento con Munziq puede mitigar la lesión por isquemia-reperfusión miocárdica, inducir cambios patológicos, proteger la función cardíaca y explorar sus mecanismos, especialmente a través de la vía de señalización NF-kappa B. Nuestro grupo de investigación se ha centrado en el estudio de la lesión miocárdica por isquemia-reperfusión.
Nuestro hallazgo sugiere que la inhibición de la vía NF-kappa B puede aliviar la lesión por isquemia-reperfusión miocárdica, lo que puede mitigar la lesión por isquemia-reperfusión miocárdica al inhibir la vía NF-kappa B, afectando la función mitocondrial y el metabolismo miocárdico. Nuestra investigación identifica a Munziq como un potencial terapéutico para la lesión miocárdica por isquemia-reperfusión, avanzando en el campo mediante la exploración de un enfoque de medicina natural. Este descubrimiento es significativo, ya que se dirige a la vía NF-kappa B, un mecanismo novedoso para el tratamiento de lesiones por isquemia-reperfusión miocárdica.
Nuestros hallazgos allanan el camino para una mayor aplicación clínica de la medicina tradicional en el tratamiento de las enfermedades cardiovasculares. Para empezar, aloje a las ratas en el grupo de fluidos corporales anormales, o ABF, en un entorno controlado dentro de cajas climáticas y proporcione alimento ordinario. Proporcione a las ratas alimento ordinario mezclado con alimento frío seco, es decir, semillas de cebada y cilantro, durante 21 días para establecer el modelo ABF.
Utilizando una técnica de administración intragástrica, administrar cinco gramos por kilogramo de Munziq a las ratas del grupo Munziq durante 21 días antes de la lesión por isquemia-reperfusión miocárdica o cirugía MIRI. Para establecer el modelo MIRI, después de 21 días de pretratamiento, se colocó la rata anestesiada en una mesa de operaciones estéril. Realizar una traqueostomía para permitir la respiración asistida por ventilador en la rata.
Antes de abrir el tórax, lave el sitio quirúrgico con agua jabonosa, afeite el área y desinféctela con una solución de yodo. A continuación, con tijeras, fórceps y retractores estériles, abra la pared torácica para exponer el corazón e identificar la arteria descendente anterior izquierda, que se encuentra en la superficie del corazón. Con una sutura 6-0, ligar la arteria para inducir isquemia regional durante 30 minutos.
Confirme la oclusión efectiva observando un color pálido en el miocardio. Después de 30 minutos, suelte la ligadura y permita la reperfusión durante 120 minutos. Confirmar la reperfusión del miocardio cuando vuelve a un color rojo brillante.
Después de la reperfusión, use un tubo de recolección de sangre al vacío para recolectar de uno a dos mililitros de sangre de la aorta abdominal. Después de sacrificar a la rata, use pinzas y tijeras estériles para recolectar tejido de miocardio del área del infarto en el ventrículo izquierdo. Coloque el tejido recolectado en un recipiente estéril para su posterior análisis.
Después de recolectar corazón infartado con miocardio de la rata establecida por MIRI, use tijeras estériles y cuchilla para seccionar el corazón horizontalmente en dos mitades a lo largo del punto medio del eje largo del ventrículo izquierdo perpendicular a la dirección del corazón. Divide la mitad de la parte apical en dos porciones. Conserve una porción en paraformaldehído al 4% a temperatura ambiente durante dos a 24 horas para el examen morfológico.
Coloque la otra porción en glutaraldehído a cuatro grados centígrados durante una a cuatro horas para microscopía electrónica. A continuación, divida la parte base del corazón, incluidas las áreas isquémicas y no isquémicas, en dos porciones. Coloque una porción en un criovial y congélela rápidamente en nitrógeno líquido.
Transfiera el tejido congelado a un congelador a menos 80 grados Celsius para realizar pruebas de biología molecular. Centrifugar la sangre extraída de la vena cava inferior a 1.000 G durante 10 minutos. Guarde el suero separado en un congelador a menos 80 grados centígrados.
Coloque las secciones de tejido fijadas en formaldehído en una incubadora a 65 grados centígrados para hornear durante 1,5 a dos horas. Sumerja las secciones de papel horneado en xileno durante 10 minutos. A continuación, sumerja secuencialmente las secciones de tejido en alcohol anhidro uno y dos durante cinco minutos cada una, seguidas de alcohol al 95%90%80% y 70%, y finalmente en agua destilada durante cinco minutos cada una.
Tiñe las secciones de tejido con hematoxilina durante tres minutos. Realice la diferenciación ácida sumergiendo brevemente las secciones de tejido en una solución de alcohol de ácido clorhídrico durante uno o dos segundos. Termine la diferenciación enjuagando con agua del grifo durante cinco minutos.
A continuación, sumerja las secciones de tejido en agua destilada, luego en alcohol al 70%, 80%, 90% y 95% durante tres minutos cada una. Después de sumergir la sección en alcohol anhidro uno y dos, tiñir las secciones con 0,5% de eosina en etanol durante un minuto. Ahora, enjuague las secciones con etanol al 95% para eliminar el exceso de color rojo.
A continuación, sumergir las secciones en etanol anhidro durante cinco minutos, seguidas de una inmersión en xileno uno y dos durante cinco minutos cada una. Monta las secciones teñidas con bálsamo neutro. Observe los cambios patológicos en el tejido bajo un microscopio.
El tejido miocárdico en el grupo simulado exhibió degeneración granular y vacuolar, infiltración limitada de glóbulos rojos y linfocitos, y dilatación y congestión vascular ocasionales. En el grupo MIRI se observó daño severo del tejido miocárdico con extensa degeneración granular y vacuolar. El daño miocárdico fue notablemente severo en el grupo ABF MIRI en comparación con el grupo control MIRI, mostrando signos amplificados de degeneración e infiltración tisular.
Las células miocárdicas tratadas con Munziq en los grupos control y ABF MIRI mostraron una degeneración granular y vacuolar reducida con menos glóbulos rojos, infiltración de linfocitos y congestión. Las células miocárdicas del grupo simulado mantuvieron intacta la estructura de las miofibrillas, la longitud uniforme del sarcómero y numerosas mitocondrias. En el grupo MIRI, las células miocárdicas mostraron hinchazón, longitud variada del sarcómero y miofilamentos alterados, con daño mitocondrial extenso.
El tratamiento con Munziq redujo la inflamación de las células miocárdicas y preservó la miofibrilla, el sarcómero y la estructura mitocondrial, similar a las afecciones simuladas. Los niveles séricos de cTn-T, CK-MB e ICAM-1 fueron significativamente más altos en el grupo ABF MIRI que en el grupo control. El pretratamiento con Munziq redujo notablemente los niveles de cTn-T, CK-MB e ICAM-1 tanto en el grupo ABF como en el grupo control MIRI.
El grupo ABF MIRI mostró un aumento de los niveles de malondialdehído y una disminución de los niveles de óxido nítrico en el tejido miocárdico en comparación con el grupo control MIRI. El pretratamiento con Munziq redujo significativamente el contenido de lactato deshidrogenasa y malondialdehído, al tiempo que aumentó los niveles de óxido nítrico en el miocardio isquémico. El grupo ABF MIRI mostró niveles elevados de interleucina uno beta, interleucina seis y TNF alfa, particularmente a nivel de proteínas.
El pretratamiento con Munziq redujo los niveles séricos y de ARNm de interleucina uno beta, interleucina seis y TNF alfa, particularmente a nivel de proteínas en el miocardio. Los marcadores de la vía NF-kappa B se regularon al alza en el tejido MIRI, lo que indica inflamación. El tratamiento con Munziq disminuyó la expresión de marcadores de vía, lo que indica una reducción de la activación de la vía NF-kappa B.
