Modelo quirúrgico para tubos uroteliales de ingeniería tisular de una sola etapa en minicerdos

Para empezar, ayuna un mini cerdo de Gotinga adulto 12 horas antes de la cirugía. Después de realizar una laparotomía estándar de la línea media inferior en un cerdo anestesiado, tire de la vejiga urinaria interperitoneal hasta la herida. Ahora, realice una hemostasia profiláctica en la pared anterior de la vejiga y haga una incisión en el músculo detrusor con diatermia.

Luego, corte la capa mucosa interna con unas tijeras para extirpar un segmento de vejiga de pared completa. Cierre la pared de la vejiga con una sutura trenzada rápida y reabsorbible dejando una abertura proximal de un centímetro cuadrado. Diseccione cuidadosamente la capa mucosa de la muestra resecada en condiciones estériles y pique la muestra de mucosa en microinjertos de un milímetro cuadrado para la inclusión en andamios.

Con pinzas, coloque las partículas de mucosa en una malla biodegradable ajustada con una relación de expansión de uno a seis. Coloque la malla con los microinjertos hacia arriba dentro de un molde rectangular de acero lleno de solución de colágeno. Después de la solidificación, deslice el hidrogel sobre una malla de nailon que descansa sobre una placa de acero perforada y retire suavemente el molde.

Expulse el agua del hidrogel colocando una malla de nailon y luego una placa de acero encima del gel, y luego comprima pasivamente con un peso de 120 gramos colocado encima de la placa de acero durante cinco minutos. Después de la compresión, retire suavemente el peso y la malla de nailon. Ahora, el injerto está listo para la manipulación quirúrgica.

Haga rodar el andamio aplanado alrededor de un stent biodegradable con los microinjertos mirando hacia el stent y suture el andamio en su lugar longitudinalmente con una sutura de monofilamento reabsorbible lentamente. Fije un tapón de enema de colon anterógrado dentro de la luz del stent suturando el stent a la tapa con dos o tres suturas interrumpidas no reabsorbibles. Después de completar el andamio, anastomése la construcción tubular a la abertura restante en la pared anterior de la vejiga con una sutura de monofilamento reabsorbible lentamente.

Apriete la anastomosis con una sutura de cuerda y lige el extremo distal del conducto. Extraiga un colgajo peritoneal del ligamento pubovesical y parchee el andamio tubular longitudinalmente con una sutura de monofilamento reabsorbible lentamente. Inyectar solución salina a través del catéter uretral para confirmar la permeabilidad anastomótica.

Diseccione sin rodeos un canal transfascial lateralmente a la línea media junto a la glándula mamaria caudal en el lado derecho. Coloque el conducto en un bolsillo subcutáneo y marque el conducto con suturas a nivel de la piel no reabsorbibles. Después de cerrar la fascia muscular anterior del músculo abdominal, cierre la piel con una sutura de monofilamento no reabsorbible.

Al final de las seis semanas de observación, inspeccione la luz del conducto mediante endoscopia para ver la continuidad y el revestimiento epitelial. Realice una tomografía computarizada con contraste para garantizar la permeabilidad del conducto. Después de seis semanas de observación, la evaluación microscópica del tejido del andamio no reveló signos de rechazo o infección del huésped, y el andamio tubular permaneció permeable y sin obstrucciones.

Las evaluaciones histológicas mostraron un epitelio luminal estratificado de origen urotelial que cubría todo el andamio con restos de los biomateriales de refuerzo aún visibles después de seis semanas.