Nörodejeneratif hastalık genellikle yıkıcı davranış belirtileri ile tezahür, bilişsel bozukluk gibi, duygudurum bozuklukları, hatta motor işlev bozuklukları. Bu çalışma, davranışsal fenotiplerin yüksek düzeyde tekrarlanabilirlik ile doğru bir şekilde değerlendirilmesini sağlar. Farelerde davranış analizinde tekrar tekrar kullanılabilen kapsamlı bir pil tasarlıyoruz.
Bu test motor fonksiyonları, sosyal etkileşim, duygusal fonksiyon ve bilişsel fonksiyon asses. Bu pildeki test sırasını ve aralığını düzenleyerek, test verimliliğini artırdık ve testler arasındaki paraziti ve fareler üzerindeki sık kullanım stresini azalttık. Başlamak için, davranış testini metin protokolünde açıklanan sırada düzenleyin.
Açık alan testini şeffaf olmayan, beyaz, plastik bir alanda gerçekleştirin. Kamera kaydını başlatın ve fareyi yavaşça arenanın ortasına koyup duvara bakacak şekilde koyun. Farenin davranışını 10 dakika kaydedin ve ev kafesine geri verin.
Ardından, bilgisayar ekranında arenayı dörde bölün. Farenin lokomotor işlevini değerlendirmek için arenadaki ızgaraçizgilerinden kaç kez geçtiğini sayın. Anksiyeteyi ölçmek için, farenin arenanın merkezi bölgesinde harcadığı süreyi ölçün.
Aynı gün yüksek artı labirent testi yapın. Tüm fareler açık alan testini bitirdikten sonra fareyi açık ve kapalı kolların kavşağına yerleştirin. Fareyi ev kafesine geri döndürmeden önce farenin davranışını beş dakika kaydedin.
İki gün üst üste açık alan testinden sonra, metin protokolüne göre yeni nesne tanıma testini ayarlayın. Kamerayı başlatın ve fareyi tanımak için fareyi duvar ortasına bakacak şekilde arenaya yerleştirin. Farenin davranışını 10 dakika kaydedin.
Sonra fareyi ev kafesine geri getirin. Alışmandan 24 saat sonra, testi tek bir yeni nesneyle tekrarlayın. Farenin yeni bir nesne ve tanıdık bir nesneyle etkileşime girdiği süreyi ayrı ayrı ölçün.
Daha sonra farenin belleği roman nesnesinin tercihi olarak hesaplayın. Sosyal etkileşim testi için, yüzeyde delikler olan iki saydam odacıklı açık bir alan alanı kullanın. Fareyi odalara alışmak için üç dakikalık nesneleri arama süresi için konu fareyi arenaya yerleştirin.
Sonra ev kafesi için konu fare dönmek ve arena temizleyin. Odalardan birine yeni bir fare koy. Daha sonra konu fareyi arenaya yeniden tanıtın ve üç dakika boyunca kaydedin.
Videoyu incelerken, özfarenin yeni fare odası veya boş oda ile etkileşimde kaldığı zaman oranını ölçerek sosyal etkileşimi ölçün. Daha sonra hızlanan rotarod testini gerçekleştirin. Her denemede, fareyi makinenin karşısındaki duvara bakan statik çubuk üzerine yerleştirin.
Fare nin ölçeği eşit olarak öğrenmesi için fareleri olası belirtilerin başlangıcından önce saf farelerde üç gün boyunca eğiterek rotarod'a alışın. Fare düştüğünde aygıtı durdurun ve farenin çubuküzerinde harcadığı zamanı kaydedin. Fareyi ev kafesine geri vermeden önce bu işlemi iki kez daha tekrarlayın.
Daha sonra bir davranış odasının ortasına su labirentkoymak ve su labirent konumunu sabit kalır sağlamak için labirent konumunu işaretleyin. Labirenti dört hayali çeyreğe ayırın. Her çeyreğin ortasına görsel ipuçları asın.
Sonra dördüncü çeyreğin ortasına bir platform yerleştirin ve konumunu işaretleyin. Su seviyesi platformdan bir santimetre daha yüksek olana kadar labirenti süt tozuyla beyaz renkli suyla doldurun. Her eğitim denemesinin başında, video kaydını başlatın ve fareyi yavaşça labirente koyun.
Farenin görüş alanından uzak dur. Fare platformu 60 saniye içinde bulamıyorsa veya fare platformu 60 saniye içinde bulunca ve üzerinde 10 saniye kalırsa fareyi ev kafesine geri döndürün. Test bittikten sonra videoyu durdurun ve fareyi kızılötesi ışığın altına ev kafesine koyun.
Son olarak daha önce açıklandığı gibi, platform olmadan su labirent testi nin sonda aşamasını gerçekleştirin. Sonra silindirik tankı zorunlu yüzme testine hazırlayın. Video kaydını başlatın ve fareyi yavaşça tankın ortasına suya koyun.
Fareyi ev kafesine geri koymadan önce fareyi altı dakika kaydedin. Zorla yüzme testinin videosunu gözden geçirin. Videonun son beş dakikasında hareketsizlik süresini ölçün.
Bu protokol, silika nano partiküllerine solunum maruziyetinden sonra farelerdeki davranış değişikliklerini incelemekti. Açık alan testi ve hızlanan rotarod testisonuçları, silika nano partiküllerinin farelerde lokomotor veya motor fonksiyonunu etkilemediğini göstermiştir. Sosyal etkileşim aktivitesi silika nano tanecikleri bir ay maruz kaldıktan sonra etkilenmiştir, Ancak açık alan testi, yükseltilmiş artı labirent testi, ve zorunlu yüzme testi maruz kalma bir ay sonra herhangi bir anksiyete veya depresyon belirtmedi.
Silika nano tanecikleri için iki aylık bir maruz kalma anksiyete neden oldu, yüksek artı labirent testi sonuçları gösterildiği gibi. İki aylık maruziyetten sonra su labirenttestinde de bilişsel bozukluk saptandı. Bu pil C57 fare zorlanma nörodejenerasyon kapsamlı davranış analizi için tasarlanmıştır.
Nörotoksin veya potansiyel risk faktörlerinin toksisitesi veya genellikle uzun süreli uygulama ve tekrarlanan testler içeren ilaç geliştirme, nörodejenerasyona bağlı boylamsal çalışmalar için en uygundur.
