Name: a volumetric method for quantification of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage
Uploaded: 2018-07-28T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 12 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage at JoVE.com

Bu çalışmada bölümlerini T. Pantel, Tıp Fakültesi Mainz Johannes Gutenberg-üniversite sunulan doktora tezi bir parçasıdır. Çalışma Friedhelm Stiftung serbest bırakır ve Stiftung Neurochirurgische Forschung (A.N. hibe) tarafından desteklenmiştir.

Hayvan deneyleri sorumlu hayvan bakımı Komitesi (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz) tarafından onaylanmış ve Alman hayvan refah Yasası (TierSchG) uygun olarak yürütülmektedir. Bakım ve hayvanların kullanımı için ilgili tüm uluslararası, ulusal ve kurumsal yönergeleri takip edildi.
Bu çalışmada, Erkek C57BL6 fareler (10-12 hafta yaş) kullanılmıştır. Kısacası, subaraknoid kanama endovasküler filaman perforasyon isoflurane ile anestezi altında tarafından akımıdır. Sol dış karotid arter cerrahi olarak hazırlanmıştır. Sonra bir filament dış karotid arter eklenen ve intracranially karotis T, subaraknoid kanama inducing delikli iç karotis arter yoluyla gelişmiş. Kafa içi basınç artış başarılı endovasküler bir göstergesi olarak alınan delikli. Farelerde SAH bir endovasküler filaman perforasyon modeli detaylı bir protokol oldu başkaları tarafından8,14yayınlandı.
1. perfüzyon ve endovasküler döküm
<ol><li>Bu çalışmada, perfüzyon 72 saat sonra SAH indüksiyon gerçekleştirildi. Anestezi intraperitoneally 5 µg/g vücut ağırlığı (bw) midazolam, 30 ng/g bw fentanil ve 0,5 µg/g bw medetomidin enjekte edilerek ikna etmek. Sadece yeterli anestezi düzeyi, hangi acı uyaranlara karşı tepkiler yokluğunda tarafından onaylandıktan ulaşıldıktan sonra devam edin.</li>
	<li>Toraks açık, 21 G kanül ile sol ventrikül ponksiyon, sağ atrium açın ve azalan aort açıklandığı gibi başka bir yerde15kelepçe.</li>
	<li>Aşağıdaki çözümleri kullanarak bir transcardiac perfüzyon gerçekleştirmek: (i) Dulbecco'nın fosfat tamponlu MgCl2 ve CaCl2 pH 7.4 ile 1 g/M glikoz ve (ii) % 4 paraformaldehyde çözüm içeren serum fizyolojik.<ol>
<li>Perfüzyon çözüm ile (i) için 2 dakika başlarlar ve çözüm ile (II) 4 dakikadır.</li>
		<li>Çözümleri bir sıcaklık 37 ° C ve vasospasm fareler16çözümlemek için en uygun perfüzyon basıncı bulundu 70 mmHg sabit bir basınç ile sıvı için değişken perfüzyon oranı ile basınç kontrollü pompa kullanarak süzülür. Basınç kaybı çözüm (i) geçiş yaparken çözüm (II) kaçının.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Radyoopak döküm ajan ile Oda sıcaklığında 20 dakika perfüzyon çözümleri (i) ve (ii) ile perfüzyon sonra devam ( Tablo malzemelerigörmek) 0.2 ml/dk sabit bir hızda.</li>
	<li>4 ° C'de radyoopak döküm malzemenin gecede tedavi için izin verir. Sonra yukarıda açıklanan17olarak kafatası beyin kaldırmak, örnek % 4 İngiltere'de yılın eriyik-e doğru aktarın ve mikro CT tarama kadar örnek 4 ° C'de depolayın.</li>
</ol>2. mikro bilgisayarlı tomografi
<ol><li>Beyin bir künt anatomik forseps ile bir plastik tüp ortasına yerleştirin. Nesneyi resim alma sırasında taşımak değil emin olmak için örnek daha biraz daha büyük çaplı bir tüp seçin. Gazlı bez tüp kapatmak için kullanın.</li>
	<li>Bilgisayar-navigasyon-kontrol (CNC) konumlandırma sistemi, nesneyi yatay ekseni döndürüleceğini X-ray kabinde mikro adım motor plastik tüp takın.</li>
	<li>Alan bakış açısı altında x-ışını radyografi örnekte hizalayın. Maksimum büyütme elde etmek için x-ışını kaynağına mümkün olduğunca yakın nesneyi yerleştirmek ve belgili tanımlık bulmak mümkün olduğunca Uzaklik en üst düzeye çıkarmak.</li>
	<li>Bir adım ve çekim görüntü Alım Protokolü ile aşağıdaki tarama parametreleri kullanın: set çekim hızı 1 s sinyal-gürültü oranı (SNR) optimize etmek gerilim 80 tüp her projeksiyon için kV (geçerli 38 µA), 1000 projeksiyonlar sonucu 360 ° dönme.</li>
	<li>RAW veri yeniden inşası için 1024 x 1024 x 1024 voxels yeniden yapılanma yazılımını kullanarak bir matris ile Shepp-Logan filtre uygulama filtre uygulanmış arka projeksiyon algoritma kullanın (bkz. Tablo malzeme). Daha fazla çözümleme için 3 boyutlu görselleştirme yazılımı içine elde edilen DICOM veri alma ( Tablo malzemelerigörmek).</li>
</ol>3. 3 boyutlu rekonstrüksiyon kafa içi vasküler ağaç ve gemi birimleri belirlenmesi
Not: İşlevleri hakkında arka plan bilgileri görselleştirme yazılım işlevi Yardımkullanarak bulunabilir.
<ol><li>DICOM veri almaişlevini kullanarak görselleştirme yazılımı içine alın.</li>
	<li>Gemi ağaç Volrenişleviyle görselleştirin. Büyük serebral arterler keskin Anahatlarda tasvir edilmektedir görselleştirme eşik seçin. Deneysel serideki tüm veri kümesi için aynı görselleştirme eşik kullanmak önemlidir.</li>
	<li>Neredeyse bazal serebral arterler (Willis daire) işleviyle VolumeEdit gemiler imleç çevreleyen incelemek. O zaman hemen hemen çözümlenmesi için gemi segment incelemek. Bu nedenle, vasküler ağaç 3 boyutlu modelini tam olarak tüm küçük dalları ana arterin ayırmak için döndürün. Analiz edilecek gemi kesimi hariç tüm gemileri silmek daha fazla çözümleme için önemlidir.</li>
	<li>Küme oluşturur görselleştirme eşik için eşik ile Autoskeleton işlevi uygular bir Merkezi-çizgi - SpatialGraphdayalı.</li>
	<li>Uygula işlevi oluşturmak için SpatialGraphToLineSet bir satır kümesi. Onun tek alt segmentler el ile imleci ile tek alt segmentleri seçip "bölme" tıklayarak ayarla satırını bölmek. Tek alt segmentler birimleri hesaplamak için çok önemli bir adımdır.</li>
	<li>Tekrar kayma bir grafik oluşturmak için LineSetToSpatialGraph işlevini kullanın.</li>
	<li>Uzunluk, hacim ve her alt bölüm çapını belirlemek için SpatialGraphStatistics işlevini kullanın. Renk kodlu görselleştirme için işlevini kullanın damar çapı elbette temsil eden SpatialGraphView. "Damar çapı ile karşılıklı olarak ilişkilendirir kalınlığı" için boyama segment ayarlayın. Deneysel serideki tüm veri kümeleri için aynı renk eşlemi seçmek önemlidir.</li>
	<li>Hangi alt segmentler içinde daha fazla çözümleme dahil edileceğini belirlemek için alt segmentler uzunlukları ekleyin. Bu da çalışmanın iç karotid arter karotis T proksimal 1 mm ve 2.5 mm orta serebral arter karotis T. distal oluşan bir gemi kesimi değerlendirildi Sonra tanımlanmış gemi segment gemi hacmi belirlemek için birimleri ekleyin.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li><li>Dorsch, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+clinical+review+of+cerebral+vasospasm+and+delayed+ischaemia+following+aneurysm+rupture.">A clinical review of cerebral vasospasm and delayed ischaemia following aneurysm rupture.</a> Acta Neurochirurgica Supplement. 110 (Pt 1), 5-6 (2011).</li><li>Vergouwen, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+delayed+cerebral+ischemia+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage+as+an+outcome+event+in+clinical+trials+and+observational+studies:+Proposal+of+a+multidisciplinary+research+group.">Definition of delayed cerebral ischemia after aneurysmal subarachnoid hemorrhage as an outcome event in clinical trials and observational studies: Proposal of a multidisciplinary research group.</a> Stroke. 41 (10), 2391-2395 (2010).</li><li>Friedrich, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CO2+has+no+therapeutic+effect+on+early+microvasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">CO2 has no therapeutic effect on early microvasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 34 (8), e1-e6 (2014).</li><li>Friedrich, B., Muller, F., Feiler, S., Scholler, K., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+subarachnoid+hemorrhage+causes+early+and+long-lasting+microarterial+constriction+and+microthrombosis:+An+in+vivo+microscopy+study.">Experimental subarachnoid hemorrhage causes early and long-lasting microarterial constriction and microthrombosis: An in vivo microscopy study.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 32 (3), 447-455 (2012).</li><li>Terpolilli, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+inhalation+reduces+brain+damage,+prevents+mortality,+and+improves+neurological+outcome+after+subarachnoid+hemorrhage+by+resolving+early+pial+microvasospasms.">Nitric oxide inhalation reduces brain damage, prevents mortality, and improves neurological outcome after subarachnoid hemorrhage by resolving early pial microvasospasms.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 36 (12), 2096-2107 (2016).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+segmentation-based+volumetric+approach+to+localize+and+quantify+cerebral+vasospasm+based+on+tomographic+imaging+data.">A segmentation-based volumetric approach to localize and quantify cerebral vasospasm based on tomographic imaging data.</a> PLoS One. 12 (2), e0172010 (2017).</li><li>Schuller, K., Buhler, D., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">A murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), e50845 (2013).</li><li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice.">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. 183 (2), 136-140 (2009).</li><li>Momin, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+delivery+of+nitric+oxide+inhibits+leukocyte+migration+and+prevents+vasospasm+in+haptoglobin+2-2+mice+after+subarachnoid+hemorrhage.">Controlled delivery of nitric oxide inhibits leukocyte migration and prevents vasospasm in haptoglobin 2-2 mice after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65 (5), 937-945 (2009).</li><li>Froehler, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+haptoglobin+2-2+mice+can+be+prevented+with+a+glutathione+peroxidase+mimetic.">Vasospasm after subarachnoid hemorrhage in haptoglobin 2-2 mice can be prevented with a glutathione peroxidase mimetic.</a> Journal of Clinical Neurocience. 17 (9), 1169-1172 (2010).</li><li>Lin, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage-induced+cerebral+vasospasm.">A murine model of subarachnoid hemorrhage-induced cerebral vasospasm.</a> Journal of Neuroscience Methods. 123 (1), 89-97 (2003).</li><li>Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+intracranial+in+vivo+animal+models+of+delayed+cerebral+vasospasm.">Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm.</a> British Journal of Neurosurgery. 24 (4), 415-434 (2010).</li><li>Feiler, S., Friedrich, B., Scholler, K., Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+induction+of+subarachnoid+hemorrhage+in+mice+by+intracranial+pressure+monitoring.">Standardized induction of subarachnoid hemorrhage in mice by intracranial pressure monitoring.</a> Journal of Neuroscience Methods. 190 (2), 164-170 (2010).</li><li>Ghanavati, S., Yu, L. X., Lerch, J. P., Sled, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+perfusion+procedure+for+imaging+of+the+mouse+cerebral+vasculature+by+X-ray+micro-CT.">A perfusion procedure for imaging of the mouse cerebral vasculature by X-ray micro-CT.</a> Journal of Neuroscience Methods. 221, 70-77 (2014).</li><li>Parra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage+associated+cerebral+vasospasm:+methodological+analysis.">Mouse model of subarachnoid hemorrhage associated cerebral vasospasm: methodological analysis.</a> Neurological research. 24 (5), 510-516 (2002).</li><li>Boulay, A. C., Saubamea, B., Decleves, X., Cohen-Salmon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+Mouse+Brain+Vessels.">Purification of Mouse Brain Vessels.</a> Journal of Visualized Experiments. 105 (e53208), (2015).</li><li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+with+a+deletion+in+the+first+intron+of+the+Col1a1+gene+develop+dissection+and+rupture+of+aorta+in+the+absence+of+aneurysms:+High-resolution+magnetic+resonance+imaging,+at+4.7+T,+of+the+aorta+and+cerebral+arteries.">Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: High-resolution magnetic resonance imaging, at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries.</a> Magnetic Resonance in Medicine. 55 (3), 592-597 (2006).</li><li>Schambach, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrafast+high-resolution+in+vivo+volume-CTA+of+mice+cerebral+vessels.">Ultrafast high-resolution in vivo volume-CTA of mice cerebral vessels.</a> Stroke. 40 (4), 1444-1450 (2009).</li><li>Figueiredo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+digital+subtraction+angiography,+micro-computed+tomography+angiography+and+magnetic+resonance+angiography+in+the+assessment+of+the+cerebrovascular+system+in+live+mice.">Comparison of digital subtraction angiography, micro-computed tomography angiography and magnetic resonance angiography in the assessment of the cerebrovascular system in live mice.</a> Clinical Neuroradiology. 22 (1), 21-28 (2012).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Temel SAH araştırma için önemli bir araç fare SAH modellerdir. Serebral vasospasm sık sık deneysel çalışmalar için DCI SAH9,11' den sonra lider mekanizmaları araştıran bir son nokta olarak kullanılır. Ancak, farelerde serebral vasospasm miktar ya da diğer küçük hayvan modelleri SAH, meydan okuyor. Vasospasm gemi çapları endovasküler perfüzyon ve döküm7,9,12 sonra tanımlanmış anatomik noktalarda ex vivo belirlenmesi veya çevresi belirlenmesi genellikle, sayısal histolojik olarak tanımlanan gemilerin10,11bölümleri. Ancak, bu yöntemlerin bazı dezavantajları var: Vasospasm yalnızca tanımlanmış anatomik noktalarda; değerlendirilir vasospasm gemi parçaları komşu değerlendirme kaçış olabilir. Histolojik eserler hatalardan başka bir kaynak mevcut. Ayrıca, değerlendirme oldukça öznel olabilir çünkü tam olarak nerede damar çapı ölçülür araştırmacı tarafından belirlenir.
Amaç bu nedenle serebral vasospasm serebral gemiyi kesimleri kesitsel görüntü veri7gemi hacmi hesaplayarak quantifies bir yöntem kurmak oldu. Burada sunulan hacimsel yöntemin en önemli avantajı kesimleri incelenebilir o gemiyi var. Bu bir noktasının nerede damar çapı ölçülür tanımının engeller. Bir daha bütün gemi parçaları değerlendirilmesi o muhtemelen gemi çapları nerede vasospasm daha proksimal ve distal geminin kaçış olabilir tanımlanmış noktalarda belirlenmesi daha vasospasm ölçmek için daha objektif bir parametre armağan avantajdır değerlendirme. Damar çapı bir renk kodu kullanarak dijital gösterimi vasospasm derece sezgisel bir tahmin sağlar. Ayrıca, hacimsel değerlendirme değerlendirme temsilcisi sonuçlarında gösterildiği gibi damar çapı göre vazospastik gemiler arasındaki büyük farklar yol açar. Burada sunulan yöntemiyle elde sanal imar damar anatomi doğru şekilde yansıtır. Bu hangi gemi çap olarak ölçülen ve dijital rekonstrüksiyonlar benzerdi, bir önceki çalışma7gözlemleri üreyen temsilcisi serisi değerlendirme tarafından gösterilir. Ancak, avantajları rağmen daha fazla çalışmalar burada sunulan Yöntem vasospasm analiz geleneksel yöntemlerle üstün olup olmadığını değerlendirmek için ihtiyaç vardır.
Bir yöntemi burada sunulan bu mikroskopik analiz döküm beyin örnekleri ya da histolojik Analizi (mikro CT zaman beyin örnek, veri işleme beyin örnek başına 45 dakika başına 90 dakika tarama) göre daha fazla zaman tanıyor kısıtlamasıdır. Ayrıca, mikro CT tarayıcıları kullanılabilirliğini onun uygulama sınırlayabilir. Hayvanlar burada muayene sayısı bu el yazması açıklanan protokol fizibilite göstermek için yeterli idi. Ancak, protokol tedavi çalışmalarında kullanılması gerekiyorsa, hayvan numaraları hesaplanan gerekir gemi birimleri ve çapları beklenen etkileri dayalı. Bu ve diğer çalışmaların fare SAH modelleri kullanarak başka bir sınırlama bu vasospasm kararlı ex vivoolmasıdır. Bu uzunlamasına çalışmalar imkansız temel değerlerini SAH indüksiyon ve farklı zaman noktalarda vasospasm önce araştırmak sağlar. Çalışmalar bunun göstermiştir rağmen manyetik rezonans tomografisi18, bilgisayarlı tomografi anjiyo19veya dijital çıkarma kullanarak fare vivo içinde büyük kafa içi gemilerin anatomisi tasvir etmek mümkündür anjiyografi20, bizim bilgi, bu yöntemler henüz kullanılmamış fare SAH modelleri içinde vivoserebral vasospasm analiz etmek. Not, serebral damarlara dijital yeniden serebral vasospasm burada sunulan sonraki hacimsel değerlendirilmesi ile ex vivo mikro CT veriler üzerinde kullanılacak sınırlı değildir. Yüksek çözünürlüklü vasküler çapraz kesit beyin görüntüleme farelerde gelecekte kullanılabilir olacaktır vasospasm in vivohacimsel analizini gerçekleştirmek için kullanılabilir.

Aneurysmatic subaraknoid kanama (SAH), hemorajik inme, bir alt tür neurointensive bakım ünitelerinde yaygın bir hastalıktır. Kanama olayı kendisi tarafından beyin hasarları oluşmaktadır, erken beyin hasarı yanı sıra (EBI), klinik tarafından tanımlanan gecikmeli serebral iskemi (şef), hasta sonucu belirleyen bir diğer önemli faktör olduğunu bozulma ile Engelli beyin perfüzyon veya beyin enfarktüsü girişimsel ve cerrahi1,2,3ile ilişkili değil. DCI için katkıda bulunan önemli vasospasms büyük beyin damarlarının bir yandan mekanizmasıdır; Öte yandan, vasospasm yüzdeki ve mikrotromboz ve kortikal yayılan depresyon ile ilgili iskemi ile microcirculatory disfonksiyon (gözden Madonald 20141içinde) bir rol oynar. Bu nedenle, vasospasm büyük beyin damarlarının tanısında klinik pratikte çok önemlidir ve birçok klinik ve deneysel çalışmalarda önemli bir bitiş noktasını görüntüler.
Vasospasm fare SAH modelleri özellikleri doğrudan değildir olmasına rağmen SAH insan hasta, fare modelleri için transfer edilebilir ilgili vasospasm-si olmak be önemi son yıllarda büyüyen. Bu modelleri SAH endovasküler filaman delikli4,5,6,7,8, cisternal gemiler9transeksiyon veya bos10 içine kan enjeksiyon tarafından indüklenen ,11,12. Geleneksel olarak vasospasm13eğitim için tasarlanmış büyük hayvan modelleri SAH aksine, fare modelleri çok sayıda transgenik fareler suşları kullanılabilir üstünlüğü var. Bu onları moleküler mekanizmalar vasospasm ve DCI lider eğitim için mükemmel bir araç yapar. Ancak, farelerde serebral vasospasm belirlenmesi zordur. Bunun nedeni, vasospasm klinik görüntüleme teknikleri kullanılarak incelenebilir büyük hayvan modeller aksine farelerde serebral vasospasm analiz etmek için Imaging vivo içinde henüz kullanılabilir değil. Bu nedenle, vasospasm yaygın olarak her iki histolojik kesitler10,11 kullanarak veya mikroskobik sonra beyin damarlarının7,9,12/ döküm belirlenir. Ancak, bu teknikler çapları sadece tanımlanmış noktalarda incelenir o gemiyi dezavantajı var.
Bir önceki çalışma7üzerinde bağlı olarak, bu el yazması bir fare SAH modelinde amaç ve vasospasm tekrarlanabilir analizi için bir yöntem sunar. Perfüzyon ve döküm beyin damarları, ex vivo mikro-CT tarama, dijital yeniden gemisi ağacının bağlı ve sonraki yöntemdir birimleri tüm beyin damarlarının değerlendirilmesi.

<table><tbody><tr><td>Medetomidin&amp;nbsp;</td><td>Pfizer, Karlsruhe, Germany</td><td>n.a.</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Ratiopharm, Ulm, Germany</td><td>n.a.</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl&amp;nbsp;</td><td>Curamed, Karlsruhe, Germany</td><td>n.a.</td><td></td></tr><tr><td>Venofix 21G</td><td>B Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany</td><td>n.a.</td><td>21G cannula&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Dulbecco&amp;rsquo;s Phosphate Buffered Saline containing MgCl2 and CaCl2, pH 7.4&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, Hamburg, Germany</td><td>D8662&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>4% paraformaldehyde solution&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, Hamburg, Germany</td><td>100496</td><td></td></tr><tr><td>Microfil MV-122&amp;nbsp;</td><td>Flowtech Inc., Carver, MA, USA</td><td>n.a.</td><td>Radiopaque</td></tr><tr><td>Micro-CT system Y.Fox</td><td>Yxlon, Garbsen, Germany</td><td>n.a.</td><td></td></tr><tr><td>Reconstruction Studio software version 1.2.8.1</td><td>TeraRecon, Frankfurt am Main, Germany</td><td>n.a.</td><td>Reconstruction software</td></tr><tr><td>Amira software version 5.4.2&amp;nbsp;</td><td>FEI Visualization Sciences Group, Hillsboro, OR, USA</td><td>n.a.</td><td>Visualization software</td></tr><tr><td>PHD ultra syringe pump</td><td>Harvard Apparatus</td><td>70-3</td><td>Pressure controlled pump</td></tr><tr><td>anatomical forceps (blunt)</td><td>B Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany</td><td>160323_v&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Infinity X-21</td><td>Deltapix, Maalov, Denmark</td><td>n.a.</td><td>high resolution camera</td></tr><tr><td>DeltaPix Insight software version 2.0.1</td><td>Deltapix, Maalov, Denmark</td><td>n.a.</td><td></td></tr><tr><td>C57BL6 mice</td><td>Charles River, Cologne, Germany</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

a volumetric method for quantification of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage

Subaraknoid kanama (SAH) hemorajik inme alt olduğunu. Kanama sonrasında oluşur beyin vasospasm hasta sonucu belirlemede önemli bir faktör olduğunu ve bu nedenle sık sık çalışma bitiş noktası olarak alınır. Ancak, küçük hayvan çalışmalarında SAH üzerinde serebral vasospasm miktar büyük bir sorun olduğunu. Burada, bir ex vivo yöntemi miktar serebral vasospasm ölçmek için objektif bir ölçü kullanılabilir tüm gemi parçaları hacimli sağlayan sunulur. Bir ilk adım olarak, beyin damarlara endovasküler döküm radyoopak döküm Aracı kullanılarak gerçekleştirilir. O zaman, kesitsel görüntü veri mikro bilgisayarlı tomografi ile elde edilir. Son adım 3 boyutlu inşası merkezi hatları ve seçilen gemi segmentlerinin birimleri hesaplamak için bir algoritma tarafından takip sanal vasküler ağacı içerir. Yöntem kendi sanal rekonstrüksiyonu ile anatomik örnekleri çapı tabanlı karşılaştırılması tarafından gösterilen serebrovasküler ağaç son derece hassas bir sanal yeniden inşası sonuçlandı. Yalnız gemi çapları ile karşılaştırıldığında, gemi birimleri SAH ve sham çalışan fareler bir dizide vazospastik ve vazospastik sigara damarları arasındaki farkları vurgulayın.

3 boyutlu beyin damar ağacının sanal yeniden yapılanma
3-boyutlu yeniden kafa içi vasküler ağaçlar son derece hassas bir damar anatomi (Şekil 1) sağlanan. Doğruluk değerlendirmek için biz çapı tabanlı karşılaştırma olarak belirlenen gemi çapları arasında ve 3 boyutlu sanal rekonstrüksiyonlar 2 anatomik olarak tanımlanmış noktalarda üzerinden yapılacak (1: 1 mm orta serebral arter (MCA), distal yaptı karotis T; 2: 1 mm karotis T distal MCA değil). Gemi çapları mikroskobik belirlenmesi için bir ölçüm ölçek için kalibre bir yüksek çözünürlüklü fotoğraf makinesi (sonsuz X-21, Deltapix) ile DeltaPix Insight yazılımı sürüm 2.0.1 kullanıldı. Bu değerlendirme için 10 beyin örnekleri (5 SAH, 5 sahte) analiz edildi. Bu 5 sahte ameliyat (ameliyat sonrası gün 1 ve 2, sırasıyla öldü SAH grubunun 2 hayvanlar) iken hangi bir SAH, akımıdır 7 12 fareler bir dizi vardı. Kafa içi damar anatomi (mikroskobik belirlenmesi vs sanal imar, doğru bir sanal yeniden inşası gösteren kesin ve neredeyse, belirlenen çapları arasında hiçbir önemli farklılıklar vardı ± Standart hata demek: MCA 150 ± 9 µm vs sol MCA 150 ± 8 µm; yaptı MCA 153 ± 8 µm vs154 ± 9 µm anda, Şekil 2bakın). 
SAH ile farelerde serebral vasospasm miktar
Serebral vasospasm ölçmek için (i ses, 1 mm iç karotid arter (ICA) ve 2.5 mm MCA sol ve (ii) damar çapı 2 anatomik olarak tanımlanmış noktalarda (sol ve sağ MCA) oluşan bir önceden tanımlanmış temsilcisi 3.5 mm gemi kesim olduğunu beyin örneklerinde SAH ve sham işletilen hayvanlardan belirlenen (n = 5). Gemi birim SAH sham için karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha düşük (36 ± 4 nL vs 71 ± 9 nL, p < 0,05). Gemi çapları SAH sham için karşılaştırıldığında daha düşük (MCA yaptı: 140 ± 10 µm vs 160 ± 11 µm, p 0,11; = sağ MCA: 130 ± 13 µm vs 158 ± 16 µm, p < 0,05; bkz. Şekil 3), düzey of önemi sadece analiz için ulaştı doğru MCA var.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57997/57997fig1.jpg"> Şekil 1. Kafa içi vasküler ağaç sanal inşası. (A) bir temsilci beyin örnek gösterir; (B) hemen hemen karşılık gelen vasküler ağaç yeniden gösterir. (C) renk kodlu sol MCA çapını görselleştirme. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/57997/57997fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57997/57997fig2.jpg"> Resim 2 . Damarlara dijital yeniden inşası doğruluğunu. 3D yeniden oluşturulan beyin örneklerinden kesin kararlı olanlar karşılaştırıldığında ortalama çapı ölçüldü. Veri ortalama ± standart hata ortalamaya gösterilir. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/57997/57997fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57997/57997fig3.jpg"> Şekil 3 . Gemi hacmi ve damar çapı SAH sonra. (A) karşılaştırma MCA çapları SAH 3D yeniden oluşturulan damarlara itibaren ölçülen ve sham fareler. (B) gemi SAH hacmindeki ve sham fareler. Veri ortalama ± standart hata ortalamaya gösterilir. p < 0.05. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/57997/57997fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage at JoVE.com

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

Bu makalenin amacı mikro bilgisayarlı tomografi ve serebral vasospasm ölçmek için kullanılan tüm gemi parçaları hacimleri belirlenmesi sonra farelerde serebrovasküler ağaç 3 boyutlu rekonstrüksiyon sağlayan bir yöntem sunmaktır fare modelleri subaraknoid kanama.

Subaraknoid kanama, bir fare modeli serebral Vasospasm miktar hacimsel bir yöntemi

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

a-volumetric-method-for-quantification-cerebral-vasospasm-murine

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Neuroscience

8.0K Görüntüleme.  Medical Center of the Johannes Gutenberg - University. Bu makalenin amacı mikro bilgisayarlı tomografi ve serebral vasospasm ölçmek için kullanılan tüm gemi parçaları hacimleri belirlenmesi sonra farelerde serebrovasküler ağaç 3 boyutlu rekonstrüksiyon sağlayan bir yöntem sunmaktır fare modelleri subaraknoid kanama.

Video: A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

A Low Mortality Rat Model to Assess Delayed Cerebral Vasospasm After Experimental Subarachnoid Hemorrhage

Objective: To characterize and establish a reproducible model that demonstrates delayed cerebral vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage (SAH) in rats, in order to identify the initiating events, pathophysiological changes and potential targets for treatment.
Methods: Twenty-eight male Sprague-Dawley rats (250 - 300 g) were arbitrarily assigned to one of two groups - SAH or saline control. Rat subarachnoid hemorrhage in the SAH group (n=15) was induced by double injection of autologous blood, 48 hr apart, into the cisterna magna. Similarly, normal saline (n=13) was injected into the cisterna magna of the saline control group. Rats were sacrificed on day five after the second blood injection and the brains were preserved for histological analysis. The degree of vasospasm was measured using sections of the basilar artery, by measuring the internal luminal cross sectional area using NIH Image-J software. The significance was tested using Tukey/Kramer's statistical analysis.
Results: After analysis of histological sections, basilar artery luminal cross sectional area were smaller in the SAH than in the saline group, consistent with cerebral vasospasm in the former group. In the SAH group, basilar artery internal area (.056 &mu;m &plusmn; 3) were significantly smaller from vasospasm five days after the second blood injection (seven days after the initial blood injection), compared to the saline control group with internal area (.069 &plusmn; 3; p=0.004). There were no mortalities from cerebral vasospasm.
Conclusion: The rat double SAH model induces a mild, survivable, basilar artery vasospasm that can be used to study the pathophysiological mechanisms of cerebral vasospasm in a small animal model. A low and acceptable mortality rate is a significant criterion to be satisfied for an ideal SAH animal model so that the mechanisms of vasospasm can be elucidated 7, 8. Further modifications of the model can be made to adjust for increased severity of vasospasm and neurological exams.

Aneurysmal subarachnoid hemorrhage (SAH) is bleeding that occurs into the subarachnoid space when an aneurysm ruptures. While the morbidity and mortality from this event has been on a decline due to improved treatment approaches, the risk of vasospasm after subarachnoid hemorrhage continues to be the same as it was several years ago. The importance of establishing a comprehensive and reproducible animal model to identify initiating events of cerebral vasospasm has been the focus of research since the first use of rats in an experimental vasospasm model in 1979 by Barry et al. Early work in rats demonstrated that a single injection of autologous blood into the cisterna magna led to acute (within minutes) but not delayed cerebral vasospasm 3, 6, 14. Here we characterize a low mortality SAH rat model that results in reproducible delayed vasospasm.

Deneysel Subaraknoid Kanama Sonrası Gecikmeli Serebral Vazospazm değerlendirin A Düşük Mortalite Rat Modeli

Objective: To characterize and establish a reproducible model that demonstrates delayed cerebral vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage (SAH) ...

Tıp

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of Willis perforation (CWp) and proven by intracranial pressure (ICP) monitoring. Thereby a homogenous blood distribution in subarachnoid spaces surrounding the arterial circulation and cerebellar fissures is achieved. Animal physiology is maintained by intubation, mechanical ventilation, and continuous on-line monitoring of various physiological and cardiovascular parameters: body temperature, systemic blood pressure, heart rate, and hemoglobin saturation. Thereby the cerebral perfusion pressure can be tightly monitored resulting in a less variable volume of extravasated blood. This allows a better standardization of endovascular filament perforation in mice and makes the whole model highly reproducible. Thus it is readily available for pharmacological and pathophysiological studies in wild type and genetically altered mice.

A standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage by intraluminal Circle of Willis perforation is described. Vessel perforation and subarachnoid bleeding are monitored by intracranial pressure monitoring. In addition various vital parameters are recorded and controlled to maintain physiologic conditions.

Subaraknoid Kanama bir fare modeli

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical options are available for a small proportion of stroke patients in the acute phase. Current research is intensively searching for novel therapeutic strategies and is increasingly focusing on the sub-acute and chronic phase after stroke because more patients might be eligible for therapeutic interventions in a prolonged time window. These delayed mechanisms include important pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity and regeneration. In order to analyze these mechanisms and to subsequently evaluate novel drug targets, experimental stroke models with clinical relevance, low mortality and high reproducibility are sought after. Moreover, mice are the smallest mammals in which a focal stroke lesion can be induced and for which a broad spectrum of transgenic models are available. Therefore, we describe here the mouse model of transcranial, permanent coagulation of the middle cerebral artery via electrocoagulation distal of the lenticulostriatal arteries, the so-called &#8220;coagulation model&#8221;. The resulting infarct in this model is located mainly in the cortex; the relative infarct volume in relation to brain size corresponds to the majority of human strokes. Moreover, the model fulfills the above-mentioned criteria of reproducibility and low mortality. In this video we demonstrate the surgical methods of stroke induction in the &#8220;coagulation model&#8221; and report histological and functional analysis tools.

Various murine models of middle cerebral artery occlusion (MCAO) are widely used in experimental brain research. Here, we demonstrate the model of transcranial permanent distal MCAO which produces consistent cortical infarction of a size corresponding to damage imposed by the majority of human ischemic strokes.

Farelerde Modelleme İnme: Distal Orta Serebral Arter Daimi Pıhtılaşma

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week protocol for repetitive hypoxic preconditioning (RHP) induces long-term protection against central nervous system (CNS) injury in a mouse model of focal ischemic stroke. RHP consists of 9 stochastic exposures to hypoxia that vary in both duration (2 or 4 hr) and intensity (8% and 11% O2). RHP reduces infarct volumes, blood-brain barrier (BBB) disruption, and the post-stroke inflammatory response for weeks following the last exposure to hypoxia, suggesting a long-term induction of an endogenous CNS-protective phenotype. The methodology for the dual quantification of infarct volume and BBB disruption is effective in assessing neurovascular protection in mice with RHP or other putative neuroprotectants. Adult male Swiss Webster mice were preconditioned by RHP or duration-equivalent exposures to 21% O2 (i.e. room air). A 60 min transient middle cerebral artery occlusion (tMCAo) was induced 2 weeks following the last hypoxic exposure. Both the occlusion and reperfusion were confirmed by transcranial laser Doppler flowmetry. Twenty-two hr after reperfusion, Evans Blue (EB) was intravenously administered through a tail vein injection. 2 hr later, animals were sacrificed by isoflurane overdose and brain sections were stained with 2,3,5- triphenyltetrazolium chloride (TTC). Infarcts volumes were then quantified. Next, EB was extracted from the tissue over 48 hr to determine BBB disruption after tMCAo. In summary, RHP is a simple protocol that can be replicated, with minimal cost, to induce long-term endogenous neurovascular protection from stroke injury in mice, with the translational potential for other CNS-based and systemic pro-inflammatory disease states.

This protocol describes repetitive hypoxic preconditioning, or brief exposures to systemic hypoxia that reduce infarct volumes and blood-brain barrier disruption following transient middle cerebral artery occlusion in mice. It also details dual quantification of infarct volume and blood-brain barrier disruption after stroke to assess the efficacy of neurovascular protection.

Farelerde Tekrarlanan Hipoksik Önkoşullanma ve Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ardından Nörovasküler Koruma Kantitasyonu

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

Measuring Post-Stroke Cerebral Edema, Infarct Zone and Blood-Brain Barrier Breakdown in a Single Set of Rodent Brain Samples

One of the most common causes of morbidity and mortality worldwide is ischemic stroke. Historically, an animal model used to stimulate ischemic stroke involves middle cerebral artery occlusion (MCAO). Infarct zone, brain edema and blood-brain barrier (BBB) breakdown are measured as parameters that reflect the extent of brain injury after MCAO. A significant limitation to this method is that these measurements are normally obtained in different rat brain samples, leading to ethical and financial burdens due to the large number of rats that need to be euthanized for an appropriate sample size. Here we present a method to accurately assess brain injury following MCAO by measuring infarct zone, brain edema and BBB permeability in the same set of rat brains. This novel technique provides a more efficient way to evaluate the pathophysiology of stroke.

This protocol describes a novel technique of measuring the three most important parameters of ischemic brain injury on the same set of rodent brain samples. Using only one brain sample is highly advantageous in terms of ethical and economic costs.

Tek Bir Kemirgen Beyin Örneklerinde İnme Sonrası Serebral Ödem, Enfarktüs Bölgesi ve Kan-Beyin Bariyeri Kırılımının Ölçülmesi

One of the most common causes of morbidity and mortality worldwide is ischemic stroke. Historically, an animal model used to stimulate ischemic stroke ...

Nörobilim

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% of the total stroke-related mortality with an important morbidity in terms of neurological outcome. A delayed cerebral vasospasm (CVS) may occur most often in association with a delayed cerebral ischemia. Different animal models of SAH are now being used including endovascular perforation and direct injection of blood into the cisterna magna or even the prechiasmatic cistern, each exhibiting distinct advantages and disadvantages. In this article, a standardized mouse model of SAH by double direct injection of determined volumes of autologous whole blood into the cisterna magna is presented. Briefly, mice were weighed and then anesthetized by isoflurane inhalation. Then, the animal was placed in a reclining position on a heated blanket maintaining a rectal temperature of 37 &#176;C and positioned in a stereotactic frame with a cervical bend of about 30&#176;. Once in place, the tip of an elongated glass micropipette filled with the homologous arterial blood taken from carotid artery of another mouse of the same age and gender (C57Bl/6J) was positioned at a right angle in contact with the atlanto-occipital membrane by means of a micromanipulator. Then 60 &#181;L of blood was injected in the cisterna magna followed by a 30&#176; downward tilt of the animal for 2 minutes. The second infusion of 30 &#181;L of blood into the cisterna magna was performed 24 h after the first one. The individual follow-up of each animal is carried out daily (careful evaluation of weight and well-being). This procedure allows a predictable and highly reproducible distribution of blood, likely accompanied by intracranial pressure elevation that can be mimicked by an equivalent injection of an artificial cerebral spinal fluid (CSF), and represents an acute to mild-model of SAH inducing low mortality.

We described in this protocol a standardized subarachnoid hemorrhage (SAH) mouse model by a double injection of autologous whole-blood into the cisterna magna. The high degree of standardization of the double-injection procedure represents a middle-to-acute model of SAH with relative safety regarding mortality.

Subaraknoid Kanama Modeli olarak Cisterna Magna içine Kan Çift Doğrudan Enjeksiyon

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A problem encountered in experimental studies using murine models of SAH is that methods for in vivo monitoring of cerebral vasospasm in mice are lacking. Here, we demonstrate the application of high frequency ultrasound to perform transcranial Duplex sonography examinations on mice. Using the method, the internal carotid arteries (ICA) could be identified. The blood flow velocities in the intracranial ICAs were accelerated significantly after induction of SAH, while blood flow velocities in the extracranial ICAs remained low, indicating cerebral vasospasm. In conclusion, the method demonstrated here allows functional, noninvasive in vivo monitoring of cerebral vasospasm in a murine SAH model.

The aim of this manuscript is to present a sonography-based method that allows in vivo imaging of blood flow in cerebral arteries in mice. We demonstrate its application to determine changes in blood flow velocities associated with vasospasm in murine models of subarachnoid hemorrhage (SAH).

Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely afflicting a fairly young population. Several animal models of SAH have been developed to investigate the pathophysiological mechanisms behind SAH and to test pharmacological interventions. The pre-chiasmatic, single injection model in the rat presented in this article is an experimental model of SAH with a predetermined blood volume. Briefly, the animal is anesthetized, intubated, and kept under mechanical ventilation. Temperature is regulated with a heating pad. A catheter is placed in the tail artery, enabling continuous blood pressure measurement as well as blood sampling. The atlantooccipital membrane is incised and a catheter for pressure recording is placed in the cisterna magna to enable intracerebral pressure measurement. This catheter can also be used for intrathecal therapeutic interventions. The rat is placed in a stereotaxic frame, a burr hole is drilled anteriorly to the bregma, and a catheter is inserted through the burr hole and placed just anterior to the optic chiasm. Autologous blood (0.3 mL) is withdrawn from the tail catheter and manually injected. This results in a rise of intracerebral pressure and a decrease of cerebral blood flow. The animal is kept sedated for 30 min and given subcutaneous saline and analgesics. The animal is extubated and returned to its cage. The pre-chiasmatic model has a high reproducibility rate and limited variation between animals due to the pre-determined blood volume. It mimics SAH in humans making it a relevant model for SAH research.

Subarachnoid hemorrhage continues to carry a high burden of mortality and morbidity in man. To facilitate further research into the condition and its pathophysiology, a pre-chiasmatic, single injection model is presented.

Bir sıçan modelinde deneysel subaraknoid kanamayı indüklemek için kiazmatik öncesi, tek otolog kan enjeksiyonu

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high mortality rate as well as an uncontrollable volume of SAH and other intracranial complications such as stroke or intracranial hemorrhage. In this protocol, a standardized SAH mouse model is presented, induced by endovascular filament perforation, combined with magnetic resonance imaging (MRI) 24 h after operation to ensure the correct bleeding site and exclude other relevant intracranial pathologies. Briefly, C57BL/6J mice are anesthetized with an intraperitoneal ketamine/xylazine (70 mg/16 mg/kg body weight) injection and placed in a supine position. After midline neck incision, the common carotid artery (CCA) and carotid bifurcation are exposed, and a 5-0 non-absorbable monofilament polypropylene suture is inserted in a retrograde fashion into the external carotid artery (ECA) and advanced into the common carotid artery. Then, the filament is invaginated into the internal carotid artery (ICA) and pushed forward to perforate the anterior cerebral artery (ACA). After recovery from surgery, mice undergo a 7.0 T MRI 24 h later. The volume of bleeding can be quantified and graded via postoperative MRI, enabling a robust experimental SAH group with the option to perform further subgroup analyses based on blood quantity.

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

Here we present a standardized SAH mouse model, induced by endovascular filament perforation, combined with magnetic resonance imaging (MRI) 24 h after operation to ensure the correct bleeding site and exclude other relevant intracranial pathologies.

Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRG) ile Kombine Subaraknoid Kanama için Endovasküler Perforasyon Modeli

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...