Name: antimicrobial characterization of advanced materials for bioengineering applications
Uploaded: 2018-08-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications at JoVE.com

Yazarlar Universidad Católica de Valencia San Vicente Mártir bu çalışma sayesinde 2017-231-001UCV için finansal destek için kabul etmek istiyorum ve 2018-231-001UCV verir.

1. numune hazırlama
<ol><li>Malzeme örnekleri 10 mm çaplı diskler 10 mm çapında silindirik yumruk kesilmiş. Not: Kırılgan malzeme uygun steril çözücüler, 1 h için yumuşadı ve sonra diskleri kesti. Örneğin, çinko aljinat gibi hidrofilik maddeler bu protokol sonrası test edildi ve autoclaved suda örnek kırma önlemek için kesmeden önce ıslatılmış. Ancak, poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) gibi hidrofobik diğer malzemeler her türlü düzgün kesilmiş olduğu için önceki şişme gerek yoktur.</li>
	<li>Örnek malzeme diskleri bir vakum fırında 60 ° C'de kuru (< 10-2 Torr) 24 h için. Not: Bazı materyaller yüksek kurutma sıcaklığı gerekebilir. Ancak, Termal malzeme aşağılamak bir sıcaklık ulaşamadığı önemlidir.</li>
	<li>Dijital kumpas ile malzeme film kalınlıkları ölçmek. Not: Bu iletişim kuralı kullanımı sürekli ve benzer kalınlıkları ile malzeme filmlerin Antimikrobiyal aktivite farklı malzemelerin karşılaştırırken önerir.</li>
	<li>Her numune etanol %70 10 dk ve sonraki ultraviyole (UV) radyasyon her yan başına 1 h için daldırma tarafından sterilize. Not: UV radyasyon UV-C radyasyon bir 12,0 W lamba ile steril Petri kabına bir laminar akış başlık içinde her numune yerleştirerek gerçekleştirilir. Dikkat: çünkü mutajenik araştırmacılar kendilerini UV radyasyon için açığa değil.</li>
	<li>1.1, 1.2, 1.3 ve 1.4 adımları gerçekleştirin. Denetim malzeme disklerle. Not: Denetim diskleri difüzyon ve iletişim yöntemi olarak polietilen tereftalat (PET) veya alternatif sigara antimikrobiyal malzemeler kullanılabilir. Ayrıca, nanokompozitlerin veya işlem görmüş malzemeler karakterize, ana malzeme kontrol malzemesi olarak kullanılmalıdır.</li>
</ol>2. tavsiye edilen mikroorganizmalar
Not: Çok çeşitli mikroorganizmalar karşı test edilmiş malzeme antimikrobiyal kapasite çalışmaya 3 farklı mikroorganizmalar kullanımı önerilir.
<ol><li>3 mikroorganizmaları saf kültürler: gram-pozitif bakteri Staphylococcus aureus, gram-negatif bakteri Escherichia colive Maya Candida albicans. Not: Diğer mikroorganizma türler de bu iletişim kuralıyla kuluçka koşulları gerekirse değiştirerek test edilebilir. Dikkat: Bu protokol için istihdam Mikroorganizma tipine göre gerekli Biyogüvenlik ölçümleri izlenmesi gerekir.</li>
	<li>Önceden steril veya autoclaved malzeme ile çalışabilir ve Bunsen burner mikrobiyal manipülasyon veya biyolojik güvenlik kabini bütün işlemi sırasında (gerekirse) aseptik koşullar sağlamak için; Not: Önerilen otoklav 121 ° C 15dk sırasında kültür ortamlar için ve 121 ° C çalışma malzeme ve biyolojik artıkları için 20 min sırasında koşullardır.</li>
</ol>3. agar Disk difüzyon testi (difüzyon yöntemi)
Not: bir sıvı difüzyon antimikrobiyal bileşiklerin ileri düzey malzemeler ana antimikrobiyal mekanizması olabilir durumlarda difüzyon yöntemi bu malzemelerin antimikrobiyal kapasitesi hakkında çok yararlı bilgiler sağlayabilir. Agar plaka merkezinde bulunan malzeme diske mikroorganizmaların büyüme inhibisyonu sonra 24 h kültürünün oluştuğu bir şeffaf halka bölgesi (halo) oluşabilir (bkz. Şekil 1).
<ol><li>
Difüzyon testi prosedürü
	<ol>
<li>Hazırlama ve otoklav tryptic soya agar (TSA) üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>TSA steril Petri yemekler Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak aseptik koşullar altında içine dökün. Not: TSA plakaları 4-6 mm kalınlığında olmalıdır.</li>
		<li>TSA ile 18-24 h 37 ° C'de bir kuluçka-Petri yemeklerinde tükenmesiyle için test edilecek farklı mikroorganizmalar kültür</li>
		<li>Hazırlama ve otoklav tryptic soya suyu (TSB) üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>Tekerlekli sandalye basketbolu aseptik şartlarda Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak önceden sterilize edilmiş serolojik pipet ile 50 mL önceden sterilize santrifüj tüpü dökmek.</li>
		<li>Kimden adım 3.1.3 25 mL steril pamuklu çubukla ve girdap kullanarak bir steril santrifüj tüpü bulunan TSB birkaç koloniler resuspend onları karıştırma bir üniforma elde etmek 1 dakika.</li>
		<li>Absorbans ayarlamak (vasıl 540 nm) ile spektrofotometre birimleri (CFU) mL oluşturan colony uygun sayıda kültürünün: yaklaşık 1.5 x 108 CFU/mL 1 x 106 -5 x 106 CFU/mL için mantar ve bakteri için. Not: Kültür ve küvet birimleri absorbans ölçmek için kullanılan spektrofotometre, türüne göre seçilmelidir.</li>
		<li>Girdap mikroorganizma dağılım geliştirmek ve kısaca bu mikrobiyal süspansiyon steril pamuklu çubukla daldırın için 5 saniye için mikrobiyal suyu. Sıvı fazlalığı kültür içeren tüp duvara basarak çubukla kaldırın.</li>
		<li>Mikrobiyal suyu süspansiyon ile steril pamuklu çubukla tüm yüzeyini mikroorganizma ile kapak ve 5 min için aşı sonra kuruması için 3 uçak TSA levha yüzeyine eşit olarak çizgi. Not: herhangi bir nem kaldırmak için TSA plakaları 10-15 dk önce aşılama için 37 ° C'de ters bir pozisyonda açık yerleştirilmesi gerekir.</li>
		<li>Onları bir ölçek etanol ile % 96 çeker ve sonra onları yanan Bunsen brülör veya alkol yazıcı ile bir çift cımbız sterilize.</li>
		<li>Test edilecek ve disk steril Cımbız kullanarak TSA plakaları ortasındaki denetlemek için örnek diskleri yerleştirebilirsiniz.</li>
		<li>Tükenmesiyle TSA tabak 24 h 37 ° C'de ters bir pozisyonda kuluçkaya. Not: herhangi bir kirlenme riski ortadan kaldırmak için bu ters bir pozisyonda TSA plakaları kuluçkaya için tavsiye edilir. Örnek disk TSA plakaları ayırır, ancak, bu adım ters bir pozisyonda gerçekleştirme. Bu durumda, bu tabakalar laminar akış başlıklı kuru için tavsiye edilir. Bu antimikrobiyal test tekrarlanabilirlik sağlamak için farklı günlerde en az quadriplicate içinde gerçekleştirilmelidir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Mikrobiyal süspansiyon konsantrasyon ve saflık denetleme Not: Adım 3.1.7'Spektrofotometre ile belirlenen mikrobiyal konsantrasyon doğru olup olmadığını denetleyin ve mikrobiyal hiçbir çevresel bulaşma olduğunu emin olmak için aşağıdaki adımlar gereklidir. Mikrobiyal çevresel kirlenme mikrobiyal kolonileri çeşitli görünüm kültürünün 24 saat sonra tarafından kolayca tespit edilebilir. Ayrıca, Tekerlekli sandalye basketbolu orta yok mikrobiyal kirlenme ondalık seri dilutions onun manipülasyon sırasında bir negatif TSB kontrol plaka ile sağlanmış olur gerekir.<ol>
<li>(Adım 3.1.4 hazır) steril TSB aseptik şartlarda uygun autoclaved ipuçları ile bir micropipette kullanarak steril microcentrifuge tüpler içine dağıtmak. Bir tanesi bir negatif TSB kontrol kullanılacaktır.</li>
		<li>Ondalık seri dilutions adım 3.1.9 TSB içeren steril microcentrifuge tüpler'de kullanılan mikrobiyal suyu süspansiyon ile gerçekleştirin.</li>
		<li>Her seyreltme önceden sterilize Drigalski spatula ya da alternatif bir araç kullanarak TSA plakalar üzerinde 100 µL yayıldı. Ayrıca TSB orta 100 μL mikroorganizma (3.2.1. adımda hazırlanan) bir TSA plaka üzerinde olmadan bir negatif TSB kontrol plaka yayıldı.</li>
		<li>Tükenmesiyle TSA plakaları tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Koloniler CFU/mL 3.1.7. adımda belirlenen benzer kontrol etmek saymak.</li>
		<li>Hiçbir mikrobiyal çevresel kirlenme ile tek tip kolonileri bir TSA tabaklarda olduğunu kontrol edin.</li>
		<li>Hiçbir mikrobiyal kirlenme yok kolonileri gösterilen TSB negatif kontrol plaka üzerinde olup olmadığını kontrol edin</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. malzeme yüzeyleri (iletişim yöntemi) üzerinde antimikrobiyal aktivitesi ölçümü
 Not: Ana antimikrobiyal mekanizması gelişmiş bazı malzemelerin yüzey temas olabilir durumlarda iletişim yöntemi bu malzemelerin antimikrobiyal kapasitesi hakkında çok yararlı bilgiler sağlayabilir. Bu yöntemde, mikroorganizmaların doğrudan malzeme yüzeyine yerleştirilir ve onların büyüme inhibisyon belirli bir miktar sonra belirlenebilir.
<ol><li>
İlk yordam
	<ol>
<li>Hazırlama ve otoklav TSB üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>Tekerlekli sandalye basketbolu aseptik şartlarda Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak önceden sterilize edilmiş serolojik pipet ile 50 mL önceden sterilize santrifüj tüpü dökmek.</li>
		<li>Tükenmesiyle test edilecek farklı mikroorganizmalar tüp TSB bir orbital Shaker (140 devir/dakika) ile 37 ° C'de bir gecede kültür</li>
		<li>Gecede kültür TSB 20 ml 50 mL önceden sterilize santrifüj tüp için yaklaşık 10 bir konsantrasyon içinde seyreltik6 CFU/mL (540, Spektrofotometre ile belirlenen nm). Not: Kültür ve küvet birimleri absorbans ölçmek için kullanılan spektrofotometre, türüne göre seçilmelidir.</li>
		<li>Bu kültürün ondalık seri dilutions TSB içeren steril microcentrifuge tüplerde gerçekleştirin. 100 µL TSA plakaları kültürünün yayılı ve tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Koloniler yaklaşık 1 x 106 CFU/mL bir ilk hücre konsantrasyonu sağlamak için sayma</li>
		<li>Sonra 24 saat ve 24 saat steril 48-şey plaka kuyu ayıran sonra mikrobiyal sayım için test edilmiş malzemelerin her türdeki 4 örnek diskleri mikrobiyal sayım için denetim diskler yer 4.</li>
		<li>Her disk yüzeyine mikrobiyal süspansiyon 150 µL pipet.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Mikrobiyal kontrol ve test malzemeleri (24 saat sonra) sayma
	<ol>
<li>4.1.6 adımdan sonra tükenmesiyle 24 h 37 ° C'de 48-şey tabak içinde kalan 4 örnek diskleri kuluçkaya. Not: Bu 24 h kuluçka süresi daha kısa veya daha uzun zaman Büyüme inhibisyon çalışma için değiştirilebilir.</li>
		<li>24 h, kuluçka sonra 4 örnek disk yüzeyine steril PBS 850 µL pipet ve mikrobiyal süspansiyon 150 µL ile karıştırın.</li>
		<li>PBS/mikrobiyal süspansiyon karışımı ve her disk 48-şey plaka toplamak ve bir 10 mL önceden steril tüp aktarabilirsiniz.</li>
		<li>Girdap PBS/mikrobiyal süspansiyon karışımı ve her disk için 1 dk, solüsyon içeren temizleyicide bu 50 Hz'de 5 min ve girdap bu hiç uygun mikroorganizmalar kalmasını sağlamak 1 dk için tekrar malzeme yüzeye yapıştırılır.</li>
		<li>Ondalık seri dilutions her sonicated kültür TSB içeren steril microcentrifuge tüplerde gerçekleştirmek ve TSA plakaları kültürünün 100 µL yaymak ve tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Her örnek ve kontrol disk yüzeyi uygun mikroorganizmalar vardır kolonileri saymak. (CFU/ml) hücrelerin bu sayıda hızlı.</li>
		<li>Son mikrobiyal kültür örnek ve denetim diskler için bir fotoğraf çekmek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. antimikrobiyal sonuçları analiz
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig1.jpg"> Şekil 1: antimikrobiyal "halo" normalleştirilmiş genişliği ölçülerini. Bu panel inhibisyon bölge (dız) çapı ve disk çapı (d) gösterir. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol><li>
Difüzyon yöntemi sonuçları analiz
	<ol>
<li>Disk çapı (d) ve (dız) inhibisyon bölgesinin çapı ölçmek (bkz. Şekil 1) bir dijital kumpas ile. Not: İnhibisyon bölge veya antimikrobiyal "halo" antimikrobiyal malzeme disk tarafından üretilen mikrobiyal Büyüme inhibisyon sonucu olarak oluşturulur (bkz. Şekil 1). Nerede mikroorganizmaların büyümüş düzgün bir şeffaf halka bölgeyi kapatmak için örnek plaka kalanı ile karşılaştırıldığında gözlemlemek mümkündür (opak bölge).</li>
		<li>Denklem (1) uygulayarak antimikrobiyal "halo" in her yuvarlak yüzey (Batıhalo) normalleştirilmiş genişliğini belirler. (1)<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq1.jpg">
</li>
		<li>Ortalama ve standart sapma her örnek "belirlenen antimikrobiyal halo" 4 KBhalo değerleri normalleştirilmiş genişliği belirleyin.</li>
		<li>Son mikrobiyal kültür malzemesi disk ile bir fotoğraf çekmek. Not: İnhibisyon bölge (dız) çapı ve disk çapı (d) Ayrıca uygun bir görüntü işleme yazılımı kullanarak 5.1.4. adımda alınan fotoğraf üzerinden ölçülebilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
İletişim yöntemi sonuçları analiz
	<ol>
<li>Denklem (2) göre kurtarıldı canlı mikroorganizmaların sayısını belirleyin. (2)<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq2.jpg"> Not: Burada, N uygun mikroorganizmalar cm testi numune2 başına kurtarılan sayısıdır; C plaka sayısıdır; D seyreltme faktörü olduğunu; A örnek disk çapı ile belirlenen cm2 testi numune yüzey alanı olduğunu.</li>
		<li>Denklem (3) uygulayarak hücre büyüme inhibisyonu yansıtacak şekilde canlılık (LV) kaybı belirler. (3)<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq3v3.jpg"> Not: C uygun mikroorganizmalar (N) ortalama sayısı CFU/mL•cm2kontrol örnekler 24 saat sonra kurtarılan, burada; S uygun mikroorganizmalar (N) CFU/mL•cm2testi numune 24 saat sonra kurtarılan, sayısıdır.</li>
		<li>Ortalama ve standart sapma her örnek 4 kararlı LV(%) değerleri ile canlılık kaybı belirler.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Sydnor, E. R. M., Perl, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hospital+epidemiology+and+infection+control+in+acute-care+settings.">Hospital epidemiology and infection control in acute-care settings.</a> Clin Microbiol Rev. 24 (1), 141-173 (2011).</li><li>Chessa, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Staphylococcus+aureus+and+Staphylococcus+epidermidis+Virulence+Strains+as+Causative+Agents+of+Persistent+Infections+in+Breast+Implants.">Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis Virulence Strains as Causative Agents of Persistent Infections in Breast Implants.</a> PLoS One. 11 (1), e0146668 (2016).</li><li>Pandey, H., Parashar, V., Parashar, R., Prakash, R., Ramteke, P. W., Pandey, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+drug+release+characteristics+and+enhanced+antibacterial+effect+of+graphene+nanosheets+containing+gentamicin+sulfate.">Controlled drug release characteristics and enhanced antibacterial effect of graphene nanosheets containing gentamicin sulfate.</a> Nanoscale. 3 (10), 4104 (2011).</li><li>Jia, Z., Shen, D., Xu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+antibacterial+activities+of+quaternary+ammonium+salt+of+chitosan.">Synthesis and antibacterial activities of quaternary ammonium salt of chitosan.</a> Carbohydr Res. 333 (1), 1-6 (2001).</li><li>Liu, Y., Wang, X., Yang, F., Yang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excellent+antimicrobial+properties+of+mesoporous+anatase+TiO2+and+Ag/TiO2+composite+films.">Excellent antimicrobial properties of mesoporous anatase TiO2 and Ag/TiO2 composite films.</a> Microporous Mesoporous Mater. 114 (1-3), 431-439 (2008).</li><li>Wang, L., Chen, J., Shi, L., Shi, Z., Ren, L., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+promotion+of+antimicrobial+activity+on+silicon+substrates+using+a+&amp;#34;click&amp;#34;+immobilized+short+peptide.">The promotion of antimicrobial activity on silicon substrates using a &amp;#34;click&amp;#34; immobilized short peptide.</a> Chem Commun (Camb). 50 (8), 975-977 (2014).</li><li>K&#252;mmerer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+in+the+environment.">Resistance in the environment.</a> J Antimicrob Chemother. 54 (2), 311-320 (2004).</li><li>Ng, V. W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+hydrogels:+A+new+weapon+in+the+arsenal+against+multidrug-resistant+infections.">Antimicrobial hydrogels: A new weapon in the arsenal against multidrug-resistant infections.</a> Adv Drug Deliv Rev. 78, 46-62 (2014).</li><li>Hegstad, K., Langsrud, S., Lunestad, B. T., Scheie, A. A., Sunde, M., Yazdankhah, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+the+Wide+Use+of+Quaternary+Ammonium+Compounds+Enhance+the+Selection+and+Spread+of+Antimicrobial+Resistance+and+Thus+Threaten+Our+Health?.">Does the Wide Use of Quaternary Ammonium Compounds Enhance the Selection and Spread of Antimicrobial Resistance and Thus Threaten Our Health?.</a> Microb Drug Resist. 16 (2), 91-104 (2010).</li><li>Rana, D., Matsuura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+modifications+for+antifouling+membranes.">Surface modifications for antifouling membranes.</a> Chem Rev. 110 (4), 2448-2471 (2010).</li><li>Lok, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+analysis+of+the+mode+of+antibacterial+action+of+silver+nanoparticles.">Proteomic analysis of the mode of antibacterial action of silver nanoparticles.</a> J Proteome Res. 5 (4), 916-924 (2006).</li><li>Chen, X., Schluesener, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanosilver:+A+nanoproduct+in+medical+application.">Nanosilver: A nanoproduct in medical application.</a> Toxicol Lett. 176 (1), 1-12 (2008).</li><li>Ahamed, M., AlSalhi, M. S., Siddiqui, M. K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticle+applications+and+human+health.">Silver nanoparticle applications and human health.</a> Clin Chim Acta. 411 (23-24), 1841-1848 (2010).</li><li>Yeaman, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Antimicrobial+Peptide+Action+and+Resistance.">Mechanisms of Antimicrobial Peptide Action and Resistance.</a> Pharmacol Rev. 55 (1), 27-55 (2003).</li><li>McLean, D. T. F., Lundy, F. T., Timson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IQ-motif+peptides+as+novel+anti-microbial+agents.">IQ-motif peptides as novel anti-microbial agents.</a> Biochimie. 95 (4), 875-880 (2013).</li><li>Brogden, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+peptides:+Pore+formers+or+metabolic+inhibitors+in+bacteria?.">Antimicrobial peptides: Pore formers or metabolic inhibitors in bacteria?.</a> Nat Rev Microbiol. 3 (3), 238-250 (2005).</li><li>Ghosh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+molecular+antibacterial+peptoid+mimics:+The+simpler+the+better!.">Small molecular antibacterial peptoid mimics: The simpler the better!.</a> J Med Chem. 57 (4), 1428-1436 (2014).</li><li>Chongsiriwatana, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptoids+that+mimic+the+structure,+function,+and+mechanism+of+helical+antimicrobial+peptides.">Peptoids that mimic the structure, function, and mechanism of helical antimicrobial peptides.</a> Proc Natl Acad Sci. 105 (8), 2794-2799 (2008).</li><li>Chen, Y., Mant, C. T., Farmer, S. W., Hancock, R. E. W., Vasil, M. L., Hodges, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+alpha-helical+antimicrobial+peptides+with+enhanced+activities+and+specificity/therapeutic+index.">Rational design of alpha-helical antimicrobial peptides with enhanced activities and specificity/therapeutic index.</a> J Biol Chem. 280 (13), 12316-12329 (2005).</li><li>Porter, E. A., Wang, X., Lee, H. S., Weisblum, B., Gellman, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-haemolytic+beta-aminoacid+oligomers.">Non-haemolytic beta-aminoacid oligomers.</a> Nature. 404 (6778), 565 (2000).</li><li>Gao, Q., Li, P., Zhao, H., Chen, Y., Jiang, L., Ma, P. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methacrylate-ended+Polypeptides+and+Polypeptoids+for+Antimicrobial+and+Antifouling+Coatings.">Methacrylate-ended Polypeptides and Polypeptoids for Antimicrobial and Antifouling Coatings.</a> Polym Chem. 8 (41), 6386-6397 (2017).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Monle&#243;n-Pradas, M., Vidaurre-Garayo, A., Suay-Ant&#243;n, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+macroporous+poly(methyl+methacrylate)+coated+with+plasma-polymerised+poly(2-hydroxyethyl+acrylate).">Characterisation of macroporous poly(methyl methacrylate) coated with plasma-polymerised poly(2-hydroxyethyl acrylate).</a> Eur Polym J. 43 (10), 4552-4564 (2007).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma-induced+polymerisation+of+hydrophilic+coatings+onto+macroporous+hydrophobic+scaffolds.">Plasma-induced polymerisation of hydrophilic coatings onto macroporous hydrophobic scaffolds.</a> Polymer (Guildf). 48 (7), 2071-2078 (2007).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Rault, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+analysis+of+water+in+reinforced+plasma-polymerised+poly(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels.">Thermal analysis of water in reinforced plasma-polymerised poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Eur Polym J. 72, 523-534 (2015).</li><li>Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Gallego-Ferrer, G., SuayAnt&#243;n, J., Pissis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+between+water+and+polymer+chains+in+poly(hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels.">Interaction between water and polymer chains in poly(hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Colloid Polym Sci. 279 (4), 323-330 (2001).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+crosslinking+on+porous+poly(methyl+methacrylate)+produced+by+phase+separation.">Effect of crosslinking on porous poly(methyl methacrylate) produced by phase separation.</a> Colloid Polym Sci. 286 (2), 209-216 (2008).</li><li>Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Gallego Ferrer, G., Suay Ant&#243;n, J., Pissis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porous+poly+(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels.">Porous poly (2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Polymer (Guildf). 42 (10), 4667-4674 (2001).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macroporous+poly(methyl+methacrylate)+produced+by+phase+separation+during+polymerisation+in+solution.">Macroporous poly(methyl methacrylate) produced by phase separation during polymerisation in solution.</a> Colloid Polym Sci. 285 (7), 753-760 (2007).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Llorens-G&#225;mez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+mechanical+analysis+and+water+vapour+sorption+of+highly+porous+poly(methyl+methacrylate).">Dynamic mechanical analysis and water vapour sorption of highly porous poly(methyl methacrylate).</a> Polymer (Guildf). 125, 58-65 (2017).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Campillo-Fern&#225;ndez, A. J., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Monle&#243;n-Pradas, M., Gallego-Ferrer, G., Pissis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porous+poly(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels+prepared+by+radical+polymerisation+with+methanol+as+diluent.">Porous poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels prepared by radical polymerisation with methanol as diluent.</a> Polymer (Guildf). 45 (26), 8949-8955 (2004).</li><li>Rodr&#237;guez-Hern&#225;ndez, J. C., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Monle&#243;n-Pradas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+nanocomposite+scaffolds+with+ordered+cylindrical+orthogonal+pores.">Three-dimensional nanocomposite scaffolds with ordered cylindrical orthogonal pores.</a> J Biomed Mater Res - Part B: Appl Biomater. 84 (2), 541-549 (2008).</li><li>Br&#237;gido-Diego, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acrylic+scaffolds+with+interconnected+spherical+pores+and+controlled+hydrophilicity+for+tissue+engineering.">Acrylic scaffolds with interconnected spherical pores and controlled hydrophilicity for tissue engineering.</a> J Mater Sci Mater Med. 40 (18), 4881-4887 (2005).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Ruiz-Pividal, J. F., Llorens-G&#225;mez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+water+diffusion+and+compression+performance+of+crosslinked+alginate+with+a+minuscule+amount+of+graphene+oxide.">Enhancement of water diffusion and compression performance of crosslinked alginate with a minuscule amount of graphene oxide.</a> Sci Rep. 7, 11684 (2017).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Deb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+irregular+graphene+oxide+tubes+using+green+chemistry+and+their+potential+use+as+reinforcement+materials+for+biomedical+applications.">Synthesis of irregular graphene oxide tubes using green chemistry and their potential use as reinforcement materials for biomedical applications.</a> PLoS One. 12 (9), e0185235 (2017).</li><li>S&#225;nchez-Correa, F., Vidaurre-Agut, C., Serrano-Aroca, A., Campillo-Fern&#225;ndez, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels+reinforced+with+graphene+oxide:+Remarkable+improvement+of+water+diffusion+and+mechanical+properties.">Poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels reinforced with graphene oxide: Remarkable improvement of water diffusion and mechanical properties.</a> J Appl Polym Sci. , (2018).</li><li>Serrano-Aroc, &. #. 1. 9. 3. ;., Iskandar, L., Deb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Green+synthetic+routes+to+alginate-graphene+oxide+composite+hydrogels+with+enhanced+physical+properties+for+bioengineering+applications.">Green synthetic routes to alginate-graphene oxide composite hydrogels with enhanced physical properties for bioengineering applications.</a> Eur Polym J. 103, 198-206 (2018).</li><li>Llorens-G&#225;mez, M., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-Cost+Advanced+Hydrogels+of+Calcium+Alginate/Carbon+Nanofibers+with+Enhanced+Water+Diffusion+and+Compression+Properties.">Low-Cost Advanced Hydrogels of Calcium Alginate/Carbon Nanofibers with Enhanced Water Diffusion and Compression Properties.</a> Polymers (Basel). 10 (4), 405 (2018).</li><li>Bauer, A. W., Kirby, W. M. M., Sherris, J. C., Turck, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibiotic+susceptibility+testing+by+a+standardized+single+disk+method.">Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method.</a> A J Clin Pathol. 45, 493-496 (1966).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ISO Specification 22196: measurement of antibacterial activity on plastics surfaces. , 584 (2007).</li><li>Taubes, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bacteria+fight+back.">The bacteria fight back.</a> Science. 321 (5887), 356-361 (2008).</li><li>Boucher, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=10+x+'20+progress--development+of+new+drugs+active+against+Gram-negative+bacilli:+an+update+from+the+infectious+diseases+society+of+America.">10 x '20 progress--development of new drugs active against Gram-negative bacilli: an update from the infectious diseases society of America.</a> Clinical Infectious Diseases. 56 (12), 1685-1694 (2013).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Yeni ileri düzey malzemeler Antimikrobiyal aktivite üzerinde 2 mevcut yöntemleri temel 2 tamamlayıcı yordamlar oluşan bu takip etmek kolay iletişim kuralı tarafından çözümlenebilir: agar disk difüzyon testi38 ve Antimikrobiyal aktivite üzerinde ölçülen ISO 22196:2007 norm39göre malzeme yüzeyler.
Bu araştırma alanında birçok literatürde bildirilen antimikrobiyal test son derece tahlil bağımlıdır. Bu nedenle, çok ayrıntılı olması önemli ve tutarlı protokolleri laboratuvarlar arasında bir yerde. Bu makalede, bu yönde bir adımdır. Ayrıca, bu alanda daha az deneyimli ve ayrıntılı, adım adım yordamları takip etmek için doğru sonuçlar gerektiren pek çok araştırmacı için çok yararlı olabilir.
Bu iletişim kuralı malzemeler 10 mm çapında yuvarlak yüzey şekillerine kesme birçok türü ile kullanılabilir. Kırılgan malzeme kesim işlemi daha kolay işlemek 1 h için uygun bir çözücü içinde şişmiş. Böylece, Aljinatlar gibi hidrofilik maddeler autoclaved distile suda sulu. Etanol, keton ve diklorometan, gibi diğer solventler hidrofobik malzemeler 1 h için onları kesmeden önce şişmeye istihdam edilebilir. Ancak, bazı malzemeler poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) gibi şişmiş gerekmez ve doğrudan kesilebilir. Bundan sonra bu örnek malzeme diskleri bir vakum fırında kuru ve herhangi bir kirlenme riski ortadan kaldırmak için her numune etanol ve 1 h için UV radyasyon ile sterilize etmek çok önemlidir.
Bu iletişim kuralı TSA ve tekerlekli sandalye basketbolu Kültür Medya ve çok çeşitli mikroorganizmalar ulaşmak için 3 mikroorganizmaları saf kültürler kullanımı önerir: gram pozitif bakteri Staphylococcus aureus, gram-negatif bakteri Escherichia coli, ve Maya Candida albicans. Ancak, alternatif kültür medya ve diğer mikroorganizmalar ihtiyacı farklı kuluçka koşulları da bu iletişim kuralı ile kullanılabilir. Bazen, sadece 1 mikroorganizma yeni bir malzeme antimikrobiyal aktivitesinin ilk bir fikrim var test edilmiştir.
Önerilen 3 karşı güçlü antimikrobiyal aktivite farklı türleri mikroorganizmaların Ayrıca test edilebilir gibi metisiline dirençli Staphylococcus epidermidis (MRSE), antibiyotik dirençli patojenlere karşı gösterilen malzemeleri hangi başarıyla bu iletişim kuralıyla kullanılmıştır. Gram-pozitif metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve Vankomisin dirençli enterokoklar (VRE) ve gram-negatif çok endişe neden diğer önemli ilaca dirençli mikroorganizmaların çoğu Pseudomonas aeruginosa40,41.
Biyofilm inhibisyonu ve Antimikrobiyal aktivite karşı diğer tip-in virüs ve parazitler gibi mikroorganizmaların malzemelerin bu iletişim kuralı ile sınanamıyor. Ancak, bu iletişim kuralı çok yararlı bir başlangıç noktası yeni bir antimikrobiyal bir incelenmesi için malzeme gelişmiş sağlar.
Antimikrobiyal agar disk difüzyon testinde önemli bir adım oluşur örnek disk agar medya ile temas alır almaz bazı malzemeleri kat çünkü plaka ortasına yerleştirilen gerekir. Bu durumda, bu örnek dikkatle açılmak için cımbız steril bir çift kullanmak için tavsiye edilir. Öte yandan, iletişim yöntemi, denetimin yıkamak için önemlidir ve örnek diskler çok iyi onları ardından dört kez bir dinç vortexing ve sonication hiçbir uygun mikroorganizmalar sağlamak amacıyla pipetting tarafından PBS ile malzeme yapıştırılır kalır yüzey.
Bu video iletişim kuralı-ebilmek var olmak kullanmak Biyoproses mühendislik, doku mühendisliği, kontrollü ilaç dağıtım, ambalaj malzemeleri, atıksu arıtma ve biyomalzeme ile kullanmak tarım gibi birçok Biyomühendislik uygulamada bir çok arzu antimikrobiyal kapasitesi.
Bu iletişim kuralı ile elde edilen sonuçları nitel (görüntüler) ve nicel (normalleştirilmiş genişliğini antibakteriyel "halo" ve canlılığı kaybı), tekrarlanabilirlik (ortalama ± standart sapma) iyi bir analiz ile. Farklı malzeme karşılaştırırken, difüzyon ve iletişim yöntemi sonuçları analiz ile elde edilen bu ortalama değerler, istatistiksel olarak önemli ölçüde Eğer onlar are çalışma için Türkiye nin analiz, özel mesaj takip tek yönlü ANOVA tarafından çözümlenmesi farklı (p < 0,01).

İmplantın başarısızlık kez antimikrobiyal profilaksi ve aseptik çalışma koşulları rağmen oluşan mikrobiyal enfeksiyonlar bir sonucudur. Bu sorun çok yüksek sağlık maliyetleri neden ve hasta1arasında üzücü olduğunu. Önemli bakteri Staphylococcus aureus gibi şu anda çok tehlikeli patojenler Nozokomiyal Enfeksiyonlar II kateterler ve diğer tıbbi implant ile ilişkili olduğu kabul edilir ve tıp aletleri2ana kirletici vardır. Bu nedenle, roman antimikrobiyal strateji geliştirme acilen günlük ve tıbbi kullanımlar için gereklidir.
Antimikrobiyal ajanlar antibiyotik3, kuaterner amonyum bileşikleri4, metal iyonları/oksitler5ve antimikrobiyal peptidler (amper)6içerir. Antibiyotik yavaş yavaş nedeniyle bakteri direnci7artış nedeniyle antibiyotik aşırı8olduğunu, daha az verimli hale gelmektedir. Kuaterner amonyum bileşikleri sadece nedeniyle9microbial direnci kısa süreli kullanım için çok etkilidir. Metal iyonları/oksitler uzun çok etkili antimikrobiyal ajanlar kullanılmaktadır ve bandaj, su filtreleri, boyalar, vb10,11,12de dahil olmak üzere birçok ortak ticari ürünlerde kullanılır. Ancak, bu tür bileşikleri-ebilmek var olmak zehirli memeli hücreleri13bazı türleri için kanıtlanmıştır.
Mükemmel antimikrobiyal ve immunomodulatory özellikleri14,15amper göstermek ve bakteri çok onlara karşı bir direnç geliştirmeye16zor görünmektedir. Ancak, saf amper üretmek için pahalı bir işlemdir; Bu nedenle, bir büyük ölçekli üretim uygun değildir. Böylece, stratejileri amper üreten sorunları olmuştur sayaç için (Örneğin, küçük moleküler antibakteriyel peptoid taklit eder17, peptoids18, α-peptidler19 ve β-peptidler20) geliştirdi. Metakrilat sona erdi polipeptitler ve polypeptoids antimikrobiyal ve zehirli boya21için sentez.
Geliştirme gibi ileri düzey malzemeler içinde saf yeni antimikrobiyal ajanların veya melez formu, önlemek ve kökenlerinin dirençli enfeksiyonların tedavisinde giderek gereklidir. Doku ve Biyoproses mühendislik gibi birçok Biyomühendislik alanlar için yeni ileri düzey malzemeler çok çeşitli geliştirilmiştir geliştirilmiş kimyasal ve fiziksel özellikleri ile son on yıl içinde çeşitli yöntemlerle: plazma polimerizasyonu üzerine aşılama bir hidrofobik yüzey22,23,24, crosslinking yoğunluk25,26terzilik, polimerizasyon çözüm27,28,29 , 30, porogen çözünme31,32ve tarafından Nanomalzemeler grafen oksit (GO)33,34,35,36 gibi birleşme ve karbon nanofibers (CNFs)37.
Bu yeni malzemelerin antimikrobiyal kapasite, çalışma onların potansiyel Biyomühendislik uygulanabilirliği katlanarak artış olabilir ve bu nedenle, temel haline gelmiştir. Biz bu yeni gelişmiş materyalleri antimikrobiyal aktivitesini ölçmek için bir takip etmek kolay iletişim kuralı mevcut. Burada, numune hazırlama sonra iki tamamlayıcı yöntem takip edilmektedir: ilk agar disk difüzyon testi38 (difüzyon yöntemi) dayanır ve ikinci üzerinde antimikrobiyal etkinliğini ölçmek için ISO 22196:2007 norm39 temel alır malzeme yüzeyleri (iletişim yöntemi).

<table><tbody><tr><td>Cylindrical punch&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td>10 mm diameter</td></tr><tr><td>Petri dishes</td><td>soria genlab</td><td>P101</td><td>90 mm diameter, sterile</td></tr><tr><td>Tryptic soy agar (TSA)</td><td>Liofilchem</td><td>610052</td><td>Dehydrated medium 500 g (powder)</td></tr><tr><td>Tryptic soy broth (TSB)</td><td>Liofilchem</td><td>610053</td><td>Dehydrated medium 500 g (powder)</td></tr><tr><td>Sterile cotton swab</td><td>EUTOTUBO</td><td>300200</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge tubes</td><td>VIDRA FOC, SA</td><td>429900</td><td>50 mL, sterile</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>VWR</td><td>83813360</td><td>Absolute ethanol</td></tr><tr><td>Sterile 48-wells plate</td><td>COSTAR</td><td>3548</td><td>Flat bottom with lid, tissue culture treated, non-pyrogenic, polystyrene</td></tr><tr><td>A pair of tweezers</td><td>BRAUN</td><td>24612036</td><td>Toothless</td></tr><tr><td>Sterile phosphate buffered saline (PBS).</td><td>VWR</td><td>E404-100TAPBS</td><td></td></tr><tr><td>Vaccum oven with a connected vacuum pump</td><td>JP Selecta, SA</td><td>5900620</td><td></td></tr><tr><td>Laminar flow hood</td><td>TELSTAR Technologies, SL</td><td>TELSTAR AH-100</td><td>12.0 W lamp of UV-C radiation</td></tr><tr><td>Class II Biological safety cabinet</td><td>LABOGENE</td><td>MARS 1200</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>ASTEC CO, LTD</td><td>SCA-165DR</td><td></td></tr><tr><td>Vortex mixer</td><td>Biosan</td><td>V-1 Plus</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotometer</td><td>Macherey-Nagel, Germany</td><td>Nanocolor UV/VIS II</td><td></td></tr><tr><td>Bunsen burner</td><td>JP Selecta, SA</td><td>7001539</td><td></td></tr><tr><td>Alcohol burner</td><td>VIDRA FOC, SA</td><td>1658/20</td><td>In case sterilisation is necessary to be performed inside class II biological safety cabinet</td></tr><tr><td>Orbital shaker</td><td>sartorius stedim</td><td>8864845</td><td></td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>SELECTA</td><td>3000617</td><td>50/60 Hz</td></tr><tr><td>Digital calliper</td><td>ACHA</td><td>17-260</td><td>0-150 mm</td></tr><tr><td>Serological pipette</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11</td><td>25 mL, sterile</td></tr><tr><td>Serological pipette</td><td>VWR</td><td>612-4950</td><td>5 mL, sterile</td></tr><tr><td>Serological pipette</td><td>VWR</td><td>612-5541</td><td>10 mL, sterile</td></tr><tr><td>Micropipette</td><td>GILSON</td><td>FA10005P</td><td>Pipetman L P200L, plastic 20-200 &amp;micro;L</td></tr><tr><td>Micropipette</td><td>GILSON</td><td>F123602</td><td>Pipetman P1000, 200-1000 &amp;micro;L</td></tr><tr><td>Micropipette&amp;nbsp;</td><td>GILSON</td><td>FA10016</td><td>Pipetman L P12X300L, 20-300 &amp;micro;L</td></tr><tr><td>Micropipette tips</td><td>LABBOX</td><td>TIBP-200-960</td><td>2-200 &amp;micro;L</td></tr><tr><td>Micropipette tips</td><td>LABBOX</td><td>TIBP-1K0-480</td><td>100-1000 &amp;micro;L</td></tr><tr><td>Pre-sterilized tube&amp;nbsp;</td><td>INSULAB</td><td>301402</td><td>10 mL&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Photo camera</td><td>Canon EOS 5D</td><td></td><td>Any camera with high resolution can also be utilized</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Gram-positive bacteria Staphylococcus aureus&lt;/em&gt;</td><td></td><td>&amp;nbsp;strain V329</td><td>Cucarella et al. &lt;em&gt;J Bacteriol&lt;/em&gt; &lt;strong&gt;183 (9)&lt;/strong&gt;,&amp;nbsp; 2888&amp;ndash;2896 (2001)</td></tr><tr><td>Gram-negative bacteria &lt;em&gt;Escherichia coli&lt;/em&gt;</td><td>Colecci&amp;oacute;n Espa&amp;ntilde;ola de Cultivos Tipo CECT</td><td>CECT 101</td><td></td></tr><tr><td>Yeast &lt;em&gt;Candida albicans&lt;/em&gt;</td><td>Colecci&amp;oacute;n Espa&amp;ntilde;ola de Cultivos Tipo CECT</td><td>CECT 1394</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrifuge tubes&amp;nbsp;</td><td>DASLAB</td><td>175508</td><td>1,5 mL</td></tr><tr><td>Autoclave</td><td>JP Selecta, SA</td><td>4002136</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotometer-cuvettes</td><td>UVAT Bio CB</td><td>F-0902-02</td><td>4,5 mL</td></tr><tr><td>Drigalski spatula</td><td>LABBOX</td><td>SPRP-L05-1K0</td><td>Sterile, disposable&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>glass balls (2 mm diameter)</td><td>Hecht Karl</td><td>1401/2</td><td>Autoclavable, alternative device to the Drigalski spatula</td></tr><tr><td>Autoclave bags</td><td>DELTALAB</td><td>200318</td><td>To sterilize microbiological residues or contaminated material</td></tr><tr><td>Electronic pipette filling device</td><td>JetPip</td><td>JET BIOFIL</td><td></td></tr><tr><td>Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td><td>LABBOX</td><td>SBG3-100-010</td><td>100 mL, for autoclaving culture media</td></tr><tr><td>Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td><td>LABBOX</td><td>SBG3-250-010</td><td>250 mL, for autoclaving culture media</td></tr><tr><td>Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td><td>LABBOX</td><td>SBG3-500-010</td><td>500 mL, for autoclaving culture media</td></tr><tr><td>Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td><td>LABBOX</td><td>SBG3-1K0-010</td><td>1000 mL, for autoclaving culture media</td></tr><tr><td>Latex gloves</td><td>DENIA</td><td>2278000000</td><td></td></tr><tr><td>Indicator tape for sterilization</td><td>LABBOX</td><td>STAP-A55-001</td><td>Self-adhesive tape with impregnated paper turning to colour when exposed to sterilization process.</td></tr><tr><td>Universal test tube rack</td><td>LABBOX</td><td>MTSP-001-001</td><td>To hold centrifuge tubes</td></tr><tr><td>Microcentrifuge tube rack</td><td>VWR</td><td>211-0210</td><td>To hold microcentrifuge tubes</td></tr><tr><td>Sterile loop</td><td>ACEFE S.A.</td><td>100140055</td><td>10 &amp;micro;L of capacity for microbial culture&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Material M1</td><td>Universidad Cat&amp;oacute;lica de Valencia San Vicente M&amp;aacute;rtir (UCV)</td><td></td><td>Material type 1&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Material M2</td><td>Universidad Cat&amp;oacute;lica de Valencia San Vicente M&amp;aacute;rtir (UCV)</td><td></td><td>Material type 2&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Material M3</td><td>Universidad Cat&amp;oacute;lica de Valencia San Vicente M&amp;aacute;rtir (UCV)</td><td></td><td>Material type3</td></tr><tr><td>Material M4</td><td>Universidad Cat&amp;oacute;lica de Valencia San Vicente M&amp;aacute;rtir (UCV)</td><td></td><td>Material type 4&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Material C</td><td>Universidad Cat&amp;oacute;lica de Valencia San Vicente M&amp;aacute;rtir (UCV)</td><td></td><td>Control material</td></tr></tbody></table>

antimicrobial characterization of advanced materials for bioengineering applications

Gelişmiş özellikleri ile yeni ileri düzey malzemeler geliştirilmesi Biyomühendislik uygulamaları geniş bir daha fazla önem kazanmaktadır. Böylece, birçok roman Biyomalzeme doku mühendisliği ve kontrollü ilaç dağıtım gibi biyomedikal uygulamalar için gerekli belirli ortamlarda taklit edecek şekilde dizayn edilmektedir. Hücreleri veya enzim immobilizasyon için gelişmiş özelliklere sahip malzemeler de geçerli araştırma konusunun Biyoproses Mühendisliği gelişmedir. Ancak, bu uygulamalar bir malzemenin en çekici özelliklerinden biri istenmeyen bulaşmaları önlemek için antibiyotik kapasitesidir. Bunun için biz takip etmek kolay iletişim kuralları (i) agar disk difüzyon testi (difüzyon yöntemi) ve (ii) ISO 22196:2007 norm malzeme yüzeylerde (temas Antimikrobiyal aktivite ölçmek için temel malzemeleri antimikrobiyal karakterizasyonu için mevcut yöntemi). Bu iletişim kuralı mikroorganizmaların geniş bir kapsayacak şekilde gram pozitif ve gram-negatif bakteri ve Maya kullanılarak gerçekleştirilmelidir. Örnek olarak, Staphylococcus aureus, Escherichia colive Candida albicanskarşı bu protokol sonrası 4 malzeme farklı kimyasal doğa ile test edilir. Bu testlerin sonuçlarını ilk malzeme ve 3 diğer malzemeler için gram pozitif ve gram-negatif bakteri karşı antibakteriyel etkinliği artan için sigara Antimikrobiyal aktivite sergilemek. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Candida albicansbüyümesini inhibe edebiliyoruz.

Bu iletişim kuralı, bir örnek olarak kullanıldı, mikroorganizmaların antimikrobiyal kapasitesi 3 karşı farklı kimyasal doğa'nın 4 malzemelerin test etmek için önerilen: Staphylococcus aureus, Escherichia colive Candida albicans . Kontrol disk (C, resim gösterilmez) oluştu olarak agar disk difüzyon testler (difüzyon yöntemi) Sigara Antimikrobiyal aktivite ilk malzeme (M1) için sergilenen ve gram-pozitif ve gram-negatif karşı antibakteriyel etkinliği artan bakteriler diğer 3 malzemeler için M2, M3 ve M4 (bkz. Şekil 2).
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig2.jpg"> Şekil 2: antimikrobiyal difüzyon yöntemi sonuçları. Bu panel kuluçka 24 h sonra 4 malzeme (M1, M2, M3 ve M4) disklerin (10 mm çap x 1 mm kalınlık) S. aureus ve E. coli karşı antimikrobiyal difüzyon yöntemi gösterir. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Şekil 3 antimikrobiyal "(1) denklemi ile hesaplanan halo" (Kuzeyhalo) farklı örnek malzemeler için M1, M2, M3 ve M4 gram pozitif ve gram-negatif bakteri karşı farklı normalleştirilmiş genişlikleri gösterir. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Maya Candida albicans (resimler gösterilmez) büyümesini inhibe başardık.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig3v2.jpg"> Şekil 3: antimikrobiyal difüzyon "halo" sonuçları. Bu panel normalleştirilmiş "halo" (Kuzeyhalo) sonra 24 h, kuluçka her malzeme (M1, M2, M3 ve M4) disk için (10 mm çap x 1 mm kalınlık) S. aureus ve E. coli karşı gösterir. Farklılıklar istatistiksel olarak anlamlı (p < 0,01). Ancak, örnek M1 Antimikrobiyal aktivite sergiledi. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig3v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Kontrol disk (C) ve Grampositive ve diğer 3 malzemeler (bkz: için gram-negatif bakteri karşı artan antibakteriyel etkinliği oluştu olarak iletişim yöntemi sonuçları da sigara Antimikrobiyal aktivite ilk malzeme (M1) için sergilenen Şekil 4).
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig4v3.jpg"> Şekil 4: antimikrobiyal iletişim yöntemi sonuçları. Bu panel 4 malzeme (M1, M2, M3 ve M4) yüzey Antimikrobiyal aktivite assay ISO 22196:2007 göre ilgili 90 mm plakaları, kuluçka S. aureus ve E. coli (10-4seyreltme faktörü) için 24 saat sonra gösterir. C denetim diskten kuluçka 24 saat sonra kurtarıldı canlı bakteri var. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig4v3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Canlılık (%) kaybı Denklem (2) ve (3) tarafından bu protokol için belirtildiği şekilde belirlendi (bkz Şekil 5).
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig5v2.jpg"> Şekil 5: canlılık iletişim yöntemi tarafından kaybı. Bu panel malzeme yüzeylerde M1, M2, M3 ve M4 S. aureus ve E. coli karşı canlılık (%) kaybı gösterir. Örnek M1 Antimikrobiyal aktivite sergiledi. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig5v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri (ya da resimler gösterilmez) iletişim yöntemi tarafından Maya Candida albicans büyümesini inhibe başardık. Bu nedenle, bu 4 ileri düzey malzemeler 3 gram pozitif ve gram negatif bakterilere karşı olumlu antimikrobiyal sonuçlar gösterdi ve böylece yüksek antibakteriyel etkinliği gereksinimleri olan birçok Biyomühendislik uygulamalar için çok yararlı olabilir. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Maya büyümesini inhibe başardık.

Watch this Scientific Journal Video about Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications at JoVE.com

Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications

İleri düzey malzemeler antimikrobiyal karakterizasyonu için bir protokol tanıtacağız. Burada, malzeme yüzeylerde Antimikrobiyal aktivite birbirini tamamlayan iki yöntemine göre ölçülür: bir agar disk difüzyon testi üzerinde dayanır, ve diğeri de ISO 22196:2007 norm dayalı standart bir prosedür.

Antimikrobiyal Biyomühendislik uygulamalar için gelişmiş malzeme karakterizasyonu

The development of new advanced materials with enhanced properties is becoming more and more important in a wide range of bioengineering applications. ...

antimicrobial-characterization-advanced-materials-for-bioengineering

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Bioengineering

21.9K Görüntüleme.  Universidad Católica de Valencia San Vicente Mártir. İleri düzey malzemeler antimikrobiyal karakterizasyonu için bir protokol tanıtacağız. Burada, malzeme yüzeylerde Antimikrobiyal aktivite birbirini tamamlayan iki yöntemine göre ölçülür: bir agar disk difüzyon testi üzerinde dayanır, ve diğeri de ISO 22196:2007 norm dayalı standart bir prosedür.

Video: Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications

High-throughput Identification of Bacteria Repellent Polymers for Medical Devices

Medical devices are often associated with hospital-acquired infections, which place enormous strain on patients and the healthcare system as well as contributing to antimicrobial resistance. One possible avenue for the reduction of device-associated infections is the identification of bacteria-repellent polymer coatings for these devices, which would prevent bacterial binding at the initial attachment step. A method for the identification of such repellent polymers, based on the parallel screening of hundreds of polymers using a microarray, is described here. This high-throughput method resulted in the identification of a range of promising polymers that resisted binding of various clinically relevant bacterial species individually and also as multi-species communities. One polymer, PA13 (poly(methylmethacrylate-co-dimethylacrylamide)), demonstrated significant reduction in attachment of a number of hospital isolates when coated onto two commercially available central venous catheters. The method described could be applied to identify polymers for a wide range of applications in which modification of bacterial attachment is important.

A high-throughput microarray method for the identification of polymers which reduce bacterial surface binding on medical devices is described.

Tıbbi Cihazlar Bakterilerin yüksek verimlilik Kimlik Savar Polimerler

Medical devices are often associated with hospital-acquired infections, which place enormous strain on patients and the healthcare system as well as ...

Biyomühendislik

Biomimetic Materials to Characterize Bacteria-host Interactions

Bacterial attachment to host cells is one of the earliest events during bacterial colonization of host tissues and thus a key step during infection. The biochemical and functional characterization of adhesins mediating these initial bacteria-host interactions is often compromised by the presence of other bacterial factors, such as cell wall components or secreted molecules, which interfere with the analysis. This protocol describes the production and use of biomimetic materials, consisting of pure recombinant adhesins chemically coupled to commercially available, functionalized polystyrene beads, which have been used successfully to dissect the biochemical and functional interactions between individual bacterial adhesins and host cell receptors. Protocols for different coupling chemistries, allowing directional immobilization of recombinant adhesins on polymer scaffolds, and for assessment of the coupling efficiency of the resulting &#8220;bacteriomimetic&#8221; materials are also discussed. We further describe how these materials can be used as a tool to inhibit pathogen mediated cytotoxicity and discuss scope, limitations and further applications of this approach in studying bacterial - host interactions.

Bacterial attachment to host cells is a key step during host colonization and infection. This protocol describes the generation of polymer-coupled recombinant adhesins as biomimetic materials which allow analysis of the contribution of individual adhesins to these processes, independent of other bacterial factors.

Bakteri-konak Etkileşimleri karakterize etmek Biyomimetik Malzemeler

Bacterial attachment to host cells is one of the earliest events during bacterial colonization of host tissues and thus a key step during infection. The ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Qualitative and Quantitative Assays for Detection and Characterization of Protein Antimicrobials

Initial evaluations of large microbial libraries for potential producers of novel antimicrobial proteins require both qualitative and quantitative methods to screen for target enzymes prior to investing greater research effort and resources. The goal of this protocol is to demonstrate two complementary assays for conducting these initial evaluations. The microslide diffusion assay provides an initial or simple detection screen to enable the qualitative and rapid assessment of proteolytic activity against an array of both viable and heat-killed bacterial target substrates. As a counterpart, the increased sensitivity and reproducibility of the dye-release assay provides a quantitative platform for evaluating and comparing environmental influences affecting the hydrolytic activity of protein antimicrobials. The ability to label specific heat-killed cell culture substrates with Remazol brilliant blue R dye expands this capability to tailor the dye-release assay to characterize enzymatic activity of interest.

Here, we present protocols to rapidly screen and characterize enzymes for antimicrobial activity. The microslide diffusion assay and the dye-release assay utilize target bacterial substrates for qualitative and quantitative enzymatic activity evaluation.

Nitel ve Nicel Saptanması için Tahliller ve Protein Antimikrobiyal karakterizasyonu

Initial evaluations of large microbial libraries for potential producers of novel antimicrobial proteins require both qualitative and quantitative methods ...

Targeting Biofilm Associated Staphylococcus aureus Using Resazurin Based Drug-susceptibility Assay

Most pathogenic bacteria are able to form biofilms during infection, but due to the difficulty of manipulating and assessing biofilms, the vast majority of laboratory work is conducted with planktonic cells. Here, we describe a peg plate biofilm assay as performed with Staphylococcus aureus. Bacterial biofilms are grown on pegs attached to a 96-well microtiter plate lid, washed through gentle submersion in buffer, and placed in a drug challenge plate. After subsequent incubation they are again washed and moved to a final recovery plate, in which the fluorescent dye resazurin serves as a viability indicator. This assay offers greatly increased ease-of-use, reliability, and reproducibility, as well as a wealth of data when conducted as a kinetic read. Moreover, this assay can be adapted to a medium-throughput drug screening approach by which an endpoint fluorescent readout is taken instead, offering a path for drug discovery efforts.

Targeting Biofilm Associated Staphylococcus aureus Using Resazurin Based Drug-susceptibility Assay

Most bacterial infections produce a biofilm. By virtue of their environment, biofilm associated bacteria are often phenotypically drug resistant. Novel antibacterial molecules that kill bacteria in biofilms are thus a high priority. We establish an assay to quickly screen for antimicrobial compounds that are effective at eradicating biofilms.

Biyofilm İlişkili Hedefleme<em&gt; Staphylococcus aureus</emKullanma&gt; Resazurin Tabanlı İlaç-duyarlılık Deneyi

Most pathogenic bacteria are able to form biofilms during infection, but due to the difficulty of manipulating and assessing biofilms, the vast majority ...

A Platform of Anti-biofilm Assays Suited to the Exploration of Natural Compound Libraries

Biofilms are regarded as one of the most challenging topics of modern biomedicine, and they are potentially responsible for over 80% of antibiotic-tolerant infections. Biofilms have displayed an exceptionally high tolerance for chemotherapy, which is thought to be multifactorial. For instance, the matrix provides a physical barrier that decreases the penetration of antibiotics into the biofilm. Also, cells within the biofilms are phenotypically diverse. Likely, biofilm resilience arises from a combination of these and other, yet unknown, mechanisms. All of the currently existing antibiotics have been developed against single-cells (planktonic) bacteria. Therefore, so far, a very limited repertoire of molecules exists that can selectively act on mature biofilms. This situation has driven a progressive paradigm shift in drug discovery, in which searching for anti-biofilms has been urged to occupy a more prominent place. An additional challenge is that there are a very limited number of standardized methods for biofilm research, especially those that can be used for large-throughput screening of chemical libraries. Here, an experimental anti-biofilm platform for chemical screening is presented. It uses three assays to measure biofilm viability (with resazurin staining), total biomass (with crystal violet staining), and biofilm matrix (using a wheat germ agglutinin, WGA-fluorescence-based staining of the poly-N-acetyl-glucosamine, PNAG, fraction). All the assays were developed using Staphylococcus aureus as the model bacteria. Examples of how the platform can be used for primary screening as well as for functional characterization of identified anti-biofilm hits are presented. This experimental sequence further allows for the classification of the hits based upon the measured end-points. It also provides information on their mode of action, especially on long-term versus short-term chemotherapeutic effects. Thus, it is very advantageous for the quick identification of high-quality hit compounds that can serve as starting points for various biomedical applications.

Biofilm infections show high tolerance towards chemotherapy. No single assay captures the complexity of biofilms. Instead, complementary assays are needed. We present a screening platform (developed for S. aureus) that combines assays for viability, biomass, and biofilm matrix. It allows anti-biofilm drug discovery, including the assessment of long-term chemotherapeutic effects.

Doğal Bileşik Kütüphaneleri Exploration uygundur Anti-biyofilm Tahliller Bir Platform

Biofilms are regarded as one of the most challenging topics of modern biomedicine, and they are potentially responsible for over 80% of ...

Synthesis of Multi-walled Carbon Nanotubes Modified with Silver Nanoparticles and Evaluation of Their Antibacterial Activities and Cytotoxic Properties

In this study, multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) were treated with an aqueous sulfuric acid solution to form an oxygen-based functional group. Silver MWCNTs were prepared by the reductive deposition of silver from an aqueous solution of AgNO3 on the oxidized MWCNTs. Given the unique color of the CNTs, it was not possible to apply them to the minimum inhibitory concentration or mitochondrial toxicity assays to evaluate the toxicity and antibacterial properties, since they would interfere with the assays. The inhibition zone and minimum bactericidal concentration for the Ag-MWCNTs were measured and Live/Dead and Trypan Blue assays were used to measure the toxicity and antibacterial properties without interfering with the color of the CNTs.

In this study, antimicrobial nanomaterials were synthesized by acidic oxidation of multiwalled carbon nanotubes and subsequent reductive deposition of silver nanoparticles. Antimicrobial activity and cytotoxicity tests were performed with the as-prepared nanomaterials.

Gümüş nano tanecikleri ve onların antibakteriyel faaliyetleri ve sitotoksik özellikleri değerlendirilmesi ile modifiye çok duvarlı karbon nanotüpler sentezi

In this study, multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) were treated with an aqueous sulfuric acid solution to form an oxygen-based functional group. Silver ...

Evaluation of Antimicrobial Activities of Nanoparticles and Nanostructured Surfaces In Vitro

The antimicrobial activities of nanoparticles and nanostructured surfaces, such as silver, zinc oxide, titanium dioxide, and magnesium oxide, have been explored previously in clinical and environmental settings and in consumable food products. However, a lack of consistency in the experimental methods and materials used has culminated in conflicting results, even amongst studies of the same nanostructure types and bacterial species. For researchers who wish to employ nanostructures as an additive or coating in a product design, these conflicting data limit their utilization in clinical settings. 
To confront this dilemma, in this article, we present four different methods to determine the antimicrobial activities of nanoparticles and nanostructured surfaces, and discuss their applicability in different scenarios. Adapting consistent methods is expected to lead to reproducible data that can be compared across studies and implemented for different nanostructure types and microbial species. We introduce two methods to determine the antimicrobial activities of nanoparticles and two methods for the antimicrobial activities of nanostructured surfaces. 
For nanoparticles, the direct co-culture method can be used to determine the minimum inhibitory and minimum bactericidal concentrations of nanoparticles, and the direct exposure culture method can be used to assess real-time bacteriostatic versus bactericidal activity resulting from nanoparticle exposure. For nanostructured surfaces, the direct culture method is used to determine the viability of bacteria indirectly and directly in contact with nanostructured surfaces, and the focused-contact exposure method is used to examine antimicrobial activity on a specific area of a nanostructured surface. We discuss key experimental variables to consider for in vitro study design when determining the antimicrobial properties of nanoparticles and nanostructured surfaces. All these methods are relatively low cost, employ techniques that are relatively easy to master and repeatable for consistency, and are applicable to a broad range of nanostructure types and microbial species.

Evaluation of Antimicrobial Activities of Nanoparticles and Nanostructured Surfaces In Vitro

We introduce four methods to evaluate the antimicrobial activities of nanoparticles and nanostructured surfaces using in vitro techniques. These methods can be adapted to study the interactions of different nanoparticles and nanostructured surfaces with a broad range of microbial species.

Nanopartiküllerin ve Nanoyapılı Yüzeylerin Antimikrobiyal Aktivitelerinin İn Vitro Olarak Değerlendirilmesi

The antimicrobial activities of nanoparticles and nanostructured surfaces, such as silver, zinc oxide, titanium dioxide, and magnesium oxide, have been ...

Generation of Greater Bacterial Biofilm Biomass using PCR-Plate Deep Well Microplate Devices

Bacterial biofilms are difficult to eradicate from surfaces using conventional antimicrobial interventions. High-throughput 96-well microplate methods are frequently used to cultivate bacterial biofilms for rapid antimicrobial susceptibility testing to calculate minimal biofilm eradication concentration (MBEC) values. Standard biofilm devices consist of polystyrene pegged-lids fitted to 96-well microplates and are ideal for measuring biofilm biomass and MBEC values, but these devices are limited by available peg surface area for biomass accumulation and cost. Here, we outline a protocol to use self-assembled polypropylene 96-well deep well PCR-plate pegged-lid device to grow Escherichia coli BW25113 and Pseudomonas aeruginosa PAO1 biofilms. A comparison of 24-hour biofilms formed on standard and deep well devices by each species using crystal violet biomass staining and MBEC determination assays are described. The larger surface area of deep well devices expectedly increased overall biofilm formation by both species 2-4-fold. P. aeruginosa formed significantly greater biomass/mm2 on deep well pegs as compared to the standard device. E. coli had greater biomass/mm2 on standard polystyrene devices as compared the deep well device. Biofilm eradication assays with disinfectants such as sodium hypochlorite (bleach) or benzalkonium chloride (BZK) showed that both compounds could eliminate E. coli and P. aeruginosa biofilms from both devices but at different MBEC values. BZK biofilm eradication resulted in variable E. coli MBEC values between devices, however, bleach demonstrated reproducible MBEC values for both species and devices. This study provides a high throughput deep well method for growing larger quantities of biofilms on polypropylene devices for downstream studies requiring higher amounts of static biofilm.

This protocol presents methodology to perform biofilm growth and biomass measurements using self-assembled deep well PCR-plate devices for high-throughput 96-well pegged lid static biofilm screening.

PCR-Plate Deep Well Microplate Cihazları Kullanılarak Daha Büyük Bakteriyel Biyofilm Biyokütlesinin Oluşturulması

Bacterial biofilms are difficult to eradicate from surfaces using conventional antimicrobial interventions. High-throughput 96-well microplate methods are ...

<meta charset="utf8"></head><body>Dirençli Bakteriler için Antibakteriyel Grafen Oksit / Bakır Nanokompozitler

Fabrication of Antibacterial Graphene Oxide/Copper Nanocomposites

Antibiotics are currently the most used antibacterial treatment for killing bacteria. However, bacteria develop resistance when continually overexposed to antibiotics. Developing&#160;antimicrobial agents that can replace existing antibiotics is essential because antibiotic-resistant bacteria have resistance mechanisms for all current antibiotics and can promote nosocomial infections. To address this challenge, in this study, we propose graphene oxide/copper (GO/Cu) nanocomposites as antibacterial materials that can replace the existing antibiotics. GO/Cu nanocomposites are characterized by transmission electron microscopy and scanning electron microscopy. They show that copper (Cu) nanoparticles are well-grown on the graphene oxide sheets. Additionally, a microdilution broth method is used to confirm the efficacy of the antimicrobial substance against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), which are frequently implicated in nosocomial infections. Specifically, 99.8% of MRSA and 84.7% of P. aeruginosa are eliminated by 500 &#181;g/mL of GO/Cu nanocomposites. Metal nanocomposites can eradicate antibiotic-resistant bacteria by releasing ions, forming reactive oxygen species, and physically damaging the bacteria. This study demonstrates the potential of antibacterial GO/Cu nanocomposites in eradicating antibiotic-resistant bacteria.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Antibiyotiğe Dirençli Bakterileri Ortadan Kaldırmak için Metalik Nanokompozitler

Herein, we introduce graphene oxide/copper (GO/Cu) nanocomposites as an antibacterial nanomaterial. The antibacterial effectiveness of the GO/Cu nanocomposites was evaluated against both antibiotic-resistant gram-positive and gram-negative bacteria.

Antibakteriyel Grafen Oksit / Bakır Nanokompozitlerin İmalatı

Antibiotics are currently the most used antibacterial treatment for killing bacteria. However, bacteria develop resistance when continually overexposed to ...

<meta charset="utf8"></head><body> Çinko Oksit Nanopartiküllerinin Sentezi ve Antibakteriyel Etkilerinin Analizi

Preparation of Zinc Oxide Nanoparticles and the Evaluation of their Antibacterial Effects

Nosocomial bacterial infections have become increasingly challenging due to their inherent resistance to antibiotics. The emergence of multidrug-resistant bacterial strains in hospitals has been attributed to the extensive and varied use of antibiotics, further exacerbating the problem of antibiotic resistance. Metal nanomaterials have been widely studied as an alternative solution for eradicating antibiotic-resistant bacterial cells. Metallic nanoparticles attack bacterial cells through various mechanisms, such as the release of antibacterial ions, generation of reactive oxygen species, or physical disruption, against which bacteria cannot develop resistance. Among the actively researched antimicrobial metal nanoparticles, zinc oxide nanoparticles, which are FDA-approved, are known for their biocompatibility and antibacterial properties. In this study, we focused on successfully developing a precipitation method for synthesizing zinc oxide nanoparticles, analyzing the properties of these nanoparticles, and conducting antimicrobial tests. Zinc oxide nanoparticles were characterized using transmission electron microscopy (TEM), dynamic light scattering (DLS), ultraviolet/visible spectroscopy, and X-ray diffraction (XRD). Antibacterial tests were conducted using the broth microdilution test with the multidrug-resistant strains of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Pseudomonas aeruginosa. This study demonstrated the potential of zinc oxide nanoparticles in inhibiting the proliferation of antibiotic-resistant bacteria.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Antibiyotik Direncinin Üstesinden Gelmede Çinko Oksit Nanopartiküllerinin Antibakteriyel Etkilerini Keşfetmek

In this study, zinc oxide nanoparticles were synthesized using a precipitation method. The antibacterial effect of the synthesized particles was tested against multidrug-resistant methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Pseudomonas aeruginosa bacterial strains.

Çinko Oksit Nanopartiküllerinin Hazırlanması ve Antibakteriyel Etkilerinin Değerlendirilmesi

Nosocomial bacterial infections have become increasingly challenging due to their inherent resistance to antibiotics. The emergence of multidrug-resistant ...