Name: vein interposition model: a suitable model to study bypass graft patency
Uploaded: 2017-01-15T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 22 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency at JoVE.com

Yazarlar onun teknik yardım için Christiane Pahrmann teşekkür ederiz. Bu çalışma, Deutsche Stiftung für Herzforschung tarafından finanse edildi (F / 28/14). DW Kalp ve Akciğer Transplantasyonu Uluslararası Derneği ödülü ile desteklenmiştir. TD Else-Kröner-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04) den Else Kröner Mükemmellik maaş aldı. SS Deutsche Forschungsgemeinschaft araştırma hibe almıştır (DFG; DE2133 / 2-1, TD ve SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, SS).

Hayvanlar Laboratuvar Hayvanları İlkeleri, Laboratuar Hayvan Kaynakları Enstitüsü tarafından hazırlanan ve Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından yayınlanan Kılavuzu&#39;nda uygun insancıl bakıma aldı. Tüm hayvan protokolleri sorumlu yerel otorite ( &quot;Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Sağlık ve Tüketiciyi Koruma Dairesi) Hamburg&quot;) tarafından onaylanmıştır. 1. Hayvan Bakımı <ol><li> Laboratuvar Hayvanları Enstitüsü 300-350 g ağırlığında Lewis sıçanları (LEW / Crl) sıçan ve ROSA / lusiferaz LEW transgenik fareler elde edin. </li><li> havalandırmalı dolaplar geleneksel koşullar altında sıçan tutmak ve onlara standart sıçan yemi ve otoklava su ad libitum beslenirler. </li><li> donör ve alıcı olarak sinjenik LEW / Crl sıçanlar olarak ROSA / lusiferaz LEW transgenik fareler kullanarak bir greft nakli gerçekleştirmek. </li></ol> Donör Sıçan 2. Hazırlık <ol><li> Bir askere kullanıniyon odası izofluran (2.5-3%) ile bir sıçan uyuşturan için. </li><li> Sırtında sıçan yerleştirin ve ağız ve burun kapsayan bir yüz maskesi ile anestezi korumak. arka ayakları sıkışmasını ve reflekslerin yokluğu doğrulayarak anestezi yeterli derinliğe kontrol edin. anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için gözlere bazı veteriner merhem sürün. </li><li> arka bacakları yaymak ve bant kullanarak kendi konumunu düzeltmek. </li><li> saç düzeltici ile inguinal saçlarını tıraş ve% 80 etanol ile takip povidon-iyot kullanarak tüm alanı dezenfekte edin. İki kez dezenfeksiyon işlemi tekrarlayın. NOT: Cerrahi alan, gazlı bez ve cerrahi aletler sterilize edilmelidir. süreç boyunca steril bir alan korumak ve tek kullanımlık, steril cerrahi eldiven, maske ve kep giymek. </li><li> Mikroskop altında, linea Inguinalis boyunca dikey bir kesi yapmak. nazikçe cilt altı dokuları ayırmak için iki forseps kullanın ve ori yüzeysel epigastrik ven maruzFemoral ven cin. Dikkatle çevre dokulardan yüzeyel epigastrik ven izole. </li><li> İki mikro kelepçeler kullanarak yüzeyel epigastrik ven kan akışını durdurun. </li><li> dikkatlice forseps ile izole ven kaldırma ve microscissors damar yoluyla keserek damar yaklaşık 0.5 ila 1 cm segmenti hasat. kan kaybını önlemek için damar güdük mikro kelepçeler bırakın. steril gazlı bez üzerine ven kaldırıldı parça yerleştirin. Dikkatle toplandı damarın bir ucunda içinde 30 G iğne yerleştirin ve heparin ile kap (50 birim / ml) yıkayın. NOT: Dikkatli damar tutun ve kaldırma, kesme ve yıkama sırasında zarar görmemesi. heparin uygun miktarda greft temizlemek için emin olun. </li><li> Alıcı sıçan içine nakli, bir gemi spazmı önlemek için kadar buz üzerinde% 1 lidokain damar segmentini tutun. </li><li> % 5 izofluran anestezi artırarak donör sıçan Euthanize. 2-3 dk, op sonralinea alba boyunca karın tr, diyafram üzerinden kesilmiş ve kan dolaşımını durdurmak için kalbi kaldırın. </li></ol> Alıcı Sıçan 3. hazırlanması <ol><li> Uyutmak ve donör sıçan aynı şekilde alıcı sıçan düzeltin. </li><li> saç düzeltici ile bacakların medial tarafını Tıraş ve povidon-iyot ve% 80 etanol kullanılarak üç kez dezenfekte edin. </li><li> anestezi derinliği izlemek ve arka ayakları kısma zaman refleksleri bulunmadığını teyit ederek yeterli olduğundan emin olun. </li><li> kasık kat diz medyan femur kesi gerçekleştirin. Mikroskop altında, çevresinden femoral arter ayırmak için 2 forseps kullanabilir. </li><li> kan akışını durdurmak için mikro kelepçeleri kullanın. Distal kelepçe ile takip ilk proksimal kelepçe, yerleştirin. </li><li> microscissors kenetlenmiş femoral arter kısa bir kesimi kesip atın. bir boşluk yaratarak microscissors kalan arter güdük kısaltılmasıven grefti daha büyük 1-2 mm. 30 G iğne kullanılarak heparin ile arteriyel güdük yıkayın. NOT: adventisya hafifçe damar güdük ötesinde çıkıntı halinde, geminin ucuna hafifçe çekin ve bir parça çıkarmak için forseps kullanabilir. </li><li> arteriyel kütükleri arasındaki adım 2.8 hasat ven yerleştirin ve boşluğa uygun sığacak şekilde uzunluğunu ayarlayın. ven yönüne dikkat edin. </li><li> ilk 10-0 prolen sütür kullanılarak proksimal anastomoz gerçekleştirin. (Şekil 1D) gösterilen sırayla tek dikiş yürütün. ventral tarafta üç sütür eklemeden önce her yan tarafında bir dikiş ile başlayın. Daha sonra, anastomoz tamamlamak için teknenin sırt tarafında üç dikiş yerleştirin. </li><li> Adım 3.8 açıklanan proksimal anastomoz için aynı tekniği kullanarak greft distal damarları bağlayın. Yine, her yan tarafında bir sütür ile başlamak ve daha sonra ventral sid üç sütür koyunE ve dorsal tarafı. </li><li> fibrin yapıştırıcı bileşen 1 ve 2 ile yük iki adet 1 mL&#39;lik şırınga dikkatlice forseps ile greft kaldırın ve bileşen 2, ardından greft altında fibrin yapıştırıcı bileşeninin 1 yaklaşık 100 ul bırakın. NOT:: 1 oranında parçalar 1 ve 2, bir 1 uygulanır emin olun. </li><li> geri pozisyonda greft yerleştirin ve greft üzerine bileşenleri 1 ve 2&#39;nin ek bir 100 ul bırakın. tutkal greft ve anastomoz yetmezliği ve damar grefti aşırı distansiyonu önlemek amacıyla anastomoz kapsar emin olun. </li><li> Dikkatle proksimal ardından uzak kelepçe açmak. </li><li> Nakledilen damar ve greft distal arter gözle görülür bir darbe kontrol ederek başarılı bir ameliyat onaylayın. </li><li> cilt kapatma engellemektedir aşırı tutkal, çıkarın. tedavi tutkal kaldırın ve microscissors aşırı çıkarmak için forseps kullanın. 5-0 prolen sütür ile cilt katmanları kapatın. </li><li> 4-5 m enjekteg / kg Carprofen subkutan sıçan uyanmak izin vermeden önce. sternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar sahipsiz hayvan bırakmayın. tamamen iyileşti kadar tek bir kafeste hayvan tutun. </li><li> Aşağıdaki 3 gün boyunca ağrı kesici ilaç olarak içme suyu (100 ml başına 50 mg metamizol) Metamizol ekleyin ve günlük hayvan izleyin. </li></ol> 4. Dubleks Sonografi NOT: duxplex sonografi sıçanlarda 14 non-invaziv kan akışını görselleştirmek için. <ol><li> indüksiyon odasında (izofluran% 2) bir sıçan Anesteziyoloji. Sırtında sıçan yerleştirin ve burnu kaplayan bir yüz maskesi ile anestezi korumak. </li><li> uyluk çevresi saç kaldırmak için saç makasları ve epilasyon kremi kullanın. </li><li> uyluk ultrason jeli uygulayın. hiçbir hava kabarcığı olmadığından emin olun. MS 400 transdüser kullanılarak dubleks sonografi görüntü elde (merkez frekansı: 30 M/ Sn 230-400 kare hızı ile Hz). </li></ol> 5. histopatolojisi NOT: Hasat morfometrik analiz 15 Masson trikrom boyama ile gemi leke ve. <ol><li> gece boyunca% 4 paraformaldehid içinde hasat kap saptamak etanol artan konsantrasyonlarda kurutmak. parafin örnek embed ve bir mikrotom kullanılarak 5 mikron kalınlığında dilimler halinde kesin. NOT: Paraformaldehyde toksik ve özel dikkatle ele alınmalıdır. </li><li> trikrom boyama solüsyonu ile onları boyamadan önce slaytlar Deparaffinize. Lekeli slaytlar dehydrate ksilen ile bunları temizleyin ve orta montaj takar. slaytlar kurutulduktan sonra, bir mikroskop ile örnekleri görmek. </li></ol> 6. Biyoparlaklık Görüntüleme (BLI) NOT: Ameliyat sonrası greft biyolüminesens sinyali 1 ölçerek in vivo zamanla takip edildi6. <ol><li> PBS 22 ml D-luciferase potasyum tuzu, 1 g çözülür ve intraperitoneal olarak sıçan (375 mg / kg vücut ağırlığı) enjekte. luciferin hayvan dönmesi için 15 dakika bekleyin. </li><li> gerçek zamanlı biyolüminesens miktar sistemi içine sıçan yerleştirin ve biyoparlaklık sinyali erişin. </li></ol>

<ol>
	<li>Sabik, J. F., 3rd, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+saphenous+vein+graft+patency.">Understanding saphenous vein graft patency.</a> Circulation. 124, 273-275 (2011).</li><li>Goldman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+patency+of+saphenous+vein+and+left+internal+mammary+artery+grafts+after+coronary+artery+bypass+surgery:+results+from+a+Department+of+Veterans+Affairs+Cooperative+Study.">Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study.</a> J Am Coll Cardiol. 44, 2149-2156 (2004).</li><li>Fitzgibbon, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+bypass+graft+fate+and+patient+outcome:+angiographic+follow-up+of+5,065+grafts+related+to+survival+and+reoperation+in+1,388+patients+during+25+years.">Coronary bypass graft fate and patient outcome: angiographic follow-up of 5,065 grafts related to survival and reoperation in 1,388 patients during 25 years.</a> J Am Coll Cardiol. 28, 616-626 (1996).</li><li>O'Brien, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+healing+around+and+within+saphenous+vein+bypass+grafts.">Wound healing around and within saphenous vein bypass grafts.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 114, 38-45 (1997).</li><li>El-Kurdi, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovine+femoral+artery+bypass+grafting+using+saphenous+vein:+a+new+model.">Ovine femoral artery bypass grafting using saphenous vein: a new model.</a> J Surg Res. 193, 458-469 (2015).</li><li>Yuda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+receptor+antagonist,+L-158,809,+prevents+intimal+hyperplasia+in+dog+grafted+veins.">Angiotensin II receptor antagonist, L-158,809, prevents intimal hyperplasia in dog grafted veins.</a> Life Sci. 68, 41-48 (2000).</li><li>McCann, R. L., Hagen, P. O., Fuchs, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspirin+and+dipyridamole+decrease+intimal+hyperplasia+in+experimental+vein+grafts.">Aspirin and dipyridamole decrease intimal hyperplasia in experimental vein grafts.</a> Ann Surg. 191, 238-243 (1980).</li><li>Thomas, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+studying+vein+graft+failure+and+therapeutic+interventions.">Animal models for studying vein graft failure and therapeutic interventions.</a> Curr Opin Pharmacol. 12, 121-126 (2012).</li><li>Hu, Y., Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+mouse+model+of+vein+bypass+graft+atherosclerosis.">New mouse model of vein bypass graft atherosclerosis.</a> Heart Lung Circ. 11, 182-188 (2002).</li><li>Salzberg, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+neointimal+formation+after+surgical+vein+grafting+in+a+murine+model+of+type+2+diabetes.">Increased neointimal formation after surgical vein grafting in a murine model of type 2 diabetes.</a> Circulation. 114, I302-I307 (2006).</li><li>Abbott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+animals:+the+Renaissance+rat.">Laboratory animals: the Renaissance rat.</a> Nature. 428, 464-466 (2004).</li><li>Lindblad-Toh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+sequencing:+three's+company.">Genome sequencing: three's company.</a> Nature. 428, 475-476 (2004).</li><li>Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Campagna, C., Ozaki, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rationale+and+practical+techniques+for+mouse+models+of+early+vein+graft+adaptations.">Rationale and practical techniques for mouse models of early vein graft adaptations.</a> Journal of vascular surgery. 52, 444-452 (2010).</li><li>Olver, D. T., Lacefield, J. C., Shoemaker, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+bidirectional+flow+in+the+sciatic+vasa+nervorum.">Evidence of bidirectional flow in the sciatic vasa nervorum.</a> Microvascular research. 94, 103-105 (2014).</li><li>Stubbendorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducing+myointimal+hyperplasia+versus+atherosclerosis+in+mice:+an+introduction+of+two+valid+models.">Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2014).</li><li>Conradi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunobiology+of+fibrin-based+engineered+heart+tissue.">Immunobiology of fibrin-based engineered heart tissue.</a> Stem cells translational medicine. 4, 625-631 (2015).</li><li>Dashwood, M. R., Tsui, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term='No-touch'+saphenous+vein+harvesting+improves+graft+performance+in+patients+undergoing+coronary+artery+bypass+surgery:+A+journey+from+bedside+to+bench.">'No-touch' saphenous vein harvesting improves graft performance in patients undergoing coronary artery bypass surgery: A journey from bedside to bench.</a> Vascular Pharmacology. 58, 240-250 (2013).</li><li>Bekler, H. I., Rosenwasser, M. P., Akilina, Y., Bulut, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+an+absorbable+collagen+cover+(NeuraWrap)+improves+patency+of+interpositional+vein+grafts.">The use of an absorbable collagen cover (NeuraWrap) improves patency of interpositional vein grafts.</a> Acta orthopaedica et traumatologica turcica. 44, 157-161 (2010).</li><li>Geurts, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knockout+rats+via+embryo+microinjection+of+zinc-finger+nucleases.">Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases.</a> Science. 325, 433 (2009).</li><li>Moreno, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+and+characterization+of+a+renin+knockout+rat.">Creation and characterization of a renin knockout rat.</a> Hypertension. 57, 614-619 (2011).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Bu video ven greft kaybı araştırmak ve altta yatan patolojik süreçlerin araştırılması ve yeni ilaçlar ya da tedavi seçeneklerinin test etmek için izin veren bir fare ven interpozisyonu modelini göstermektedir. Anestezi cerrahi prosedürler çok önemli bir yönüdür. Bu özellikle uzun süreli operasyonlar sırasında, güvenli ve kolay bir yöntem olduğu için sürekli inhalasyon anestezi sistemi tavsiye edilir. Bu işlem en fazla 1 saat sürer eğitim safhasında büyük önem olabilir. Cerrahi işlem ile ilgili olarak, hasatı ve implantasyon 17 boyunca damar grefti zarar vermemek için çok önemlidir. Geminin adventisya Kavrama ven grefti zarar görmesini önlemek ve sonraki trombüs oluşumunu ve greft başarısızlık önleyebilirsiniz. Greft açıklığı ven grefti veya Dista kan akışının gözlem yoluyla ve nabız aşı yapımını ven hemen sonra tespit edilebilirl arter yanı sıra dubleks sonografi ile. prosedürün bir diğer kritik yönü ven grefti aşırı distansiyonu önlemek içindir. tansiyon sistemine ven grefti ani maruz kalma müteakip aşırı şişkinlik artmış duvar gerilimi, yol açar ve akış paterni değişiklikleri. Bu tromboz, anastomoz yetmezliği ve erken greft yetmezliği kaynaklarıdır. fibrin yapıştırıcı ile ven grefti destekleyen kontrolsüz balon önlemek ve mekanik imha intima ve medya koruyabilirsiniz. Emilebilir kollajen kapakları fibrin yapıştırıcı bir alternatiftir ve perivenöz 18 kapakları olarak kullanılabilir. Bu protokol kapsamında en kritik adım kuşkusuz ven grefti ile arter arasında anastomoz olduğunu. Bu greft erken başarısızlıkla sonuçlanabilir anastomoz daralmasına yol açacaktır olarak bakım, geminin iki duvarı delmek için değil alınmalıdır. Buna ek olarak, özel bir attention sütür lokalizasyonu ödenmelidir. arter ve ven sütür pozisyonların congruency greft açıklığını sağlayan ve yetersizliği önler. Bunu kolaylaştırmak için, dikiş Şekil 1D&#39;de gösterilen sırada gerçekleştirilebilir. Bir acemi ilk mikrocerrahi ekipman ve anatomik yapıların küçük boyutlarda aşina gerekir, çünkü teknik zorluk derecesi, tekniğin bir sınırlama olarak görülebilir. Bununla birlikte, kullanılan diğer modelleri aynı zorlukları sergiler ve biz bu videoyu kısa bir süre içinde bu tekniği ana acemi cerrahlar yardımcı olacağına inanıyoruz. Venöz graft yetmezliği için çok sayıda küçük hayvan modelleri, literatürde tarif edilmiştir. Ancak, çoğu modeller sadece analiz 13 doku çok küçük miktarlarda sunmak. Bu yöntemin bir avantajı, elde edilebilir doku nispeten büyük bir miktardır. Bir greft birden fazla bölüme ayrılabilir birND, böylece, gerekli deney hayvan sayısını azaltmak, farklı deney için de kullanılır. Çinko parmak nükleaz teknolojisindeki son gelişmeler nakavt sıçan 19 nesil sağladı. Uygun knock-out fareler seçerek, greft açıklığı kaybı farklı hastalık koşullarında ele alınabilir. Örneğin renin nakavt fareleri hipertansiyon 20 çalışma için kullanılabilir. Bu genetik kökenden, farklı ortamlarda veya myointima hiperplazi gelişiminde bazı genlerin etkisi üzerine ven greft yetmezliği mekanizmaları hakkında bilgi toplamak için bu hayvan modeli ile kombine edilebilir. Sonuç olarak, bu videoda açıklanan model gerçekleştirmek için, tekrarlanabilir, ucuz ve kolay olduğunu ve hızlı ve güvenilir kurulabilir. ven greft yetmezliğinin ana nedeni Myointima hiperplazi, ilerici lümen obliterasyon sonuçlanan dört hafta boyunca hızla gelişti. Başarıyla test edilen tedaviBu modelde seçenekler, büyük hayvan modellerinde onaylanabilir.

Koroner arter hastalıkları ve bunların komplikasyonları dünyada önde gelen ölüm nedenleri arasındadır. Güncel tedavi stratejileri yeniden kurulması kan akımı üzerine ya daralmış damar genişletici veya bir bypass oluşturarak odaklanmak. damar otogrefti kullanarak koroner arter bypass cerrahisi (CABG) ilk kez 1968 yılında tanımlanmıştır ve yılda rafine edilmiştir. Dışında sol ön revaskülarizasyon inen koroner arter gelen, safen ven kanallar en sık 1 kullanılmaktadır. Ancak, greft açıklık safen ven grefti (SVG) Aşil topuğu kalır. Cerrahiden bir yıl sonra, greft açıklık on yıl 2,3 sonra% 61 düşüyor,% 85&#39;dir. SVG açıklık kaybı patofizyolojik mekanizmaları ve nedenlerini açıklanması dolayısıyla önemli bir görevdir. Bu video ven greft kaybı araştırmak için bir sıçan ven interpozisyonu modelini göstermektedir. Bu yöntemin genel amaçları altında yatan biyopatolojik keşfetmek için vardırve ve hastalığın ilerlemesi sırasında -physiological süreçler ilaç veya tedavi seçeneği testi için uygun bir model geliştirmektir. arteriyel sisteme yüzeysel epigastrik ven nakli, bu model yakından koroner bypass klinik ayarını taklit eder. Cerrahi travma, iskemi ve duvar basıncı patolojik damar değişikliklerinin önemli tetikler ve tarif edilen modelinde taklit edilir. Farklı modeller ve türlerin ven greft açıklığı kaybı araştırmak için kullanılabilir. Bu domuzlar 4, koyun 5, köpeklerde 6 ve maymun 7 gibi büyük hayvan modelleri, insan damar ve anatomik yapıları benzer ve bu nedenle 8 test edilecek Bypass stent veya yeni cerrahi teknikler gibi kompleks terapötik stratejiler, sağlar. Ancak özel konut, ekipman ve personel gereklidir. Buna ek olarak, yüksek maliyetler ve ameliyat sırasında ek bir anestezist ihtiyacı onların geniş bir uygulama engel. Smsıçanlarda da dahil olmak üzere tüm hayvanlar, özel konut gerekmez, kullanımı kolay, ve yönetilebilir maliyetleri. Fare modellerinde 9,10 ile karşılaştırıldığında, sıçan modelleri sonuca daha iyi çalışabilirlik avantajı ve bu nedenle daha az değişkenliğe sahip. Sıçanlar fizyolojik ve genetik fareler 11,12 den insanlara daha benzer. Buna ek olarak, çoğu vahşi tip fareler sadece II hataları tip eğilimli fare modelleri yapmak sınırlı myointima 13, gelişir. Böyle inferior vena kava olarak ana fare damarlar, histolojisi, sadece birkaç hücre tabakalarından oluşur ve erken değerlendirme zor 13 vermektedir. Bir başka dezavantaj, greft kurtarma sonra bir sonraki analiz için uygun bir doku küçük bir miktardır. Bu video açıklanan model, gerçekleştirmek için, yeniden üretilebilir, ucuz ve kolay ve hızlı ve güvenilir bir tespit edilebilir. Bu viral vektörler gibi pahalı deneysel terapötik maddeleri değerlendirmek için uygundurekonomik bir şekilde gen terapisi için.

<table><tbody><tr><td>Rat LEW/Crl</td><td>Charles River</td><td>Stock number 004</td><td></td></tr><tr><td>Rat LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1&lt;br/&gt; luc)11Jmsk</td><td>Institute of laboratory animals, Kyoto University, Japan</td><td>NBPR rat number 0299</td><td>http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/</td></tr><tr><td>PFA 4%</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>#157135S</td><td>20%</td></tr><tr><td>hair clipper</td><td>WAHL</td><td>8786-451A ARCO SE</td><td></td></tr><tr><td>Forene</td><td>AbbVie</td><td>PZN 10182054 Art.Nr.: B506</td><td>Isoflurane</td></tr><tr><td>microsurgical clamp</td><td>Fine Science Tools</td><td>18055-04</td><td>Micro-Serrefine - 4 mm</td></tr><tr><td>clamp applicator</td><td>Fine Science Tools</td><td>18056-14</td><td></td></tr><tr><td>hair removal creme</td><td>Rufin cosmetic</td><td>27618</td><td></td></tr><tr><td>Povidone-Iodine</td><td>Betadine Purdue Pharma</td><td>NDC:67618-152</td><td></td></tr><tr><td>10-0 Ethilon suture</td><td>Ethicon</td><td>2814G</td><td></td></tr><tr><td>5-0 prolene suture</td><td>Ethicon</td><td>EH7229H</td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl</td><td>Pfizer</td><td>400684.00.00</td><td>Carprofen</td></tr><tr><td>Novaminsulfon</td><td>Ratiopharm</td><td>PZN 03530402</td><td>Metamizole</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Rotexmedica</td><td>PZN: 3862340</td><td>25.000 I.E./ ml</td></tr><tr><td>Xylocain 1%</td><td>AstraZeneca</td><td>PZN: 1137907</td><td>Lidocain</td></tr><tr><td>EVICEL</td><td>J&amp;amp;J Med.Ethicon Biosur</td><td>PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE</td><td>fibrin glue</td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td><td>B.Braun</td><td>PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 770 high-resolution &lt;em&gt;in vivo&lt;/em&gt; micro-imaging system</td><td>VisualSonics</td><td></td><td>duplex sonography</td></tr><tr><td>Ecogel 100 ultrasound gel</td><td>Eco-med</td><td>30GB</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin Firefly, potassium salt</td><td>Biosynth</td><td>L-8220</td><td></td></tr><tr><td>PBS pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Xenogen Ivis 200</td><td>Perkin Elmer</td><td></td><td>bioluminescence imaging</td></tr><tr><td>Weigerts iron hematoxylin Kit</td><td>Merck</td><td>1.15973.0002</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Resorcine-Fuchsine Weigert</td><td>Waldeck</td><td>2.00E-30</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Acid Fuchsin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F8129-25G</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Ponceau S solution</td><td>Serva Electrophoresis</td><td>33427</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Azophloxin</td><td>Waldeck</td><td>1B-103</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Molybdatophosphoric acid hydrate</td><td>Merck</td><td>1.00532.0100</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Orange G</td><td>Waldeck</td><td>1B-221</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Light Green SF</td><td>Waldeck</td><td>1B-211</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Vitro-Clud</td><td>Langenbrinck</td><td>04-0001</td><td></td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>537020</td><td></td></tr><tr><td>37% HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1758</td><td></td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Th. Geyer</td><td>3410</td><td></td></tr><tr><td>Paraffin</td><td>Leica biosystems</td><td>REF 39602004</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol absolute</td><td>Th. Geyer</td><td>2246</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 96%</td><td>Th. Geyer</td><td>2295</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 70%</td><td>Th. Geyer</td><td>2270</td><td></td></tr><tr><td>Slide Rack</td><td>Ted Pella</td><td>21057</td><td></td></tr><tr><td>Staining dish</td><td>Ted Pella</td><td>21075</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen Eye and Nose ointment</td><td>Bayer</td><td>1578675</td><td>Eye ointment</td></tr></tbody></table>

vein interposition model: a suitable model to study bypass graft patency

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. Research models for bypass graft failure are essential for a better understanding of pathobiological and pathophysiological processes during graft patency loss. Large animal models, such as pigs or sheep, resemble human anatomical structures but require special facilities and equipment. This video describes a rat vein interposition model to investigate vein graft patency loss. Rats are inexpensive and easy to handle. Compared to mouse models, the convenient size of rats permits better operability and enables a sufficient amount of material to be obtained for further diverse analysis. In brief, the inferior epigastric vein of a donor rat is harvested and used to replace a segment of the femoral artery. Anastomosis is conducted via single stitches and sealed with fibrin glue. Graft patency can be monitored non-invasively using duplex sonography. Myointimal hyperplasia, which is the main cause for graft patency loss, develops progressively over time and can be calculated from histological cross sections.

sıçan ven interpozisyonu modeli myointima hiperplazi ve ven greft yetmezliği gelişimini incelemek için uygundur. Hayvanlar ameliyat sonrası iyi kurtarmak ve mükemmel fiziksel durumu sonrası operasyon göstermektedir. Şekil 1 anahtar cerrahi adımları gösterir. Linea Inguinalis boyunca cilt kesisi sonra, epigastrik yüzeysel ven ve femoral arter (Şekil 1A) tespit edilir. Bu erken greft yetmezliği ve açıklık kaybına yol açabilir olarak greft Hasat, greft (Şekil 1B) zarar vermeden, dikkatli bir şekilde yapılmalıdır. Alıcı hayvan (Şekil 1C) greft yerleştirdikten sonra, anastomoz dikiş Şekil 1D gösterilen sırayla yapılır. Tamamlanan venöz interpozisyon grefti soluk (Şekil 1E) belirir ve kırmızı olmak ve reperfüzyon (Şekil 1F) sonra titreşim göstermelidir. başarılı integrati<html> femoral arter ve greft açıklığının içine damar üzerine nakli non-invaziv dubleks sonografi kullanılarak (Şekil 2A) teyit edilebilir sonra. Genden Luc-negatif sıçan içine Luc-pozitif sıçan damarını nakli, biyolüminesans görüntüleme süresi (Şekil 2B) üzerine greft varlığını izlemek için kullanılabilir. Myointima hiperplazi zamanla greft giderek gelişir. Masson trikrom histolojik boyama internal elastik laminanın (Şekil 2C) içindeki myointima oluşumunu göstermektedir. (Internal elastik laminanın olan bölgelere göre lümen enine kesit alanına bölünmesi) luminal tıkanıklığa hesaplanması ve böylece myointima hiperplazi tekrarlanabilir dinamikleri teyit günde 28 ameliyat sonrası gün 7 arasında greft açıklığının aşamalı bir kayıp ortaya Bu fare modelinde (Şekil 2D). 1 re &quot;src =&quot; / files / ftp_upload / 54839 / 54839fig1.jpg &quot;/&gt; Şekil 1: Cerrahi Prosedür Programı Ayrıntılı. inguinal bölge (A) Anatomi. (B) Hasat epigastrik yüzeysel ven greft. Alıcı hayvanın arter kütükleri arasındaki ven grefti yerleştirilmesi (C). (D) anastomoz dikiş sırası. venöz greft inşaat sonrası (E) Sitesi. venöz greft interpozisyonu reperfüzyon sonrası (F) Sitesi. Siyah oklar epigastrik yüzeysel ven işaretleyin. Ölçek çubuğu = 5 mm. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54839/54839fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/54839/54839fig2.jpg" /> Şekil 2: Hayvan Modeli Karakterizasyonu. Venöz interpozisyonu (A) Dubleks sonografi immed greft<html> geçirmeden transplantasyon (0d) ve 28 gün sonrası operasyon (28d) sonra. 0 gün ve ameliyat sonrası 28 günde Luc-negatif farelere nakledilen Luc-pozitif greftler (B) BLI. (C), Örnek greft kesitleri gün 7, 14, 21 sonra hasat ve 28 ve Masson trikrom ile lekelenmiştir. (Üst panel: Ölçek çubuğu = 400 mikron; Alt panel: Ölçek çubuğu = 100 mikron) (D) yüzde Luminal obliterasyon eski lümeninden yeni iç lümen bölünmesiyle hesaplanır. Gruplar arası farklılıkların Bonferroni post-hoc testi ile varyans analizi (ANOVA) Tek yönlü analiziyle değerlendirildi. p &lt;0.01. Hata çubukları, standart sapma (SD) &#39;dir. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54839/54839fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> _upload / 54839 / 54839Sup1.jpg &quot;/&gt; Yan Dosya 1: Cerrahi Prosedür şematik İllüstrasyon. linea Inguinalis boyunca dikey bir kesik aşağı epigastrik ven açığa verici bir sıçandan gerçekleştirilir. Kan akışı iki mikro kelepçeler ile durdurulur ve 0.5-1.0 cm uzunluğunda bir damar segmenti hasat edilir. Alıcı sıçanlarda olarak, ortalama femoral insizyon femoral ven, arter ve sinir açığa gerçekleştirilir. femoral arter sıkma sonra, damar segment çıkarılır ve hasat ven grefti ile değiştirilir. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54839/Vein_interpostition_3.pptx" target="_blank">Company Dosya 1 görüntülemek için lütfen buraya tıklayınız (veya indirmek için sağ tıklayın).</a>

Watch this Scientific Journal Video about Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency at JoVE.com

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats.

Ven interpozisyonu Model: baypas açıklığının Eğitim için uygun bir model

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

vein-interposition-model-suitable-model-to-study-bypass-graft

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

8.7K Görüntüleme.  University Heart Center Hamburg. This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats. 

Video: Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in peripheral arterial bypass surgery as well as in arteriovenous fistulas.1-5 The experimental procedure of vein graft interposition in the common carotid artery by using the cuff-technique has been applied in several research projects to examine the aetiology of neointimal hyperplasia and therapeutic options to address it. 6-8 The cuff prevents vessel anastomotic remodeling and induces turbulence within the graft and thereby the development of neointimal hyperplasia.
Using the superior caval vein graft is an established small-animal model for venous arterialization experiment.9-11 This current protocol refers to an established jugular vein graft interposition technique first described by Zou et al., 9 as well as others.12-14 Nevertheless, these cited small animal protocols are complicated.
To simplify the procedure and to minimize the number of experimental animals needed, a detailed operation protocol by video training is presented. This video should help the novice surgeon to learn both the cuff-technique and the vein graft interposition. Hereby, the right external jugular vein was grafted in cuff-technique in the common carotid artery of 21 female Sprague Dawley rats categorized in three equal groups that were sacrificed on day 21, 42 and 84, respectively. Notably, no donor animals were needed, because auto-transplantations were performed. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice. In addition, the graft patency rate was 60 % for the first 10 operated animals and 82 % for the remaining 11 animals. The blood flow at the time of sacrifice was 8&plusmn;3 ml/min. In conclusion, this surgical protocol considerably simplifies, optimizes and standardizes this complicated procedure. It gives novice surgeons easy, step-by-step instruction, explaining possible pitfalls, thereby helping them to gain expertise fast and avoid useless sacrifice of experimental animals.

Neointimal hyperplasia is the primary cause of stenosis in arterialized veins. We propose a new protocol whereby the right external jugular vein is grafted using the cuff technique in the common carotid artery of Sprague Dawley rats. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice.

Sıçanlarda Common Karotid Arter interpozisyon Harici Juguler Ven Greft: Gelişmiş Mikrocerrahi Tekniği Eğitimi

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Tıp

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma and devastating tissue loss. Despite favorable and highly encouraging early and intermediate functional outcomes, rejection of the highly immunogenic skin component of a VCA and potential adverse effects of chronic multi-drug immunosuppression continue to hamper widespread clinical application of VCA. Therefore, research in this novel field needs to focus on translational studies related to unique immunologic features of VCA and to develop novel immunomodulatory strategies for immunomodulation and tolerance induction following VCA without the need for long term immunosuppression.
This article describes a reliable and reproducible translational large animal model of VCA that is comprised of an osteomyocutaneous flap in a MHC-defined swine heterotopic hind limb allotransplantation. Briefly, a well-vascularized skin paddle is identified in the anteromedial thigh region using near infrared laser angiography. The underlying muscles, knee joint, distal femur, and proximal tibia are harvested on a femoral vascular pedicle. This allograft can be considered both a VCA and a vascularized bone marrow transplant with its unique immune privileged features. The graft is transplanted to a subcutaneous abdominal pocket in the recipient animal with a skin component exteriorized to the dorsolateral region for immune monitoring.
Three surgical teams work simultaneously in a well-coordinated manner to reduce anesthesia and ischemia times, thereby improving efficiency of this model and reducing potential confounders in experimental protocols. This model serves as the groundwork for future therapeutic strategies aimed at reducing and potentially eliminating the need for chronic multi-drug immunosuppression in VCA.

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

Vascularized Composite Allotransplantations (VCA) have become a clinical reality. However, broad clinical application of VCA is limited by chronic multi-drug immunosuppression. The authors present a reliable and reproducible large animal model to translate novel immunomodulatory strategies that can minimize or potentially eliminate the need of immunosuppression in VCA.

Translational Vaskülarize Kompozit allotransplantasyon (VCA) Araştırma için Modifiye heterotopik Domuz Hind Ekstremite nakli Modeli

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

Various valved conduits and stent-mounted valves are used for right ventricular outflow tract (RVOT) valve replacement in patients with congenital heart disease. When using prosthetic materials however, these grafts are susceptible to bacterial infections and various host responses.
Identification of bacterial and host factors that play a vital role in endovascular adherence of microorganisms is of importance to better understand the pathophysiology of the onset of infections such as infective endocarditis (IE) and to develop preventive strategies. Therefore, the development of competent models to investigate bacterial adhesion under physiological shear conditions is necessary. Here, we describe the use of a newly designed in vitro perfusion chamber based on parallel plates that allows the study of bacterial adherence to different components of graft tissues such as exposed extracellular matrix, endothelial cells and inert areas. This method combined with colony-forming unit (CFU) counting is adequate to evaluate the propensity of graft materials towards bacterial adhesion under flow. Further on, the flow chamber system might be used to investigate the role of blood components in bacterial adhesion under shear conditions. We demonstrated that the source of tissue, their surface morphology and bacterial species specificity are not the major determining factors in bacterial adherence to graft tissues by using our in-house designed in vitro perfusion model.

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

We describe an in-house designed in vitro flow chamber model, which allows the investigation of bacterial adherence to graft tissues.

Vitro modeli doku grefti bakteriyel bağlılık çalışmaya paralel-plaka perfüzyon sistemi

Various valved conduits and stent-mounted valves are used for right ventricular outflow tract (RVOT) valve replacement in patients with congenital heart ...

Gelişim Biyolojisi

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. The long-term clinical results showed excellent patency rates, however, with significant incidence of stenosis. To investigate the cellular and molecular mechanisms of vascular neotissue formation and prevent stenosis development in tissue engineered vascular grafts (TEVGs), we developed a mouse model of the graft with approximately 1 mm internal diameter. First, the TEVGs were assembled from biodegradable tubular scaffolds fabricated from a polyglycolic acid nonwoven felt mesh coated with &#949;-caprolactone and L-lactide copolymer. The scaffolds were then placed in a lyophilizer, vacuumed for 24 hr, and stored in a desiccator until cell seeding. Second, bone marrow was collected from donor mice and mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. Third, approximately one million cells were seeded on a scaffold and incubated O/N. Finally, the seeded scaffolds were then implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. The implanted grafts demonstrated excellent patency (&#62;90%) without evidence of thromboembolic complications or aneurysmal formation. This murine model will aid us in understanding and quantifying the cellular and molecular mechanisms of neotissue formation in the TEVG.

To improve our knowledge of cellular and molecular neotissue formation, a murine model of the TEVG was recently developed. The grafts were implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. This model achieves similar results to those achieved in our clinical investigation, but over a far shortened time-course.

Fare Modeli Inferior Vena Cava İnterpozisyon Greft İmplantasyonu

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and trade one defect for another. Tissue engineering holds the promise to address this increasing demand. However, most tissue engineering strategies fail to generate stable and functional tissue substitutes because of poor vascularization. This paper focuses on an in vivo tissue engineering chamber model of intrinsic vascularization where a perfused artery and a vein either as an arteriovenous loop or a flow-through pedicle configuration is directed inside a protected hollow chamber. In this chamber-based system angiogenic sprouting occurs from the arteriovenous vessels and this system attracts ischemic and inflammatory driven endogenous cell migration which gradually fills the chamber space with fibro-vascular tissue. Exogenous cell/matrix implantation at the time of chamber construction enhances cell survival and determines specificity of the engineered tissues which develop. Our studies have shown that this chamber model can successfully generate different tissues such as fat, cardiac muscle, liver and others. However, modifications and refinements are required to ensure target tissue formation is consistent and reproducible. This article describes a standardized protocol for the fabrication of two different vascularized tissue engineering chamber models in vivo.

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

This is a guideline for constructing in vivo vascularized tissue using a microsurgical arteriovenous loop or a flow-through pedicle configuration inside a tissue engineering chamber. The vascularized tissues generated can be employed for organ regeneration and replacement of tissue defects, as well as for drug testing and disease modeling.

Bir ıntrinsic Vaskülarizasyon tarafından Doku Mühendisliği<em&gt; İn Vivo</em&gt; Doku Mühendisliği Odası

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and ...

Biyomühendislik

Procedure for Human Saphenous Veins Ex Vivo Perfusion and External Reinforcement

The mainstay of contemporary therapies for extensive occlusive arterial disease is venous bypass graft. However, its durability is threatened by intimal hyperplasia (IH) that eventually leads to vessel occlusion and graft failure. Mechanical forces, particularly low shear stress and high wall tension, are thought to initiate and to sustain these cellular and molecular changes, but their exact contribution remains to be unraveled. To selectively evaluate the role of pressure and shear stress on the biology of IH, an ex&#160;vivo perfusion system (EVPS) was created to perfuse segments of human saphenous veins under arterial regimen (high shear stress and high pressure). Further technical innovations allowed the simultaneous perfusion of two segments from the same vein, one reinforced with an external mesh. Veins were harvested using a no-touch technique and immediately transferred to the laboratory for assembly in the EVPS. One segment of the freshly isolated vein was not perfused (control, day 0). The two others segments were perfused for up to 7 days, one being completely sheltered with a 4 mm (diameter) external mesh. The pressure, flow velocity, and pulse rate were continuously monitored and adjusted to mimic the hemodynamic conditions prevailing in the femoral artery. Upon completion of the perfusion, veins were dismounted and used for histological and molecular analysis. Under ex&#160;vivo conditions, high pressure perfusion (arterial, mean = 100 mm Hg) is sufficient to generate IH and remodeling of human veins. These alterations are reduced in the presence of an external polyester mesh.

Procedure for Human Saphenous Veins Ex Vivo Perfusion and External Reinforcement

The mechanisms leading to the development of intimal hyperplasia (IH) and vein graft failure are still poorly understood. This study describes an ex&#160;vivo system to perfuse human veins under controlled flow and pressure. Furthermore the efficiency of external mesh reinforcement to limit the development of IH was evaluated.

İnsan Safen Ven Prosedürü<em&gt; Ex vivo</em&gt; Perfüzyon ve Dış Takviye

The mainstay of contemporary therapies for extensive occlusive arterial disease is venous bypass graft. However, its durability is threatened by intimal ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, intimal hyperplasia, and atherosclerosis. The goal of this article is to demonstrate a method for placing bilateral venous interposition grafts in a rabbit, then transducing the grafts with a gene transfer vector that achieves durable transgene expression. The method allows the investigation of the biological roles of genes and their protein products in normal vein graft homeostasis. It also allows the testing of transgenes for the activities that could prevent vein graft failure, e.g., whether the expression of a transgene prevents the neointimal growth, reduces the vascular inflammation, or reduces atherosclerosis in rabbits fed with a high-fat diet. During an initial survival surgery, the segments of right and left external jugular vein are excised and placed bilaterally as reversed end-to-side common carotid artery interposition grafts. During a second survival surgery, performed 28 days later, each of the grafts is isolated from the circulation with vascular clips and the lumens are filled (via an arteriotomy) with a solution containing a helper-dependent adenoviral (HDAd) vector. After a 20-min incubation, the vector solution is aspirated, the arteriotomy is repaired, and flow is restored. The veins are harvested at time points dictated by individual experimental protocols. The 28-day delay between the graft placement and the transduction is necessary to ensure the adaptation of the vein graft to the arterial circulation. This adaptation avoids rapid loss of transgene expression that occurs in vein grafts transduced before or immediately after grafting. The method is unique in its ability to achieve durable, stable transgene expression in grafted veins. Compared to other large animal vein graft models, rabbits have advantages of low cost and easy handling. Compared to rodent vein graft models, rabbits have larger and easier-to-manipulate blood vessels that provide abundant tissue for analysis.

This method describes the placement of interposition vein grafts in rabbits, the transduction of the grafts, and the achievement of durable transgene expression. This allows the investigation of physiological and pathological roles of transgenes and their protein products in grafted veins, and testing of gene therapies for vein graft disease.

Tavşan manken dayanıklı Transgene ifade juguler ven ortak karotid arter interpozisyonu Greftler için

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Synergizing Antegrade Endoscopic with Bridging Vein Harvesting for Improvement of Great Saphenous Vein Graft Quality from the Lower Leg

Antegrade endoscopic harvesting of autografts for bypass grafting may be an optimal strategy addressing excellent graft quality and reduced post-operative wound complications. This standardized protocol for antegrade endoscopic vein harvesting (EVH) from the lower leg has the potential to be introduced to routine coronary artery bypass grafting (CABG). Patients undergoing CABG surgery are positioned on a surgical table with two additional foam rollers below the extended legs, enabling antegrade EVH from the lower leg. Following minimally invasive surgical access through a bridging vein harvest technique, an endoscopic optical dissector is inserted antegrade into the wound. The main vessel and side branches are dissected under continuous optical control of vein quality status and the working channel. After, an endoscopic optical retractor is inserted with an internal bipolar electrocoagulation device for precise, safe, and tissue-protective interruption of side branches. After release of the vein, the vessel is cut off at the proximal and distal ends under optical control, retrieved from the wound, then cannulated and flushed with heparinized saline. Finally, all side branches of the vein graft are double-clipped. Vascular histology is analyzed in a randomized selection of vein samples. After applying this standardized EVH protocol, the learning curve was shown to be steep, and graft quality was sufficient for coronary artery bypass grafting in every case. There was no conversion to surgical harvesting and low risks for tissue damage and bleeding. Leg positioning and synergizing EVH with bridging vein harvesting improved procedural success and vein graft quality. In our hands, antegrade EVH from the lower leg was feasible, demonstrating straightforward graft dissection as well as adequate macroscopic and microscopic graft quality with preserved endothelial integrity. In conclusion, the introduced technique is safe, shows excellent vein autograft quality, and illustrates feasibility for elective and urgent isolated CABG and combined CABG scenarios.

Presented here is a protocol for antegrade endoscopic vein harvesting from the lower leg, which can safely be introduced in routine coronary artery bypass grafting. Vein grafts present excellent graft quality following this standardized protocol with positioning of the legs, minimally invasive access to the vein, and antegrade endoscopic vein harvesting.

Alt Bacaktan Büyük Saphenous Ven Greft Kalitesinin İyileştirilmesi için Köprüven Damar Hasat ile Sinerji Antegrade Endoskopik

Antegrade endoscopic harvesting of autografts for bypass grafting may be an optimal strategy addressing excellent graft quality and reduced post-operative ...

Koyunlarda Venöz Uygunluk Değerlendirmesi için 3D Anjiyografi

Quantifying Inferior Vena Cava Compliance and Distensibility in an In Vivo Ovine Model Using 3D Angiography

Synthetic vascular grafts overcome some challenges of allografts, autografts, and xenografts but are often more rigid and less compliant than the native vessel into which they are implanted. Compliance matching with the native vessel is emerging as a key property for graft success. The current gold standard for assessing vessel compliance involves the vessel's excision and ex vivo biaxial mechanical testing. We developed an in vivo method to assess venous compliance and distensibility that better reflects natural physiology and takes into consideration the impact of a pressure change caused by flowing blood and by any morphologic changes present. 
This method is designed as a survival procedure, facilitating longitudinal studies while potentially reducing the need for animal use. Our method involves injecting a 20 mL/kg saline bolus into the venous vasculature, followed by the acquisition of pre and post bolus 3D angiograms to observe alterations induced by the bolus, concurrently with intravascular pressure measurements in target regions. We are then able to measure the circumference and the cross-sectional area of the vessel pre and post bolus. 
With these data and the intravascular pressure, we are able to calculate the compliance and distensibility with specific equations. This method was used to compare the inferior vena cava's compliance and distensibility in native unoperated sheep to the conduit of sheep implanted with a long-term expanded polytetrafluorethylene (PTFE) graft. The native vessel was found to be more compliant and distensible than the PTFE graft at all measured locations. We conclude that this method safely provides in vivo measurements of vein compliance and distensibility.

Yazar Spotlight: Konjenital Kalp Hastalığı Araştırmalarında Neovasküler Gelişim için Geliştirilmiş Görüntüleme

This protocol allows for the in vivo quantification of venous compliance and distensibility using catheterization and 3D angiography as a survival procedure allowing for a variety of potential applications.

İnferior Vena Kava Uyumunun ve Genişletilebilirliğinin İn Vivo Küçükbaş Hayvan Modelinde 3D Anjiyografi Kullanılarak Ölçülmesi

Synthetic vascular grafts overcome some challenges of allografts, autografts, and xenografts but are often more rigid and less compliant than the native ...

Ven interpozisyonu Model: baypas açıklığının Eğitim için uygun bir model

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Sıçanlarda Common Karotid Arter interpozisyon Harici Juguler Ven Greft: Gelişmiş Mikrocerrahi Tekniği Eğitimi

Translational Vaskülarize Kompozit allotransplantasyon (VCA) Araştırma için Modifiye heterotopik Domuz Hind Ekstremite nakli Modeli

Vitro modeli doku grefti bakteriyel bağlılık çalışmaya paralel-plaka perfüzyon sistemi

Fare Modeli Inferior Vena Cava İnterpozisyon Greft İmplantasyonu

Bir ıntrinsic Vaskülarizasyon tarafından Doku Mühendisliği

İnsan Safen Ven Prosedürü

Tavşan manken dayanıklı Transgene ifade juguler ven ortak karotid arter interpozisyonu Greftler için

Alt Bacaktan Büyük Saphenous Ven Greft Kalitesinin İyileştirilmesi için Köprüven Damar Hasat ile Sinerji Antegrade Endoskopik

İnferior Vena Kava Uyumunun ve Genişletilebilirliğinin İn Vivo Küçükbaş Hayvan Modelinde 3D Anjiyografi Kullanılarak Ölçülmesi

İnferior Vena Kava Uyumunun ve Genişletilebilirliğinin İn Vivo Küçükbaş Hayvan Modelinde 3D Anjiyografi Kullanılarak Ölçülmesi