Name: high-frequency ultrasound imaging of mouse cervical lymph nodes
Uploaded: 2015-07-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 2 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes at JoVE.com

Bu eser Batı Virginia Üniversitesi Mary Babb Randolph Kanser Merkezi&#39;nden Dorothy D. Radford Endowment Fonu tarafından desteklenmiştir. West Virginia Üniversitesi Hayvan Modelleri ve Görüntüleme Tesisi (AMIF) ve Mikroskopi Görüntüleme Tesisi (MIF) kullanımı (Mary Babb Randolph Kanser Merkezi ve NIH hibe P20 RR16440 tarafından desteklenen, P30 RR032138 / GM103488 ve S10 RR026378) minnetle kabul edilmektedir.

Bu protokolde gösterilen tüm hayvan prosedürleri gözden geçirilmeli ve protokoller 11-0412 ve 14-0514 altında West Virginia Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve Bakımı ve Kullanımı için NIH Kılavuzunda belirtilen usul ve esaslara uygun olarak yapılmıştır Hayvanların. 1. Hayvan hazırlanması <ol><li> 1.5 L / dakika,% 100 oksijen ile karıştırılmış% 3 izofloran ile bir indüksiyon bölmesi tek bir fare anestezisi. 40 ° C&#39;ye önceden ısıtılmış ve 37-42 ° C&#39;de (Şekil 2A) arasında muhafaza görüntüleme platformu üzerine sırt üstü yatırıldı indüksiyon bölme yeri ve hayvan çıkarın. Bir ayak tutam yanıt eksikliği ile anestezi onaylayın. </li><li> Anestezi sistemine bağlı roket ucu konisi içinde fare burun yerleştirin. Kararlı durum sedasyon (1.5 L / dk% 100 oksijen ile karıştırılır% 1.5 isofluorane) korumak için anestezi uygulayın. </li><li> Dryin önlemek için göz yağlayıcı her göz Uygulaörn. Elektrotlara elektrot jeli uygulayın ve ilgili elektrot dört pençeleri her sabitlemek için bandı kullanın. elektrot pedleri kalp hızı ve solunum hızı izleme sağlamak için görüntüleme sistemine hayvanın EKG iletir. Yağlayın ve vücut ısısının sürekli izlenmesi için rektal ısı probu yerleştirin. Normal fare vücut sıcaklığı 36.9 ° C&#39;dir. 1-2 ° C varyasyon anestezi altında iken normaldir. </li><li> Fare boynundan kürk kaldırmak için tüy dökücü krem ​​kullanın. Saç ve aşırı tüy dökücü krem ​​çıkarmak için su batırılmış gazlı bez ile boyun bölgesini durulayın. İsteğe bağlı olarak, kalan vücut saç (Şekil 2B) kaldırmak için tüy dökücü krem ek uygulamasını kullanabilirsiniz. </li></ol> Fare Servikal lenf nodu 2. Kimlik ve Image Acquisition HFUS kullanma <ol><li> Başlamak kürk yoksun boyun bölgesinde ısındı ultrason jel tabakası uygulayın. Optimum görüntü için jel liberal uygulamasını kullanınKalite (Şekil 2C). Ultrasonik görüntülemenin engelleyebilir uygulama sırasında jel, hava baloncuklarının oluşumunu ortadan kaldırmak. </li><li> Görüntüleme platformu yani fare hafif yüksek kafa ile konumlandırılmış 20-30 ° ayarlayın. Bu pozisyon fare için en uygun solunum hızını sağlamak için yardımcı olur. Montaj sistemi enine 40 MHz transdüser yerleştirin ve dönüştürücü scanhead ön ultrason jeli (Şekil 2C) batırılır kadar dikkatlice indirin. NOT: Bu aşırı solunum sıkıntısına yol açabilir, fare boyun üzerine aşırı basınç uygulamayın emin olun. Görüntüleme dönüştürücü ve fare arasında jel tamponu olması için ek olarak, bu yararlıdır. </li></ol> Lenf düğümleri B-Mod Görüntüleme ve Algılama: <ol start="3"><li> Parlaklığı (B-) aşağıdaki parametrelere modu ayarları ayarlamak HFUS toplama yazılımı kontrol bilgisayarı kullanarak:, derinlik 10.00 22 dB Kazançmm, 14.08 mm. NOT: Bu ayarlar bir başlangıç ​​noktası önerilmektedir ve farklı uygulamalar arasındaki optimal görüntü elde etmek için hafif ayarlama gerektirebilir. Çevreleyen hiperekoik alanda deri yüzeyine yakın oval hipoekoik yapılar normal servikal lenf düğümleri gözlemleyin. Hastalıklı lenf nodu görünümü modelleri arasında değişebilir. Sistematik görüntü boyun bölgedeki tüm lenf nodları aşağıdaki adımları kullanın: <ol><li> Torasik bölgeye yönelik şekilde kaudal bir kafatasın içinde boyun taramak için Y-eksenini kullanın. Görüntüyü ortalamak için X ekseni kullanın. </li><li> Önemli işaretlerini tanımak: yanak boşluğu, dil, ve tiroid bezi (Şekil 3A, B ve C sırasıyla); yatay fare boyun ventral yüzeyi ayarlamak için boynun her iki tarafı bile B-mod resimde gözüken hale görüntüleme platformu eğin. devirme miktarı, her bir fare fizyolojisi bağlıdır. </li></ol></li&gt; <li> Boyun boyunca lenf nodları ve ilgili yerler harita için, tiroid bezi ile ağız boşluğu / dil bölgeden tüm boyun bölgesinde bir 3D tarama gerçekleştirin. <ol><li> Dil / ağız boşluğu bölgesini (Şekil 3A) bulun ve Y ölçeğinde sayısal konumunu not alın. </li><li> Tiroid bezi (Şekil 3C) bulun ve Y ölçeğinde sayısal konumunu not alın. </li><li> Görüntülü boyun bölgesi için mm cinsinden toplam uzunluğunu belirlemek için (2.4.1) ve (2.4.2) &#39;de elde edilen değer arasındaki farkı hesaplayın. </li><li> Belirlenen toplam uzunluğunun orta üzerinde dönüştürücüyü merkezi Y topuzunu kullanın. </li><li> Basın &quot;3D&quot;. Toplam uzunluğu girin. 3D adım boyutu için, tüm boyun bölgesinde görüntü serisi yığını elde etmek için 0.076 mm kullanın. </li></ol></li><li> Tarama tamamlandığında, daha sonra 4 zam, boyun sağ veya sol tarafını seçmek ve ilgi bireysel lenf düğümünde dönüştürücüyü ortalamakFare kapalı 0 MHz transdüser. 40 MHz transdüser çıkarın ve daha yüksek çözünürlüklü görüntüler elde etmek için (ayrıca çapraz pozisyonda) 50 MHz MicroScan transduser ile değiştirin. Fare boyun ultrason jeli yenileyin ve ultrason jeli içine 50 MHz transdüser indirin. </li></ol> 3D Power Doppler Görüntüleme <ol start="6"><li> Davranış 3D eşek hacmi ve bireysel servikal lenf nodlarının şöyle vaskülaritesinden güç Doppler ile tarar: <ol><li> Aşağıdaki güç modu ayarlarını güç Döpper kazanmak ve ayarlamak için sistem klavyede Güç düğmesine basın: PRF 4 KHz, Doppler 34 dB kazanç, 2B kazanç 30 dB, derinlik 5.00 mm, genişliği 4.73 mm. NOT: Daha önce olduğu gibi, bu ayarlar önerilen başlangıç ​​noktası ve çeşitli modellerde optimal görüntü elde etmek için gerektiğinde değiştirilebilir. </li><li> Ilgi lenf nodu kranial-en noktayı bulun ve Y ölçekte konumunu not alın. </li><li> Aynı düğüm ve notun en kaudal noktasını bulunY ölçeğinde yer. </li><li> Lenf nodu toplam uzunluğunu belirlemek için mesafe farkını hesaplayın (adım 2.4.3 bakınız). </li><li> Y ölçekli konumunu kullanarak, belirlenen toplam uzunluğunun orta üzerinde dönüştürücüyü ortalayın. </li><li> Basın &quot;3D&quot; ve toplam lenf nodu uzunluğunu girin. Adım boyutu 0.051 mm kullanın. NOT: göğüs bölgesinde transdüserden yakınlığı nedeniyle, 50 MHz&#39;lik güç ileticisi, bağlı, normal solunum hareketinin tespiti için sabit olmayan bir Doppler görüntüsü neden olabilir. Bu &quot;Fizyolojik&quot; sekmesi altında kullanılabilir &quot;Solunum Gating&quot; seçeneğini kullanarak bertaraf edilebilir. </li><li> Güç Doppler ile analiz ve görüntüler elde etmek için &quot;3D tarama&quot; seçeneğini seçin bölgeyi belirtir sarı kutusu ile seçilen lenf nodu Surround. Farenin kapalı dönüştürücüyü kaldırın ve boyun karşı tarafa taşıyın. Fare üzerine dönüştürücüyü indirin ve ima yukarıda açıklanan adımları tekrarlayınboynun bu tarafında ge lenf nodları. </li></ol></li><li> Sonraki analiz için görüntü setleri kaydedin. </li></ol> 3. Servikal Lenf Nodu Biyopsi <ol><li> Biyopsi için istenen lenf düğümü seçin ve 50 MHz dönüştürücü ile HFUS görüntüleme korumak. Fare boyun her tarafında büyük görünür servikal lenf nodu seçti. Lenf düğümü büyümesi, genellikle bir enflamatuvar yanıtı gösterir ve bu nedenle, düğüm biyopsi için ideal adaylardır. NOT: servikal düğümler daha küçük 10 mm 3 biyopsi yapmak çok zordur bulduk. </li><li> Şırınga tutucu içine ekli 27 G, 0,5 inç iğne ile 1 ml şırınga koyarak biyopsi için iğne ve şırınga hazırlayın. Iğne fare boyun (Şekil 4A) 90 ° yönlendirmek için iğne tutucu ayarlayın. </li><li> İğnenin seviyesine tüm fare platformu yükseltmek yoluyla hazırlayın. 3D motoru kaldırarak ve uzun platf geçerek bunu başarmakorm veya sağlanan kısa platform altında uygun yükseklikte bir katı bir nesne yerleştirerek. Bu amaç için, bir plastik mikrofüj tüpüne rafı kullanın. Gerekirse, iğne aparatı karşısında boyun yan tarafında bulunan biyopsi düğümler için platformunu 180 ° döndürün. </li><li> Daha sonra &quot;Max &amp; Genişletilmiş tampon&quot; seçerek, &quot;Tercihler&quot; seçeneğini seçerek satın alma ayarlarını yapın. 8.00 mm ila 9.73 mm genişliğinde bir derinliğe kadar görüş alanını büyütür. Ekran Tuşları dial kullanarak iğne rehberi açın. İğne kılavuzu ekranda iğne yolunu tahmin ve biyopsi için doğru konumda ilgi lenf nodu sıraya izin verir olacaktır. </li><li> Lenf düğümü, orta veya hafif ekran (Şekil 4B) merkezin solunda lenf nodu merkezlenerek görünümünde sürekli kalmasını sağlar. Prosedürün tüm cine loop elde etmek için, biyopsi başlamadan önce sistem klavyede Öncesi tetiğe basın. </li><li> İğne ucu görünümü ve temas deri (Şekil 4B) girinceye kadar iğne tutucu ayarlayın. Hızlı cildi delmek itin bir firma ile iğne Advance. Ucu da kapsül (Şekil 4C) deler ve medulla (Şekil 4D) içinde görünür oluncaya kadar iğne ilerletmeye devam edin. </li><li> İğne düzgün düğümün içinde yer almaktadır sonra, yavaşça biyopsi (Şekil 4D ve 4E) yapmak için geri 200-300 ul demarcations arasındaki şırınga pistonu çekin. Bu biyopsi materyali genellikle şırınga içinde görünmez unutmayın. </li><li> Yavaşça fare boyun iğne çıkarılır. 1.5 ml mikrofüj tüpüne şırınga içeriğini boşaltınız. Tüp içinde iğne bırakarak enjektör iğne çıkarın. Aynı şırınga ile (stok kaynağından ayrı alikotundan) biyopsi medya 1 ml toplayın ve th iğne tutarken daha sonra şırınga iğne yeniden bağlayınE tüpü. <ol><li> Tüpe biyopsi medya kovma ile biyopsi medya ile şırınga ve iğne yıkayın. NOT: iğne biyopsisi sonrasında herhangi bir noktada takılı iken piston geri çekmeyin. Bunun sebebi küçük örneklem büyüklüğü biyopsi materyali kaybetme riskini azaltır. </li></ol></li><li> Histolojik araçlarla (Şekil 4F) tarafından lenf nodu içeriği onaylayın ve uygun ek yöntemler (histokimya vb akım sitometri) tarafından analiz edin. </li><li> Biyopsi işlemi tamamlandıktan sonra, anestezi kapatın ve rektal sıcaklık probu kaldırın. Gazlı bez ile fare aşırı ultrason jeli çıkarın ve her pençe bandı çıkarın. </li><li> Görüntüleme platformu fareyi çıkarın ve bir kafese geri dönün. Biyopsi sitesinden Minimal kanama oluşabilir, ancak bu müdahale olmadan durur. Tam etkinlik sürdürülür kadar kurtarma sırasında fare izleyin. </li></ol> 4. Görüntü Servikal lenf nodu Analizi <ol><li&gt; ultrason yazılımında analiz için görüntüyü seçin ve &quot;Görüntü İşleme&quot; sekmesine gidin. &quot;3D içine Load&quot; seçiniz. </li><li> &quot;Tek Pane göster&quot; butonuna tıklayarak, sol üst köşede &quot;3D Yeniden İnşa Image&quot; seçeneğini seçin. İsterseniz Resmi büyütmek için yakınlaştırma işlevini kullanın. &quot;Ekran Düzeni&quot; Toggle sadece görünümden power Doppler bindirme kaldırır B-modda resmi görebilmek için. Bu kolay müteakip 3-D analizi sırasında lenf nodu kenarlarını görmek için yapar. Lenf nodu başlangıcını bulmak için görüntü serisi ilerleyin. </li><li> Lenf nodu circumscribe için, &quot;3D Settings&quot; sekmesine gidin. Daha sonra, &quot;Başlat&quot; düğmesine yanındaki &quot;Paralel&quot; &quot;Sesi&quot; seçeneğini seçin. </li><li> Kaydırma bireysel görüntülerin içinde ilgi alanı çevresinde hatlarını çizin. Tüm lenf nodu kapsayacak görüntüleri işaretlenmiştir kadar devam edin. Için &quot;Finish&quot; seçinizanalizi tamamlamak. </li><li> Görüntünün alt kısmında, 3D hacim ve% damarlanma otomatik olarak görüntülenir. NOT: 3D ses lenf nodu hacmine karşılık gelir ve yüzde damarlanma güç Doppler ile kan akışının pozitif lenf nodu yüzdesini temsil eder. </li><li> &quot;Ekran Düzeni&quot; Toggle B- mod görüntü üzerinde bir kaplama olarak power Doppler görüntüleme görüntülemek için. Yüzey görünümünde ilgi hacmi alanının net bir görünüm gözlemlemek. Daha fazla kullanım için film (avi) olarak isim levhası görüntü dosyası (TIF) formatında veya 3D taramaları görüntüleri aktarın. </li></ol>

<ol>
	<li>Montone, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infectious+diseases+of+the+head+and+neck:+a+review.">Infectious diseases of the head and neck: a review.</a> Am J Clin Pathol. 128 (1), 35-67 (2007).</li><li>Bryson, T. C., Shah, G. V., Srinivasan, A., Mukherji, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+lymph+node+evaluation+and+diagnosis.">Cervical lymph node evaluation and diagnosis.</a> Otolaryngol Clin North Am. 45 (6), 1363-1383 (2012).</li><li>Joshi, P. S., Pol, J., Sudesh, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+-+A+diagnostic+modality+for+oral+and+maxillofacial+diseases.">Ultrasonography - A diagnostic modality for oral and maxillofacial diseases.</a> Contemp Clin Dent. 5 (3), 345-351 (2014).</li><li>Oz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+clinical+and+sonographic+features+in+55+children+with+tularemia.">Evaluation of clinical and sonographic features in 55 children with tularemia.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 14 (8), 571-575 (2014).</li><li>Niedzielska, G., Kotowski, M., Niedzielski, A., Dybiec, E., Wieczorek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+lymphadenopathy+in+children--incidence+and+diagnostic+management.">Cervical lymphadenopathy in children--incidence and diagnostic management.</a> Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 71 (1), 51-56 (2007).</li><li>Ying, M., Bhatia, K. S., Lee, Y. P., Yuen, H. Y., Ahuja, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+ultrasonography+of+malignant+neck+nodes:+greyscale,+Doppler,+contrast+enhancement+and+elastography.">Review of ultrasonography of malignant neck nodes: greyscale, Doppler, contrast enhancement and elastography.</a> Cancer Imaging. 13 (4), 658-669 (2013).</li><li>Stoeckli, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+staging+of+the+neck+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma:+a+comparison+of+CT,+PET/CT,+and+ultrasound-guided+fine-needle+aspiration+cytology.">Initial staging of the neck in head and neck squamous cell carcinoma: a comparison of CT, PET/CT, and ultrasound-guided fine-needle aspiration cytology.</a> Head Neck. 34 (4), 469-476 (2012).</li><li>Rottey, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+metastatic+lymph+nodes+in+head+and+neck+cancer:+a+comparative+study+between+palpation,+ultrasonography,+ultrasound-guided+fine+needle+aspiration+cytology+and+computed+tomography.">Evaluation of metastatic lymph nodes in head and neck cancer: a comparative study between palpation, ultrasonography, ultrasound-guided fine needle aspiration cytology and computed tomography.</a> Acta Clin Belg. 61 (5), 236-241 (2006).</li><li>Greco, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+biomicroscopy+in+small+animal+research:+applications+in+molecular+and+preclinical+imaging.">Ultrasound biomicroscopy in small animal research: applications in molecular and preclinical imaging.</a> J Biomed Biotechnol. 2012, (2012).</li><li>Chen, J. J., Fu, S. Y., Chiang, C. S., Hong, J. H., Yeh, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+tumor+vasculature+distributions+in+central+and+peripheral+regions+based+on+Doppler+ultrasound.">Characterization of tumor vasculature distributions in central and peripheral regions based on Doppler ultrasound.</a> Med Phys. 39 (12), 7490-7498 (2012).</li><li>El Kaffas, A., Giles, A., Czarnota, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dose-dependent+response+of+tumor+vasculature+to+radiation+therapy+in+combination+with+Sunitinib+depicted+by+three-+dimensional+high-frequency+power+Doppler+ultrasound.">Dose-dependent response of tumor vasculature to radiation therapy in combination with Sunitinib depicted by three- dimensional high-frequency power Doppler ultrasound.</a> Angiogenesis. 16 (2), 443-454 (2013).</li><li>Bachawal, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Earlier+detection+of+breast+cancer+with+ultrasound+molecular+imaging+in+a+transgenic+mouse+model.">Earlier detection of breast cancer with ultrasound molecular imaging in a transgenic mouse model.</a> Cancer Res. 73 (6), 1689-1698 (2013).</li><li>Loveless, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+assessing+the+microvasculature+in+a+murine+tumor+model+using+contrast-enhanced+ultrasonography.">A method for assessing the microvasculature in a murine tumor model using contrast-enhanced ultrasonography.</a> J Ultrasound Med. 27, 12-1699 (2008).</li><li>Snyder, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complementarity+of+ultrasound+and+fluorescence+imaging+in+an+orthotopic+mouse+model+of+pancreatic+cancer.">Complementarity of ultrasound and fluorescence imaging in an orthotopic mouse model of pancreatic cancer.</a> BMC Cancer. 9, 106 (2009).</li><li>Kodama, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volumetric+and+angiogenic+evaluation+of+antitumor+effects+with+acoustic+liposome+and+high-frequency+ultrasound.">Volumetric and angiogenic evaluation of antitumor effects with acoustic liposome and high-frequency ultrasound.</a> Cancer Res. 71 (22), 6957-6964 (2011).</li><li>Hwang, M., Hariri, G., Lyshchik, A., Hallahan, D. E., Fleischer, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+quantified+contrast-enhanced+sonography+with+in+vivo+tumor+response.">Correlation of quantified contrast-enhanced sonography with in vivo tumor response.</a> J Ultrasound Med. 29 (4), 597-607 (2010).</li><li>Li, L., Mori, S., Sakamoto, M., Takahashi, S., Kodama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+lymph+node+metastasis+via+afferent+lymphatic+vessels+for+development+of+imaging+modalities.">Mouse model of lymph node metastasis via afferent lymphatic vessels for development of imaging modalities.</a> PLoS One. 8 (2), e55797 (2013).</li><li>Springer, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+and+identification+of+etiologies+involved+in+the+development+of+acquired+hydronephrosis+in+aged+laboratory+mice+with+the+use+of+high-frequency+ultrasound+imaging.">Investigation and identification of etiologies involved in the development of acquired hydronephrosis in aged laboratory mice with the use of high-frequency ultrasound imaging.</a> Pathobiol Aging Age Relat Dis. 4, (2014).</li><li>Papadopoulos, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mouse+Model+for+Pathogen-induced+Chronic+Inflammation+at+Local+and+Systemic+Sites.">A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites.</a> J Vis Exp. (90), (2014).</li><li>Vulcano, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+infection+with+enteropathogenic+Escherichia+coli+triggers+immune+response+and+intestinal+histological+alterations+in+mice+selected+for+their+minimal+acute+inflammatory+responses.">Oral infection with enteropathogenic Escherichia coli triggers immune response and intestinal histological alterations in mice selected for their minimal acute inflammatory responses.</a> Microbiol Immunol. 58 (6), 352-359 (2014).</li><li>Myers, J. N., Holsinger, F. C., Jasser, S. A., Bekele, B. N., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+orthotopic+nude+mouse+model+of+oral+tongue+squamous+cell+carcinoma.">An orthotopic nude mouse model of oral tongue squamous cell carcinoma.</a> Clin Cancer Res. 8 (1), 293-298 (2002).</li><li>Kanojia, D., Vaidya, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4-nitroquinoline-1-oxide+induced+experimental+oral+carcinogenesis.">4-nitroquinoline-1-oxide induced experimental oral carcinogenesis.</a> Oral Oncol. 42 (7), 655-667 (2006).</li><li>Van den Broeck, W., Derore, A., Simoens, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+nomenclature+of+murine+lymph+nodes:+Descriptive+study+and+nomenclatory+standardization+in+BALB/cAnNCrl+mice.">Anatomy and nomenclature of murine lymph nodes: Descriptive study and nomenclatory standardization in BALB/cAnNCrl mice.</a> J Immunol Methods. 312 (1-2), 12-29 (2006).</li><li>Walk, E. L., McLaughlin, S., Coad, J., Weed, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+high+frequency+ultrasound+to+monitor+cervical+lymph+node+alterations+in+mice.">Use of high frequency ultrasound to monitor cervical lymph node alterations in mice.</a> PLoS One. 9 (6), e100185 (2014).</li><li>Pezold, J. C., Zinn, K., Talbert, M. A., Desmond, R., Rosenthal, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+ultrasonography+to+evaluate+murine+orthotopic+oral+cavity+tumors.">Validation of ultrasonography to evaluate murine orthotopic oral cavity tumors.</a> ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 68 (3), 159-163 (2006).</li><li>Sano, D., Myers, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metastasis+of+squamous+cell+carcinoma+of+the+oral+tongue.">Metastasis of squamous cell carcinoma of the oral tongue.</a> Cancer Metastasis Rev. 26 (3-4), 645-662 (2007).</li><li>Sano, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+combination+anti-endothelial+growth+factor+receptor+and+anti-vascular+endothelial+growth+factor+receptor+2+targeted+therapy+on+lymph+node+metastasis:+a+study+in+an+orthotopic+nude+mouse+model+of+squamous+cell+carcinoma+of+the+oral+tongue.">The effect of combination anti-endothelial growth factor receptor and anti-vascular endothelial growth factor receptor 2 targeted therapy on lymph node metastasis: a study in an orthotopic nude mouse model of squamous cell carcinoma of the oral tongue.</a> Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 135 (4), 411-420 (2009).</li><li>Tang, X. H., Knudsen, B., Bemis, D., Tickoo, S., Gudas, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+cavity+and+esophageal+carcinogenesis+modeled+in+carcinogen-treated+mice.">Oral cavity and esophageal carcinogenesis modeled in carcinogen-treated mice.</a> Clin Cancer Res. 10 (1 Pt 1), 301-313 (2004).</li><li>Vitale-Cross, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+carcinogenesis+models+for+evaluating+molecular-+targeted+prevention+and+treatment+of+oral+cancer.">Chemical carcinogenesis models for evaluating molecular- targeted prevention and treatment of oral cancer.</a> Cancer Prev Res (Phila). 2, 419-422 (2009).</li></ol>

Bu yazı için Yayın masrafları Görsel Sonics tarafından sponsor.

Açıklanan protokol görselleştirme ve non-invazif HFUS görüntüleme kullanarak faregiller servikal lenf düğümlerinin in situ olarak incelenmesine izin verir. B-mod ve Doppler görüntüleme kullanımı, servikal lenf nodu morfolojisi, hacim ve lenf nodu kan akımı, klinik uygulamada, servikal hastanın düğüm tanımlanması için kullanılana benzer klinik öncesi fare modeli sistemleri deneysel bir analizi temin görselleştirmek için. iğne biyopsisi ile cervial lenf düğümleri izleme yeteneği aynı zamanda bağışıklık hücresi farklılaşmaları ve farelerde oral kavite hastalık kaynaklı lenfadenopati içerisinde yabancı hücre tipleri ya da bakteri varlığını tespit etmek için yararlı bir yöntem sağlar. kullanımı ve HFUS ile bağlantılı düşük maliyet kolaylığı hayvan modellerinde bir çok çeşitli servikal lenf düğümü durumu süratle taranması için izin verir. Bu protokol kritik bir adım HFUS görüntülerde servikal lenf nodlarının ilk başarılı kimlik olduğunu. Tesisimiz HFUS tran bir ürün yelpazesine sahiptiren yüksek kalitede görüntü elde etmek için onları kullandık böylece sducers tarif. Biz tarif dönüştürücüler kullanılamaz Ancak, diğer dönüştürücüler kullanarak görüntüleme adapte etmek mümkündür. Bu amaçla, uygun bir görüntü elde etmek için görüntü derinliği ve genişliği ayarlayarak tüm yeterlidir. Bu tür görüntülerin çözünürlüğü değişebilir, ama yine de HFUS kullanarak yüksek kaliteli görüntüler elde etmek mümkün olmalıdır. Oral kavite ve tiroid bezinin görüntüleme görülecek ölçüde lenf nodları lokalize doğru bölgeye kullanıcıya yönlendirmede yardımcı olacaktır. Cilt yüzeyine yakın karakteristik oval şekilli, hipoekoik doğası ve yüzeysel konumu uygun boyun bölgesi içinde servikal lenf nodu hızlı doğrulayıcı tanımlama için olanak sağlar. Tüm üç düğüm tek görüntü düzlemi (Şekil 3B) görünür olabilir, tipik olarak bir ya da iki düğüm görüntüleme sırasında yakalanır. Transdüser pozisyonu küçük ayarlamalar parçalamak için yapılabilirer farklı görüntüleme boyun tek tarafındaki tüm düğümlerin görselleştirme izin görünür uçaklar. Servikal lenf düğümleri tanımlamak için güvenilir açıklanan tekniği bulduk da, görüntüleme ve biyopsi tekniği özgü sınırlamalar vardır. Hatta hafif basınç dönüştürücü kafa yoluyla deriye uygulandığı zaman fare servikal lenf nodu yüzeysel yapısı aşırı hareketlilik kazandırır. Bu dönüm görüntüleri tanımlanır kadar yavaşça fare boyun ultrason jeli içine dönüştürücü kafa uygulayarak etkisiz olabilir. Lenf nodu hareketlilik de yüksek çözünürlükte (50 MHz) aralığı dönüştürücüleri kullanarak, özellikle ince iğne biyopsisi karmaşık hale getirebilir. Biyopsi için lenf nodu Merkezli görüntüleri tipik olarak örten deri ve kapsül delmek için gereken biyopsi iğnesi gücüne görüş alanının dışına itilir. Bu, iğne girişinin yönüne doğru lenf nodu merkez dışı konumlandırma çözülebilirlenf nodu için yer sağlama karşısında itti ama yine de biyopsi sırasında görüş alanı içinde kalması gereken. Bizim deneyim, lenf düğümleri&gt; 10 mm 3 biyopsi çok zordur ve genellikle iğne ilerlemesi sırasında iğne ile itti ziyade nüfuz edilir. Böylece, biyopsi iyi 10 mm 3 servikal bölgede yeterli düğüm hedef boyutu ve istikrarı sağlamak için&gt; boyutu büyümüş lenf düğümleri için ayrılmıştır. Buna ek olarak, biyopsi maddesi daha büyük hücre sayısı (örneğin, akış sitometrisi) gerekli işlemler için yeterli hücre sayıları içermeyebilir. HFUS başarılı bir şekilde, ortotopik HNSCC 25 tümörleri görselleştirmek için kullanılır ve oral tümörleri 24 olan farelerde rahim düğümü metastazı izlemek için potansiyele sahiptir. Ultrason ek olarak, biyoışıldama görüntüleme ayrıca canlı farelerde 26,27 ortotopik, oral, tümör oluşumu ve servikal lenf düğümü metastazı görselleştirmek için kullanılmıştır. Bir altern gibiative yaklaşım, biyolüminesans görüntüleme, doğrudan aynı hayvanda zamanla tümör ilerlemesi ve metastatik yükünü ölçmek edememek HFUS üzerinde belirgin bir avantajı vardır. Tartışmasız yararlıdır iken, biyolüminesans görüntüleme lenf nodu morfolojisi, nodal hacimleri veya kan akışı da dahil olmak üzere HFUS tarafından görüntülendi parametrelerin, birçok ölçemezse. Biyoparlaklık görüntüleme da ince iğne biyopsisi için adaptasyon için uygun bu tekniği render görüntüleme sırasında fareler korumak için özelleşmiş karanlık kutu gerektirir. Bundan başka, biyoışıldama görüntüleme stabil bir şekilde, ya da lusiferaz ekspresyonunu sınırlamak uyanlabilir dokuya özel transgenik sistemleriyle bağışıklık yetersizliği olan farelerde lusiferaz ile transfekte edilmiş tümör hücreleri ile ortotopik xenografts durumlarda, sadece kullanılacak olan bu tekniği sağlayan, lusiferaz enzimi ifade eden tümör hücrelerinin üretimini gerektirir Tümör kökenli dokusuna özgü bir uzay-zamansal bir şekilde. Bunun aksine, HFUS U olduğuda tam bir bağışıklık sistemi 28,29 farelerde kanserojen kaynaklı Oral tümör modellerinde servikal lenf düğümleri görüntüleme yeteneğine sahip olarak, bu modellerde biyoışıldama görüntü ile bağlantılı olarak sed. HFUS tümör hücreleri lusiferaz yalnız görüntüleme yöntemidir ya daha servikal lenf nodu tutulumu daha kapsamlı bir resmini sağlayabilir ifade eden ağız kanseri, biyolüminesans ve sistemlerde HFUS görüntüleme elde edilebilir kombine bilgilerin çoğu fare modellerinde daha kolay adapte olabilir iken. Bu teknik, bir hayvan, kısa süreli anestezi altında, bir ters çevrilmiş bir konumda muhafaza edilebilir enflamatuar lenfadenopati neden ağız hastalığı en modellerinde kullanılmak üzere, gerçek zamanlı olarak, fare servikal lenf düğümleri tespit etmek ve tespit etmek için yeteneği sağlar. Lenf nodu metastazı veya bakteriyel enfeksiyon ve yaşam hayvanlarda lenf nodu morfolojik birlikte etkisi Algılama geleneksel yöntemler üzerinde önemli bir fayda sunuyorLenf düğümleri histolojik inceleme için ölü hayvanların kaldırılacak gerektirir. İnce iğne biyopsisi ile birleştiren HFUS oral kavite hastalıkları en güncel fare modellerinde hastalığın ilerlemesini izlemek için geliştirilmiş bir yöntem sağlayan, klinikte yapılır ne benzer servikal lenf nodları, rutin patolojik analizi yürütmek için bir araç verir.

Interstisyel doku sıvısı lenf drenajı Oral ve maksillofasiyal bölgede 1,2 doğan bulaşıcı mikroorganizmaların ve kanser yayılması ana yöntemdir. Boyundaki lenf düğümlerine klinik değerlendirmesi, ağız boşluğu içinde kaynaklanan hastalıkların varlığı veya ilerlemesini belirlemek için kullanılan bir ortak bir tanısal bir uygulamadır. Bu sözlü hastalık teşhisi 3 değerli anatomik bölgeler olarak toplanması servikal lenf düğümlerinin önemini vurgulamaktadır. Çeşitli özel görüntüleme metodolojileri klinik hastalıklı servikal lenf düğümleri tanımlamak için kullanılmaktadır. Bu pozitron emisyon tomografisi (PET), bilgisayarlı tomografi (BT) ve manyetik rezonans görüntüleme (MR) içerir. Çok değerli olmakla birlikte, bu yöntemler tüm etkinleştirmek veya görüntüleme sürecini geliştirmek için dolaşıma geniş hasta hazırlığı, son derece özel ekipman ve / veya kimyasal infüzyon gerektirir. Sonografik görüntüleme (ultrason, ABD) im için kullanılan yaygın uygulanan bir tekniktirnedeniyle enfeksiyon veya metastatik tutulumu 4-6 lenfadenopati ile başvuran yaş servikal lenf nodları. ABD genellikle cerrahi eksizyon 7 tümör evreleme ve gerekliliğini belirlemek için yardımcı hasta lenf nodu durumunun kapsamlı bir temsilini sağlamak için PET-BT ve MR ile birleştirilmiştir. ABD non-invaziv doğası da kullanım kolaylığı, düşük maliyet, minimum hasta rahatsızlık ve hazırlık dahil olmak üzere diğer görüntüleme yöntemleri üzerinde doğal avantajlara sahiptir. En servikal lenf nodu yüzeyel deri altı konumu ABD tanısal doğruluğu 8 iyileştirilmesi, artan hassasiyetle minimal invaziv ince iğne aspirasyon biyopsisi rehberlik sağlar. Ticari yüksek frekanslı (HF) ABD ile 30 mikron 9 iç anatomik yapılarının ayrıntılı çözünürlüğü sağlar. 22-70 MHz arasında değişen dönüştürücüleri kullanılarak, HFUS kolaylıkla in vivo iç organların gerçek zamanlı görüntülenmesine olanak sağlamak için deney kemirgen sistemleri çeşitli uygulanmıştır.; HFUS genel ve özel kontrast agents9 bir dizi gibi, geleneksel bir parlaklık (B) modu tümör oluşumu görüntülenmesi için adapte edilmiştir. HFUS güç Doppler kullanılarak canlı farelerde 10,11 anjiyogenik perfüzyon kapsamlı bir değerlendirme sağlayarak, fare tümörler içinde kan akışını izlemek için yeteneği sağlar. HFUS klinik uygulamada, bu teknolojinin paralel yarar gösteren, ana gövde boşluğu içinde hastalıklı fare lenf düğümleri görselleştirmek için kullanılmıştır. Özellikle, enflamatuvar ve metastatik visseral lenf nodu değişiklikler meme 12,13, pankreatik 14, kolorektal 15 ve akciğer tümörleri 16, hem de elyaflı histocytomas 17 ve elde edilen hidronefrozların 18 yaşlı fare modeli barındıran kanser fare modellerinde gözlenmiştir . Bu örnekler, ro, çok çeşitli tümör kaynaklı lenfadenopati için güçlü bir araştırma aracı olarak HFUS değerini kuvvetlendirmekgöçük sistemleri. Bakteriyel enfeksiyon 19,20 ve baş ve boyun skuamöz hücreli karsinom çeşitli modelleri (HNSCC) 21,22 preklinik ortamda bu hastalıkların incelemek için geliştirilmiştir. Insanlarda tersine, fareler oral kavite dokularda (mandibula, submandibuler mandibular ve yüzeysel parotise 23) lenf anket üç servikal lenf düğümleri içerir. Son zamanlarda, HNSCC 24 bir kanserojen ile indüklenmiş fare modelinde lenf nodu hacmi ve kan akımındaki değişiklikleri izleme, bu lenf düğümlerinin konumu ve şekil harita HFUS kullanımını bildirmiştir. Burada, tanımlama, görüntüleme ve canlı farelerde servikal lenf düğümleri analiz HFUS kullanımı için detaylı bir protokol sağlar. Bu protokol ayrıca t üzerinde servikal lenf nodu içeriğinde değişiklikler ve patolojilerin histolojik izleme sağlayan, genişlemiş fare servikal lenf nodu Resim- eşliğinde ince iğne biyopsisi yapmak için HFUS kullanma fizibilitesini kanıtlamaktadırAynı hayvanda ime. Bu protokol, farelerde herhangi bir invaziv ağız boşluğu hastalıktan elde edilen servikal lenf nodu patolojilerin ayrıntılı bir çalışma sağlamak için kolayca uyarlanabilir.

<table><tbody><tr><td>Vevo2100 High Resolution Micro-ultrasound Imaging System, with integrated software Version 1.6.0</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td><td>VS-11945</td><td></td></tr><tr><td>Power Dopper Mode and 3D Mode</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td><td>VS-11952; VS-11484</td><td></td></tr><tr><td>Vevo compact anesthesia system</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vevo integrated rail system including 3D motor and micromanipulator for injections</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td><td>SA-11983</td><td></td></tr><tr><td>Thermasonic Gel Warmer</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td><td></td><td>Optional</td></tr><tr><td>Transducers &amp;ndash; MS-550D (Broadband frequency: 22 MHz - 55 MHz)</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td><td>VS-11960</td><td>Referred to as 40 MHz Transducer</td></tr><tr><td>Transducers &amp;ndash; MS-700 (Broadband frequency: 30 MHz - 70 MHz)</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td><td>VS-12026</td><td>Referred to as 50 MHz Transducer</td></tr><tr><td>Ophthalmic Ointment</td><td>Patterson Veterinary</td><td>07-888-1663</td><td></td></tr><tr><td>Electrode gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>174-1525</td><td></td></tr><tr><td>Tape</td><td>Medical Arts Press</td><td>174-153000</td><td></td></tr><tr><td>Depilatory Cream</td><td>Carter Products</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cotton swabs</td><td>General Supply</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-037-907</td><td></td></tr><tr><td>Water</td><td>General Supply</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lubricating gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>57-05</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>01-50</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrifuge tube rack</td><td>General Supply</td><td></td><td>Used to raise mouse platform for optimal biopsy position</td></tr><tr><td>27 G &amp;frac12; inch needle with 1 ml syringe</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-87</td><td></td></tr><tr><td>ThinPrep PreservCyt Solution</td><td>Hologic</td><td>70097-002</td><td>Refered to as biopsy media</td></tr><tr><td>Microcentrifuge tubes</td><td>General Supply</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Thinprep 2000 processor</td><td>Cytyc, Marlborough, MA</td><td></td><td>Blue Filter</td></tr><tr><td>Olympus AX70 Provis Microscope</td><td>Olympus, Center Valley, PA</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

high-frequency ultrasound imaging of mouse cervical lymph nodes

Yüksek frekanslı ultrason (HFUS) yaygın deneysel küçük hayvan sistemlerinde iç anatomik yapıların görüntülenmesi için non-invaziv bir yöntem olarak kullanılmaktadır. HFUS, 30 mikron kadar küçük yapılar tespit yeteneği, parlaklık (B) modu olarak kemirgenlerde yüzeysel lenf düğümleri görselleştirmek için kullanılmıştır bir özelliğe sahiptir. B-mod görüntüleme ile birleştiren power Doppler lenf düğümleri ve diğer organlara içinde dolaşım kan akışını ölçmek için izin verir. HFUS fare modeli sistemleri bir dizi lenf nodu görüntüleme için kullanılmış olsa da, farelerde HFUS görüntüleme ve servikal lenf düğümlerinin karakterizasyonu tarif detaylı bir protokol bildirilmemiştir. Burada, HFUS tespit etmek ve farelerde servikal lenf düğümleri karakterize etmek için adapte edilebileceğini göstermektedir. Kombine B-mod ve Doppler görüntüleme, immünolojik-genişlemiş serviks düğümlerinde kan akışında bir artış tespit etmek için kullanılabilir. Biz de hiçbir servikal lenf ince iğne biyopsisi yapmak için B-mod görüntüleme kullanımını tanımlamakdes histolojik analiz için lenf dokusu almak için. Son olarak, yazılım destekli adımları lenf nodu hacmindeki değişiklikler hesaplamak ve yeniden görüntü oluşturulmasını takip lenf nodu morfolojisi değişiklikleri görselleştirmek için tarif edilmiştir. görsel zamanla servikal lenf nodu biyoloji değişiklikleri izlemek yeteneği oral kavite hastalığın klinik öncesi fare modellerinde servikal lenf nodu değişiklikleri non-invazif izleme için basit ve güçlü bir teknik sağlar.

Görüntüleme ve biyopsi prosedürlerine yönelik genel şeması, Şekil 1 &#39;de gösterilmiştir. prosedürde önemli adımlar görüntüleme için fare uygun bir hazırlama, servikal lenf düğümleri tanımlanmasını doğru hazırlama ve iğne biyopsisi yapılması, ve Yatak analizini içerir biçem ve Doppler görüntüleri hacim ve bilgisayar yazılımı kullanılarak seçilen her düğümün içinde damarlanma miktarını ölçmek için. Fare servikal lenf düğümlerinin HFUS görüntüleme uygulanması ve görüntüleme süre (Şekil 2A) boyunca uygun bir anestezi hem de tüm boyun alanını (Şekil 2B) içeren saç tam ayrılmasını sağlamak gerekir. depilated bölgeye ultrason jeli liberal başvuru prosedürü (Şekil 2C) sırasında net HFUS sinyali sağlar. Boyun bölgesi HFUS görüntüleme özelliği ultrasonografik görüntüler üretmek servikal anatomik yerlerinden görselleştirme destekli olduğunu. Şekil3 B-mod (Şekil 3D) ve power Doppler modunda (Şekil 3E) anahtar organların örnekleri (Şekil 3A-C), servikal lenf düğümleri gösterir. Anestezi farelerde Gerçek zamanlı HFUS görüntüleme klinik uygulamada yapılır ne benzer servikal düğüm rehberliğinde ince iğne biyopsisi için izin verir. Kontrol mikroenjektör ekipmana biyopsi iğnesi ve bağlı tahsilat şırınga Yerleştirme Şekil 4A gösterilmiştir. Müteakip B-mod ultrason görüntüleri biyopsi (Şekil 4D) sırasında ideal bir önceki biyopsi (Şekil 4B) iğne yerleşimi, servikal lenf nodu (Şekil 4C) içine iğne ucu girişi ve iğne konumunu göstermektedir. Close-up görüntü lenf nodu (Şekil 4E) medullasındaki içinde iğne ucu göstermektedir. Sitospin tarafından biyopsi bileşenlerin işlenmesi başarılı lenf nodu doğrulayarak bol lenfoid hücre kümeleri ve ilişkili bağ dokusu, ortayaBiyopsi (Şekil 4F). Detaylı bilgi lenf nodu mimarisi, hacim ve damar akışının ilişkin elde edilecek için HFUS görüntülerin Hesaplamalı tabanlı analiz verir. Power Doppler modu ve 3D ses ölçümleri, yüzde damarlanma (PV) kullanarak tüm düğümleri (Şekil 5A) kapsayan resim serisi hesaplanabilir. Buna ek olarak, 3D görüntü genel lenf nodu topografya (Şekil 5B) ortaya sanal lenf düğümü yeniden sağlar. <img alt="Figür 1" src="/files/ftp_upload/52718/52718fig1.jpg" /> Şekil 1:. Farelerde teşhis HFUS servikal lenf nodu görüntüleme katılan adımların Bakış şematik önemli adımlar şunlardır: 1 HFUS görüntüleme fareler hazırlanması ve üç fare servikal lenf düğümlerini içeren boyun bölgesinde 40 ve 50 MHz çözünürlüklü görüntüleri elde etmek . 2: servikal lenf nodları ve sonraki histolojik analiz ince iğne görüntü kılavuzluğunda biyopsi<html> malzemesini biyopsi. 3: Bilgisayar destekli görüntü analizi ve damar akışının ilgili lenf nodu hacmi ve yüzde (%) belirlemek için B-mod ve Doppler elde edilen lenf nodu görüntüleri 3D rekonstrüksiyon. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52718/52718fig2.jpg" /> Şekil 2:. Servikal lenf nodu değerlendirmesi ve biyopsi için in vivo mikro-görüntüleme sistemi yüksek çözünürlüklü bakış (A) HFUS sistemi servikal lenf nodu görüntüleme için hazırlanmış bir anestezi fare ile gösterilir. Ayrıca gösterilen mikropüskürtücü (MI) ve 3D motor aşaması (3D MS) aksesuar cihazıdır. (B) boyun bölgesinde kaldırıldı saçlı HFUS görüntüleme için hazırlanmış bir anestezi fare görünümü kadar kapatın. (C) boyunda yer 50 MHz transdüser ile aynı fare. Boyun bölgesinde görüntüleme kolaylaştırmak için kullanılan ekstra ultrason jeli unutmayın. 718fig3.jpg &quot;/&gt; Şekil 3: B-mod ve güç Doppler Temsilcisi HFUS servikal anatomi görüntüler. (A, B), burun boşluğuna yakın görüntüleme ile görselleştirildi bukkal boşluk (BC) ve dil (T) gösteren ağız boşluğunun B-mod görüntüleri. Boyun her iki tarafında bulunan üç servikal lenf düğümleri (m, çene etiketli SM submandibuler; SP yüzeysel parotid) (B) gösterildiği gibi, tek bir görüntü düzlemi hipoekoik yapıların bir grup olarak görünür. (C), bir katı, ekojenik kelebek şeklinde bir yapı olarak ortaya çıkan, üst göğüs bölgesinde görselleştirildiği gibi, tiroid bezi (Th). (AC) 40 MHz transdüser ile görüntülendi; Ölçek çubuğu = 1 mm. (D, E), normal (D) Temsilcisi görüntüleri ve B-mod ve güç Doppler (kırmızı) ile genişlemiş (E) servikal lenf nodları. Noktalı çizgiler bireysel lenf düğümleri özetlemektedir. Ölçek çubuğu = 0,5 mm. <img alt="Şekil 4," src = &quot;/ files / ftp_upload / 52718 / 52718fig4.jpg&quot; /&gt; Şekil 4: Servikal lenf nodu biyopsisi set-up, görüntüleme ve biyopsi materyalinin Sitospin analizi (A) fare boyun yakın mikro enjektör ve iğne yerleştirme gösteren görüntüleme platformudur.. Geniş bir mikrosantrifüj tüpü raf (turuncu blok) hala biraz 3D-motor aşaması için alan sağlarken uygun iğne yerleşimini sağlayan bir platform yükseltmek için kullanılır. Bu düzenleme, her fare için motorlu sahne kaldırarak harcanan zamanı en aza indirir. (B - D) Tüm boyun HFUS görüntüleri 50 MHz transdüser kullanılarak servikal lenf nodu biyopsisi bir video alınan. (B) biyopsi öncesinde boyun tarafına yerleştirilmiş iğne gösteren HFUS B-mod görüntü. İğne ucu sadece iğne yörünge göstermek için görüntüleme sırasında üst üste iğne rehber pozisyonunda (yeşil noktalı çizgi) altında hiperekojen yapıdır. Lenf düğümü merkezindegörüntü. Ölçek çubuğu = 1 mm. Lenf nodu içine (C) İğne girişi. Servikal lenf düğümü (D) Biyopsi. (E) servikal lenf düğümünün Zoomed biyopsisi. Ölçek çubuğu = 0,5 mm. Başarılı bir biyopsi teyit Örnek biyopsi lenf malzemenin (F), sitospin analizi. Ölçek çubuğu = 100 mikron. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52718/52718fig5.jpg" /> Şekil 5:. 3D servikal lenf nodu görüntülerin bilgisayar analizi lenf nodu (A) Temsilcisi ekran bilgisayar yazılımı kullanılarak analiz edildi. düğüm mavi sınırlı olduğunu; Analiz sonuçları 3D Ses ve belirtildiği gibi yüzde damarlanma (PV) göstermektedir. (B) 3D analizden sonra aynı düğümün bir yüzey görünümü görüntüsü. A alınan ölçümlere dayalı lenf nodu tüm hacmini oluşturur.

Watch this Scientific Journal Video about High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes at JoVE.com

High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes

Bu protokol, görüntüleme fare servikal lenf düğümleri için yüksek frekanslı ultrason (HFUS) uygulanmasını tarif etmektedir. Bu teknik, görselleştirme ve servikal lenf nodu morfolojisi, hacim ve kan akışının ölçümü optimize eder. Servikal lenf nodları ve histolojik değerlendirme için lenf dokusunun işleme görüntü kılavuzluğunda biyopsi de gösterilmiştir.

Fare Servikal lenf nodu Yüksek frekanslı Ultrasonik Görüntüleme

High-frequency ultrasound (HFUS) is widely employed as a non-invasive method for imaging internal anatomic structures in experimental small animal ...

high-frequency-ultrasound-imaging-of-mouse-cervical-lymph-nodes

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

18.9K Görüntüleme.  West Virginia University.  Bu protokol, görüntüleme fare servikal lenf düğümleri için yüksek frekanslı ultrason (HFUS) uygulanmasını tarif etmektedir. Bu teknik, görselleştirme ve servikal lenf nodu morfolojisi, hacim ve kan akışının ölçümü optimize eder. Servikal lenf nodları ve histolojik değerlendirme için lenf dokusunun işleme görüntü kılavuzluğunda biyopsi de gösterilmiştir. 

Video: High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the initiation of an immune response 1. Here, we present methods for adoptive transfer of labeled T cells, isolation of lymph nodes, and imaging motility of CD4+ T cells in the explanted lymph node as first described in 2002 2. Two-photon imaging of immune cells requires that the cells are fluorescently labeled, either by staining with a cell tracker dye or by expressing a fluorescent protein. We demonstrate the adoptive transfer procedure of injecting cells derived from donor mice into the tail vein of a recipient animal, where they home to lymphoid organs within approximately 15-30 min. We illustrate the isolation of a lymph node and describe methods to ensure proper mounting of the excised lymph node. Other considerations such as proper oxygenation of perfused media, temperature, and laser power are discussed. Finally, we present 3D video images of naive CD4+ T cells exhibiting steady state motility at 37&deg;C.

Two-photon imaging has uncovered lymphocyte motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and durring an immune response 1. Here, we demonstrate adoptive transfer of T cells, isolation of lymph nodes, and imaging motility of CD4+ T cells in the explanted lymph node.

Farelerde Periferik lenf nodu diseksiyonu ve 2-Foton Görüntüleme

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

Biyoloji

Murine Superficial Lymph Node Surgery

In the field of immunology, to understand the progression of an immune response against a vaccine, an infection or a tumour, the response is often followed over time. Similarly, the study of lymphocyte homeostasis requires time course experiments. Performing these studies within the same mouse is ideal to reduce the experimental variability as well as the number of mice used. Blood withdrawal allows performance of time course experiments, but it only gives information about circulating lymphocytes and provides a limited number of cells1-4. Since lymphocytes circulating through the body and residing in the lymph nodes have different properties, it is important to examine both locations. The sequential removal of lymph nodes by surgery provides a unique opportunity to follow an immune response or immune cell expansion in the same mouse over time. Furthermore, this technique yields between 1-2x106 cells per lymph node which is sufficient to perform phenotypic characterization and/or functional assays. Sequential lymph node surgery or lymphadenectomy has been successfully used by us and others5-11. Here, we describe how the brachial and inguinal lymph nodes can be removed by making a small incision in the skin of an anesthetised mouse. Since the surgery is superficial and done rapidly, the mouse recovers very quickly, heals well and does not experience excessive pain. Every second day, it is possible to harvest one or two lymph nodes allowing for time course experiments. This technique is thus suitable to study the characteristics of lymph node-residing lymphocytes over time. This approach is suitable to various experimental designs and we believe that many laboratories would benefit from performing sequential lymph node surgeries.

To follow the progression of an immune response over time within the same mouse, lymph nodes can be sequentially removed by surgery. Here, we describe how this technique can be performed.

Mürin Yüzeysel lenf nodu Cerrahisi

In the field of immunology, to understand the progression of an immune response against a vaccine, an infection or a tumour, the response is often ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Intravital Imaging of the Mouse Popliteal Lymph Node

Lymph nodes (LNs) are secondary lymphoid organs, which are strategically located throughout the body to allow for trapping and presentation of foreign antigens from peripheral tissues to prime the adaptive immune response. Juxtaposed between innate and adaptive immune responses, the LN is an ideal site to study immune cell interactions1,2. Lymphocytes (T cells, B cells and NK cells), dendritic cells (DCs), and macrophages comprise the bulk of bone marrow-derived cellular elements of the LN. These cells are strategically positioned in the LN to allow efficient surveillance of self antigens and potential foreign antigens3-5. The process by which lymphocytes successfully encounter cognate antigens is a subject of intense investigation in recent years, and involves an integration of molecular contacts including antigen receptors, adhesion molecules, chemokines, and stromal structures such as the fibro-reticular network2,6-12. 
Prior to the development of high-resolution real-time fluorescent in vivo imaging, investigators relied on static imaging, which only offers answers regarding morphology, position, and architecture. While these questions are fundamental in our understanding of immune cell behavior, the limitations intrinsic with this technique does not permit analysis to decipher lymphocyte trafficking and environmental clues that affect dynamic cell behavior. Recently, the development of intravital two-photon laser scanning microscopy (2P-LSM) has allowed investigators to view the dynamic movements and interactions of individual cells within live LNs in situ12-16. In particular, we and others have applied this technique to image cellular behavior and interactions within the popliteal LN, where its compact, dense nature offers the advantage of multiplex data acquisition over a large tissue area with diverse tissue sub-structures11,17-18. It is important to note that this technique offers added benefits over explanted tissue imaging techniques, which require disruption of blood, lymph flow, and ultimately the cellular dynamics of the system. Additionally, explanted tissues have a very limited window of time in which the tissue remains viable for imaging after explant. With proper hydration and monitoring of the animal's environmental conditions, the imaging time can be significantly extended with this intravital technique. Here, we present a detailed method of preparing mouse popliteal LN for the purpose of performing intravital imaging.

Recent advances in 2-photon microscopy have enabled real-time in situ imaging of live tissues in animal models, thereby enhancing our ability to investigate cellular behavior in both physiologic and pathologic conditions. Here, we outline the preparations required to perform intravital imaging of the mouse popliteal lymph node.

Intravital Görüntüleme Fare Popliteal Lenf Nodu

Lymph nodes (LNs) are secondary lymphoid organs, which are strategically located throughout the body to allow for trapping and presentation of foreign ...

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

The lymphatic vascular system is an important component of the circulatory system that maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and mediates fat absorption in the gut. Yet despite its critical function, there is comparatively little understanding of how the lymphatic system adapts to serve these functions in health and disease1. Recently, we have demonstrated the ability to dynamically image lymphatic architecture and lymph "pumping" action in normal human subjects as well as in persons suffering lymphatic dysfunction using trace administration of a near-infrared fluorescent (NIRF) dye and a custom, Gen III-intensified imaging system2-4. NIRF imaging showed dramatic changes in lymphatic architecture and function with human disease. It remains unclear how these changes occur and new animal models are being developed to elucidate their genetic and molecular basis. In this protocol, we present NIRF lymphatic, small animal imaging5,6 using indocyanine green (ICG), a dye that has been used for 50 years in humans7, and a NIRF dye-labeled cyclic albumin binding domain (cABD-IRDye800) peptide that preferentially binds mouse and human albumin8. Approximately 5.5 times brighter than ICG, cABD-IRDye800 has a similar lymphatic clearance profile and can be injected in smaller doses than ICG to achieve sufficient NIRF signals for imaging8. Because both cABD-IRDye800 and ICG bind to albumin in the interstitial space8, they both may depict active protein transport into and within the lymphatics. Intradermal (ID) injections (5-50 &mu;l) of ICG (645 &mu;M) or cABD-IRDye800 (200 &mu;M) in saline are administered to the dorsal aspect of each hind paw and/or the left and right side of the base of the tail of an isoflurane-anesthetized mouse. The resulting dye concentration in the animal is 83-1,250 &mu;g/kg for ICG or 113-1,700 &mu;g/kg for cABD-IRDye800. Immediately following injections, functional lymphatic imaging is conducted for up to 1 hr using a customized, small animal NIRF imaging system. Whole animal spatial resolution can depict fluorescent lymphatic vessels of 100 microns or less, and images of structures up to 3 cm in depth can be acquired9. Images are acquired using V++ software and analyzed using ImageJ or MATLAB software. During analysis, consecutive regions of interest (ROIs) encompassing the entire vessel diameter are drawn along a given lymph vessel. The dimensions for each ROI are kept constant for a given vessel and NIRF intensity is measured for each ROI to quantitatively assess "packets" of lymph moving through vessels.

Recently developed imaging techniques using near-infrared fluorescence (NIRF) may help elucidate the role the lymphatic system plays in cancer metastasis, immune response, wound repair, and other lymphatic-associated diseases.

Bir Mouse Lenfatik damarları Non-invaziv Optik Görüntüleme

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

Highly Resolved Intravital Striped-illumination Microscopy of Germinal Centers

Monitoring cellular communication by intravital deep-tissue multi-photon microscopy is the key for understanding the fate of immune cells within thick tissue samples and organs in health and disease. By controlling the scanning pattern in multi-photon microscopy and applying appropriate numerical algorithms, we developed a striped-illumination approach, which enabled us to achieve 3-fold better axial resolution and improved signal-to-noise ratio, i.e. contrast, in more than 100 &#181;m tissue depth within highly scattering tissue of lymphoid organs as compared to standard multi-photon microscopy. The acquisition speed as well as photobleaching and photodamage effects were similar to standard photo-multiplier-based technique, whereas the imaging depth was slightly lower due to the use of field detectors. By using the striped-illumination approach, we are able to observe the dynamics of immune complex deposits on secondary follicular dendritic cells &#8211; on the level of a few protein molecules in germinal centers.

High-resolution intravital imaging with enhanced contrast up to 120 &#181;m depth in lymph nodes of adult mice is achieved by spatially modulating the excitation pattern of a multi-focal two-photon microscope. In 100 &#181;m depth we measured resolutions of 487 nm (lateral) and 551 nm (axial), thus circumventing scattering and diffraction limits.

Germinal Merkezleri derece Çözülmüş Intravital Çizgili-aydınlatma Mikroskopi

Monitoring cellular communication by intravital deep-tissue multi-photon microscopy is the key for understanding the fate of immune cells within thick ...

Analysis of Lymph Node Volume by Ultra-High-Frequency Ultrasound Imaging in the Braf/Pten Genetically Engineered Mouse Model of Melanoma

Tyr::CreER+,BrafCA/+,Ptenlox/lox&#160;genetically engineered mice (Braf/Pten mice) are widely used as an in vivo model of metastatic melanoma. Once a primary tumor has been induced by tamoxifen treatment, an increase in metastatic burden is observed within 4-6 weeks after induction. This paper shows how Ultra-High-Frequency UltraSound (UHFUS) imaging can be exploited to monitor the increase in metastatic involvement of the inguinal lymph nodes by measuring the increase in their volume.
The UHFUS system is used to scan anesthetized mice with a UHFUS linear probe (22-55 MHz, axial resolution 40 &#181;m). B-mode images from the inguinal lymph nodes (both left and right sides) are acquired in a short-axis view, positioning the animals in dorsal recumbency. Ultrasound records are acquired using a 44 &#181;m step size on a motorized mechanical arm. Afterward, two-dimensional (2D) B-mode acquisitions are imported into the software platform for ultrasound image post-processing, and inguinal lymph nodes are identified and segmented semi-automatically in the acquired cross-sectional 2D images. Finally, a total reconstruction of the three-dimensional (3D) volume is automatically obtained along with the rendering of the lymph node volume, which is also expressed as an absolute measurement.
This non-invasive in vivo technique is very well tolerated and allows the scheduling of multiple imaging sessions on the same experimental animal over 2 weeks. It is, therefore, ideal to assess the impact of pharmacological treatment on metastatic disease.

Melanoma is a very aggressive disease that quickly spreads to other organs. This protocol describes the application of ultra-high-frequency ultrasound imaging, coupled with 3D rendering, to monitor the volume of the inguinal lymph nodes in the Braf/Pten mouse model of metastatic melanoma.

Braf/Pten Genetiği Mühendisliğiyle Tasarlanmış Melanom Fare Modelinde Ultra Yüksek Frekanslı Ultrason Görüntüleme ile Lenf Düğümü Hacminin Analizi

Tyr::CreER+,BrafCA/+,Ptenlox/lox&#160;genetically engineered mice (Braf/Pten mice) are widely used as an in vivo model of metastatic melanoma. Once a ...

Kanser Araştırmaları

High-Resolution Ultrasonography for the Analysis of Orthotopic ATC Tumors in a Genetically Engineered Mouse Model

Anaplastic thyroid carcinoma (ATC) is associated with a poor prognosis and short median survival time, but no effective treatment improves the outcomes significantly. Genetically engineered murine models that mimic ATC&#39;s progression may help researchers to study treatments for this disease. Crossing three different genotypes of mice, a TPO-cre/ERT2; BrafCA/wt; Trp53&#916;ex2-10/&#916;ex2-10&#160;transgenic ATC model was developed. The ATC murine model was induced by an intraperitoneal injection of tamoxifen with overexpression of BrafV600E and deletion of Trp53, and the tumors were generated within about 1 month. High-resolution ultrasound was applied to investigate the tumor initiation and progression, and the dynamic growth curve was obtained by measuring the tumor sizes. Compared to magnetic resonance imaging (MRI) and computed tomography scanning, ultrasound has advantages in observing the ATC murine model, such as being noninvasive, portable, in real-time, and without radiation exposure. High-resolution ultrasound is suitable for dynamic and multiple measurements. However, ultrasonographic examination of the thyroid in mice requires relevant anatomical knowledge and experience. This article provides a detailed procedure for utilizing high-resolution ultrasound to scan tumors in the transgenic ATC model. Meanwhile, ultrasonic parameter adjustment, ultrasound scanning skills, anesthesia and recovery of the animals, and other elements that need attention during the process are listed.

The present protocol describes high-frequency ultrasonography for visualizing the entire mouse thyroid gland and monitoring the growth of anaplastic thyroid carcinoma.

Genetiği Değiştirilmiş Bir Fare Modelinde Ortotopik ATC Tümörlerinin Analizi için Yüksek Çözünürlüklü Ultrasonografi

Anaplastic thyroid carcinoma (ATC) is associated with a poor prognosis and short median survival time, but no effective treatment improves the outcomes ...

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to assessing pathology post-mortem in animals euthanized at multiple time points in different cohorts, which increases the number of mice needed for a study. Imaging mice in longitudinal studies can track the progression of disease in individual animals, reducing the number of mice needed. Advances in ultrasound technology have allowed for the detection of micrometer-level changes in tissues. Ultrasound has been used to study follicle maturation in ovaries and xenograft growth but has not been applied to morphological changes in the mouse uterus. This protocol examines the juxtaposition of pathology with in vivo imaging comparisons in an induced endometrial cancer mouse model. The features observed by ultrasound were consistent with the degree of change seen by gross pathology and histology. Ultrasound was found to be highly predictive of the observed pathology, supporting the incorporation of ultrasonography into longitudinal studies of uterine diseases such as cancer in mice.

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

This protocol describes a method for monitoring the progression of morphological changes over time in the uterus in an inducible mouse model of endometrial cancer using ultrasound imaging with correlation to gross and histological changes.

Farelerde Tümör Baskılayıcıları Arid1a ve Pten'in Pax8'e Yönelik Delesyonunda Endometriyal Kanser Progresyonunun Non-İnvaziv Ultrason Değerlendirmesi

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to ...

Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy

Lymph nodes (LNs) are organs spread within the body, where the innate immune responses can connect with the adaptive immunity. In fact, LNs are strategically interposed in the path of the lymphatic vessels, allowing intimate contact of tissue antigens with all resident immune cells in the LN. Thus, understanding the cellular composition, distribution, location and interaction using ex vivo whole LN imaging will add to the knowledge on how the body coordinates local and systemic immune responses. This protocol shows an ex vivo imaging strategy following an in vivo administration of fluorescent-labeled antibodies that allows a very reproducible and easy-to-perform methodology by using conventional confocal microscopes and stock reagents. Through subcutaneous injection of antibodies, it is possible to label different cell populations in draining LNs without affecting tissue structures that can be potentially damaged by a conventional immunofluorescence microscopy technique.

This protocol describes a technique to image different cell populations in draining lymph nodes without alterations in the organ structure.

Ex-Vivo Konfokal Mikroskopi ile Lenf Nodal Yapısı nın Ve Hücresel Lokalizasyonun Görselleştirilmesi

Lymph nodes (LNs) are organs spread within the body, where the innate immune responses can connect with the adaptive immunity. In fact, LNs are ...

<meta charset="utf8"></head><body>Farelerde Hepatik Mikrovasküler Analiz için Ultra Hızlı Doppler Ultrason

Imaging and Quantification of the Hepatic Vasculature of Mice Using Ultrafast Doppler Ultrasound

Non-invasive in vivo imaging of the vasculature is a powerful tool for studying disease mechanisms in rodents. To achieve high sensitivity imaging of the microvasculature using Doppler ultrasound methods, imaging modalities employing the concept of ultrafast imaging are preferred. By increasing the frame rate of the ultrasound scanner to thousands of frames per second, it becomes possible to improve the sensitivity of the blood flow down to 2 mm/s and to obtain functional information about the microcirculation in comparison to a sensitivity of around 1 cm/s in conventional Doppler modes. While Ultrafast Doppler ultrasound (UFUS) imaging has become adopted in neuroscience, where it can capture brain activity through neurovascular coupling, it presents greater challenges when imaging the vasculature of abdominal organs due to larger motions linked to breathing. The liver, positioned anatomically under the diaphragm, is particularly susceptible to out-of-plane movement and oscillating respiratory motion. These artifacts not only adversely affect Doppler imaging but also complicate the anatomical analysis of vascular structures and the computation of vascular parameters. Here, we present a qualitative and quantitative imaging analysis of the hepatic vasculature in mice by UFUS. We identify major anatomical vascular structures and provide graphical illustrations of the hepatic macroscopical anatomy, comparing it to an in-depth anatomical assessment of the hepatic vasculature based on Doppler readouts. Additionally, we have developed a quantification protocol for robust measurements of hepatic blood volume of the microvasculature over time. To contemplate further research, qualitative vascular analysis provides a comprehensive overview and suggests a standardized terminology for researchers working with mouse models of liver disease. Furthermore, it offers the opportunity to apply ultrasound as a non-invasive complementary method to inspect hepatic vascular defects in vivo and measure functional microvascular alterations deep within the organ before unraveling blood vessel anomalies at the micron scale levels using ex vivo staining on tissue sections.

<meta charset="utf8"></head><body>Ultrafast Doppler Ultrason Kullanılarak Farelerin Hepatik Vaskülatürünün Görüntülenmesi ve Miktarının Belirlenmesi

Ultrafast Doppler ultrasound (UFUS) with high spatial resolution (100 &#956;m) and sensitivity represents a suitable noninvasive imaging modality for obtaining a comprehensive qualitative overview of the hepatic vasculature. UFUS also facilitates quantitative measurements of the microvasculature, aiming to enhance our understanding of vascular disease mechanisms.

Ultrafast Doppler Ultrason Kullanılarak Farelerin Hepatik Vaskülatürünün Görüntülenmesi ve Miktarının Belirlenmesi

Non-invasive in vivo imaging of the vasculature is a powerful tool for studying disease mechanisms in rodents. To achieve high sensitivity imaging of the ...