Name: methods for comparing nutrients in beebread made by africanized and european honey bees and the effects on hemolymph protein titers
Uploaded: 2015-03-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 42 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers at JoVE.com

The authors thank Mona Chambers, Geoffrey Hidalgo and Maurissa Two Two for their technical assistance. We also thank Dr. Earl White for amino acid analysis, Dr. Roger Simonds for analysis of pollen for pesticides, and Drs. Stanley S. Schneider, Vanessa Corby-Harris and Kirk Anderson for their reviews and discussion of earlier versions of the manuscript and many helpful suggestions.

1. AHB ve EHB Kolonileri gelen beebread Alınması <ol><li> Bal arısı kolonilerinin üzerinde polen tuzakları yerleştirin ve polen toplamak. Bir kahve değirmeni kullanarak (anterlerden döken polen benzer) ince bir toz haline polen öğütün. </li><li> Arılar sadece verilen polen üzerinde yem böylece kapalı bir uçuş alanı (EFA) 5 koloni AHB ve EHB her kurulması. Arılar aralarında geçemez böylece EHB ve AHB koloniler arasında sürüklenen işçi önlemek için, ayrı bölüme EFA bölmek. 3,500-4,000 işçi arıların, EFA her bölümde nektar, bal, olgunlaşmamış kuluçka ve boş tarak ile balmumu tarak bireysel EHB veya AHB kolonileri yerleştirin. NOT: Kurulan zaman koloniler polen depolanmış yok. polen depolanır oranı koloniler bir döşeme kraliçe içermeyen artırılabilir. </li><li> EFA her bölümünde polen ile bir tepsi koyarak koloniler zemin polen besleyin. O foragin böylece her tepsi üzerinde polen yaklaşık 60 g Yayılmag arı o kadar corbicular yükleri toplamak ve beebread olarak kolonilerinde polen saklayabilirsiniz. 3 hafta boyunca her gün, her tepsi üzerinde taze polen sunmaya devam. </li><li> Avrupa beebread (EBB) olarak, ve Africanized beebread (ABB) olarak Africanized kolonilerin Avrupa kolonilerden beebread bakın. </li></ol> Kafeslerde 2. Beslenme Arılar <ol><li> Bir çevre odasında ayrı çıkması kafeslerde AHB ve EHB kolonilerden kapalı işçi damızlık Yeri çerçeveleri 32-34 ° C ve% 40 bağıl nemde set .. </li><li> İşçiler ortaya ve yaklaşık 24 saat eski olduğunda, 12 pleksiglas biyoanaliz kafesleri (boyutları = 11,5 x 7,5 x 16,5 cm 3) kurmak ve 100 yeni ortaya çıkan EHB veya her kafese 100 yeni ortaya çıkan AHB işçi arılar ya ekleyin. AHB beslenen ABB, EHB beslenen ABB, AHB beslenen EBB ve EHB beslenen EBB: Aşağıdaki tedavi kombinasyonları oluşturmak için her kafeste EBB veya ABB ya hücrelerin bilinen bir sayı (kafes başına 24-30 hücre) ile tarak bir bölümünü yerleştirin. (4 tedaviler, 6Tedavi başına kafesleri; Toplam 24 kafesler). </li><li> Her bir kafes hacimce formüle su şişeleri ve% 50 bal ve su solüsyonu ekleyin. 11 günlük bir çalışma dönemi için günlük bal ve su şişeleri tekrar doldurun. </li></ol> 3. Örnekleme İşçi Arılar ve beebread ve tahmin Tüketim <ol><li> Örnek 10 yeni önceki kafeslerde onları yerleştirerek EHB ve AHB işçileri ortaya çıktı. Gün 0 arılar gibi bunlara bakın ve onları hemolimf protein konsantrasyonları için temel olarak hizmet var. </li><li> Onlar 4, 7, ve 11 gün boyunca EBB veya ABB beslenen sonra her kafesten 10 arıları çıkarın. </li><li> Bireysel mikrosantrifüj tüpler canlı arılar koyun ve buz paketleri üzerinde ayarlayın. Hemolimf protein konsantrasyonu analizi için dört arı bir alt-numûnesinin seçin. </li><li> Gün-11 arılar örnekleme sonra, hala beebread ihtiva tarak hücrelerinin sayısını. Bu beebread tüketiminin bir nispi ölçüdür. </li><li> Her bir kafes içinde hücrelerden geri kalan beebread çıkarın ve Separ saklamakkafese göre mikrosantrifüj tüpleri yedi. PH, çözünür protein konsantrasyonu ve amino asit içeriği için analiz edilene kadar -80 ° C&#39;de beebread örnekleri tutun. </li></ol> 4. Polen ve beebread pH tahmin <ol><li> EFA arıların beslenen polen altı rastgele 0.3 g numune alın ve damıtılmış su, 300 ul içinde çözülür. 0,01 hassasiyetle bir su geçirmez çift kavşak pH mızrak kullanarak pH&#39;ı ölçün. </li><li> Her bir kafeste 11 günlük besleme döneminden sonra kalan beebread 0.3 g örneği alın. Polen (4.1) için tarif edildiği gibi saf su ve ölçü pH 300 ul beebread çözülür. </li></ol> 5. Protein Analizi <ol><li> Altı polen örnekleri ve her kafes EBB ve ABB bir örnek almak. -20 ° C&#39;de saklayın örnekleri çözünür protein konsantrasyonu açısından analiz edilene kadar. </li><li> 0.1 M fosfat tampon çözeltisi (PBS) 1000 ul polen ya da beebread ya 20 mg karıştırın. </li><li> Vo1 dakika boyunca 571,2 x g&#39;de 10 saniye ve santrifüj Karışımı rtex. </li><li> 96 gözlü düz tabanlı EIA / RIA polistiren bir levhanın gözleri içine yüzer tabakanın ve yerine bir 10 ul numune çıkarılmaktadır. Üç kuyu her örnek çoğaltın. </li><li> (Isıtıldı ve bir iğne sivri çekilmiş olan) kanatlı eklenme noktasının yakınında göğüs sağ yan kısmına, bir 20 ul kılcal tüp ekleyerek, herbir kafes toplanan arılar hemolimf çizin. Karın tergites arasındaki zarı içine aynı tüp takarak, gerekirse ek hemolimf toplayın. </li><li> 0.1 M PBS 9 ul hemolimf 1 ul ekle. Çözünür protein için analiz edilene kadar -20 ° C&#39;de hemolimf çözeltisi saklayın. </li><li> Ticari bir Bradford protein deneyi kiti kullanılarak toplam polen, beebread çözünür protein konsantrasyonlarını ve hemolimf örnekleri belirler. Üreticinin talimatlarını izleyin. </li><li> Çözünür protein c tahmin etmek bir standart eğri kurmakoncentration büyükbaş hayvan serum albumin (BSA) içinde bilinen bir protein konsantrasyonları, protein absorbans ölçülerek örneklerinde. Bir spektrofotometre kullanılarak 595 nm&#39;de protein absorbansı ölçülür. </li></ol> 6. Amino Asit Analizi <ol><li> Her koloninin tarak hücrelerinden Havuz bireysel analiz için numuneler EBB ve ABB temsilcisi örnek oluşturmak için. </li><li> 50 mg polen al ya beebread örnek örnekleme şişelerine konuldu ve d 4-alanin oluşan 50 ng / ml iç standart solüsyonu, 100 ul ile birlikte şişeye damıtılmış su, 1 ml ilave d 23 -lauric asit, 13 ° C 6 -glükoz d 39 -arachidiac asit elde edildi. </li><li> 5 dakika boyunca numune ve sonikasyon Cap. </li><li> Metanol, 1 ml ilave etmek suretiyle bir HLB KARTUŞU, beebread ve polen numune, 1 ml ilave edilir, damıtılmış suyun 1 mL eklenerek dengelenir. % 5.0 MeOH / H2O ve ELU 1 ml kartuş yıkayın% 80 MeOH / H2O 1 ml te </li><li> Bir azot akımı altında kuruyana kadar örnek buharlaştırın. Piridin ve 50 ul ve N, O-Bis (trimetilsilil) trifloroasetamid + Trimetilklorosilan (BSTFA + TMCS), 100 ul ile yeniden oluşturun. </li><li> Kapak 30 dakika süreyle 70 ° C&#39;de inkübe edilir ve örnek. </li><li> Örnek soğutmak ve temiz bir otomatik numune şişesine aktarmak için izin verin. </li><li> Bir Kütle Seçici Dedektör içine Cap ve numuneyi uçucu bileşikler ve organik asitler hem örnekleri analiz etmek için bir gaz kromatografa arabirim. BSTFA + TMCS 1.0 um film kalınlığı olan bir sütun (30 x 0.25 mm iç çap) kullanılarak TMS türetme aşağıdaki şeker ve organik asitler ayırın. </li><li> 2 dakika boyunca 50 ° C&#39;de sütun fırın ayarlayın, sonra 5 ° C / dakika ile 290 ° C&#39;ye kadar doğrusal olarak sıcaklık artışı. ve 7 dakika tutun. Sırasıyla, 250 ° C ve 290 ° C GC enjektörü ve GC / MS arayüzü ayarlayın. <ol><li> Bir flo bir taşıyıcı olarak Helyum kullanın1.0 ml / dak ağırlık oranı. 230 ° C MS kaynak sıcaklığını ayarlayın. </li></ol></li><li> Ayarlama ve perflorotirbütilamin (PptBA) günlük kütle spektrometresi kalibre. Varlığı ile ilgili veri ve amino asit konsantrasyonlarının elde edilmesi için tam tarama (35-700 amu) pozitif iyon modunda PptBA bir 1 ul enjeksiyon kullanın. </li></ol>

<ol>
	<li>Brodschneider, R., Crailsheim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nutrition+and+health+in+honey+bees.">Nutrition and health in honey bees.</a> Apidologie. 41 (3), 278-294 (2010).</li><li>Spivak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relative+success+of+Africanized+and+European+honey-bees+over+a+range+of+life-zones+in+Costa+Rica.">The relative success of Africanized and European honey-bees over a range of life-zones in Costa Rica.</a> J. Appl. Ecol. 29 (1), 150-162 (1992).</li><li>Schneider, S. S., McNally, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+foraging+patterns+and+colony+energy+status+in+the+African+honey+bee+Apis+mellifera+scutellata.">Spatial foraging patterns and colony energy status in the African honey bee Apis mellifera scutellata.</a> J. Insect Behav. 6 (2), 195-210 (1993).</li><li>Becerra-Guzman, F., Guzman-Novoa, E., Correa-Benitez, A., Zozaya-Rubio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Length+of+life,+age+at+first+foraging+and+foraging+life+of+Africanized+and+European+honey+bee+(Apis+mellifera)+workers,+during+conditions+of+resource+abundance.">Length of life, age at first foraging and foraging life of Africanized and European honey bee (Apis mellifera) workers, during conditions of resource abundance.</a> J. Api. Res. 44 (4), 151-156 (2005).</li><li>Saltykova, E. S., Lvov, A. V., Ben&#8217;kovskaya, G. V., Poskryakov, A. V., Nikolenko, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interracial+differences+in+expression+of+genes+of+antibacterial+peptides,+Abaecin,+Hymenoptaecin,+and+Defensin,+in+bees+Apis+mellifera+mellifera+and+Apis+mellifera+caucasica.">Interracial differences in expression of genes of antibacterial peptides, Abaecin, Hymenoptaecin, and Defensin, in bees Apis mellifera mellifera and Apis mellifera caucasica.</a> J. Evol. Biochem. Phys. 41 (5), 506-510 (2005).</li><li>Decanini, L. I., Collins, A. M., Evans, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+and+heritability+in+immune+gene+expression+by+diseased+honeybees.">Variation and heritability in immune gene expression by diseased honeybees.</a> J. Hered. 98 (3), 195-201 (2007).</li><li>Gilliam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiology+of+pollen+and+beebread:+the+genus+Bacillus.">Microbiology of pollen and beebread: the genus Bacillus.</a> Apidologie. 10 (3), 269-274 (1979).</li><li>Gilliam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiology+of+pollen+and+beebread:+the+yeasts.">Microbiology of pollen and beebread: the yeasts.</a> Apidologie. 10 (3), 43-53 (1979).</li><li>Gilliam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+roles+of+non-pathogenic+microflora+associated+with+honey+bees.">Identification and roles of non-pathogenic microflora associated with honey bees.</a> FEMS Microbiology Letters. 155 (1), 1-10 (1997).</li><li>Loper, G. M., Standifer, L. N., Thompson, M. J., Gilliam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemistry+and+microbiology+of+bee-collected+almond+(Prunus+dulcis)+pollen+and+beebread.+I.+Fatty+acids,+sterols,+vitamins,+and+minerals.">Biochemistry and microbiology of bee-collected almond (Prunus dulcis) pollen and beebread. I. Fatty acids, sterols, vitamins, and minerals.</a> Apidologie. 11 (1), 63-73 (1980).</li><li>Khachatryan, Z. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predominant+role+of+host+genetics+in+controlling+the+composition+of+gut+microbiota.">Predominant role of host genetics in controlling the composition of gut microbiota.</a> PLoS ONE. 3 (8), e3064 (2008).</li><li>Turnbaugh, P. J., Ley, R. E., Mahowald, M. A., Magrini, V., Mardis, E. R., Gordon, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+obesity+associated+gut+microbiome+with+increased+capacity+for+energy+harvest.">An obesity associated gut microbiome with increased capacity for energy harvest.</a> Nature. 444 (7122), 1027-1031 (2006).</li><li>Ley, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity+alters+gut+microbial+ecology.">Obesity alters gut microbial ecology.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 102 (31), 11070-11075 (2005).</li><li>Ley, R. E., Peterson, D. A., Gordon, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecological+and+evolutionary+forces+shaping+microbial+diversity+in+the+human+intestine.">Ecological and evolutionary forces shaping microbial diversity in the human intestine.</a> Cell. 124 (4), 837-848 (2006).</li><li>Standifer, L. N., McCaughey, W. F., Dixon, S. E., Gilliam, M., Loper, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemistry+and+microbiology+of+pollen+collected+by+honey+bees+(Apis+mellifera+L.)+from+almond,+Prunisdulcis.+II.+Protein,+amino+acids+and+enzymes.">Biochemistry and microbiology of pollen collected by honey bees (Apis mellifera L.) from almond, Prunisdulcis. II. Protein, amino acids and enzymes.</a> Apidologie. 11 (2), 163-171 (1980).</li><li>Human, H., Nicolson, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nutritional+content+of+fresh,+bee-collected+and+stored+pollen+of+Aloe+greatheadii+var+davyana+(Asphodelaceae).">Nutritional content of fresh, bee-collected and stored pollen of Aloe greatheadii var davyana (Asphodelaceae).</a> Phytochem. 67 (14), 1486-1492 (2006).</li><li>Schneider, S. S., DeGrandi-Hoffman, G., Smith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+African+honeybee:+Factors+contributing+to+a+successful+biological+invasion.">The African honeybee: Factors contributing to a successful biological invasion.</a> Ann. Rev. Entomol. 49, 351-376 (2004).</li><li>Winston, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+and+management+of+Africanized+honey+bees.">The biology and management of Africanized honey bees.</a> Annu. Rev. Entomol. 37, 173-193 (1992).</li><li>Woyke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brood-rearing+ef&#64257;ciency+and+absconding+in+Indian+honeybees.">Brood-rearing ef&#64257;ciency and absconding in Indian honeybees.</a> J. Apic. Res. 15 (3/4), 133-143 (1976).</li><li>Woyke, J., Fletcher, D. J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brood+rearing+and+absconding+of+tropical+honey+bees.">Brood rearing and absconding of tropical honey bees.</a> African Bees. , 96-102 (1977).</li><li>Winston, M. L., Otis, G. W., Taylor, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absconding+behavior+of+the+Africanized+honey+bee+in.">Absconding behavior of the Africanized honey bee in.</a> South America. J. Api. Res. 18 (2), 85-94 (1979).</li><li>Schneider, S. S., McNally, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+in&#64258;uencing+seasonal+absconding+in+colonies+of+the+African+honey+bee,+Apis+mellifera+scutellata.">Factors in&#64258;uencing seasonal absconding in colonies of the African honey bee, Apis mellifera scutellata.</a> Insectes Soc. 39 (4), 402-423 (1992).</li><li>Hepburn, H. R., Reece, S. L., Neumann, P., Moritz, R. F. A., Radloff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absconding+in+honeybees+(Apis+mellifera)+in+relation+to+queen+status+and+mode+of+worker+reproduction.">Absconding in honeybees (Apis mellifera) in relation to queen status and mode of worker reproduction.</a> Insectes Soc. 46 (4), 323-326 (1999).</li><li>Harrison, J. F., Fewell, J. H., Anderson, K. E., Loper, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+physiology+of+the+invasion+of+the+Americas+by+Africanized+honeybees.">Environmental physiology of the invasion of the Americas by Africanized honeybees.</a> Integr. Comp. Biol. 46 (6), 1110-1122 (2006).</li><li>DeGrandi-Hoffman, G., Eckholm, B. J., Huang, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+bee+bread+made+by+Africaized+and+European+honey+bees+(Apis+mellifera)+and+its+effects+on+hemolymph+protein+titers.">A comparison of bee bread made by Africaized and European honey bees (Apis mellifera) and its effects on hemolymph protein titers.</a> Apidologie. 44 (1), 52-63 (2013).</li><li>Cappelari, F. A., Turcatto, A. P., Morais, M. M., DeJong, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Africanized+honey+bees+more+efficiently+convert+protein+diets+into+hemolymph+protein+than+do+Carniolan+bee+(Apis+melliferacarnica).">Africanized honey bees more efficiently convert protein diets into hemolymph protein than do Carniolan bee (Apis melliferacarnica).</a> Genet. Mol. Res. 8 (4), 1245-1249 (2009).</li><li>Human, H., Nicolson, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nutritional+content+of+fresh,+bee-collected+and+stored+pollen+of+Aloe+greatheadii+var+davyana+(Asphodelaceae).">Nutritional content of fresh, bee-collected and stored pollen of Aloe greatheadii var davyana (Asphodelaceae).</a> Phytochem. 67, 1486-1492 (2006).</li><li>Bonvehi, J. S., Jorda, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nutrient+composition+and+microbiological+quality+of+honeybee-collected+pollen+in+Spain.">Nutrient composition and microbiological quality of honeybee-collected pollen in Spain.</a> J. Agric. Food Chem. 45 (3), 725-732 (1997).</li><li>Anderson, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+ecology+of+the+hive+and+pollination+landscape:+Bacterial+associates+from+floral+nectar,+the+alimentary+tract+and+stored+food+of+honey+bees+(Apismellifera).">Microbial ecology of the hive and pollination landscape: Bacterial associates from floral nectar, the alimentary tract and stored food of honey bees (Apismellifera).</a> PLoS ONE. 8 (12), e83125 (2013).</li><li>Southwick, E. E., Roubik, D. W., Williams, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+energy+balance+in+groups+of+Africanized+and+European+honey+bees:+ecological+implications.">Comparative energy balance in groups of Africanized and European honey bees: ecological implications.</a> Comp. Biochem. Physiol. A. 97 (1), 1-7 (1990).</li><li>Spivak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relative+success+of+Africanized+and+European+honey-bees+over+a+range+of+life-zones+in+Costa+Rica.">The relative success of Africanized and European honey-bees over a range of life-zones in Costa Rica.</a> J. Appl. Ecol. 29 (1), 150-162 (1992).</li><li>Francoy, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometric+and+genetic+changes+in+a+population+of+Apis+mellifera+after+34+years+of+Africanization.">Morphometric and genetic changes in a population of Apis mellifera after 34 years of Africanization.</a> Genet. Mol. Res. 8 (2), 709-717 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Yukarıda tarif edilen metotlar kullanılarak, AHB tarafından yapılan beebread AHB ve EHB hem daha büyük miktarlarda tüketilen olduğu bulunmuştur. EHB ve -AHB beebread her tür benzer miktarlarda tüketilen rağmen, -AHB yüksek hemolimf proteini titreleri bulunmaktaydı. AHB de Hemolimf protein düzeyleri aynı diyetler 26 beslenen olsa EHB daha yüksek olduğu nerede bizim yöntemlere dayalı bulgular daha önceki raporlara benzer. Hem EHB ve AHB tarafından farklı oranlarda tüketilen EBB ve ABB tüketimini ölçerek, her alttürde hemolimf protein konsantrasyonu artan gıda tüketimi tarafından gündeme olamayacağı belirlenmiştir. Hemşire arı yaş işçilerde hemolimf protein konsantrasyonu ve plato için ayar noktası EHB daha AHB yüksek olduğu bir plato gibi görünüyor. Polen depolama oranını optimize edecek beebread üretim için koloniler kurmak için birkaç önemli koşullar vardır. İlk olarak, kolonies açık yavrularıyla çerçeveleri gerekir. Beslemek açık damızlık olmadan, işçiler çok polen toplamak olmaz. Hiçbir ek yavru üretilir, böylece İkincisi, koloni queenless olmalıdır. Kuluçka yetiştirme polen büyük miktarlarda gerektirir ve sadece aşırı polen saklanır. EFA kurulan küçük koloniler halinde, koloniler queenless olması gerekir, böylece yavru alanları genişleyen sanki beebread olarak depolanır az polen olacaktır. Beebread yapılabilmesi için, son olarak, polen corbicular yükler olarak toplanır ve tarak hücrelerinde depolanmalıdır. Polen polen tuzakları toplanan ise, onlar corbicular yükler olarak toplamak, böylece arıların bunu sunmadan önce ince bir toz toprak olması gerekir. yöntemler beebread tüketimi yerine mutlak tahminlere göre nitel oluşturulan ölçmek için. Hücreler tamamen arı ekmek boşaltılması sırasında sayıldı tek tüketimi oldu. Toplam arı ekmek tüketiminin daha kesin bir tahmin arı br çıkararak elde edilebilirhücrelerden ead öncesi ve çalışma dönemi sonrasında tartılır olabilir bir börek içine yapım. Ancak, onlar bir koloni olur ve belki de çalışma dönemi sırasında işlemeye devam gibi arılar üzerinde yem diye hücrelerde arı ekmek tutmak istedim. Ağırlık artışı olabilir, çünkü arılar, bazı hücrelerde kendilerine beslenen seyreltilmiş bal koymak çünkü Çalışma öncesi ve sonrası tarak bölümlerinin ağırlık farkı tüketim tahmini olarak kullanılan değildi. İşçiler ayrıca arı ekmeği ile seyreltilmiş bal bazı eklemiş olabilir. Bu nedenlerden dolayı, besleme süresinden önce ve sonra arı ekmek yaklaşık olarak eşit miktarlarını ihtiva eden hücreler sayıldı ve niteliksel bir ölçüm elde edildi. Yine de, 11 gün sonra EBT kıyasla sayılır boş ABB hücrelerin sayısında beebread iki tür arasında çarpıcı bir farklılık yoktu. Saklanan polen beebread olur zaman belirleme olabilir diarılar sürekli hücrelere polen ekleyin çünkü fficult. arılar polen toplamak bu yüzden üretim beebread için kullanılan koloniler açık damızlık çerçeveler ile kurulmuştur. Koloni kurulduktan sonra larvalar yaklaşık 9 gün boyunca beslemek için vardı ancak, koloniler queenless edildi. 3 haftalık süre kalanı için kolonileri EFA, toplanan arılar depolanan ve beebread dönüştürülen polen içinde bulunduğumuz zaman. Kafeslerde arılar onu besleyen ek 11 gün süreyle tarak hücrelerinde depolanan polen tutulması da beebread için polen işleme devam etmiş olabilir. arı ekmek polen dönüşüm yaklaşık 7 gün 8 sürer. EHB ve AHB beslenen beebread düşük pH ve polen beslenen kıyasla daha düşük bir protein konsantrasyonları. Dönüşüm beebread sonra polen değişikliklerin benzer bulgular diğerleri 7,10,27 tarafından rapor edilmiştir. Bizim sonuçlar ancak önceki raporlardan farklı, ki konsantrasyonlarda farklılıklar o vardıbeebread ve polen ile f bazı amino asitler yer alır. hem protein ve amino asit konsantrasyonlarında değişiklikler proteolitik enzimlerin aktivitesi nedeniyle olabilir, kaynak arılar kendileri veya beebread 7,8,28,29 yılında kurulan mikrobiyal topluluklar olabilir. Protein konsantrasyonunun ölçülmesi için kullanılan yöntem daha önce Africanized ile diyet protein ve Avrupa arı 26 etkilerini belirlemek için tarif edilenlere benzerdir. Yöntemlerden bir uzantısı olarak, biz polen ve beebread çözünür protein tahmin başardık. Bu yöntemler, daha önceki raporlarda 7,10,27 benzer bulgular oluşturulur. Bulgularımız AHB daha verimli EHB fazla diyet protein asimile olduğunu, ve bu göç ve 30-32 kurulan haline gelmiştir çoğu bölgelerde AHB ekolojik hakimiyeti önemli bir faktör olabilir ek kanıtlar sunmaktadır.

Beslenme bal arısı kolonilerinin sağlık ve canlılığı ve nüfus olarak kendi işyerinde temel bir rol oynar. Gıda Besinler enerji ve kuluçka yetiştiriciliği, termoregülasyon için gerekli biyokimyasal bileşenleri, yiyecek arama ve immün yanıtı sağlamak. Bal arısı kolonilerinin için, besin koloni popülasyonları büyümek ve sağlık nektar ve polen gelen korumak için gerekli. Nektar karbonhidrat sağlar ve polen gibi protein, lipit, vitamin ve mineraller 1 olarak kalan beslenme gereksinimleri sağlamaktadır. Bal arılarının subspecies gibi işçi uzun ömürlü, yavru yetiştiriciliği ve sosyal dokunulmazlık 2-6 mekanizmaları gibi besin temelli koloni düzeyinde parametreleri farklı olabilir. Bu farklılıklar gıda, özellikle polen kolonisi tarafından işlenen ve bireylerde sindirilir nasıl bağlantılı olabilir. Polen kimyasal değişti tarak hücrelerinde ve mikrobik kaynaklı laktik asit fermantasyonu ile saklanır <sup&gt; 7-10. Fermente polen beebread olarak adlandırılır. Orada topladıkları polen ve mağaza besin elde etme yeteneği alttür arasındaki genotipik farklılıklar olabilir ve bu koloni büyüme ve hayatta kalma etkileyebilir. Gıda işleme ve besin edinimine genotipik etkileri aynı gıdalar 11-14 tüketirken bazı kişiler diğerlerinden daha fazla besin ve kalori elde etmek neden diğer organizmalarda belgelenmiştir. Burada bal arılarının değişik alttürü tarafından yapılan kompozisyon ve beebread tüketimini karşılaştırmak için kullanılan yöntemleri açıklar. Yöntem işçi arıların neden hemolimf protein titreleri de tarif edilmiştir ölçmek için. Beebread besin bileşimine Önceki çalışmalar Avrupa bal arıları (EHB) 10,15,16 ile yapıldı. Ancak, aynı polen yem bile farklı alttür arılar tarafından yapılan beebread farklılıklar olabilir. EHB ve AHB karşılaştırıldı bu denizaltılar, çünküPECIES gıda işleme ve besin satın 17 ile ilgili olabilecek farklı davranış ve fizyolojik farklılıklar var. En önemli farklılıkların bazıları AHB toplamak ve EHB daha fazla polen tüketmek ve kuluçka 18 içine daha kolay dönüştürmek gibi görünüyor vardır. AHB kolonileri EHB daha yüksek kaynaşma fiyat bilgisi ve gıda kaynaklarının kısıtlı 19-23 olduğunda abscond. Absconding EHB nadirdir. AHB de EHB 24 daha yüksek metabolik oranları var. EHB ve AHB arasındaki koloni düzeyi farklılıklarını beslenme temeli ve aynı zamanda besin içeriği o beebread dönüştürülür sonra (örneğin, amino asitler ve protein) için polen toplama oranı ile ilişkili olabilir. Beebread tüketimi ve ortaya çıkan protein edinimi de EHB ve AHB arasındaki koloni düzeyinde farklılıklar bir rol oynayabilir. Geliştirilen yöntemleri kullanarak, EHB ve AHB aynı polen kaynağı beebread yaptı. beebread sonra EAC arılar geri beslenmiştirh alttürü ve arılar kendi alttür veya beebread kaynağına özgü bir şekilde beebread proteini elde olmadığını belirleyebilir.

<table><tbody><tr><td>waterproof double junction pH spear&amp;nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coffee Grinder</td><td>Mr. Coffee&amp;nbsp;</td><td>model 1DS77</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&#039;s phosphate buffer solution</td><td>Emd-millipore</td><td>BSS-1005-B</td><td></td></tr><tr><td>EIA/RIA polystyrene plate</td><td>Sigma-Aldrich-Corning</td><td>CLS3590-100EA</td><td></td></tr><tr><td>microcapillary pipets</td><td>Kimble Glass Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Quick Start Bradford Protein Assay Kit 2&amp;nbsp;</td><td>Bio-Rad</td><td>#500-0202</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotometer</td><td>Biotek Synergy HT&amp;nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mass Selective Detector&amp;nbsp;</td><td>Agilent</td><td>5973N</td><td></td></tr><tr><td>HLB cartridge</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>gas chromatograph&amp;nbsp;</td><td>Agilent</td><td>6930</td><td></td></tr><tr><td>&amp;nbsp;gas chromatography column&amp;nbsp;</td><td>A J&amp;amp;W Scientific&amp;nbsp;</td><td>DB-1701</td><td></td></tr><tr><td>d&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;-alanine&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>488917</td><td></td></tr><tr><td>d&lt;sub&gt;23&lt;/sub&gt;-lauric acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>451401</td><td></td></tr><tr><td>&lt;sup&gt;13&lt;/sup&gt;C&lt;sub&gt;6&lt;/sub&gt;-glucose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>389374</td><td></td></tr><tr><td>Pyridine&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>270970</td><td></td></tr><tr><td>N,O-Bis (trimethylsilyl)trifluoroacetamide +&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Trimethylchlorosilane (BSTFA + TMCS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>33148</td><td></td></tr><tr><td>Perfluorotributylamine (PFTBA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>442747-U</td><td></td></tr><tr><td>&lt;sup&gt;d39&lt;/sup&gt;-arachidiac acid</td><td>Cambridge Isotope&amp;nbsp;</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

methods for comparing nutrients in beebread made by africanized and european honey bees and the effects on hemolymph protein titers

Bal arılarının beebread olarak kovanda topladıkları polen ve mağaza besinleri almak. Biz arıların toplamak ve özel olarak inşa edilmiş kapalı uçuş alanı koloniler koyarak beebread dönüştürmek polen kaynağını kontrol etmek yöntemler geliştirdi. Yöntem polen ve beebread protein ve amino asidi bileşimi analizi için geliştirilmiştir. Biz de beebread tüketimi ölçülen ve yöntemler ortaya çıkması sonrasında 4, 7 ve 11 gün süreyle beebread üzerinde beslendikten sonra yetişkin işçi arı hemolimf protein titreleri belirlemek için kullanılmıştır açıklar. Yöntem genotip beebread polen dönüştürmeyi ve arılar tüketir ve bu proteini elde oranını etkiler olup olmadığını belirlemek için kullanılmıştır. İki alttür (Avrupa ve Africanized bal arıları, sırasıyla EHB ve AHB) aynı polen kaynağı ile sağlandı. Gelişmiş yöntemlere dayanarak, her iki alt türü tarafından yapılan beebread polen daha düşük protein konsantrasyonu ve pH değerlerine sahiptirler. Genel olarak, asit con aminoya EHB veya AHB tarafından yapılan beebread olarak deùerleri benzerdir ve polen daha beebread yüksek seviyelerde gerçekleşmiştir. -AHB Ve EHB Hem EHB göre daha AHB yapılan beebread önemli ölçüde daha fazla tüketilmesi. EHB ve -AHB beebread her tür benzer miktarlarda tüketilen rağmen, AHB içinde hemolimf protein konsantreleri EHB daha yüksek bulunmuştur. AHB ve EHB arasındaki protein edinimi farklılıklar her alttür gelişti coğrafi bölge ile ilgili çevresel uyarlamalar yansıtıyor olabilir. Bu farklılıklar nedeniyle damızlık yetiştiriciliği ve koloni gelişimi üzerindeki etkileri Yeni Dünya AHB nüfus başarılı kurulmasına katkıda bulunabilir.

<html> Beebread pH ve protein konsantrasyonu için analiz edilmeden önce en az bir ay süreyle -80 ° C&#39;de saklanır ve amino asit analizi önce yaklaşık 4 ay süren. Beebread pH ve protein konsantrasyonu (Şekil 1) polen ile farklılaştığı keşfedildi. Protein konsantrasyonu olarak beebread pH polen daha düşüktür. EHB ve -AHB Hem EBT (Şekil 2) daha fazla ABB tüketti. AHB hemolimfi çözünür protein seviyeleri, tüketilen beebread tipine (Şekil 3) EHB önemli ölçüde daha yüksek idi. EHB ve -AHB beebread her tür benzer miktarlarda tüketilen halde hemolimf protein düzeylerinde bu farklılıklar meydana geldi. örnekleme sırasında arıların yaşı anlamlı hemolimfteki çözünür protein konsantrasyonları etkilemiştir. Protein konsantrasyonları farklı değildi gün-7 ya da 11 ile karşılaştırıldığında gün 4 arılar anlamlı olarak düşüktü. bal arıları için gerekli olan 10 amino asitlerden _content &quot;&gt;, histidin ama polen tespit edilmiştir. Bir çok durumda, beebread ölçülen amino asit konsantrasyonu (Şekil 4). Örneğin, konsantrasyon polen daha yüksekti lösin ve treonin poleni ile karşılaştırıldığında beebread yaklaşık% 60 daha yüksek olduğu, ve valin konsantrasyonları, yaklaşık% 25 daha yüksekti. Alanin, aspartik asit, glutamin, ve metiyonin düzeyleri de polen daha beebread yüksekti. Amino asitler konsantrasyonları arasında büyük farklılık fenilalanin ve sistein hariç ABB ve PDR. Fenilalanin seviyeleri EBT veya polen ya kıyasla ABB ile ilgili olarak iki kat daha yüksektir. Sistein konsantrasyonları ABB veya polen ile karşılaştırıldığında EBT düşüktü. Triptofan da daha yüksek konsantrasyonlarda, sadece amino asit mevcuttu EBB veya polen ve ABB prolin ABB. Konsantrasyonlu daha polen EBB daha yüksekti. Şekil 1: pH (A) ve polen çözünür protein konsantrasyonları (B) ve Avrupa (EHB) veya Africanized (AHB) bal arıları tarafından yapılan beebread karşılaştırılması. polen pH varyans analizi ile tespit edildiği üzere beebread önemli ölçüde daha yüksek (F 2,12 = 3725, p &lt;0.0001) bir Tukeys W-çoklu karşılaştırma testi ile gerçekleştirilmiştir. polen protein konsantrasyonu EHB (EBB) veya AHB (ABB) tarafından yapılan beebread göre anlamlı olarak yüksek bulundu (F 2,27 = 16.49; p &lt;0.0001). Aynı harfle takip edilen araçlar 0.05 düzeyinde önemli ölçüde farklı değildir. <img alt="Şekil 2," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52448/52448fig2highres.jpg" width="600" /> Şekil 2: cel ortalama yüzdesiTamamen kafesli arılar tarafından 11 günlük süre üzerinde tüketilen beebread içeren ls. beebread aynı polen kaynağı kullanılarak ya Avrupa (EHB) veya Africanized (AHB) arılar tarafından yapılmıştır. Araçlar, her tedavinin beş kafesleri tahmin edilmiştir; Bir tek yönlü varyans analizi (F 3,16 = 7.3, p = 0.003) ve Tukey B testi ile tespit edildiği üzere aynı harf olan 0.05 düzeyinde önemli ölçüde farklı değildir. Bu Şekil 25 modifiye edilmiştir. <img alt="Şekil 3," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52448/52448fig3highres.jpg" width="600" /> Şekil 3: 4, 7, ve 11 gün süreyle Avrupa (EBB) veya Africanized (ABB) arılar tarafından yapılan Avrupa (EHB) veya Africanized gelen hemolimfteki proteinin ortalama konsantrasyonu (AHB) bal arılarının beslenen beebread bir tekrarlı ölçümler analizi. Varyans 4 Akne tedavi edici arasında önemli farklılıklar belirtilentment grupları (F 3,20 = 19.7, p &lt;0.001). AHB beslenen ABB çözünür protein düzeyleri EHB beslenen ABB (p = 0.008) veya EBB (p = 0.018) anlamlı olarak yüksek bulunmuştur. örnekleme sırasında arıların yaşı anlamlı hemolimfteki çözünür protein konsantrasyonları etkilemiştir. Seviyeleri gün 7 (p &lt;0.0001) veya 11 (p = 0.001) ile karşılaştırıldığında gün-4 arı anlamlı olarak düşüktü. Gün 7 ve 11.Gün arılar (p = 0.149) farklılık yoktu. Bu rakam, 25 modifiye edilmiştir. <img alt="Şekil 4," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52448/52448fig4highres.jpg" width="600" /> Şekil 4:. Amino asitlerin konsantrasyonları (polen gramı başına ug veya beebread) polen ya da EBT yapılmış beebread Avrupa arıları tarafından yapılan beebread ve ABB Afrikalılaşmış arıları tarafından yapılmıştır. Triptofan, sistein, fenilalanin ve prolin ön açıklık amacıyla ayrı ayrı çizilmiştironların miktarda reyi. Bu rakam, 25 modifiye edilmiştir.

Watch this Scientific Journal Video about Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers at JoVE.com

Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Here are methods to quantify nutrients in pollen before and after its conversion to beebread by two subspecies of honeybees. We describe techniques to measure beebread consumption and resulting protein titers in both subspecies.

Africanized ve Avrupa Bal Arısı Made by beebread besin tuzu karşılaştırılması yöntemleri ve Hemolenf Protein Titrelerin Etkileri

Honey bees obtain nutrients from pollen they collect and store in the hive as beebread. We developed methods to control the pollen source that bees ...

methods-for-comparing-nutrients-beebread-made-africanized-european

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Biology

10.6K Görüntüleme.  USDA-ARS. Here are methods to quantify nutrients in pollen before and after its conversion to beebread by two subspecies of honeybees. We describe techniques to measure beebread consumption and resulting protein titers in both subspecies. 

Video: Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Empirical, Metagenomic, and Computational Techniques Illuminate the Mechanisms by which Fungicides Compromise Bee Health

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered &#34;bee-safe,&#34; there is mounting evidence that fungicide residues in pollen are associated with bee declines (for both honey and bumble bee species). While the mechanisms remain relatively unknown, researchers have speculated that bee-microbe symbioses are involved. Microbes play a pivotal role in the preservation and/or processing of pollen, which serves as nutrition for larval bees. By altering the microbial community, it is likely that fungicides disrupt these microbe-mediated services, and thereby compromise bee health. This manuscript describes the protocols used to investigate the indirect mechanism(s) by which fungicides may be causing colony decline. Cage experiments exposing bees to fungicide-treated flowers have already provided the first evidence that fungicides cause profound colony losses in a native bumble bee (Bombus impatiens). Using field-relevant doses of fungicides, a series of experiments have been developed to provide a finer description of microbial community dynamics of fungicide-exposed pollen. Shifts in the structural composition of fungal and bacterial assemblages within the pollen microbiome are investigated by next-generation sequencing and metagenomic analysis. Experiments developed herein have been designed to provide a mechanistic understanding of how fungicides affect the microbiome of pollen-provisions. Ultimately, these findings should shed light on the indirect pathway through which fungicides may be causing colony declines.

Microbial consortia within bumble bee hives enrich and preserve pollen for bee larvae. Using next generation sequencing, along with laboratory and field-based experiments, this manuscript describes protocols used to test the hypothesis that fungicide residues alter the pollen microbiome, and colony demographics, ultimately leading to colony loss.

Ampirik, Metagenomic ve bilgisayar teknikleri mekanizma hangi mantar ilaçları uzlaşma arı sağlık ile aydınlatmak

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered ...

Çevre

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

Koloni Düzeyde Bireysel olan Bal Arısı Kalkınma Çevre Kimyasalların Etkisinin Değerlendirilmesi

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide regulation studies. The risk of exposure to fungicide residues is likely to be especially high if the spray occurs on, or near host plants while the bees are collecting pollen to provision their nests. For species of Osmia that consume pollen from a select group of plants (oligolecty), the inability to use pollen from non-host plants can increase their risk factor for fungicide-related toxicity. This manuscript describes protocols used to successfully rear oligolectic mason bees, Osmia ribifloris sensu lato, from egg to prepupal stage within cell culture plates under standardized laboratory conditions. The in vitro-reared bees are subsequently used to investigate the effects of fungicide exposure and pollen source on bee fitness. Based on a 2 &#215; 2 fully crossed factorial design, the experiment examines the main and interactive effects of fungicide exposure and pollen source on larval fitness, quantified by prepupal biomass, larval developmental time, and survivorship. A major advantage of this technique is that using in vitro-reared bees reduces natural background variability and allows the simultaneous manipulation of multiple experimental parameters. The described protocol presents a versatile tool for hypotheses testing involving the suite of factors affecting bee health. For conservation efforts to be met with significant, lasting success, such insights into the complex interplay of physiological and environmental factors driving bee declines will prove to be critical.

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Fungicide sprays on flowering plants may expose solitary bees to high concentrations of pollen-borne fungicide residues. Using laboratory-based experiments involving in vitro-reared bee larvae, this study investigates the interactive effects of consuming fungicide-treated pollen derived from host and non-host plants.

Vitro Yalnız arı yetiştirme: larva Risk faktörleri değerlendirmek için bir araç

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide ...

Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee (Apis mellifera) Workers

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired glands that are located in the head of the bee are highly sensitive to the quantity and quality of pollen and pollen substitutes that the nurse bee consumes. The glands get smaller when nurses are fed deficient diets and are large when they are fed complete diets. Because nurse hypopharyngeal gland size is a robust indicator of nurse nutrition, it is essential that those studying honey bee nutrition know how to measure these glands. Here, we provide detailed methods for dissecting, staining, imaging, and measuring nurse bee hypopharyngeal glands. We present comparisons of unstained and stained tissue and data that were used to study the impact of pollen on gland size. This method has been used to test how diet impacts hypopharyngeal gland size but has further use for understanding the role of these glands in hive health.

Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee Apis mellifera Workers

Hypopharyngeal gland acinus size is a robust measure of nurse honey bee nutrition. Here, we provide a detailed protocol for dissecting, staining, imaging, and measuring nurse bee hypopharyngeal gland acini.

Ölçüm Hypopharyngeal bezi Acinus boyutunda bal arı (Apis mellifera) işçi

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired ...

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees (Bombus terrestris)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from flowering plants. Only a few studies have described the gustatory responses of bees toward toxins in food, and these experiments have mainly used the proboscis extension response on restrained honey bees. Here, a new behavioral assay is presented for measuring the feeding responses of freely-moving, individual worker bumble bees to nutrients and toxins. This assay measures the amount of solution ingested by each bumble bee and identifies how tastants in food influence the microstructure of the feeding behavior.
The solutions are presented in a microcapillary tube to individual bumble bees that have been previously starved for 2-4 hr. The behavior is captured on digital video. The fine structure of the feeding behavior is analyzed by continuously scoring the position of the proboscis (mouthparts) from video recordings using event logging software. The position of the proboscis is defined by three different behavioral categories: (1) proboscis is extended and in contact with the solution, (2) proboscis is extended but not in contact with the solution and (3) proboscis is stowed under the head. Furthermore the speed of the proboscis retracting away from the solution is also estimated.
In the present assay the volume of solution consumed, the number of feeding bouts, the duration of the feeding bouts and the speed of the proboscis retraction after the first contact is used to evaluate the phagostimulatory or the deterrent activity of the compounds tested.
This new taste assay will allow researchers to measure how compounds found in nectar influence the feeding behavior of bees and will also be useful to pollination biologists, toxicologists and neuroethologists studying the bumble bee&#39;s taste system.

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees Bombus terrestris

A novel behavioral assay is described for investigating the short term gustatory responses of the mouthparts of freely-moving bumble bees (Bombus terrestris) toward nutrients and toxins in solution.

A Novel Davranış Testi (Bumble Bees Serbestçe hareket eden Bireyin Tat Cevapları, Araştırma<em&gt; Bombus terrestris</em&gt;)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from ...

Nörobilim

Preparation of Single-cohort Colonies and Hormone Treatment of Worker Honeybees to Analyze Physiology Associated with Role and/or Endocrine System

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related division of labor). Young workers are engaged in nursing the brood (nurse bees), while older workers are engaged in foraging for nectar and pollen (foragers). The physiology of the workers changes in association with this role shift. For example, the main function of the hypopharyngeal glands (HPGs) changes from the secretion of major royal jelly proteins (MRJPs) to the secretion of carbohydrate-metabolizing enzymes. Because worker tasks change as the workers age in typical colonies, it is difficult to discriminate the physiological changes that occur with aging from those that occur with the role shift. To study the physiological changes in worker tissues, including the HPGs, in association with the role shift, it would be useful to manipulate the honeybee colony population by preparing single-cohort colonies in which workers of almost the same age perform different tasks. Here we describe a detailed protocol for preparing single-cohort colonies for this analysis. Six to eight days after single-cohort colony preparation, precocious foragers that perform foraging tasks earlier than usual appear in the colony. Representative results indicated role-associated changes in HPG gene expression, suggesting role-associated HPG function. In addition to manipulating the colony population, analysis of the endocrine system is important for investigating role-associated physiology. Here, we also describe a detailed protocol for treating workers with 20-hydroxyecdysone (20E), an active form of ecdysone, and methoprene, a juvenile hormone analogue. The survival rate of treated bees was sufficient to examine gene expression in the HPGs. Gene expression changes were observed in response to 20E- and/or methoprene-treatment, suggesting that hormone treatments induce physiological changes of the HPGs. The protocol for hormone treatment described here is appropriate for examining hormonal effects on worker physiology.

Here we describe our detailed protocol for the preparation of single-cohort honeybee colonies&#160;&#8211; a useful tool for analyzing the role-associated worker physiology. We also describe detailed protocols for treating workers with juvenile hormone and ecdysone to evaluate the involvement of these hormones in the regulation of worker behavior and/or physiology.

Tek kohort Kolonileri ve İşçi arıların Hormon Tedavisi hazırlanması Rolü ve / veya Endokrin Sistemi Fizyolojisi İlişkili Analiz

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related ...

Obtaining Specimens with Slowed, Accelerated and Reversed Aging in the Honey Bee Model

Societies of highly social animals feature vast lifespan differences between closely related individuals. Among social insects, the honey bee is the best established model to study how plasticity in lifespan and aging is explained by social factors.
The worker caste of honey bees includes nurse bees, which tend the brood, and forager bees, which collect nectar and pollen. Previous work has shown that brain functions and flight performance senesce more rapidly in foragers than in nurses. However, brain functions can recover, when foragers revert back to nursing tasks. Such patterns of accelerated and reversed functional senescence are linked to changed metabolic resource levels, to alterations in protein abundance and to immune function. Vitellogenin, a yolk protein with adapted functions in hormonal control and cellular defense, may serve as a major regulatory element in a network that controls the different aging dynamics in workers.
Here we describe how the emergence of nurses and foragers can be monitored, and manipulated, including the reversal from typically short-lived foragers into longer-lived nurses. Our representative results show how individuals with similar chronological age differentiate into foragers and nurse bees under experimental conditions. We exemplify how behavioral reversal from foragers back to nurses can be validated. Last, we show how different cellular senescence can be assessed by measuring the accumulation of lipofuscin, a universal biomarker of senescence.
For studying mechanisms that may link social influences and aging plasticity, this protocol provides a standardized tool set to acquire relevant sample material, and to improve data comparability among future studies.

In honey bee workers, aging depends on social behaviors rather than on chronological age. Here we show how worker-types with very different aging patterns can be obtained and analyzed for cellular senescence.

, Yavaşlatıldı Hızlandırılmış ve Ters Honey Bee Model Yaşlanma ile Örneklerin Alınması

Societies of highly social animals feature vast lifespan differences between closely related individuals. Among social insects, the honey bee is the best ...

Biyoloji

Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment methods. Here we describe methods to measure the quantities of adult bees, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, by photographing frames, and by installing hives on scales and with internal sensors. Data from these periodic evaluations are then combined with running average and daily detrended data on hive weight and internal hive temperature. The resulting datasets have been used to detect colony-level effects of imidacloprid applied in a sugar syrup as low as 5 parts per billion. The methods are objective, require little training, and provide permanent records in the form of sensor output and photographs.

Sublethal doses of pesticides may affect colonies in ways that are difficult to detect using only periodic or visual methods. Methods to measure total adult bee mass, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, photographing frames, and installing sensors, are provided. Data analysis is also addressed.

Bal arıları üzerinde Sublethal pestisit pozlama koloni düzeyi etkilerinin izlenmesi

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment ...

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee (Bombus) Hive Entrances

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis. This has traditionally been done by netting foragers at nest entrances or on flowers, chilling the bees on ice, and then removing the pollen loads from the corbiculae with forceps or a brush. This method is time and labor intensive, may alter normal foraging behavior, and can result in stinging incidents for the worker performing the task. Pollen traps, such as those used on honey bee hives, collect pollen by dislodging corbicular pollen loads from the legs of workers as they pass through screens at the nest entrance. Traps can remove a large quantity of pollen from returning forager bees with minimal labor, yet to date no such trap is available for use with bumble bee colonies. Workers within a bumble bee colony can vary in size making size selection of entrances difficult to adapt this mechanism to commercially reared bumble bee hives. Using 3D printing design programs, we created a pollen trap that successfully removes the corbicular pollen loads from the legs of returning bumble bee foragers. This method significantly reduces the amount of time required by researchers to collect pollen from bumble bee foragers returning to the colony. We present the design, results of pollen removal efficiency tests, and suggest areas of modifications for investigators to adapt traps to a variety of bumble bee species or nest box designs.

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

We present a non-lethal and automated mechanism to collect pollen from bumble bee (Bombus) workers returning to a hive. Instructions for producing, preparing, installing and using the devices are included. By using 3D-printed objects, modification to the design was timely, efficient and allowed for quick turnaround for testing.

Bombus Arısı (Bombus) Kovan Girişleri için 3D Baskılı Polen Tuzağı

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis.  ...

Assessing Agrochemical Risk to Mated Honey Bee Queens

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not accurately capture the effects of agrochemical exposure on honey bee queens. As the sole producer of fertilized eggs inside a honeybee colony, the queen is arguably the most important single member of a functioning colony unit. Therefore, understanding how agrochemicals affect queen health and productivity should be considered a critical aspect of pesticide risk assessment. Here, an adapted method is presented to expose honey bee queens and worker queen attendants to agrochemical stressors administered through a worker diet, followed by tracking egg production in the laboratory and assessing first instar eclosion using a specialized cage, referred to as a Queen Monitoring Cage. To illustrate the method&#39;s intended use, results of an experiment in which worker queen attendants were fed diet containing sublethal doses of imidacloprid and effects on queens were monitored are described.

This protocol was developed to enhance the understanding of how agrochemicals affect honey bee (Apis mellifera) reproduction by establishing methods to expose honey bee queens and their worker caretakers to agrochemicals in a controlled, laboratory setting and carefully monitoring their relevant responses.

ÇiftLeşme Bal Arısı Kraliçeleri için Tarımsal Kimyasal Riskin Değerlendirilmesi

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not ...