Name: reproducable paraplegia by thoracic aortic occlusion in a murine model of spinal cord ischemia-reperfusion
Uploaded: 2014-03-03T21:55:00.000+00:00
Duration: 5 min 59 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion at JoVE.com

Biz bu projeye Mali Destek Araştırma ve Eğitim Göğüs Cerrahisi Vakfı&#39;na teşekkür etmek istiyorum.

1.. Ameliyat öncesi hazırlık ve Anestezi <ol><li> Prosedür boyunca steril tekniği gözlemlemek için emin olun. Tüm aletleri yatıyordu. </li><li> Bu uygun bir sıcaklıkta (36.5 ° C) ısınmaya böylece önce anestezi indüksiyonu için sıcaklık kontrol yatak açın. Lazer Doppler perfüzyon monitörde güç indüksiyon sırasında önyükleme böylece. </li><li> Indüksiyon odasında fare yerleştirin. <ol><li> Dikkatle indüksiyon sırasında fare solunum hızını izlemek. </li><li> En kısa sürede solunum hızı görsel yavaşladı gibi, indüksiyon odasından fareyi çıkarın. </li><li> Anestezik yeterliliğini değerlendirmek için ayak tutam gerçekleştirin. </li></ol></li><li> Yatar pozisyonda fare düzgün anestezi ile, yer fare. </li><li> Burun konisi içine gelecek şekilde yerleştirin ve ısıtma tabloya tüm ekstremitelerde sabitleyin. <ol><li> Ekstremiteler hiçbir deviati ile, anatomik pozisyonda güvenli olduğundan emin olmak için özel dikkatbir tarafa on. Fare yanlış konumlandırılmış ise, sternotomi sırasında internal torasik arter transekte önlemek zordur. </li></ol></li><li> Tırnak makası ya da piyasada satılan epilasyon kremi kullanarak, orta hat toraks saç kaldırmak ve alt ekstremite ventral yüzeyi bıraktı. <ol><li> Epilasyon kremi kullanarak, daha büyük 30 saniye yerinde bırakarak krem ​​önlemek ise, hem alkali yanıkları oluşabilir. </li></ol></li><li> Yeterli anestezi sağlamak için volatil anestezik buharlaştırıcı konsantrasyonu titre. <ol><li> Yüksek akış O 2 ile izofluran kullanılarak% 1-5 arasında beklenen buharlaştırıcı fraksiyonları. </li><li> Uçucu anestezi buharlaştırıcı konsantrasyonu kendiliğinden muhafaza ederken, solunumda cerrahi uyarılması sırasında anesteziyi muhafaza etmek üzere titre edilmelidir. </li></ol></li></ol> 2. Rektal Probe Lazer Doppler Yerleştirme <ol><li> Farenizin rektum içine yağlanmış rektal prob takın. Oper için yerinde sabitlemekyatak ating. </li><li> 36.5 ° C&#39;lik bir hedef rektal sıcaklık için ısıtma yatak ayarlayın </li><li> Fare femoral arter üzerinde küçük bir kesi yapmak ve uzak deri altı doku cildi teşrih. </li><li> Femoral arter üzerinde lazer Doppler probu yerleştirin. </li><li> Perfüzyon monitör 800 perfüzyon birimleri daha büyük kaydeder kadar prob pozisyonlarını ayarlayın. <ol><li> Sıkıca güvenli prob. Yanlış güvence probları yanlış düşük perfüzyon ölçümleri olabilir. </li></ol></li></ol> 3. Aort Arch / Köprücük Arter diseksiyonu <ol><li> Sternal çentik yukarıda 2 cm&#39;lik cilt kesi yapın ve yavaşça deri altı doku cildi teşrih. </li><li> Submandibular bez ücretsiz teşrih. <ol><li> Kanama oluşursa, hafif basınç bir pamuklu çubukla ile uygulanabilir. </li><li> Avasküler düzlemde orta hat boyunca submandibular bez bölün. </li></ol></li><li> Forseps ile yavaşça sternum ve SCISS kullanarak kaldırınors sternum orta hat boyunca 1 cm orta hat sternotomi olun. orta hattan herhangi bir sapma, kontrol etmek zor olacaktır internal meme arteri kanama neden olabilir. </li><li> Sternum kenarında her tarafta 5-0 retraksiyon sütür koyun ve yanal işletim yatağa sütür güvence sternum çekin. Pnömotoraks önlemek için çok yanal çekilme sütürler yerleştirmekten kaçının. </li><li> Trakea boyunca künt diseksiyon ücretsiz kayış kasları kullanma. Sol kayış kas maruz geliştirmek için makas ile ayrılabilir. </li><li> Çevreleyen dokudan timus ücretsiz teşrih. Büyük damarlar görüntülenmiştir kadar künt diseksiyon devam edin. Plevral boşluğa girişini önlemek için aşırı dikkatli kullanın. </li><li> Arkus aorta ve sol subklavyen arter vasküler kelepçeler yerleştirin. </li><li> Doğrulayın uzak akışı uygun bozdu. Bu perfüzyon birimlerde bir&gt;% 90 azalma olarak görülecektir. <ol><li> Desi için tıkanıklığına devam4-8 dakika için kırmızı. </li></ol></li><li> Vasküler kelepçesini çıkarın ve göğüs kapanmasından önce hemostaz doğrulayın. </li></ol> 4. Sternotomi ve Cilt Kapatma <ol><li> Farenin sol tarafında geri çekme dikiş çıkarın. </li><li> Doğru çekilme sütür ile sternotomi kapatın. <ol><li> (Önceden yerleştirilen geri çekme dikiş kullanarak) Tek sternum sütür sternum kapatılması için yeterli değildir. Başka bir dikiş yerleştirme gereksiz ve pnömotoraks ve kanama riskini artırır. </li></ol></li><li> 5-0 dikiş çalışan yakın bir cilt. </li></ol> 5. Kurtarma ve Postoperatif Değerlendirme <ol><li> Kurtarma kafesine fare aktarın. Kafes kurtarma haznesinin çevre sıcaklığı artırmak ve çevreye ısı kaybını azaltmak için bir ısıtma pedi üzerine yerleştirilmelidir. </li><li> Yakından işaretler solunum sıkıntısı veya nöbet aktivitesi için fareyi izlemek. Kurum kurallarına göre analjezi yönetmek. Euthanize fareler hemen nöbet veya solunum sıkıntısı görülmektedir eğer. <ol><li> CO2 odası ötenazi bizim tercih edilen bir yöntemdir. CO2 mevcut değilse, servikal dislokasyon başka bir seçenektir. </li><li> Tam iyileşme kullanılan uçucu anestetik ve konsantrasyon uzunluğuna bağlı olarak, 1-2 saat beklenebilir. </li></ol></li><li> Normal kafes fare dönün. Kafesin kat yiyecek ve su yer yerleştirin. </li><li> Locomotion 8 Basso Fare Ölçeği ile 12 saat aralıklarla nörolojik durumunu değerlendirin. </li></ol>

<ol>
	<li>Conrad, M. F., Ye, J. Y., Chung, T. K., Davison, J. K., Cambria, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+complications+after+thoracic+aortic+surgery:+long-term+survival+and+functional+status+varies+with+deficit+severity.">Spinal cord complications after thoracic aortic surgery: long-term survival and functional status varies with deficit severity.</a> J. Vasc. Surg. 48, 47-53 (2008).</li><li>Okita, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fighting+spinal+cord+complication+during+surgery+for+thoracoabdominal+aortic+disease.">Fighting spinal cord complication during surgery for thoracoabdominal aortic disease.</a> Gen. Thorac. Cardiovasc. Surg. 59, 79-90 (2011).</li><li>Wong, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+spinal+cord+deficits+after+thoracoabdominal+aortic+aneurysm+repair.">Delayed spinal cord deficits after thoracoabdominal aortic aneurysm repair.</a> Ann. Thorac. Surg. 83, 1345-1355 (2007).</li><li>Taira, Y., Marsala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+proximal+arterial+perfusion+pressure+on+function,+spinal+cord+blood+flow,+and+histopathologic+changes+after+increasing+intervals+of+aortic+occlusion+in+the+rat.">Effect of proximal arterial perfusion pressure on function, spinal cord blood flow, and histopathologic changes after increasing intervals of aortic occlusion in the rat.</a> Stroke. 27, 1850-1858 (1996).</li><li>Naslund, T. C., Hollier, L. H., Money, S. R., Facundus, E. C., Skenderis, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protecting+the+ischemic+spinal+cord+during+aortic+clamping.+The+influence+of+anesthetics+and+hypothermia.">Protecting the ischemic spinal cord during aortic clamping. The influence of anesthetics and hypothermia.</a> Ann. Surg. , 409-515 (1992).</li><li>Qayumi, A. K., Janusz, M. T., Lyster, D. M., Gillespie, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+model+for+investigation+of+spinal+cord+injury+caused+by+aortic+cross-clamping.">Animal model for investigation of spinal cord injury caused by aortic cross-clamping.</a> J. Invest. Surg. 10, 47-52 (1997).</li><li>Lang-Lazdunski, L., Matsushita, K., Hirt, L., Waeber, C., Vonsattel, J. P., Moskowitz, M. A., Dietrich, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+Cord+Ischemia:+Development+of+a+model+in+the+mouse.">Spinal Cord Ischemia: Development of a model in the mouse.</a> Stroke. 31, 208-213 (2000).</li><li>Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basso+Mouse+Scale+for+locomotion+detects+differences+in+recovery+after+spinal+cord+injury+in+five+common+mouse+strains.">Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains.</a> J. Neurotrauma. 23, 635-659 (2006).</li><li>Kwon, B. K., Tetzlaff, W., Grauer, J. N., Beiner, J., Vaccaro, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+and+pharmacologic+treatment+of+acute+spinal+cord+injury.">Pathophysiology and pharmacologic treatment of acute spinal cord injury.</a> Spine. J. 4, 451-464 (2004).</li><li>Cheshire, W. P., Santos, C. C., Massey, E. W., Howard, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+infarction:+etiology+and+outcome.">Spinal cord infarction: etiology and outcome.</a> Neurology. 47, 321-330 (1996).</li><li>Kakinohana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+paraplegia+after+spinal+cord+ischemic+injury+requires+caspase-3+activation+in+mice.">Delayed paraplegia after spinal cord ischemic injury requires caspase-3 activation in mice.</a> Stroke. 42 (8), 2302-2307 (2011).</li><li>Wang, Z., Yang, W., Britz, G. W., Lombard, F. W., Warner, D. S., Sheng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+simplified+spinal+cord+ischemia+model+in+mice.">Development of a simplified spinal cord ischemia model in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 189, 246-251 (2010).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=model+of+ischemic+spinal+cord+injury+with+delayed+paralysis+caused+by+aortic+cross-clamping.">model of ischemic spinal cord injury with delayed paralysis caused by aortic cross-clamping.</a> Anesthesiology. 113, 880-891 (2010).</li><li>Kang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+systemic+hypothermia+on+a+murine+model+of+thoracic+aortic+ischemia+reperfusion.">The effects of systemic hypothermia on a murine model of thoracic aortic ischemia reperfusion.</a> J. Vasc. Surg. 52, 435-443 (2010).</li><li>Li, J., Benashski, S., McCullough, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-stroke+hypothermia+provides+neuroprotection+through+inhibition+of+AMP-activated+protein+kinase.">Post-stroke hypothermia provides neuroprotection through inhibition of AMP-activated protein kinase.</a> J. Neurotrauma. 28 (7), 1281-1288 (2011).</li></ol>

Yazarlar herhangi bir mali çıkarlarını beyan.

Spinal kord iskemi reperfüzyon sekonder parapleji az anlaşılmış patolojilerin 9 arasında bir kompleks sonucudur. Bu en yaygın olarak torakoabdominal aort ameliyattan sonra görülen da, bu tür disseksiyonlarda, travma, embolik olaylar, vaskülit, sistemik hipotansiyon ve 10 gibi diğer bir sıvının çeşitli parapleji neden olabilir. Bu yaralanma daha fazla anlayışa ve bu yaralanma ortadan kaldırmak için gelecekteki hedeflerini sağlamak için, hayvan modelleri bir zorunluluk haline gelmiştir. Hastalar bu komplikasyon sergi ya derhal veya gecikmeli felç ile tutulmuş. Bu model ve diğerleri yeterli klinik görülen felç 11 bimodal dağılımını paraleldir. Orta derecede iskemi (4 dakika) bir gecikmeli felç üretilmiş olmakla birlikte, uzun süreli iskemi (8 dakika) hemen ve sürekli bir felç ile sonuçlanmıştır. Sunulan modeli al gerektiren kıyasla avantajları vardırateral torakotomi 12,13. Median sternotomi maruz bozulmadan plevra boşluğu bırakır ve trakeal entübasyon veya plevral boşlukta negatif basınç yeniden kurma ihtiyacını ortadan kaldırır. Klinik, sternotomi yan torakotomi daha çok daha az ameliyat sonrası ağrı ile ilişkilidir ve postoperatif analjezik ihtiyacını azaltabilir. Bu model, bir sınırlama olmadan değildir. Diğer modellerde olduğu gibi, kemirgen cerrahi bir öğrenme eğrisi vardır ve iyi bir cerrahi tekniktir şarttır. Diseksiyon itina ile yapılır değilse Fareler çabuk yenik düşer. Intraoperatif mortalite en sık nedenleri kanama veya pnömotoraks vardır. Potansiyel olarak ölümcül kanamayı önlemek için sternotomi orta hat yapılmalıdır. Sternotomi çok yanal yapılmış ise iç meme arter ve sonraki kanama bir işlem oluşabilir. Ayrıca, aorta ve subklavyen arter inen kaba diseksiyonu difficul olacak kanama neden olabilirt veya kontrol etmek imkansız. Pnömotorakslar başka bir potansiyel olarak ölümcül bir komplikasyonudur. Bunlar genellikle geri çekme dikişlerle veya aort diseksiyonu yerleştirme sırasında meydana. Retraksiyon dikişler çok yanal yer veya aort arkı dikkatle disseke değilse bir pnömotoraks oluşur ve evrensel ölümcül olabilir. Sonraki adımlar yeniden üretilebilirlik sağlamak için kullanılabilir olması gerekir. Normotermi kritiktir. Ameliyat sırasında fareler mümkün 36.5 ° C&#39;ye yakın olarak tutulur. Hatta hafif hipotermi spinal kord ve felç modellerinde 14,15 önemli bir nöro-koruyucu etkilere sahip olduğu gösterilmiştir. Bundan başka, lazer Doppler ölçümleri yakından izlenmeli ve distal akışında sadece% 90 azalma ile farenin karşılaştırma için dahil edilmelidir. Son derece değişken daha uzak akışları ve sonuçları aort veya subklavian arterlerin tıkanması eksik olabilir sonuçları. Sonuç olarak, l sıçangil modelisunulan ower ekstremite felci kolayca yüksek tekrarlanabilir sonuçlar veren, kabul edilebilir. Bu modelin uygulamaları anında ve gecikmeli felç incelemek için bir araç ile araştırmacı bakılabilmektedir. Ayrıca, bu modelin benimsenmesi bu yıkıcı komplikasyon mücadelede yararlı kanıtlamak olabilir.

Alt ekstremite felci, torakoabdominal müdahaleleri zorlaştırmaya devam etmektedir. Spinal kord iskemi-reperfüzyon hasarı (SCIR) olarak bilinen yaralanması, yüksek riskli hastalarda 1 ile% 20 kadar felç ile sonuçlanır. Böyle sol kalp bypass, lomber cerbrospinal sıvı kanalizasyon, hipotermik dolaşım durması ve interkostal arter reimplantation gibi cerrahi ilaveler bu komplikasyonun 2 insidansını azalttı, ancak, çok fazla hasta etkilenmeye devam. Klinik olarak, spinal kord, iskemi ve reperfüzyon yaralanması müdahale 3 Aşağıdaki felç anında ya da geç olarak görülmektedir. Ancak, bu yaralanma anlayışımız mekanik ayrıntı eksikliği boğulmuş olmuştur. Sonuç olarak, birkaç seçenek ortaya çıktıktan sonra hasarı azaltmak için kullanılabilir. Dolayısıyla omurilik iskemisi küçük bir hayvan, kemirgen, modeli Ilan ve reperfüzyon yaralanması için adresdaha iyi patogenezi karakterize. Bugüne kadar çalışmaların çoğunluğu bu yaralanma, yani sıçan 4, tavşan 5, ve domuz 6 modelleri karakterize etmek için büyük hayvan modelleri kullanılmıştır. Ancak bu, maliyet, karmaşıklık, değişken tekrarlanabilirlik, ve en önemlisi, genetik manipülasyon için uygun teknikler eksikliği ile sınırlıdır. Bu yayınlanmış hayvan modellerinin en güvenilir tavşanlarda abdominal aortun infrarenal çapraz kenetlenmesini içerir. Bununla birlikte, insan anterior spinal nöronlar çoğunlukla daha yakın şube 7 kendi damar tedarik türetmek. Bu modellerde omurilik değişken damar anatomisi klinik kullanıma sonuçları geçiş zorluk ekler. Bu el yazması klinik olarak anlamlı ve istihdam kolay torakal aort tıkanıklığı sonrası hemen veya gecikmeli parapleji için bir model sunuyor. Mini sternoto yoluyla arkus maruziyetbenim az invaziv ve minimal morbidite ve mortalite ile yüksek tekrarlanabilir sonuçlar ortaya çıkarabilir. Zorluklar ve teknik nüansları olmadan değil bu model, bu kolayca uygulanabilir arka ekstremite felci bir model üretmek için dikkatli diseksiyon ve doku kullanımı ile aşılabilir iken.

<table><tbody><tr><td>VMS Anesthesia Machine</td><td>MDS Matrx</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Vet One</td><td>13985-528-60</td><td>2.0% through nose cone&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Induction Chamber</td><td>Vet Equip</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Heating Bed</td><td>Vestavia Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lazer Doppler Monitor</td><td>Moor Instruments</td><td>VMS-LDF1</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Suture, Polyester</td><td>Surgidac</td><td>VD-551</td><td>Taper Needle</td></tr><tr><td>Microdissecting Clips</td><td>Biomedical Research Instruments</td><td>14-1030, 14-1060</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Instruments</td><td>Fine Surgical Instruments</td><td></td><td>Forceps, needle holder</td></tr></tbody></table>

reproducable paraplegia by thoracic aortic occlusion in a murine model of spinal cord ischemia-reperfusion

Arka plân Alt ekstremite felci aort müdahaleleri zorlaştırmaya devam etmektedir. Altta yatan patolojinin anlayış eksikliği oluşumda bu yaralanmayı azaltmak için gelişmeler engellemiştir. Mevcut model torakal aort tıkanıklığı sonrası tekrarlanabilir alt ekstremite felci gösterir. Yöntemler Yetişkin erkek C57BL6 farenin izofluran ile anestezi uygulandı. Bir cervicosternal kesiden aort maruz kaldı. Inen aorta ve sol subklavian arter plevral boşluğa girmeden, tespit edilmiştir. Bu damarların iskeletizasyonu 4 dakika boyunca (orta iskemi) veya 8 dak (uzun süreli iskemi) için hemen kapağın (Sham) veya oklüzyonu takip etmektedir. Sternotomi ve cilt kapatıldı ve fare kurtarma için ısınma yatağa aktarıldı. Kurtarma sonra, fonksiyonel analiz, 48 saat kadar 12 saatlik aralıklarla elde edilmiştir. Sonuçlar Sham ameliyat fareler hiçbir gözlemlenebilir arka bacak açığı gösterdi. 4 dakika boyunca ılımlı iskemi maruz Fareler 48 saatte felç tamamlamak için ilerlemesi ardından 12 saat minimal fonksiyonel açığı vardı. Uzamış iskemi maruz Fareler postoperatif dönemde herhangi bir noktasında hiçbir gözlemlenebilir arka-bacak hareketi ile anında felç vardı. Hiçbir gözlenen intraoperatif veya post operatif mortalite yoktu. Sonuç Olup derhal veya gecikmeli yeniden üretilebilir alt ekstremite felç bir murin modelinde elde edilebilir. Ayrıca, medyan sternotomi ve dikkatli diseksiyonu, yüksek hayatta kalma oranları ve tekrarlanabilirlik kullanılarak elde edilebilir.

Fareler sham ameliyat (n = 3) veya 4 (n = 3), 8 dakika boyunca aort tıkanıklığı (n = 3). Ameliyat sonrasında fareler Basso Fare Puanına (Şekil 1) ile derecelendirildi. Sham ameliyat Fareler postoperatif herhangi bir noktasında hiçbir gözlemlenebilir fonksiyonel eksiklikleri vardı. Ilımlı iskemi (4 dk) tabi Fareler 48 saat ile felç tamamlamak için ilerici fonksiyonel gerileme ile 12 saat normal arka ekstremite fonksiyonu yakın vardı. Uzamış iskemi grubunda (8 dk) fareler herhangi kazanılabilir fonksiyonu olmadan ameliyata (Şekil 2) Aşağıdaki tam felç vardı. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50910/50910fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50910/50910fig1.jpg" /> Şekil 1. Basso Hind Ekstremite Motor Fonksiyon 8 puan. 9 (normal functi 0 (hiçbir fonksiyonu) kadar derecelendirildi arka ekstremite nörolojik disfonksiyon için skorlama sistemi) üzerinde. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/50910/50910fig1highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 2," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50910/50910fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50910/50910fig2.jpg" /> Şekil 2.. Postoperatif Hind-Ekstremite Fonksiyon. Nörolojik açığın şiddeti 48 saat kadar ameliyat sonrası 12 saat aralıklarla Basso Fare Ölçeği ile derecelendirildi. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/50910/50910fig2highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion at JoVE.com

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Spinal kord iskemi-reperfüzyon hasarı mekanistik anlayış eksikliği, yüksek riskli aort operasyonları aşağıdaki paraplejiyi önlemek için ek maddeler engellemiştir. Bu nedenle, hayvan modellerinin geliştirilmesi zorunludur. Bu el yazması bir fare modelinde torakal aort tıkanıklığı sonrası tekrarlanabilir alt ekstremite felci gösterir.

Spinal Kord İskemi-reperfüzyon bir Mürin Modelinde Torasik Aort Tıkanıklığı tarafından tekrarlanabilir Parapleji

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

reproducable-paraplegia-thoracic-aortic-occlusion-murine-model-spinal

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

12.0K Görüntüleme.  University of Colorado.  Spinal kord iskemi-reperfüzyon hasarı mekanistik anlayış eksikliği, yüksek riskli aort operasyonları aşağıdaki paraplejiyi önlemek için ek maddeler engellemiştir. Bu nedenle, hayvan modellerinin geliştirilmesi zorunludur. Bu el yazması bir fare modelinde torakal aort tıkanıklığı sonrası tekrarlanabilir alt ekstremite felci gösterir. 

Video: Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide. Medical therapies for symptomatic relief are limited. Surgical or endovascular interventions are useful for some individuals, but long-term results are often disappointing. As a result, there is a need for developing new therapies to treat PAD. The murine hindlimb ischemia preparation is a model of PAD, and is useful for testing new therapies. When compared to other models of tissue ischemia such as coronary or cerebral artery ligation, femoral artery ligation provides for a simpler model of ischemic tissue. Other advantages of this model are the ease of access to the femoral artery and low mortality rate. 
In this video, we demonstrate the methodology for the murine model of unilateral hindimb ischemia. The specific materials and procedures for creating and evaluating the model will be described, including the assessment of limb perfusion by laser Doppler imaging. This protocol can also be utilized for the transplantation and non-invasive tracking of cells, which is demonstrated by Huang et al.1.

Murine Model of Hindlimb Ischemia

The surgical procedure for induction of unilateral hindlimb ischemia is demonstrated, with confirmation of ischemia by laser Doppler perfusion imaging.

Murin Model Hindlimb İskemi

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Biyoloji

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed to improve/ameliorate the respiratory failure following high cervical spinal cord injury (SCI). Here we propose a murine pre-clinical model of high SCI at the cervical 2 (C2) metameric level to study diverse post-lesional respiratory neuroplasticity. The technique consists of a surgical partial injury at the C2 level, which will induce a hemiparalysis of the diaphragm due to a deafferentation of the phrenic motoneurons from the respiratory centers located in the brainstem. The contralateral side of the injury remains intact and allows the animal recovery. Unlike other SCIs which affect the locomotor function (at the thoracic and lumbar level), the respiratory function does not require animal motivation and the quantification of the deficit/recovery can be easily performed (diaphragm and phrenic nerve recordings, whole body ventilation). This pre-clinical C2 SCI model is a powerful, useful, and reliable pre-clinical model to study various respiratory and non-respiratory neuroplasticity events at different levels (molecular to physiology) and to test diverse putative therapeutic strategies which might improve the respiration in SCI patients.

Respiratory failure is the leading cause of death following a cervical spinal cord injury. Having a reproducible, quantifiable, and reliable pre-clinical animal model of respiratory failure induced by a partial cervical injury will help to understand the subsequent respiratory and non-respiratory neuroplasticity and allow testing putative repair strategies.

Post-lezyonlu Solunum nöroplastisite Eğitim için Servikal Spinal Kord Yaralanması bir fare modeli

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Tıp

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) below the site of injury. The secondary ischemia that develops following the initial mechanical insult is a serious complication of the SCI and severely impairs the function and viability of surviving neuronal and non-neuronal cells in the SC. In addition, ischemia is also responsible for the growth of lesion during chronic phase of injury and interferes with the cellular repair and healing processes. Thus there is a need to develop a spinal cord ischemia model for studying the mechanisms of ischemia-induced pathology. Focal ischemia induced by photothrombosis (PT) is a minimally invasive and very well established procedure used to investigate the pathology of ischemia-induced cell death in the brain. Here, we describe the use of PT to induce an ischemic lesion in the spinal cord of mice. Following retro-orbital sinus injection of Rose Bengal, the posterior spinal vein and other capillaries on the dorsal surface of SC were irradiated with a green light resulting in the formation of a thrombus and thus ischemia in the affected region. Results from histology and immunochemistry studies show that PT-induced ischemia caused spinal cord infarction, loss of neurons and reactive gliosis. Using this technique a highly reproducible and relatively easy model of SCI in mice can be achieved that would serve the purpose of scientific investigations into the mechanisms of ischemia induced cell death as well as the efficacy of neuroprotective drugs. This model will also allow exploration of the pathological changes that occur following SCI in live mice like axonal degeneration and regeneration, neuronal and astrocytic Ca2+ signaling using two-photon microscopy.

Photothrombosis is a minimally invasive and highly reproducible procedure to induce focal ischemia in the spinal cord and serves as a model of spinal cord injury in mice.

Farelerde Omurilik Yaralanma Modeli Olarak Odak iskemisi Fototromboz kaynaklı

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

Bir Yenidoğan Fare Omurilik Sıkıştırma Yaralanması Modeli

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, hypotension, necrotizing enterocolitis, bowel transplantation, trauma and chronic inflammation. Intestinal ischemia-reperfusion (IR) injury is a consequence of acute mesenteric ischemia, caused by inadequate blood flow through the mesenteric vessels, resulting in intestinal damage. Reperfusion following ischemia can further exacerbate damage of the intestine. The mechanisms of IR injury are complex and poorly understood. Therefore, experimental small animal models are critical for understanding the pathophysiology of IR injury and the development of novel therapies.
Here we describe a mouse model of acute intestinal IR injury that provides reproducible injury of the small intestine without mortality. This is achieved by inducing ischemia in the region of the distal ileum by temporally occluding the peripheral and terminal collateral branches of the superior mesenteric artery for 60 min using microvascular clips. Reperfusion for 1 hr, or 2 hr after injury results in reproducible injury of the intestine examined by histological analysis. Proper position of the microvascular clips is critical for the procedure. Therefore the video clip provides a detailed visual step-by-step description of this technique. This model of intestinal IR injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Here we describe the detailed procedure of intestinal ischemia-reperfusion in mice which results in reproducible injury without mortality to encourage the standardization of this technique across the field. This model of intestinal ischemia-reperfusion injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

Reproducible Arterial Denudation Injury by Infrarenal Abdominal Aortic Clamping in a Murine Model

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These complications can be attributed to impairments in re-endothelialization within the wound margins. Yet, the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization remain to be defined. While several animal models to study re-endothelialization after arterial denudation are available, few are performed in the mouse because of surgical limitations. This undermines the opportunity to exploit transgenic mouse lines and investigate the contribution of specific genes to the process of re-endothelialization. Here, we present a step-by-step protocol for creating a highly reproducible murine model of arterial denudation injury in the infrarenal abdominal aorta using external vascular clamping. Immunocytochemical staining of injured aortas for fibrinogen and &#946;-catenin demonstrate the exposure of a pro-thrombotic surface and the border of intact endothelium, respectively. The method presented here has the advantages of speed, excellent overall survival rate, and relative technical ease, creating a uniquely practical tool for imposing arterial denudation injury in transgenic mouse models. Using this method, investigators may elucidate the mechanisms of re-endothelialization under normal or pathological conditions.

Understanding the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization following arterial denudation injury is of paramount importance in preventing thrombosis and restenosis of arteries. Here we describe a protocol for reproducible arterial denudation injury of the infrarenal abdominal aorta. The procedure was developed to investigate the underlying mechanisms that regulate endothelial regeneration using mouse models.

Bir Fare Modelinde İnfrarenal Abdominal Aort Bağlama Ekipmanları tarafından tekrarlanabilir Arter denüdasyon Yaralanma

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These ...

Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing and treating this complication using experimental models of spinal cord ischemia. The model described here demonstrates varying degrees of paraplegia that relate to the length of occlusion following thoracic aortic occlusion in a rat spinal cord ischemia model.
A 2-Fr. balloon-tipped catheter was advanced through the femoral artery into the descending thoracic aorta until the catheter tip was placed at the left subclavian artery in anesthetized male Sprague-Dawley rats. Spinal cord ischemia was induced by inflating the catheter balloon. After a set period of occlusion (9, 10, or 11 min), the balloon was deflated. Neurologic assessment was performed using the motor deficit index at 24 h after surgery, and the spinal cord was harvested for histopathological examination.
Rats that underwent 9 min of aortic occlusion showed mild and reversible motor impairment in the hind limb. Rats subjected to 10 min of aortic occlusion presented with moderate but reversible motor impairment. Rats subjected to 11 min of aortic occlusion displayed complete and persistent paralysis. The motor neurons in the spinal cord sections were more preserved in rats subjected to shorter duration of aortic occlusion.
Researchers can achieve a reproducible hind limb motor deficit following thoracic aortic occlusion using this spinal cord ischemia model.

This study demonstrates the technique to make a minimally invasive and easily reproducible model of spinal cord ischemia in rats. Various degrees of hind limb motor deficit can be produced by controlling the aortic occlusion time.

Spinal Kord İskemisinin Sıçan Modelinde Aortik Oklüzyon Sonrası Tekrarlanabilir Motor Bozukluğu

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse model is useful for investigating the pathophysiology of cerebral ischemia-reperfusion and determining potential therapeutic strategies for patients with stroke. Variations in the anatomy of the circle of Willis of C57BL/6 mice affects their infarct volume after cerebral-ischemia-induced injury. Studies have indicated that distal MCA occlusion (MCAO) can overcome this problem and result in a stable infarct size. In this study, we establish a two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion through the interruption of the blood flow to the right MCA. We distally ligate the right MCA and right common carotid artery (CCA) and restore blood flow after a certain period of ischemia. This ischemia-reperfusion injury induces an infarct of stable size and a behavioral deficit. Peripheral immune cells infiltrate the ischemic brain within the 24 h infiltration period. Additionally, the neuronal loss in the cortical area is less for a longer reperfusion duration. Therefore, this two-vessel occlusion model is suitable for investigating the immune response and neuronal recovery during the reperfusion period after cerebral ischemia.

A mouse model of cerebral ischemia-reperfusion is established to investigate the pathophysiology of stroke. We distally ligate the right middle cerebral artery and right common carotid artery and restore blood flow after 10 or 40 min of ischemia.

Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Induction of Complete Transection-Type Spinal Cord Injury in Mice

Spinal cord injury (SCI) largely leads to irreversible and permanent loss of function, most commonly as a result of trauma. Several treatment options, such as cell transplantation methods, are being researched to overcome the debilitating disabilities arising from SCI. Most pre-clinical animal trials are conducted in rodent models of SCI. While rat models of SCI have been widely used, mouse models have received less attention, even though mouse models can have significant advantages over rat models. The small size of mice equates to lower animal maintenance costs than for rats, and the availability of numerous transgenic mouse models is advantageous for many types of studies. Inducing repeatable and precise injury in the animals is the primary challenge for SCI research, which in small rodents requires high-precision surgery. The transection-type injury model has been a commonly used injury model over the last decade for transplantation-based therapeutic research, however a standardized method for inducing a complete transection-type injury in mice does not exist. We have developed a surgical protocol for inducing a complete transection type injury in C57BL/6 mice at thoracic vertebral level 10 (T10). The procedure uses a small tip drill instead of rongeurs to precisely remove the lamina, after which a thin blade with rounded cutting edge is used to induce the spinal cord transection. This method leads to reproducible transection-type injury in small rodents with minimal collateral muscle and bone damage and therefore minimizes confounding factors, specifically where behavioral functional outcomes are analyzed.

This protocol describes how to create a precise laminectomy for induction of stable transection-type spinal cord injury in the mouse model, with minimal collateral damage for spinal cord injury research.

Farelerde Tam Traneksiyon Tipi Spinal Kord Yaralanması İndüksiyonu

Spinal cord injury (SCI) largely leads to irreversible and permanent loss of function, most commonly as a result of trauma. Several treatment options, ...