Выделение капилляров сетчатки мыши и субэндотелиального матрикса для измерения жесткости с помощью атомно-силовой микроскопии

Известно, что воспаление сосудов вызывает дегенерацию капилляров сетчатки при ранней диабетической ретинопатии, которая является основным микрососудистым осложнением диабета, угрожающим зрению. Наша лаборатория изучает, могут ли механические сигналы в виде жесткости сосудов способствовать этим аномальным изменениям сосудов сетчатки на ранних стадиях диабета, и если да, то каким образом. Растет интерес к разработке способов профилактики диабетической ретинопатии на ранней стадии, уделяя особое внимание подавлению воспаления сетчатки, которое возникает на ранних стадиях диабета и способствует нейроваскулярной дисфункции сетчатки.

Наша недавняя работа показывает, что в дополнение к генетическим и биохимическим факторам, механические сигналы, такие как жесткость сосудов, могут способствовать воспалению сетчатки на ранних стадиях диабета. Наш протокол позволит исследователям изолировать интактные сосуды сетчатки и субэндотелиальный матрикс для последующих измерений жесткости с помощью атомно-силового микроскопа. Эти измерения помогут определить роль сосудистой жесткости и эндотелиальной механобиологии в развитии сосудистых дефектов, связанных с диабетической ретинопатией и макулярной дегенерацией.

Применяя мельчайшие силы взаимодействия на наноуровне двух пиктонов, атомно-силовая микроскопия предлагает чувствительный, точный и надежный метод прямого измерения жесткости мягких биологических образцов, таких как кровеносные сосуды, клетки и доступные метрики. Насколько нам известно, такие точные измерения однозначно возможны с помощью атомно-силового микроскопа. Наша недавняя работа показала, что капилляры сетчатки становятся более жесткими при диабете, что приводит к воспалению и дегенерации сосудов сетчатки.

Более глубокое понимание механической регуляции диабетической ретинопатии как потенциала для выявления противовоспалительных мишеней, основанных на микробиологии, для более эффективных методов лечения в будущем.