Мера in vitro является подходящей мерой для проверки растворения растворов твердого препарата китайской медицины, которые учитывают эффекты распада лекарственного средства, поведение растворения и содержание активного ингредиента. Обнаружение многоиндексного компонента может лучше отражать нейтральное влияние и разницу в растворении различных компонентов. Продемонстрирует процедуру Куинюнь Ду, выдающийся студент из моей лаборатории.
Для начала приготовьте исходный раствор эталонного вещества, взвесив 10,6 миллиграмма салидроцида, 5,24 миллиграмма галловой кислоты и 5,21 миллиграмма этилгалловой кислоты отдельно на электронных аналитических весах. Затем добавьте их по отдельности в пятимиллилитровую мерную колбу. Затем добавьте метанол класса ВЭЖХ для растворения и разбавьте до пяти миллилитров.
И, наконец, хорошо встряхните, чтобы получить исходный раствор эталонного вещества с массовой концентрацией 2,120, 1,048 и 1,042 миллиграмма на миллилитр соответственно. Чтобы приготовить раствор исследуемого образца, извлеките 2,8 грамма гранул родиолы с 10 миллилитрами метанола класса ВЭЖХ с помощью ультразвуковой очистительной машины в течение 30 минут. Затем отфильтруйте его с помощью фильтра 0,22 микрометра для проверки адаптивности системы.
Затем приготовьте смешанный эталонный раствор, который содержит 0,590 миллиграмма на миллилитр салидроцида, 2,030 миллиграмма на миллилитр галловой кислоты и 1,930 миллиграмма на миллилитр этилгаллата. Чтобы получить теоретическое содержание каждого характерного компонента гранул родиолы, поместите 2,8 грамма гранул родиолы в коническую колбу объемом 500 миллилитров. Добавьте 200 миллилитров сверхчистой воды и ультразвуковое извлечение в течение 60 минут.
Затем отфильтруйте его с помощью фильтра 0,22 микрометра. После определения содержания испытуемого раствора устанавливают хроматографические условия для высокоэффективной жидкостной хроматографии, как описано в рукописи. Чтобы исследовать линейную зависимость, разбавьте эталонные исходные растворы галловой кислоты и этилгаллата и эталонные исходные растворы салидроцида, чтобы получить раствор градиентной концентрации для построения стандартной кривой.
Затем впрыскивают 10 микролитров смешанного эталонного раствора в систему ВЭЖХ шесть раз в день и запускают образцы в тех же условиях ВЭЖХ, записывая при этом пиковую площадь каждого компонента. Затем вводят 10 микролитров приготовленного раствора образца и определяют пиковые площади ВЭЖХ в соответствии с хроматографическими условиями через разные промежутки времени. Возьмите шесть образцов одной и той же партии гранул родиолы для приготовления раствора исследуемого образца, как показано ранее, и введите 10 микролитров каждого образца в систему ВЭЖХ.
Запустите образцы, как показано ранее, чтобы определить воспроизводимость. После приготовления шести порций одной и той же партии гранул родиолы для исследуемого раствора добавляют около 50% эталонного субстрата каждого индексного компонента. Запустите эти образцы в системе ВЭЖХ, как показано ранее, чтобы рассчитать скорость восстановления, как описано в рукописи.
Чтобы провести испытание на растворение, добавьте 100 миллилитров сверхчистой воды в чашку для растворения аппарата для растворения препарата и поддерживайте температуру на уровне 37 градусов Цельсия со скоростью вращения 100 об / мин. Затем добавьте 2,8 грамма гранул родиолы в чашку для растворения и сразу же начните записывать продолжительность растворения. Соберите в общей сложности один миллилитр образца с помощью инжектора через разные промежутки времени и немедленно заполните объем в чашке для растворения растворяющей средой при той же температуре.
Немедленно заполните собранные образцы через микропористую мембрану размером 0,22 микрометра и возьмите последующий фильтрат. После определения содержания каждого компонента в каждый момент времени с помощью ВЭЖХ рассчитайте растворение каждого момента времени и кумулятивное растворение, как описано в рукописи. Получена хроматограмма образца и эталонный раствор.
Три различных пика, соответствующих галловой кислоте, салидроциду и этилгаллату, показывают, что градиент элюирования имел хорошее разрешение для трех индексных компонентов в гранулах родиолы. Кривые растворения каждого компонента показывают, что кумулятивное растворение галловой кислоты составляло более 80% через одну минуту. В то время как для салидроцида и этилгалловой кислоты он составлял более 65% через пять минут.
Однако кумулятивное растворение каждого компонента индекса уменьшилось через 30 минут. Регулируя проблему разбавления стандартной кривой, в соответствии с предварительным экспериментом по обработке проб, образцы должны быть собраны быстро, чтобы они не пропустили специальный момент времени сбора.
