Форма наночастиц влияет на поглощение клеток, но была проделана ограниченная работа по изменению формы полимером. Этот протокол демонстрирует, как удлинить полимеромы для улучшенных применений доставки лекарств. Этот метод обеспечивает простой подход, который может создавать множество различных полимеромных форм с потенциальным применением в доставке лекарств, псевдоэлементах или для других неисследованных полей.
Удлиненные полимеромы могут одновременно доставлять гидрофобные и гидрофильные препараты и легче входить в клетки. Этот метод может помочь переправлять лекарства через гематоэнцефалический барьер, решая серьезную медицинскую проблему. Для начала растворите 0,015 г выбранного полиэстера в одном миллилитре ДМСО путем вихря в течение 15 минут и настройте аппарат для инъекции растворителя.
Поместите пусковую пластину непосредственно под вертикальным шприцевым насосом, затем поместите пятимиллилитровую стеклянную желчь с одним миллилитром деионизированной воды второго типа в миниатюрный звездчатый стержень на перемешиваемой пластине. Отрегулируйте высоту шприцевых насосов, чтобы наконечник иглы был полностью погружен в деионизированную воду второго типа, и установите скорость инфузии шприцевого насоса на уровне пяти микролитров в минуту. Выполните инъекцию растворителя, втянув органический растворитель и раствор полиэстера в иглу 27 калибра.
Поместите иглу в шприцевой насос и убедитесь, что она надежно закреплена. Отрегулируйте толкающий блок так, чтобы он касался конца плунжера шприца. Запустите перемешиваемую пластину так, чтобы вода вращалась со скоростью 100 оборотов в минуту, а затем запустите шприцевой насос.
После того, как шприцевой насос полностью влил органический растворитель и полимер в воду, снимите перемешивание и крышкой стеклянную мерзость. Для характеристики полимеромы с помощью динамического рассеяния света или DLS добавьте один миллилитр воды с небольшим процентом органического растворителя и полимера в одну миллилитровую кювету. Выполняется DLS путем помещения кюветы в систему и настройки запуска.
Считывание взвешенного диаметра по интенсивности полимером и индекса полидисперсности или PDI. После промывки мембраны диализа объемом 300 килодалтон в соответствии с протоколами, предусмотренными производителем, добавляют один миллилитр полимерного раствора в резервуар диализного устройства. Поместите диализное устройство в 250-миллилитрный клюш со 150 миллилитрами деионизированной воды второго типа на перемешиваемую пластину.
Установите перемешиваемую пластину на скорость, которая позволяет мягкое движение диализного устройства, и оставьте его перемешиваться на ночь. После завершения диализа извлеките один миллилитр полимеромного раствора из диализного устройства. Создайте 150 миллилитров желаемого солевого буфера с концентрацией 50, 100 или 200 миллимоляров хлорида натрия на основе конечных желаемых полимеромных свойств и удерживайте нагрузку диализного устройства в 150 миллилитрах раствора соли в течение 18 часов для перемешивания.
После модуляции формы выполните измерения DLS. Обратите особое внимание на измерения PDI по сравнению с духовными полимеромами, поскольку изменение PDI предполагает эффективное изменение формы полимеров. Используйте соответствующие элементы управления для визуализации, особенно неформуемированные полимеромы, чтобы обеспечить успех метода.
Наблюдение ТЭМ полимером на основе ПЭГ-PLA указывает на общую сферическую структуру с более толстой внешней линией, которая указывает на мембрану. Полимеромы присутствуют в виде физических структур и SEM с кистечкой, подобной внешнему слою ПЭГ. Один час диализа в воде привел к тому же общему среднему диаметру с удалением растворителя, уменьшающим диаметр полимеромы.
При использовании более крупных начальных концентраций органического растворителя ожидается уменьшение большего диаметра. При создании полимером PEG-PLA ожидаются скромные изменения в PDI, что может указывать на изменение формы. При диализе полимером PEG-PLGA, которые являются несколько более гидрофобными, чем полимеры PEG-PLA против соли, увеличение PDI более согласуется с удлинением со всеми изученными градиентами соли, что приводит к увеличению PDI.
Аналогичные результаты следует наблюдать при использовании 50-миллимолярного градиента соли, чтобы вызвать изменение формы независимо от гидрофобности полиэстера. Между тем, градиенты соли 100 и 200 миллимоляров хлорида натрия показывают прямую тенденцию к увеличению дельта-PDI с увеличением гидрофобности полиэфира. Изображения ПОЛИМЕРОМ PEG-PLA, диализированных с 50 миллионами менее хлорида натрия, показали со стоматоцитами и удлиненными палочками.
По мере увеличения концентрации соли до 100 миллимоляров наблюдалось увеличение числа стержней с уменьшением количества стоматоцитов. Диализ против 200 миллимолярных полимером более последовательно образованных пролатов со скромными соотношениями сторон. Наиболее сложной частью этого протокола является последовательное создание полимеромы.
Поэтому важно практиковать процедуру.
