Когда химическая компания хочет вывести на рынок новый химический или другой материал, она должна предоставить данные из серии испытаний на экотоксичность. Тест на водоросли является одним из трех обязательных тестов, которые необходимо выдать. Тест на водоросли страдает от того факта, что это довольно сложно выполнить.
По этой причине мы разработали платформу тестирования LEVITATT. LEVITATT использует светодиодный свет, чтобы избежать проблем с чрезмерной тепловой генерацией. Кроме того, он обеспечивает равномерное светлое поле.
Он имеет компактный размер, а это означает, что вам не нужно много места для выполнения теста водорослей, но в то же время, это позволяет использовать достаточно объема образца для выполнения химического анализа и характеристики до, во время и после тестирования. Это особенно важно при тестировании наноматериалов. Это видео продемонстрирует использование LEVITATT для тестирования токсичности водорослей наноматериалов и других сложных веществ.
Демонстрация состоит из следующих четырех этапов. Во-первых, опишите компоненты LEVITATT. Второй шаг заключается в подготовке решения для водорослей роста средств массовой информации.
И третий шаг заключается в том, чтобы дать обзор процедуры, как выполнить тест токсичности водорослей. Последний шаг заключается в измерении увеличения биомассы водорослей с помощью флюорометра. LEVITATT можно поместить в контролируемый температурой кабинет комнаты.
Это обеспечивает стабильную температуру на протяжении всего воздействия. Установка помещается на орбитальный шейкер, чтобы обеспечить вращение образцов во время испытания. Испытание проводится в 20-миллилитровых сцинтилляционных флаконах, содержащих четыре миллилитров среды воздействия.
Крышка винта с просверленным отверстием позволяет обмениваться СО2 с воздухом во время экспозиции. Светодиодный источник зажат между двумя пластиковыми листами и расположен в центре каждого корпуса. Размещение создает однородное световое поле и сводит к минимуму затенение между образцами.
Каждый корпус монтируется с зажимами и может ввести до пяти образцов. Компактный размер сводит к минимуму пространство, необходимое для проведения эксперимента. Для подготовки фондовых решений, взвесить соответствующее количество каждого соединения.
Фондовый раствор состоит из различных солей, жизненно важных для роста водорослей. Когда соответствующее количество солей были взвешены, они разбавляются ультра-чистой водой. Фондовые растворы стерилизованы либо путем фильтрации, либо путем автоклавирования.
После стерилизации, фондовые растворы могут храниться в темноте при четырех градусах по Цельсию. Подготовь серию концентраций воздействия. Коэффициент между концентрацией воздействия не должен превышать 3,2.
Соответствующий объем экспоненциально растущих водорослей добавляется к каждой тестовой концентрации. Окончательная плотность клеток должна быть примерно 10 000 водорослей на миллилитр. Важно, что предварительная культура экспоненциально растет, чтобы выполнить критерии достоверности теста.
Измерительные флаконы смешиваются, чтобы обеспечить однородное распределение водорослей и соединений перед отбором проб. Образцы выливают в стаканы, а четыре миллилитров заливают в 20-миллилитровые сцинтилляционные флаконы. Сцинтилляционные флаконы теперь ограничены.
Пипетка 0,4 миллилитра от каждой концентрации. Добавьте 1,6 миллилитров ацетона, чтобы нарушить клеточной стенки и выпустить хлорофилл в жидкую фазу. Каждый стеклянный флакон теперь плотно близко, чтобы избежать испарения ацетона во время хранения.
Ограниченные сцинтилляционные флаконы теперь случайным образом распределены в LEVITATT и инкубированы в течение 72 часов. Измерьте интенсивность света и температуру в начале и конце инкубации, чтобы обеспечить соответствие желаемым рекомендациям. Суб-выборка делается в течение 24 часов'interval путем трубопроводов 0,4 миллилитров из каждого сцинтилляционных флаконов в стеклянные флаконы.
Добавьте 1,6 миллиона ацетона, чтобы нарушить работу клеточной стенки и выпустить хлорофилл в жидкую фазу. После добавления ацетона, винт крышки плотно и оставить образцы в темноте до анализа. Используйте флюорометр для количественной оценки биомассы в образце, приобретенном в течение всего периода тестирования.
Настройки на флюорометре должны быть 420 нанометров в качестве восклицательный длина волны и длина волны выброса 671 нанометров. Каждая индивидуальная выборка измеряется три раза, и отмечаются относительные значения. Относительные значения флюорометра используются для расчета темпов роста, которые будут использоваться для дальнейшего лечения данных.
Используйте статистическое программное обеспечение, чтобы соответствовать нелинейной кривой регрессии к данным о рассчитанных темпах роста. Примером нелинейной кривой регрессии может быть логистика жизнеспособной функции. Связанный интервал доверия 95%показан рядом с моделью fit.
Регулярно эффективные значения концентрации, такие как 10, 20 и 50%неэффективны, используются для сообщения о результатах теста на экотоксичность. В заключение, LEVITATT предоставляет компактную платформу для тестирования токсичности водорослей обычных химических веществ в соответствии с международными стандартизированными руководящими принципами. Кроме того, установка обеспечивает надежную платформу для тестирования сложных веществ, которые мешают прохождению света к водорослям, таким как наноматериалы или цветные вещества.
