Кислород градиент эктацитометрия является функциональным анализом, который оценивает индивидуальную серповидную тенденцию. На сегодняшний день никаких других функциональных анализов не имеется и не используется. Кислород градиент эктацитометрия способна определить кислородное напряжение, при котором клетки крови пациента с серповидно-клеточной болезнью начинают серпить.
Это кислородное напряжение зависит от пациента, и он может служить в качестве биомаркера для тяжести заболевания. При серповидно-клеточной болезни, этот метод может быть использован для мониторинга эффективности лечения и он может быть использован для разработки новых методов лечения. Визуальная демонстрация этой техники важна, потому что она очень чувствительна.
Есть множество факторов, которые будут влиять на измерение, которое вы не знаете, когда вы начинаете работать с этой техникой. Тот, кто пытается это в первый раз может возникнуть, что техника очень чувствительна для подготовки образца и обработки образцов. Мой совет заключается в том, чтобы работать как можно более стандартизированным и разработать рутину.
Чтобы начать эту процедуру, включите компьютер и эктацитометр и откройте программное обеспечение на компьютере. Откройте азотный баллон, чтобы убедиться, что азот доступен для дезоксигената образца. Нижняя Боб в чашку и убедитесь, что чашка может повернуть свободно.
Когда программное обеспечение работает, проверьте сообщение убедитесь, что газовый клапан открыт и нажмите OK. Убедитесь, что эктацитометр запускает процесс само проверки и выберите начало. Если само проверка не удается, повторно запустите его, нажав аппаратную проверку, pO2, самоуправку. Выберите сканирование pO2 из различных тестов, перечисленных слева.
Выберите настройки справа от экрана и убедитесь, что они установлены в соответствии с параметрами, перечисленными в таблице одного из текстовых протоколов, убедившись, что держать те же настройки для каждого измерения. Сохраните эти настройки, нажав OK, а затем нажав OK снова. Во-первых, собирать образцы крови путем venepuncture в трубке, содержащей ЭДТА и хранить кровь при четырех градусах по Цельсию в течение как минимум 30 минут, но не более 24 часов.
После этого аккуратно смешайте образцы путем инверсии для гомогенизации. Пусть образцы прогреются до комнатной температуры на роликовой скамейке перед измерением. Используйте гематологический анализатор для измерения полного количества крови, поместив аспирации иглы в трубку и нажав кнопку за иглой гематологии анализатор, чтобы начать измерение и анализатор будет использовать от 20 до 200 микролитров всей крови.
Затем стандартизируйте весь образец крови до подсчета РБК 200 миллионов красных кровяных телец в пяти миллилитров PVP путем расчета объема образца, который будет добавлен. Для начала вырежьте наконечник пипетки и предварительно промокнете его, трижды перерасходуя кровь. Затем пипетка расчетный объем образца в флакон PVP.
Аккуратно смешайте образец вручную инверсией, пока он не станет однородным. Медленно нарисуйте два миллилитров крови и смесь PVP в три миллилитровых шприца без иглы. Нажмите поршень, чтобы удалить любые видимые пузырьки воздуха и избыток раствора образца до тех пор, пока между 1,5 и 1,8 миллилитров остаются в шприце.
Введать общий объем образца медленно и равномерно в Боб через разъем. Убедитесь, что уровень образца выше датчика кислорода и небольшого всасывающего отверстия. В программном обеспечении щелкните новый и заполните идентификатор выборки, замечания, дату пожертвования и вязкость PVP.
Нажмите OK и аспирировать. После 60 секунд аспирации, чашка поворачивается и аспирировать снова в течение 15 секунд. Когда вращение остановится, нажмите OK. Закройте крышку машины.
Нажмите продолжить и начать сейчас, как кислород градиент эктацитометрия делается с фиксированной выгоды. После измерения распечатайте отчет, который показывает кривую и параметры, которые автоматически рассчитываются программным обеспечением. Убедитесь, что необработанные данные автоматически хранятся в назначенной папке в настройках.
Во-первых, удалите образец шприца и замените его шприцем, наполненным дистиллированной водой или деионизированной водой. Нажмите чистой и медленно промыть разъем во время полоскания убедившись, что флеш в обоих направлениях. Затем снимите шприц и поднимите боб.
Используйте мягкую ткань, чтобы тщательно высушить боб и разъем. Затем используйте большой шприц, чтобы промыть разъем для того, чтобы удалить любую воду, оставшуюся в трубке и Боб. Держите шприц на входе и блокировать розетку Боб, чтобы вернуть давление в трубах тем самым удаляя оставшуюся воду.
Затем высушите чашку, избегая при этом прикосновения к кислороду месте. Опустите боб и чашку, готовя машину к следующему измерению. После обеспечения того, чтобы машина была правильно промыта, проверьте, чтобы убедиться, что надлежащие трубки относятся к решению очистки.
Закройте программное обеспечение, нажмите близко, и нажмите начать в конце дня очистки программы. Затем опорожните бутылку отходов и использовать мягкую ткань, чтобы высушить боб и чашку. Закройте крышку машины.
Закройте азотный баллон и выключите компьютер и машину. Кислород градиент эктацитометрия может быть использована для изучения серповидного поведения красных кровяных телец в диапазоне концентраций кислорода. В кислородной градиентной эктацитометрии за непрерывной дезоксигенацией образца азотным газом следует быстрая реоксигенация окружающим воздухом.
В этих условиях серп красных кровяных телец можно наблюдать при дезоксигенации. Это вызовет искажение дифракции картины, потому что серп красные клетки не будут выравниваться должным образом под применяется стресс стрижки. Серп красные кровяные тельца показывают изменение формы во время дезоксигенации, которая имитирует условия во время кислородной градиентной эктацитометрии, но не показывают никаких изменений в форме при насыщении кислородом.
Этот процесс приводит к искажению структуры дифракции во время кислородной градиентной эктацитометрии и, таким образом, к снижению индекса удлинивания. Репрезентативная кривая, полученная эктацитометром, показывает шесть параметров, отражающих различные характеристики серповидного поведения: максимальный индекс удлинивания, минимальный индекс удлинения, дельта EI, точка серпа, область под кривой и восстановление. Здесь показаны репрезентативные кривые эритроцитов от здорового контроля, пациенты с признаками HbS и однородный больной серповидно-клеточной болезнью.
Явные различия в репрезентативных кривых гомозиготных больных серповидно-клеточной терапии гидроксиловой мочевиной и переливанием подчеркивают полезность этого анализа. Есть множество факторов, которые влияют на кислород градиент эктацитометрии, такие как температура, рН, и осмоляность PVP, но и остатки воды и степень смешивания раствора образца крови может повлиять на измерения. Поэтому важное значение имеет стандартизированная обработка образцов.
Результат кислородной градиентной эктацитометрии может быть непосредственно реализован в клинической практике, тем самым способствуя персонализированной медицине. Этот метод позволяет изучать серповидное поведение, чтобы исследовать потенциал новых методов лечения серповидно-клеточной болезни и может служить клинически актуальным биомаркером для тяжести заболевания.
