Этот метод повторяет в виво биомеханических стрейч тестирования брахиального сплетения в поросенка, выступающей в качестве весьма актуальной клинической большой неонатальной модели животных. Эти методы могут не только помочь в понимании механизмов растяжения травмы, но также может сообщить о значениях порога травмы для функционального и структурного дефицита в неонатальном брахиальном сплетении. Демонстрацией процедуры будет Рейчел Мэги, аспирант из моей лаборатории.
После подтверждения отсутствия палебральных и абстиненции рефлексы, место анестезированной свиньи в положении на спине на операционном столе, с верхней конечности в похищении подвергать подмышей области. Поместите драпировку над животным и используйте лезвие скальпеля номер 10, чтобы сделать разрезы над отмеченной кожей. Средний разрез является чрезмерно трахеи до верхней трети грудины, подвергая брахиального сплетения комплекса по обе стороны позвоночника.
Чтобы разоблачить одну сторону брахиального сплетения животного, верхний разрез делается от верхнего конца среднего разреза, соответствующего C3, к верхней руке, и нижний разрез делается из нижнего конца среднего разреза, соответствующего T3, на верхнюю руку. Используйте типсы с каждой стороны разреза, чтобы отделить ткань от надстернальной выемки вдоль края ключицы к верхней руке, щадя головную и базилиническую вены. Используя ножницы, щипцы и тупое вскрытие, отпустите превосходный лоскут для доступа к шейной области брахиального сплетения, и нижний лоскут для доступа к грудной области брахиального сплетения.
Выполните тупое вскрытие поверхностных мышц, чтобы разоблачить брахиального сплетения. Затем внимательно изучите сплетение, чтобы найти бифуркации отделов и определить области брахиального сплетения ниже бифуркации, ближе к руке, как шнур и нерв и области выше бифуркации, ближе к позвоночнику, как корень или ствол. Для настройки биомеханического испытательного устройства прикрепите основание устройства к тележке и используйте большие C-зажимы для крепления электромеханического привода к основанию.
Прикрепите 200-ньютоновую ячейку нагрузки к приводу и винт в зажим с мягким плексигласом, чтобы предотвратить концентрацию стресса в месте зажима. Используя штатив, приложите камеру, которая может записывать до 100 кадров в секунду при разрешении 658 на 492 пикселя и прикрепляйте USB-кабели с камеры, привода и загрузки ячейки к компьютеру для интеграции и синхронизации всех компонентов установки. Затем подключите компьютер, привод и загрузите ячейку в источник питания.
Для калибровки ячейки нагрузки перед записью применяемых нагрузок используйте регулируемую ручку, чтобы установить привод под углом 90 градусов таким образом, чтобы он выравнивался вертикально и проверил угол с помощью protractor. Откройте программное обеспечение ячейки нагрузки и нажмите Кнопку, чтобы показать живое считывание напряжения. Далее повесить от нуля до 1000-граммовых весов от зажима в 100-граммовых шагом, запись измеренного напряжения при каждой нагрузке.
Когда напряжение было записано для всех 10 весов, вычислить склон и перехватить, чтобы определить линейное уравнение напряжения и весов. Для биомеханического тестирования изолированного брахиального сплетения нерва, использовать тонкие ножницы, чтобы сократить нерв и использовать пользовательский зажим, чтобы зажать разрез стороне нерва. Этикетка зажатого сегмента нерва с черной акриловой краской и место один сантиметр линейки квартиру внутри животного, чтобы установить шкалу для анализа данных.
В программном обеспечении камеры поместите поле зрения камеры непосредственно над проверенными сегментами, чтобы обеспечить мониторинг движения и/или смещения маркеров и определить фактическое напряжение тканей в определенной точке времени. Завехать базовые измерения, такие как высота, с которой нерв вставляется в тело со стола, высота зажима со стола, угол привода и полная длина ткани. Откройте программное обеспечение программирования и нажмите Run.
Введите имя файла и перемещение и нажмите Initialize и TARE. Нажмите Начните, чтобы растянуть сегмент брахиального сплетения. Ткань будет вытягиваться с заданной скоростью 500 миллиметров в минуту до полного отказа происходит в любом сегменте нервной ткани.
Затем сохраните видеофайл, натященную тентильную нагрузку, смещение ткани и продолжительность теста, и заместит место сбоя как сегмент, на котором ткань разрывается. В этом репрезентативном тесте из четырех сегментов брахиального сплетения полученная отказная нагрузка составила 8,3 ньютона, а средний отказ штамма составил 35% для образцов неонатальной нервной ткани при растягиваниях. Некоторые области нерва подверглись более высокому напряжению, чем другие, что указывает на неуниформную травму по длине нерва.
Данные камеры позволили определить место сбоя в этом эксперименте как проксимальное для профменов. Важно, чтобы, во-первых, животное глубоко анестезировано и не проявляет никаких признаков боли или дискомфорта, во-вторых, откалибровать нагрузочную клетку, а в-третьих, крепко зажать ткань. Эта модель животных in vivo может быть использована для изучения функциональных и гистологических изменений в ткани брахиального сплетения после различной степени растяжек и для изучения сложных сценариев родов.
