Name: murine distal colostomy, a novel model of diversion colitis in c57bl/6 mice
Uploaded: 2018-07-12T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 20 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice at JoVE.com

Todos os métodos descritos aqui foram aprovados pela autoridade veterinária do governo (turismo für Landwirtschaft, und Lebensmittelsicherheit Fischerei Mecklenburg-Vorpommern, (LALLF M-V)).
1. pré-operatório cuidados e preparação do Animal
<ol><li>Após a chegada na instalação de animais, dividir os animais (C57Bl/6) em grupos de tamanho similar, cada grupo da gaiola juntos e manter grupos constante em todas as experiências. Nota: Use animais do mesmo sexo. Os resultados descritos foram obtidos com ratos masculinos. Nota: Se animais machos são usados, começando juntos quando eles são 7 semanas de idade, para que possa estabelecer-se uma hierarquia de grupos de gaiola, minimizando assim o risco de comportamento agressivo durante as experiências.</li>
	<li>Pelo menos uma semana antes da cirurgia, alternar para uma alta energia (> 14 MJ/kg) e rica em proteínas (> 20%) alimentar contendo todos os oligoelementos essenciais e vitaminas (para obter detalhes, consulte lista de materiais). Nota: Assegurar todos os ratos pesar pelo menos 25 g quando a cirurgia é realizada.</li>
	<li>Induzi a anestesia e analgesia pela injeção intraperitoneal de cetamina (87 mg/kg, i.p.) e cloridrato de xilazina (13 mg/kg, i.p.). Espere até que o mouse tolera estimulação mecânica, por exemplo, arremesso de dedo do pé, sem resposta motora.</li>
	<li>Prenda o mouse seguiram com fitas na posição supina sobre uma subjacência de calor posicionada a mesa de operação, garantindo o posicionamento durante a operação estável e evitando uma esmagadora perda de calor do corpo. Nota: A subjacência de calor deve ter uma temperatura de superfície de 36 ° C a 40 ° C; a temperatura de operação deve ser de 21 ° C.</li>
</ol>2. distal colostomia operação
<ol><li>Raspe o cabelo abdominal. Antes de iniciar a cirurgia, desinfecte o campo de operação três vezes, utilizando álcool 70% e um Iodofor. Cubra o campo de operação, a garantia de condições assépticas.</li>
	<li>Realizar uma laparotomia mediana de 15 mm por incisão da musculatura abdominal e o peritônio ao longo da linea alba, minimizando assim a perda de sangue.</li>
	<li>Use dois DeBakey atraumática pinça, puxe cuidadosamente o ceco, íleo terminal e ascendente e o cólon transverso da cavidade peritoneal. Nota: Tenha cuidado para limitar estritamente a manipulação mecânica do intestino para evitar danos às estruturas mesentéricas.</li>
	<li>Identifica o polo cecal, o cólon ascendente e intestino delgado (figuras 1a e 1b). Nota: A identificação correta do cólon ascendente é fundamental para colocação da colostomia. Em casos onde a anatomia da região ileocecal é ambígua, a presença de Peyer identifica o intestino delgado, e a presença de fezes formadas caracteriza o cólon.</li>
	<li>Use uma régua para determinar a posição da futuro da colostomia. Ele deve ser colocado 20mm distal à válvula ileocecal para uma colostomia distal.</li>
	<li>Efectue uma segunda incisão de 3 mm na parede abdominal no quadrante superior direito. Puxe o segmento de cólon anteriormente identificados através desta incisão para formar um loop, tomando cuidado para não distorcer o loop.</li>
	<li>Passe cuidadosamente uma cânula de calibre 22 i.v. flexível através do mésocôlon. Tome cuidado para não danificar estruturas vasculares mesentéricas.</li>
	<li>Retorno do intestino para a cavidade peritoneal.</li>
	<li>Corrigi as duas extremidades do tubo flexível para a pele com pontos simples e uma sutura absorvível (por exemplo, Poliglactina 910 ou fibras c de 1/2 de 4-0).</li>
	<li>Antes de fechar a laparotomia, realizar ressuscitação com fluidos usando uma injeção intraperitoneal de soro fisiológico a 0,9% 0,5 mL.</li>
	<li>Feche o peritônio e a camada muscular com uma sutura contínua usando uma sutura absorvível (por exemplo, Poliglactina 910 ou fibras c de 1/2 de 4-0). Feche a pele com uma sutura contínua usando uma sutura absorvível (por exemplo, Poliglactina 910 ou fibras c de 1/2 de 4-0).</li>
	<li>Abra o loop exteriorização do cólon através da realização de uma transecção subtotal usando uma tesoura bem. Evite todos os ferimentos para o mesentério. Não transecto completamente o cólon.</li>
	<li>Corrigir a cada abertura da colostomia usando três pontos único da cheio-espessura no peritônio e pele usando um monofil, sutura absorvível (por exemplo, polydioxanone ou monofil 3 de 6-0/8s). O loop aferente, que é uma final-colostomia funcional, e o loop eferente, que é uma fístula mucosa, sejam claramente separadas neste momento (Figura 1C). Nota: O tempo de operação deve ser menos de 20 minutos para limitar as perdas térmicas e fluidas.</li>
	<li>Após terminar a cirurgia, desinfectar instrumentos usando uma solução de desinfecção aldeído livre em um banho ultra-sônico de acordo com as instruções do fabricante.</li>
</ol>3. operação sham (Colotomy)
<ol><li>Execute as etapas 1.1. através de 2.4.</li>
	<li>Use uma régua para determinar a posição de futuros colotomy. O colotomy deve ser posicionado à mesma distância da válvula ileocecal como a colostomia no grupo experimental.</li>
	<li>Abra o cólon pelo menos dois terços sua circunferência usando tesouras bem.</li>
	<li>Fechar o colotomy com uma única camada, espessura total interrompido sutura usando um monofil, sutura absorvível (por exemplo, polydioxanone, monofil 3 de 6-0/8s). Nota: O tempo de operação deve ser menos de 20 minutos para um cirurgião tarimbado, limitando perdas térmicas e fluidas.</li>
	<li>Execute os passos 2.10. , 2.11. e 2.14.</li>
</ol>4. pós-operatório cuidados
<ol><li>Retorno de animais de suas gaiolas. Proporcionam um ambiente bem temperado de 37 ° C (por exemplo, com uma lâmpada infravermelha) até que os ratos são totalmente acordados. Em seguida, manter os ratos em um ambiente de temperatura e umidade-regulamentados (21 ° C; 30% ± 10% umidade relativa). Permita o livre acesso à comida e água potável. Para facilitar a penetração de fluidos, fornecem adicional ensopados de água alimentação animal.</li>
	<li>Iniciar analgesia pós-operatória injetando buprenorfina de peso de corpo de 0,1 mg/kg s.c. quando animais mostram resposta à estimulação mecânica. Tenha cuidado para evitar a depressão respiratória.</li>
	<li>Suplemento de água potável com tramadol 1mg/mL para analgesia contínua durante a primeira semana pós-operatória.</li>
	<li>Para compensar a diminuição da ingestão de líquidos devido à mobilidade reduzida, fornecer um bloco sólido beber na gaiola durante a primeira semana pós-operatória.</li>
	<li>Pesar os animais e o escore de comportamento animal diariamente durante a primeira semana, em dois dias durante o restante do primeiro mês e a cada três dias durante o segundo mês usando o escore de severidade de doença descrito em Kleinwort et al 6.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Glotzer, D. J., Glick, M. E., Goldman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proctitis+and+colitis+following+diversion+of+the+fecal+stream.">Proctitis and colitis following diversion of the fecal stream.</a> Gastroenterology. 80, 438-441 (1981).</li><li>Morson, B., Dawson, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Gastrointestinal Pathology. , (1972).</li><li>Whelan, R. L., Abramson, D., Kim, D. S., Hashmi, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversion+colitis.+A+prospective+study.">Diversion colitis. A prospective study.</a> Surg Endosc. 8, 19-24 (1994).</li><li>Haas, P. A., Fox, T. A., Szilagy, E. 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Todos os autores declaram que eles têm não tem interesses concorrente.

O modelo murino de DC apresentado neste protocolo confiável reproduz as características histopatológicas de DC humana (por exemplo, de novo desenvolvimento de folículos linfoides da submucosa de segmentos intestinais inflamados, cripta encurtamento e reduções em número de células de Goblet). Além desta vantagem, este modelo é induzido por um fator desencadeante muito semelhante e apresenta-se com um curso clínico de moderada a leve gravidade como é o caso em humanos mais afetados.
Para obter resultados reprodutíveis e letalidade aceitável perioperatória, alguma prática em técnicas microcirúrgicos é necessária. No entanto, tanto da colostomia e sham operação (colotomy) pode ser executada com mortalidade perioperatória muito baixa (< 10%). Algumas etapas operacionais são de grande importância: 1) identificar positivamente o íleo cólon e terminal. Em casos onde não está claro a anatomia da região ileocecal, cólon pode ser identificado pela presença de fezes formadas e íleo terminal pela presença de Peyer. 2) quando exteriorizing o loop de colostomia, assegurar que o mesentério não está contorcido, evitando Isquemia mesentérica e íleo mecânico. 3) quando perfurando o mesentério com o tubo flexível, assegurar-se de que um sector isento de navio é escolhido, evitando Isquemia mesentérica e sangramento. 4) ao criar a pequena incisão na parede abdominal, verificar hemostasia suficiente. Se necessário, use thermo-coagulação para parar o sangramento de vasos do músculo. 5) assegura a Colônica loop é aberto pelo menos em dois terços de sua circunferência e que a parede posterior é suficientemente exteriorizada, garantindo assim o bloqueio completo da passagem de fezes para os segmentos de intestino distal. 6) assegurar que ambas as extremidades da colostomia são bem fixadas à pele para evitar uma passagem aberta para a cavidade peritoneal, resultando em maiores riscos de infecção ou um íleo mecânico porque o fluxo fecal não pode sair. Normalmente, todos os procedimentos cirúrgicos podem ser realizados sem lupas ou microscópios cirúrgicos. Em geral, a utilização destes dispositivos requer uma formação complementar.
Mesmo quando a complexidade dos procedimentos cirúrgicos é apenas moderada, há muitas questões agente e perioperatório essenciais a ser considerado para finalizar com sucesso a experiência com resultados reprodutíveis.
É essencial para a sobrevivência a longo prazo com uma colostomia permanente que os ratos têm um ceco intacto. Um grupo experimental com colostomia proximal adjacente à válvula ileocecal mostrou uma taxa de mortalidade de 100% na primeira semana pós-operatória devido à perda de peso irreversível (dados não mostrados). Portanto, é de extrema importância para escolher o local da colostomia distal no mínimo 20 mm válvula de Bauhin. Esta observação pode ser devido a fisiologia da digestão de roedor. Transporte retrógrado do cólon proximal ao ceco ocorre nestas espécies. O ceco é onde a síntese de nutrientes por occurs8 a microflora bacteriana. MCV normal e MCH valores durante o seguimento a longo prazo indicam que animais com colostomia distal não sofrem de deficiências de vitaminas importantes. Além disso, a coprofagia é uma parte essencial do comportamento nutricional de roedores em seus ambientes naturais. Ao estabelecer o modelo, estávamos muito preocupados que distorçer a coprofagia em consequência da presença de uma colostomia permanente pode resultar em deficiências nutricionais, (por exemplo, vitamina B). No entanto, apesar de ser um problema em condições onde o acesso aos nutrientes é limitado, anteriormente mostrou que coprofagia perde sua importância nutricional nas condições experimentais com livre excesso de água e alimento nutricionalmente equilibrada9 . Nas nossas condições experimentais, é vital para otimizar as condições de ingestão nutricional pós-operatório. Usamos ração animal que tinha um teor elevado de proteínas, otimizado qualidade de proteína e aumento da densidade de energia. Animais foram aclimatados para essa dieta pelo menos duas semanas antes da cirurgia. No pós-operatório, ensopados de água de alimentação foi oferecida ad libidum para facilitar alimentar e ingestão de líquidos.
É fundamental utilizar ratos do mesmo sexo em ambos os grupos, experimentais e sham. Sexo foi mostrado para afetar significativamente o curso não só de inflamação sistêmica, mas também de inflamação intestinal em colite induzida quimicamente vários modelos10,11,12. Em geral, animais machos irão desenvolver a doença mais pronunciada com inflamação maior, mais dano de cripta, menos regeneração, níveis mais elevados de citocinas pró-inflamatórias e recuperações mais lentas de perda de peso10. Uma vantagem adicional do uso de animais machos é melhores pesos de idade correspondente corpo pré-operatória, levando a melhor compensação do período de perda de peso inicial de pós-operatório. No entanto, ratos fêmeas podem ser usados no protocolo se específicas perguntas (por exemplo, a influência dos hormônios sobre a manifestação da DC estão a tratar de sexo. Usar ratos masculinos requer mais esforço na manutenção de condições de habitação estável. Camundongos machos são mais propensos a interações agressivas, levando a lesões e morte. Camundongos machos vivem em hierarquias estabelecidas com um macho dominante. Uma vez estabelecida a hierarquia no grupo, continuou lutando é menos comum13,14. Por esta razão, formamos os grupos experimentais à chegada dos ratos em nossas instalações animais pelo menos duas semanas antes da cirurgia e mantido estes grupos até experimentos terminaram. Em geral, grupos experimentais de 5 a 7 animais foram mantidos em uma gaiola. Manutenção de condições de alojamento e social estável foi de extrema importância não só para minimizar comportamentos agressivos de animais experimentais. Condições de habitação foram mostradas para influenciar o ganho de peso, bem como parâmetros imunológicos15,16,17.
Susceptibilidade aos modelos de colite induzida quimicamente e geneticamente modificados varia consideravelmente entre estirpes de rato a18,19,20. O presente protocolo foi estabelecido em camundongos C57Bl/6, uma cepa de rato com um fundo genético bem definido e um bem caracterizadas sistema imunológico21,22,23 que mostra intermediário para forte inflamatória resposta no dextran sulfato de sódio-induzida colite modelo20 e é considerado um protótipo de estirpe Th123. O uso de outras tensões do rato pode ser considerado quando atividades de doença mais graves ou um ambiente de Th2 é necessário.
Em resumo, o nosso protocolo constitui uma ferramenta valiosa para avaliar o papel de vários tipos de células imunes, citocinas, quimiocinas e outras moléculas de sinalização na patogénese da DC. Um grande número de modelos de camundongos geneticamente modificados estão disponível com o fundo C57BL/6 e pode ser combinado com o nosso modelo (por exemplo, ratos deficientes de IL-17, IL-10, chemokine CXCL13, chemokine-receptores CXCR5 e CCR7 e esfingosina-1-fosfato receptor 4). A disponibilidade de cepas de congenic do mouse sobre o fundo de C57BL/6 largamente facilitar a transferência de experiências para estabelecer o papel dos tipos de células distintas envolvidos na etiologia da DC. Finalmente, o modelo oferece a oportunidade de avaliar a influência das intervenções locais (por exemplo, modificação do local microbiome e terapia antiinflamatória local) sobre imunidade mucosal em segmentos intestinais afetados e não afetados e sistêmica homeostase imune.

Nos últimos anos, um número substancial de colite não-infecciosas entidades diferentes de doenças clássica inflamatória intestinal (IBD; i. e., ulcerosa de Crohn doença ou colite) tem sido clinicamente e histopatologicamente caracterizada em seres humanos. Os mecanismos fisiopatológicos, levando ao desenvolvimento destas formas de colite não são completamente compreendidos parcialmente, porque os modelos animais apropriados são escassos. Colite de diversão é uma dessas entidades recentemente descritas. Embora o termo foi inventado em 1980 por Glotzer1, a descrição inicial de um fenótipo semelhante foi dada em 1972 por Morson2. A doença se desenvolve em 50% a 91% dos pacientes com desvio de enterostomy, e sua intensidade clínica varia de3,4. Tendo em conta a incidência anual de cerca de 120.000 pacientes de colostomia em Estados Unidos da América, esta entidade de doença constitui um importante problema de saúde.
O objetivo geral de desenvolver este protocolo foi fornecer um modelo murino de DC que se baseia em um gatilho de colite semelhante ao observado em humano DC e que reproduz as características histopatológicas primárias da doença humana. Em contraste com outros modelos de colite murino, indução de colite em nosso modelo não requer animais geneticamente modificados (por exemplo, ratos transgénicos de IL-7, caderina N dominante negativos ratos ou camundongos TGFβ- / - ), o aplicativo de quimicamente irritante de substâncias (por exemplo, dextrano sulfato de sódio (DSS) - colite induzida, ou trinitrobenzeno sulfônico (neutrófilos) - induzido colite), ou a transferência de populações de células específicos em camundongos deficientes imunes (como a transferência dealta CD45RB modelo de colite) (para uma revisão, ver5). Em contraste com outros modelos, o sistema imunológico intacto do nosso modelo DC permite avaliação do mecanismo imunológico envolvido no desenvolvimento da DC. A limitação de inflamação da mucosa do segmento intestinal excluído permite a avaliação de sua repercussão na imunidade da mucosa em outras partes do trato gastrintestinal, sobre a homeostase imune em outros compartimentos imunes do trato intestinal (por exemplo, , Do Peyer patches e mesenteriale dos gânglios linfáticos) e sobre a homeostase imune de todo o organismo. Finalmente, o nosso modelo constitui um instrumento apropriado para investigar os mecanismos de controlo locais estímulos inflamatórios provenientes de alterações no ambiente local normal para o local microbiome tanto antígenos alimentares.

<table><tbody><tr><td>&lt;em&gt;Operation material&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>heat underlay, 6 watt</td><td>ThermoLux, Witte + Sutor GmbH</td><td>461265</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 70% (with methylethylketon)</td><td>Pharmacie of the University Hospital Greifswald</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wooden applicators, small cotton head onesided, wooden stick, 150 mm length</td><td>Centramed GmbH, Germany</td><td>8308370</td><td>for disinfection of operation field</td></tr><tr><td>Scissor</td><td>Aesculap (BRAUN)</td><td>BC064R</td><td></td></tr><tr><td>Atraumatic DeBakey forceps</td><td>Aesculap (BRAUN)</td><td>OC021R</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Aesculap (BRAUN)</td><td>BM012R</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix Safety &lt;em&gt;i.v.&lt;/em&gt; cannula 22G</td><td>Braun Melsungen AG, Germany</td><td>4268091S-01</td><td></td></tr><tr><td>VICRYL Plus 4-0 violet braided; V-5 17 m 1/2c; 70 cm</td><td>ETHICON, Inc.</td><td>VCP994H</td><td></td></tr><tr><td>PDS II 6-0 monofil; V-18 13 mm 3/8c; 70 cm</td><td>ETHICON, Inc.</td><td>Z991H</td><td></td></tr><tr><td>BD Plastipak 1 mL (Syringes with needle with sterile interior)</td><td>BD Medical</td><td>305501</td><td></td></tr><tr><td>Triacid-N (N-Dodecylpropan-1,3-diamin)</td><td>ANTISEPTICA, Germany</td><td>18824-01</td><td>disinfection of surgical instruments in ultrasonic bath</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Medications&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ketamine 10%, 100 mg/mL (ketamine hydrochloride)</td><td>selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH</td><td>9089.01.00</td><td>87 mg/kg &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>Xylasel, 20 mg/mL (xylazine hydrochloride)</td><td>selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH</td><td>400300.00.00</td><td>13 mg/kg &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td><td>Braun Melsungen AG, Germany</td><td>6697366.00.00</td><td></td></tr><tr><td>Buprenovet 0.3 mg/mL (buprenorphine)</td><td>Bayer, Germany</td><td>PZN: 01498870</td><td>0.1 mg/kg &lt;em&gt;s.c.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>Tramal Drops, 100 mg/mL (tramadol hydrochloride)</td><td>Gr&amp;uuml;nenthal GmbH, Germany</td><td>10116838</td><td>1 mg/mL drinking water</td></tr><tr><td>Ceftriaxon-saar 2 g (ceftriaxone)&amp;nbsp;</td><td>Cephasaar GmbH, Germany</td><td>PZN: 08844252</td><td>25 mg/kg body weight &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>metronidazole 5 mg/mL</td><td>Braun Melsungen AG, Germany</td><td>PZN: 05543515</td><td>12.5 mg/kg body weight &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Food&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ssniff M-Z Ereich</td><td>ssniff, Germany</td><td>&amp;nbsp;V1184-3</td><td></td></tr><tr><td>Solid Drink Dehyprev Vit BIO, pouches</td><td>TripleATrading, the Netherlands</td><td>SDSHPV-75</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nikon Eclipse Ci-L</td><td>Nikon Instruments Europe BV, Germany</td><td></td><td>light microscopy</td></tr><tr><td>VetScan HM 5&amp;nbsp;</td><td>Abaxis, USA</td><td>770-9000</td><td>Veterinary hematology analyzer of 50 &amp;micro;l venous EDTA-blood</td></tr><tr><td>Bandelin SONOREX (Ultrasonic bath)</td><td>Bandelin electronics, Germany</td><td>RK 100 H</td><td>disinfection of surgical instruments</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Software&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NIS-Element BR4 software</td><td>Nikon Instruments Europe BV, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism Version 6</td><td>GraphPad Software, Inc.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

murine distal colostomy, a novel model of diversion colitis in c57bl/6 mice

Colite de diversão (DC) é uma condição clínica frequente, ocorrendo em pacientes com segmentos intestinais excluídos o fluxo fecal como resultado de um desvio enterostomy. A etiologia desta doença permanece mal definida mas parece diferir da clássica Enteropatias inflamatórias tais como a doença de Crohn e colite ulcerativa. Pesquisa teve como objetivo decifrar os mecanismos fisiopatológicos, levando ao desenvolvimento desta doença tem sido severamente dificultada pela falta de um adequado modelo murino. Este protocolo gera um modelo murino de DC que facilita o estudo da função do sistema imunológico e sua interação com o microbiome no desenvolvimento da DC. Nesse modelo, usando animais C57BL/6, partes distais do cólon são excluídas do fluxo fecal, criando uma colostomia distal, provocando o desenvolvimento de leve a moderada inflamação nos segmentos excluídos do intestino e reproduzindo as lesões de marca registrada do ser humano DC com uma resposta inflamatória sistêmica moderada. Em contraste com o modelo de rato, um grande número de modelos de murino geneticamente modificados no fundo C57BL/6 está disponível. A combinação destes animais com o nosso modelo permite que as funções potenciais de individuais citocinas, quimiocinas ou receptores de moléculas bioativas (por exemplo, interleucina (IL) -17; Il-10, chemokine CXCL13, chemokine receptores CXCR5 e CCR7 e o receptor de esfingosina-1-fosfato 4) para ser avaliado na patogénese da DC. Em grande parte a disponibilidade de cepas de congenic do mouse sobre o fundo de C57BL/6 facilita a transferência de experiências para estabelecer os papéis de tipos de células distintas envolvidos na etiologia da DC. Finalmente, o modelo oferece a oportunidade de avaliar as influências de intervenções locais (por exemplo, modificação do local microbiome ou terapia anti-inflamatória local) sobre imunidade mucosal em segmentos intestinais afetados e não afetados e na homeostase imune sistêmica.

Cirurgia é bem tolerada no experimental (colostomia) e grupos de Souza (colotomy). Mortalidade perioperatória não deve exceder 10%, quando a gestão de cirurgia e perioperatório é executada corretamente. Na primeira semana pós-operatória, perda de peso significativa é vista em ambos os grupos, experimentais e sham. Animais do grupo farsa atingir seu nadir de peso, geralmente em direção ao quarto dia de pós-operatório, mas ocorre um dia depois no grupo experimental. Perda de peso é mais pronunciada no grupo experimental, alcançando 21,7% do peso corporal inicial. Em contraste, os animais de Souza perdem 10,8% de seu corpo inicial de peso (Figura 2)6. Após o nadir de peso na primeira semana pós-operatória, peso corporal aumenta continuamente em ambos os grupos experimentais, mas com uma inclinação mais lenta no grupo experimental. Sinais e sintomas de inflamação intestinal grave (i.e., descarga sangrenta ou líquidas evacuações ocorrem nem no experimental, nem o grupo sham6). Mortalidade total durante os primeiros 60 dias no pós-operatório é de cerca de 40% no grupo de colostomia e cerca de 10% no grupo colotomy. A maioria das mortes ocorrem durante a primeira semana pós-operatória (61% no grupo experimental, 66% no grupo sham). Causas de morte são mostradas na Figura 3.
Colostomia distal em camundongos resulta no desenvolvimento de colite linfocítica predominantemente reproduzindo as características histológicas de marca da DC humana. Estas alterações aumentam com a duração de exclusão intestinal. Comprimento da cripta é significativamente reduzido em segmentos excluídos do intestino. Este encurtamento atinge a significância estatística após 14 dias de desvio fecal (Figura 3a). O comprimento da cripta cálice célula-rolamento é reduzido após 30 dias em segmentos excluídos do intestino (Figura 3b). Números de célula absoluta do cálice são também significativamente reduzidos em criptas no segmento intestinal excluído após 14 dias de pós-operatório (Figura 3C). A lesão de marca da DC, o desenvolvimento de folículos linfoides na mucosa, requer uma maior duração do desvio de fezes. Apesar de um aumento do número de folículos linfoides pode ser observado logo em duas semanas, as diferenças se tornam significativas depois de dois meses (figuras 5a-c). Todas as alterações histopatológicas descritas antes são mais acentuadas na distal do que nas regiões proximais dos segmentos excluídos do intestino. Um infiltrado neutrofílico típico como um sinal de inflamação aguda geralmente não é observado (figuras 5 d-e).
Como um sinal de uma repercussão sistêmica de inflamação intestinal local, contagens dos neutrófilos são aumentou significativamente em animais de colostomia logo em 14 dias após a cirurgia. Esta diferença é mantida até o final do período de observação (60 dias). Contagens de plaquetas são aumentou ligeiramente em animais com desvio do cólon após 60 dias (Figura 6). Hematócrito e hemoglobina são reduzidos a 14 dias após a operação no grupo de colostomia em relação ao grupo de Souza.
Ficou demonstrado que deficiência de vitamina em causas de roedores reduzido volume corpuscular médio (MCH) e significa valores de hemoglobina corpuscular médio (MCV)7. Em nosso modelo, vemos iniciais aumentos em ambos estes parâmetros após 14 e 30 dias. Tanto MCV e MCH retornam aos valores normais após longo acompanhamento (Figura 7). Isto mostra que a colostomia distal não resulta em deficiência vitamínica clinicamente significativa durante o seguimento a longo prazo.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig1.jpg"> Figura 1: Anatomia da região cecal e o procedimento cirúrgico. (a) gráfica representação da anatomia no pós-operatório. (b) topografia do cecal pol e pontos anatômicos. (c) gráfico representação das aberturas da colostomia. Figura 1a foi modificado de Kleinwort et al.6. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig2.jpg"> Figura 2: desenvolvimento do peso do corpo. Peso de corpo é mostrado como porcentagem do peso do corpo no pré-operatório. O corpo de peso curvas de colostomia e sham (colotomy) animais revelam que a perda de peso no pós-operatório inicial foi significativamente maior no grupo de colostomia em relação ao grupo de Souza (p < 0,001). Valores são meios ± erros-padrão da média entre 21 a 26 animais por grupo (21 animais receberam colostomias; 26 animais estavam no grupo sham). Esta figura foi modificada de Kleinwort et al.6. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig3.jpg"> Figura 3: causas de morte. São representadas como porcentagens de mortalidade e complicações são ilustradas em um gráfico de pizza (colostomia (um) grupo, grupo b Souza). Complicações pós-operatórias foram determinadas pela necropsia. Síndrome de emaciação foi definido como a perda de peso contínua superior a 33% do peso corporal inicial e sem outros achados na necropsia. Íleo e fuga anastomótica foram diagnosticados na necropsia. Complicações do estoma foram definidas como abcessos peristomal e separações mucocutâneas. Outras complicações composta por deiscência de ferida da laparotomia, isquemia do ceco, e casos não está claro na necropsia. Diferenças significativas na distribuição de complicações pós-operatórias foram vistas entre os grupos (p = 0.021, analisados utilizando o teste exato de Fisher para análise de dois lados de tabelas de contingência até 6 × 6). Havia 39 animais no grupo de colostomia e 29 no grupo sham. Esta figura foi modificada de Kleinwort et al.6. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig4.jpg"> Figura 4: população de comprimento e célula de cálice de cripta. Números de comprimento e cálice célula cripta foram determinados utilizando cortes de parafina do reto após coloração ácido periódico-Schiff. (a) comprimento cripta foi diminuiu significativamente no reto dos animais com colite de diversão (DC). (b) o comprimento da região de célula cálice-rolamento da cripta foi medido e definido como uma relação para o comprimento total da cripta. Trinta e sessenta dias no pós-operatório, a percentagem de células de goblet cripta-comprimento-rolamento foi diminuída no grupo DC. (c) Taça celulares foram significativamente reduzidos em animais de DC em relação ao grupo de Souza. Gráficos em (a) a (c) mostram meios e erros-padrão através de 5 a 9 animais por grupo (dias de colostomia 14 e 30, sham 14 dias: n = 8; colostomia 60 dias: n = 5; sham a 30 e 60 dias: n = 9); ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. Esta figura foi modificada de Kleinwort et al.6. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig4large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig5.jpg"> Figura 5: folículos linfoides e infiltrados inflamatórios. (a) linfoides folículos dos cólons desviadas e animais de Souza foram contados em cortes de parafina do reto corados com hematoxilina e eosina. O gráfico mostra meios e erros-padrão entre 5 a 9 animais por grupo (dias de colostomia 14 e 30, sham 14 dias: n = 8; colostomia 60 dias: n = 5; 30 e 60 dias de controle: n = 9), ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. (b) e (c) representante exemplos de seções do reto de colostomia (b) e Souza (c) os animais 60 dias no pós-operatório corados com hematoxilina e eosina. Um proeminente folículo linfoide (∗) esteve presente na mucosa de um rato de colostomia. Barras de escala representam 100 µm. (d) e (e) coloração com Cloracetato reação de esterase em cortes de parafina foi realizada para detectar granulócitos neutrófilos. Em secções transversais do reto desviado, infiltrado neutrofílico inflamatório agudo foi observado no grupo de colostomia (d), nem em animais de Souza (e) até 60 dias no pós-operatório. Barras de escala representam 100 µm. Esta figura foi modificada de Kleinwort et al.6. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig5large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig6.jpg"> Figura 6: contagens de neutrófilos e plaquetas. Contagens de sangue de amostras de sangue venoso foram determinadas por um analisador de hematologia veterinária. (a) neutrófilos contagens foram aumentou significativamente no grupo de colostomia em comparação com animais Souza até 60 dias no pós-operatório. (b) contagem de plaquetas foram ligeiramente elevada no grupo de colostomia 60 dias no pós-operatório. O gráfico mostra meios e erros-padrão entre 5 a 9 animais por grupo (dias de colostomia 14 e 30, sham 14 dias: n = 8; colostomia 60 dias: n = 5; sham a 30 e 60 dias: n = 9), ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig6large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig7.jpg"> Figura 7: parâmetros de células vermelhas do sangue. Contagens de sangue de amostras de sangue venoso foram determinadas por um analisador de hematologia veterinária. (a) hemoglobina e hematócrito (b) foram significativamente menores no grupo de colostomia, comparado ao grupo de Souza. (c) volume corpuscular médio (MCH) foi significativamente elevado 14 e 30 dias no pós-operatório, no grupo de colostomia em comparação com o grupo farsa mas voltou ao normal após 60 dias. (d) significa valores de hemoglobina corpuscular médio (MCV) eram elevados após 30 dias, mas já não depois de 60 dias no pós-operatório, no grupo de colostomia comparado ao sham a animais. O gráfico mostra meios e erros-padrão entre 5 a 9 animais por grupo (dias de colostomia 14 e 30, sham 14 dias: n = 8; colostomia 60 dias: n = 5; sham a 30 e 60 dias: n = 9), ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig7large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

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Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice

Murino colostomia Distal, um novo modelo de colite de diversão em camundongos C57BL/6

Murino colostomia distal fornece um modelo murino para colite de diversão humana, uma colite linfocítica predominantemente no segmento de cólon excluído do fluxo fecal.

Diversion colitis (DC) is a frequent clinical condition occurring in patients with bowel segments excluded from the fecal stream as a result of a ...

murine-distal-colostomy-novel-model-diversion-colitis-c57bl6

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

12.8K visualizações.  Universitätsmedizin Greifswald. Murino colostomia distal fornece um modelo murino para colite de diversão humana, uma colite linfocítica predominantemente no segmento de cólon excluído do fluxo fecal.

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Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane (AOM) and Dextran Sulfate Sodium (DSS)

Individuals with inflammatory bowel disease (IBD), such as Crohn's disease (CD) or ulcerative colitis (UC) are at increased risk of developing colorectal cancer (CRC) over healthy individuals. This risk is proportional to the duration and extent of disease, with a cumulative incidence as high as 30% in individuals with longstanding UC with widespread colonic involvement.1 Colonic dysplasia in IBD and colitis associated cancer (CAC) are believed to develop as a result of repeated cycles of epithelial cell injury and repair while these cells are bathed in a chronic inflammatory cytokine milieu.2 While spontaneous and colitis-associated cancers share the quality of being adenocarcinomas, the sequence of underlying molecular events is believed to be different.3 This distinction argues the need for specific animal models of CAC.
Several mouse models currently exist for the study of CAC. Dextran sulfate sodium (DSS), an agent with direct toxic effects on the colonic epithelium, can be administered in drinking water to mice in multiple cycles to create a chronic inflammatory state. With sufficient duration, some of these mice will develop tumors.4 Tumor development is hastened in this model if administered in a pro-carcinogenic setting. These include mice with genetic mutations in tumorigenesis pathways (APC, p53, Msh2), as well as mice pre-treated with genotoxic agents (azoxymethane [AOM], 1,2-dimethylhydrazine [DMH]).5 
The combination of DSS with AOM as a model for colitis associated cancer has gained popularity for its reproducibility, potency, low price, and ease of use. Though they have a shared mechanism, AOM has been found to be more potent and stable in solution than DMH. While tumor development in other models generally requires several months, mice injected with AOM and subsequently treated with DSS develop adequate tumors in as little as 7-10 weeks.6, 7 Finally, AOM and DSS can be administered to mice of any genetic background (knock out, transgenic, etc.) without cross-breeding to a specific tumorigenic strain. Here, we demonstrate a protocol for inflammation-driven colonic tumorigenesis in mice utilizing a single injection of AOM followed by three seven-day cycles of DSS over a 10 week period. This model induces tumors with histological and molecular changes closely resembling those occurring in human CAC and provides a highly valuable model for the study of oncogenesis and chemoprevention in this disease.8

Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane AOM and Dextran Sulfate Sodium DSS

We demonstrate a protocol in which administration of the genotoxic agent azoxymethane (AOM) followed by three cycles of the pro-inflammatory agent dextran sulfate sodium (DSS) rapidly and consistently generates colon tumors in mice with morphologic and molecular similarities to those seen in human colitis-associated cancer.

Câncer de modelagem Colite Associada com Azoximetano (OMA) e sulfato de sódio Dextran (DSS)

Individuals with inflammatory bowel disease (IBD), such as Crohn's disease (CD) or ulcerative colitis (UC) are at increased risk of developing colorectal ...

Medicina

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

This protocol outlines the steps required to produce a robust model of infectious disease and colitis, as well as the methods used to characterize Citrobacter rodentium infection in mice. C. rodentium is a gram negative, murine specific bacterial pathogen that is closely related to the clinically important human pathogens enteropathogenic E. coli and enterohemorrhagic E. coli. Upon infection with C. rodentium, immunocompetent mice suffer from modest and transient weight loss and diarrhea. Histologically, intestinal crypt elongation, immune cell infiltration, and goblet cell depletion are observed. Clearance of infection is achieved after 3 to 4 weeks. Measurement of intestinal epithelial barrier integrity, bacterial load, and histological damage at different time points after infection, allow the characterization of mouse strains susceptible to infection.
The virulence mechanisms by which bacterial pathogens colonize the intestinal tract of their hosts, as well as specific host responses that defend against such infections are poorly understood. Therefore the C. rodentium model of enteric bacterial infection serves as a valuable tool to aid in our understanding of these processes. Enteric bacteria have also been linked to Inflammatory Bowel Diseases (IBDs). It has been hypothesized that the maladaptive chronic inflammatory responses seen in IBD patients develop in genetically susceptible individuals following abnormal exposure of the intestinal mucosal immune system to enteric bacteria. Therefore, the study of models of infectious colitis offers significant potential for defining potentially pathogenic host responses to enteric bacteria. C. rodentium induced colitis is one such rare model that allows for the analysis of host responses to enteric bacteria, furthering our understanding of potential mechanisms of IBD pathogenesis; essential in the development of novel preventative and therapeutic treatments.

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

Citrobacter rodentium infection provides a valuable model to study enteric bacterial infections as well as host immune responses and colitis in mice. This protocol outlines the measurement of barrier integrity, pathogen load and histological damage allowing for the thorough characterization of pathogen and host contributions to murine infectious colitis.

O<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Modelo de Rato: Contribuições Estudar patógeno e hospedeiro para Colite Infecciosa

This protocol  outlines the steps required to produce a robust model of infectious disease and  colitis, as well as the methods used to characterize ...

Imunologia e Infecção

Murine Colitis Modeling using Dextran Sulfate Sodium (DSS)

Colitis can occur from viral or bacterial infections, ischemic insult, or autoimmune disorders; most notably Ulcerative Colitis and the colonic variant of Crohn&rsquo;s Disease - Crohn&rsquo;s Colitis. Acute colitis may present with abdominal pain and distention, malabsorption, diarrhea, hematochezia and mucus in the stool. We are beginning to understand the complex interactions between the environment, genetics, and epithelial barrier dysfunction in Inflammatory Bowel Disease and animal models of colitis have been essential in advancing our understanding of this disease. One popular model involves supplementing the drinking water of mice with low-molecular weight Dextran Sodium Sulfate (DSS), resulting in epithelial damage and a robust inflammatory response in the colon lasting several days 1.Variations of this approach can be used to model acute injury, acute injury followed by repair, and repeated cycles of DSS interspersed with recovery modeling chronic inflammatory diseases 2. After a single four-day treatment of 3% DSS in drinking water, mice show signs of acute colitis including weight loss, bloody stools, and diarrhea. Mice are euthanized at the conclusion of the treatment course and at necropsy dissected colons are processed and can be 'Swiss rolled" 3 to allow microscopic analysis of the entire colon or infused with formalin as "sausages" to allow macroscopic analysis. Tissue is then embedded in paraffin, sectioned, and stained for histologic review.

Murine Colitis Modeling using Dextran Sulfate Sodium DSS

Dextran sulfate sodium (DSS) administered in the drinking water is an established murine inflammatory injury model of acute colitis. This protocol outlines the method for DSS treatment and the preparation of tissues.

Modelagem Colite murino utilizando Dextran Sulfato de Sódio (DSS)

Colitis can occur from viral or bacterial infections, ischemic insult, or autoimmune disorders; most notably Ulcerative Colitis and the colonic variant of ...

Biologia

Murine Ileocolic Bowel Resection with Primary Anastomosis

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer being two common examples. Despite the frequency of these procedures, a significant knowledge gap remains in describing the inherent effects of intestinal resection on host physiology and disease pathophysiology. This article provides detailed instructions for an ileocolic resection with primary end-to-end anastomosis in mice, as well as essential aspects of peri-operative care to maximize post-operative success. When followed closely, this procedure yields a 95% long-term survival rate, no failure to thrive, and minimizes post-operative complications of bowel obstruction and anastomotic leak. The technical challenges of performing the procedure in mice are a barrier to its wide spread use in research. The skills described in this article can be acquired without previous surgical experience. Once mastered, the murine ileocolic resection procedure will provide a reproducible tool for studying the effects of intestinal resection in models of human disease.

Ileocolic resection is commonly performed in several human diseases; however, little is known regarding the impact of intestinal resection on surgical illnesses. This article provides instruction on executing the procedure in mice with high success, providing a means to study the effects of ileocolic resection in models of disease.

Murino ileocolic Bowel ressecção com anastomose primária

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer ...

Creation of Colonic Anastomosis in Mice

Intestinal anastomoses are commonly performed in both elective and emergent operations. Even so, anastomotic leaks are a highly feared complications of colonic surgeries and can occur in up to 26% of surgical anastomoses, with mortality being up to 39% for patients with such a leak. Currently, there remains a paucity of data detailing the cellular mechanisms of anastomotic healing. Devising preventative strategies and treatment modalities for anastomotic leak could be greatly potentiated by a better understanding of appropriate anastomotic healing.
A murine model is ideal as previous studies have shown that the murine anastomosis is the most clinically similar to the human case as compared with other animal models. We offer an easily reproducible murine model of colonic anastomosis in mice that will allow for further illustration of anastomotic healing.

Anastomotic leak or breakdown after surgery is a major cause of postoperative morbidity and mortality. Our surgery for creating a colonic anastomosis is a reliable and reproducible method for studying the healing mechanisms of anastomoses.

Criação de uma anastomose colônica em ratos

Intestinal anastomoses are commonly performed in both elective and emergent operations. Even so, anastomotic leaks are a highly feared complications of ...

Murine Appendectomy Model of Chronic Colitis Associated Colorectal Cancer by Precise Localization of Caecal Patch

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal cancer, inflammatory bowel disease, and Parkinson&#8217;s disease. To study the function of the appendix, a gut disease-associated murine appendectomy model has been established and its step-by-step protocol is described here. This report introduces a facile protocol for caecal patch removal in mice followed by the chemical induction of chronic colitis-associated colorectal cancer using a combination of dextran sulfate sodium (DSS) and azoxymethane (AOM). IgA specific cells and IgA concentration were significantly reduced upon removal of the caecal patch in male C57BL/6 mice&#160;compared to those in the sham group. Simultaneously administering 2% DSS and AOM resulted in nearly 80% mice survival in both sham and appendectomy groups without significant body weight loss. Histological results confirmed colonic inflammation and different degrees of adenocarcinoma. This model can be used for the study of the functional role of the appendix in maintaining gut microbiota homeostasis and pathogenesis of gut colitis and malignancies, as well as for the potential development of drug targeting therapies.

The presented protocol describes a facile surgical removal of the appendix (caecal patch) in a mouse followed by the induction of inflammatory bowel disease-associated colorectal cancer. This murine appendectomy model enables investigation of the biological role of the appendix in the pathogenesis of human gastrointestinal disease.

Modelo de apendicectomia Murina de colite crônica câncer colorretal associado por localização precisa do remendo de Caecal

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal ...

<meta charset="utf8"></head><body>Modelo Murino para Estudo do Íleo Secundário Pós-Operatório por Manipulação Intestinal

Postoperative Ileus Murine Model

Most patients experience postoperative ileus (POI) after surgery, which is associated with increased morbidity, mortality, and hospitalization time. POI is a consequence of mechanical damage during surgery, resulting in disruption of motility in the gastrointestinal tract. The mechanisms of POI are related to aberrant neuronal sensitivity, impaired epithelial barrier function, and increased local inflammation. However, the details remain enigmatic. Therefore, experimental murine models are crucial for elucidating the pathophysiology and mechanism of POI injury and for the development of novel therapies.
Here, we introduce a murine model of POI generated via intestinal manipulation (IM) that is similar to clinical surgery; this is achieved by mechanical damage to the small intestine by massaging the abdomen 1-3 times with a cotton swab. IM delayed gastrointestinal transit 24 h after surgery, as assessed by FITC-dextran gavage and fluorescence detection of the segmental digestive tract. Moreover, tissue swelling of the submucosa and immune cell infiltration were investigated by hematoxylin and eosin staining and flow cytometry. Proper pressure of the IM and a hyperemic effect on the intestine are critical for the procedure. This murine model of POI can be utilized to study the mechanisms of intestinal damage and recovery after abdominal surgery.

<meta charset="utf8"></head><body>Modelo Murino de Íleo Pós-Operatório

We describe a murine model of postoperative ileus generated via intestinal manipulation. Gastrointestinal transit function, pathologic changes, and immune cell activation were assessed 24 h after surgery.

Modelo Murino de Íleo Pós-Operatório

Most patients experience postoperative ileus (POI) after surgery, which is associated with increased morbidity, mortality, and hospitalization time. POI ...

Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes mellitus, dyslipidemia, non-alcoholic steatohepatitis, cardiovascular events, and cancers) through restrictive and malabsorptive mechanisms. Understanding the mechanisms by which these procedures allow such improvements often require their transposition into animals, especially in mice, because of the ease of generating genetically modified animals. Recently, the single-anastomosis duodeno-ileal bypass with sleeve gastrectomy (SADI-S) has emerged as a procedure that uses both restrictive and malabsorptive effects, which is being used as an alternative to gastric bypass in case of major obesity. Thus far, this procedure has been associated with strong metabolic improvements, which has led to a marked increase in its use in daily clinical practice. However, the mechanisms underlying these metabolic effects have been poorly studied as a result of a lack of animal models. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice, with a special focus on perioperative management. The description and use of this new rodent model will be helpful for the scientific community to better understand the molecular, metabolic, and structural changes induced by the SADI-S and to better define the surgical indications for clinical practice.

Single-anastomosis duodeno-ileal bypass (SADI-S) is an emerging bariatric procedure with important metabolic effects. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice.

Modelo de Bypass Duodeno-Ileal de Anastomose Única com Gastrectomia Vertical em Camundongos

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes ...

Murino colostomia Distal, um novo modelo de colite de diversão em camundongos C57BL/6

Resumo

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Câncer de modelagem Colite Associada com Azoximetano (OMA) e sulfato de sódio Dextran (DSS)

O

Modelagem Colite murino utilizando Dextran Sulfato de Sódio (DSS)

Murino ileocolic Bowel ressecção com anastomose primária

Criação de uma anastomose colônica em ratos

Modelo de apendicectomia Murina de colite crônica câncer colorretal associado por localização precisa do remendo de Caecal

Modelo Murino de Íleo Pós-Operatório

Modelo Murino de Íleo Pós-Operatório

Modelo Murino de Íleo Pós-Operatório

Modelo de Bypass Duodeno-Ileal de Anastomose Única com Gastrectomia Vertical em Camundongos