마이클 Bílý와 Ondřej P. 사이먼 보조금에서 체코 대학의 생명 과학 [내부 부여 기관의 학부 환경 과학, CULS 프라하 (42110 1312 3175 (20164236))]에 의해 지원 되었다. 카렐 Douda에 대 한 지원 체코 과학 재단 (13-05872S)에서 왔다. 민물 진주 홍합의 정부에 의해 투자는 체코 공화국의 자연 보존 기관에 의해 관리에 대 한 체코 행동 계획의 구현 동안 bioindication 및 진주 홍합의 현재 발생에 대 한 데이터 수집에 체코 공화국에서 사용할 수

1. 메쉬 케이지
참고: 그림 1을 참조 하십시오.
<ol><li>자료 준비
	<ol>
<li>실험의 실험실에 부분에 대 한 자료 준비: 강 ~ 1-2 L 물 당 메쉬 케이지, 메쉬 케이지 (플라스틱 본체 1, 2 플라스틱 커버, 2 장의 340 µ m, 4 볼트 공과 감 금 소 당 4 견과류와 함께 특별 한 기술 체), 펜 치 스 패너, 파스퇴르 펫, 스 트레이너, 디지털 카메라, 줌 스테레오 현미경, 보정 표 (현미경 장비), 50 mm 직경, 비 커, 2 플라스틱 접시 5 접시를 해 부 trinocular (~ 25 cm x 15 cm x 3-5 cm), 및 플라스틱 상자.</li>
		<li>Hyporheal 설치를 수행 하려면 고무 호스와 100 µ m 기 공 망, 그리고 물 총 병을 준비 합니다. 장치의 건설, 보조 파일 1 참조: S.1. 메쉬 케이지 건설.</li>
	</ol></li>
	<li>아래와 메시 감 금 소의 중앙 부분을 조립. 개인 보유 감 금 소의 부분을 조립 한다. 한 장의 플라스틱 체, 그리고 마지막으로 메인 상단에 몸 한 플라스틱 덮개를 먼저 삽입 합니다. 4 개의 볼트를 사용 하 여 그것을 확보.</li>
	<li>생물 학적 자료를 준비
	<ol>
<li>메쉬 케이지 강 물을 포함 하는 플라스틱 그릇에 넣어. 약 실 전체의 절반 인지 확인 합니다. FWPM 청소년 걸릴 ( 보조 파일 1 참조: S.6. 생물 소재) 열 절연 상자 밖으로 하 고 페 트리 접시에 넣어. 주: 갑작스런 온도 변화 ~ 2 ° c.를 초과 하지 않는 확인 하십시오</li>
		<li>물 총 병 및 여과기 using, 청소년 암 설을 통해 선별.</li>
	</ol></li>
	<li>현미경 및 카메라 설정 합니다. 계기의 캘리브레이션을 수행 (참조 보충 File1: S. 5. 현미경 및 phototechnics)입니다. 현미경 아래에서 약간 물을 포함 하는 페 트리 접시를 놓습니다.</li>
	<li>감 금 소 (실험적인 실험실 작업)에 청소년을 넣어
	<ol>
<li>파스퇴르 피 펫을 사용 하 여 배양 접시에서 한 개인을 제거 하 고 신중 하 게 현미경 페 트리 접시에 그것을 배치.</li>
		<li>접 안 렌즈 (~ 40 배 확대)로 봐서 개인의 적합성을 확인 합니다. 참고: "좋은" 피트 니스 의미는 개별 이동, 회전 측면에서 셸, 등 발 제거 죽 었 거 나 낮은 피트 니스는 파스퇴르와 개인 플라스틱 및 별도 페 트리 접시 (FWPM와는 열린 청소년에에서 배치 하는 민 다 셸, 운동, 발은 하지 꺼내, 조각난된 쉘, 물에 떠 있는 듯이 청소년, 쉘, 부분 decalcification의 보이는 분해).</li>
		<li>FWPM의 2 개의 사진을 보여주는 좋은 피트 니스 ~ 80 X의 지속적인 확대를 사용 하 여 개별 가져가 라. 참조 보조 파일 1: S.5. 현미경 및 phototechnics. 사진을 저장 합니다. 참고: length의 좋은 측정을 위해 청소년 해야 합니다 놓일 세로로 (측면 보기). 주요 목표는 나중 사진을 분석을 가능 하 게 충분히 좋은 최대 포탄 길이의 높은-품질의 사진을 걸릴 것입니다.</li>
		<li>최대한 빨리 사진을 찍은 소년 장에 적절 한 챔버에 삽입 합니다. 사진과 챔버의 번호를 기록 합니다.</li>
		<li>메쉬 케이지에서 사용된 모든 챔버에 대 한 각 개인으로이 단계를 반복 합니다. : 참고 보조 파일 1: S.1. 메쉬 케이지 건설.</li>
		<li>일단 모든 사용된 챔버 진주 홍합, 플라스틱 체 케이지, 다음 부드럽게 플라스틱 커버 넣어 넣고 견과류 함께 모든 부품을 확보.</li>
		<li>Hyporheic 영역에는 설치의 경우 통과 호스 끝의 하나 하나는 챔버의이 위치에서 수정 다음 반대로 막힘 메쉬과 하단 끝에 바인딩 ( 보조 파일 1 참조: S.1. 메쉬 케이지 건설).</li>
	</ol></li>
	<li>스토어 청소년
	<ol>
<li>그는 청소년 완전히 몰입 하는 thermobox에 그것을 계속 케이지 강 물, 플라스틱 상자에 넣어. 설치 하기 전에 제자리에서 강 물 온도에 설치 (점진적 냉각, 최대 24 시간에 5 ° C) 곳에 적응 청소년 하자.</li>
	</ol></li>
	<li>메쉬 케이지 설치
	<ol>
<li>청소년, 강철 스파이크, 볼트와 금속 너트, 스 패너, 메시 케이지를 포함 한 필드 자료 준비, 온도 습도 필드 ( 테이블의 자료 및 보조 파일 1 참조: S.4.2. 측정 물), 문자열, 카메라, 필드 프로토콜 망치, 그리고 스페이드.</li>
		<li>안정적인 수 온 변화 < ~ 2 ° c를 유지 FWPM 청소년 필드 thermobox (절연된 상자)에서 사이트에 전송 메쉬 케이지와 thermobox를 로컬 환경 조건 (pH, 전도도, 등)에 적응 청소년 수 있도록 사이트에 강에 넣습니다.</li>
		<li>메쉬 케이지를 설치 합니다.<ol>
<li>필드 thermobox에서 메시 케이지를 제거 합니다. 2 개의 강철 스파이크와 그것을 제공 하 고 고정 필드 데이터로 거. 연구 영역 (예를 들어, 메인 스트림 흐름 하지 직접적인 햇빛에 있는 서 있는 물에 직접 물 흐름에의 가장자리에)에 FWPMs에 대 한 일반적인 조건 서식 지로 케이지를 앵커.<ol>
<li>오픈 워터, 강철 스파이크의 쌍을 사용 하 여 수정 강 아래쪽에 케이지 강 바닥의 측면과 수준에 누워 강 흐름의 강의 중심을 향해 45 °의 각도에서 다운스트림. 아래쪽 가로 가장자리 강 하단 표면 위에서 약 10-15 cm 이어야 한다. 한 지역에서 각 감 금 소 사이 2 m의 최소 거리를 유지 (참조 보조 파일 1: S.4. 유지 보수 연습장).</li>
				<li>Hyporheic 영역에 대 한 감 금 소의 위쪽 가로 가장자리 강 하단 표면에 평행 하 게가 고 약 실에 위치 하는 hyporheic, 물의 흐름에 수직인 수직 가로 위치에 강 바닥으로 새 장을 발굴합니다 깊이 테스트 해야 합니다. 실험 기간 동안 물 샘플링의 가능성에 대 한 아래쪽 표면 위에 고무 호스의 위쪽 끝에 밖으로 (참조 보조 파일 1: S.4.2. 측정 물). 참고: 것이 좋습니다 감 금 소에 정기적인 검사 및 유지 관리를 수행 하기 위해 (참조 보조 파일 1: 미 4. 유지 보수 연습장).</li>
			</ol>
</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>감 금 소를 제거 하 고는 노출 후에 청소년을 수송. 이 위해, 물 감 금 소를 당겨 하 고 떠내려 물자로 정밀한 앙금 뿐만의 그들을 취소 한 강 물으로 채워진 필드 thermobox에 넣어. 실험실에 즉시 새 장을 전송 하 고 사망률과 성장 속도 평가 시작 합니다. : 참고 보조 파일 1: S.3. 노출 기간. 감 금 소 및 실험실 환경 사이 이상 5 ° C의 온도 차이, 경우 온도 균일화를 첫 번째 필요한입니다.</li>
	<li>각 청소년의 생활/피트 니스를 선택 하 여 실험을 평가 (1.5.2와 1.5.3 단계 참조)와 페 트리 접시 ~ 80 X의 지속적인 확대를 사용 하 여 각 라이브 청소년의 2 이미지를 받아. 체력과 사진과 챔버의 번호를 기록 합니다.</li>
	<li>(모든 방법에 공통) 실험을 완료
	<ol>
<li>이미지 분석 소프트웨어에서 측정을 수행 합니다. 이미지 분석 소프트웨어를 사용 하 여 모두 입력된 이미지 (단계 1.5.3)에 고 출력 이미지 (단계 1.9)에 모든 평가 청소년의 신체 크기 결정에 대 한. 최대 총 포탄 길이 사용 하 여 입력 및 출력에서 본문 크기 값으로 두 사진에 기록.</li>
		<li>테이블 프로세서에 측정 된 값을 삽입 하 고 계산 하는 증가분 (%) 각 살아남기 위한 청소년.</li>
		<li>메쉬 케이지에서 모든 실험 개인에 게 살아남은 개인의 수의 비율을 사용 하 여 메쉬 케이지 당 생존 율 (%)를 예상. 참고: 실험 후 반환 생존자 사육 프로그램을 (참조 보조 파일 1: S.6. 생물 소재).</li>
	</ol></li>
</ol>2. 샌 디 케이지
참고: 그림 2를 참조 하십시오.
<ol><li>자료 준비
	<ol>
<li>실험의 실험실에 부분에 대 한 자료 준비: 2 접시 (직경 ~8.5 cm), 파스퇴르 펫, 스 트레이너, 25 L 강 물, 플라스틱 상자, 체 (메쉬 크기 1 및 2 m m), 큰 플라스틱 상자 (25 L), 모래 케이지 (참조 보조 파일 1 : S.2입니다. 샌 디 연습장 건설), 디지털 카메라, 줌 스테레오 현미경, 보정 표 (현미경 장비), 해 부 trinocular 정렬 연구 영역에서 강 모래 (단계 2.1.3 참조) 및 프로토콜. 참조 자료의 테이블 및 보조 파일 1: 미 2. 샌 디 연습장 건설.</li>
		<li>격리 프로세스에 대 한 자료 준비: 둥근 용기 (각 케이지 플러스 1 여분의 1), 2 접시 (직경 ~ 14 cm), 파스퇴르 피 펫, 돋보기 안경, 그리고 강 물 1 L.</li>
		<li>2 mm 체 강 모래를 가려낼 다음 1 mm 체 입자 크기의 1-2 m m.을 통해 모래를 건조 하 고 필요한 때까지 건조 형태로 저장.</li>
	</ol></li>
	<li>가지고 있는 청소년 ( 보조 파일 1 참조: S.6. 생물 소재)는 thermobox의 고 페 트리 접시에 넣어. 물 총 병 및 여과기 using, 청소년 암 설을 통해 선별.</li>
	<li>현미경 및 카메라 설정 (참조 보조 파일 1: S.5. 현미경 및 phototechnics)입니다.</li>
	<li>감 금 소 (실험적인 실험실 작업)에 청소년을 넣어
	<ol>
<li>플라스틱 상자에 모래 케이지를 놓습니다. 정렬 된 모래를 흩어 (참조 단계 2.1.3) 모래 장의 높이의 1 / 3에. 상자에 물을 부 어. 모래 표면 물 수준 아래 약 10 m m 인지 확인 합니다. 강 물 25 L 상자에 모래 케이지를 삽입 하 고 청소년 FWPMs로 동일한 온도에 노출 (참조 보조 파일 1: S.6.2. 생물학 물자의 저장) 12 헤 햇빛에 모래의 어떤 노출 하지.</li>
		<li>페 트리 접시 준비 FWPM 청소년 가져가 라.</li>
		<li>접 안 렌즈에 보고 하 여 개인의 체력을 확인 (단계 1.5.2 참조).</li>
		<li>사진 문서를 다음과 같이 수행 합니다. 모든 개인 발견의 한 사진의 찍을 (단계 1.5.3 참조) 가장 큰 개인의 10을 선택 하십시오. 또는, 대량 평가 대 한 낮은 배율 (~ 40 X) 함께 모든 청소년의 사진을 찍을 하 고 10 가장 큰 개인을 선택 합니다. 모든 사진을 저장 하 고 그들의 숫자를 기록 합니다.</li>
		<li>물 총 병을 사용 하 여, 준비 된 모래으로 FWPM 청소년 이동 합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>스토어 청소년
	<ol>
<li>케이지 완전히 포장 되어 강 물으로 큰 플라스틱 상자에 감 금 소를 넣어 고은 thermobox에 그것을 유지. 현장에서 강 물 온도 (점진적 냉각, 최대 24 h를 위한 5 ° C)을 설치 하기 전에 적응 청소년 하자.</li>
	</ol></li>
	<li>모래 케이지 설치
	<ol>
<li>필드 설치에 대 한 자료 준비: 모래 감 금 소, 25 L 필드 thermobox, 평평한 돌 (최소한의 무게 1 k g), 그물 (메쉬 크기 10 x 10 m m), 물 총 병, 필드 온도 습도 (참조 테이블의 재료 와 보충 파일 1: S.4.2. 물 측정), 삽, 그리고 필드 프로토콜.</li>
		<li>안정적인 물 온도 (~ 2 ° C 변화) 유지 필드 thermobox에 있는 사이트에 청소년와 함께 감 금 소를 전송 합니다. FWPM 청소년 지역 환경 조건 (pH, 전도도, 등)에 적응 하도록 필드 사이트에서 강에 모래 연습장과 필드 thermobox를 넣어.</li>
		<li>FWPMs (예를 들어, 메인 스트림 흐름은 meander에서, 직접 물 흐름에, 서 있는 물에서 아닙니다, 직접적인 햇빛에의 가장자리에)에 대 한 일반적인 조건 서식 지로 모래 케이지를 설치 합니다.<ol>
<li>오픈 워터에 대 한 그물을 사용 하 여 평평한 돌으로 모래 케이지를 고정 하 고 강 하단에 배치 합니다. 감 금 소의 넓은 쪽 흐름으로 45 °의 각도 형성 확인 하십시오.</li>
			<li>케이지 덮개는 강 하단 표면 수준 Hyporheal에 대 한 물 흐름에 수직인 강바닥에 감 금 소를 발굴. 참고: 것이 좋습니다 감 금 소에 정기적인 검사 및 유지 관리를 수행 하기 위해 (참조 보조 파일 1: 미 4. 1. 검사 사이트).</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>감 금 소 및 전송 청소년 노출 후 제거 : 참고 보조 파일 1: S.3. 노출 기간.<ol>
<li>물 감 금 소를 당겨, 떠내려 물자의 그들을 취소 하 고 강 물으로 채워진 필드 thermobox에 넣어.</li>
		<li>실험실에 연습장을 수송 하 고 사망률과 성장 속도 평가 시작 합니다. 참고: 경우 온도 차이가 5 ℃ 이상 장과 실험실 환경, 그것은 온도 맞춰야 하 게 하는 데 필요한.</li>
	</ol></li>
	<li>모래에서 별도 FWPM 청소년
	<ol>
<li>준비 물 깊이 50 mm의 둥근 용기 (각 케이지 별도로)와 1 개의 여분 라운드 컨테이너. 케이지에서 둥근 용기에 모래를 전송. 소용돌이 치는 모션을 사용 하 여 별도 용기에 더 가벼운 입자를 밖으로 세척.</li>
		<li>점차적으로이 컨테이너에서 내용을 샘플링 하 고 단계별 파스퇴르 피 펫 및 돋보기를 사용 하 여 청소년에 대 한 검색. 파스퇴르 피 펫을 사용 하 여 페 트리 접시에는 청소년을 넣어. 첫 번째 부정적인 발견 후 마지막 소년 발견 되었습니다 때까지이 단계 및 다음 다른 10 배를 반복 합니다. 각 세척 단계 후 깨끗 한 강물 모래와 원래 컨테이너에 추가 합니다. 참고: 특히 씻은 후에 첫번째 밖으로, 제대로 내용을 검사할 및 정밀한 앙금 등 다른 층 밸러스트의 그것을 청소.</li>
	</ol></li>
	<li>실험 평가
	<ol>
<li>각 소년의 적합성을 확인 (단계 2.4.3 1.5.2 참조) 생존자의 수를 계산 하 고.</li>
		<li>사진의 찍을 (단계 2.4.4 참조) 각 개인의 개별적, 즉은 각 개인의 더 명확한 정체성. 또는, 대량 사진을 찍어 하 고 최종 결과에서 10 최고의 성장된 개인의 하위 집합을 선택 합니다. 참고: 두 가능성 비슷한 보고 가치가 있다. 가능성 1 최고의 사진 배율, 따라서 또한 더 중대 한 정확도의 혜택 뿐만 아니라 높은 작업의 한계는 있다.</li>
	</ol></li>
	<li>실험 완료
	<ol>
<li>이미지 분석 소프트웨어에서 측정을 수행 합니다. 다음 예외와 메쉬 케이지 (단계 1.10 참조)에서 실험 완료: 각 소년의 성장 율 (%)를 평가 하지 않습니다 하지만 모래 케이지 실험에서 전체 그룹을 평가. 참고: 실험 후 생존자에 반환 되어야 번 식 프로그램 ( 보조 파일 S.6.1을 참조 하십시오. Se생물 소재의 lection).</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol>
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J. M., Storey, R. G., Williams, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological,+chemical+and+physical+characteristics+of+downwelling+and+upwelling+zones+in+the+hyporheic+zone+of+a+north-temperate+stream.">Biological, chemical and physical characteristics of downwelling and upwelling zones in the hyporheic zone of a north-temperate stream.</a> Hydrobiologia. , 183-195 (2001).</li><li>Roley, S. S., Tank, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pore+water+physicochemical+constraints+on+the+endangered+clubshell+mussel+(Pleurobema+clava).">Pore water physicochemical constraints on the endangered clubshell mussel (Pleurobema clava).</a> Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 73 (12), 1712-1722 (2016).</li><li>Larson, J. H., Eckert, N. L., Bartsch, M. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+substrate+size+and+cleaning+regime+on+growth+and+survival+of+captive-bred+juvenile+freshwater+pearl+mussels,+Margaritifera+(Linnaeus,+1758).">Effects of substrate size and cleaning regime on growth and survival of captive-bred juvenile freshwater pearl mussels, Margaritifera (Linnaeus, 1758).</a> Hydrobiologia. 766 (1), 89-102 (2015).</li><li>Hru&#353;ka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+of+semi-natural+breeding+programme+of+freshwater+pearl+mussel+in+the+Czech+Republic.">Experience of semi-natural breeding programme of freshwater pearl mussel in the Czech Republic.</a> Die Flussperlmuschel in Europa: Bestandssituation und Schutzmassnahmen. , 69-75 (2000).</li><li>Bayne, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+components+of+growth+differences+between+individual+oysters+(Crassostrea+gigas)+and+a+comparison+with+Saccostrea+commercialis.">Physiological components of growth differences between individual oysters (Crassostrea gigas) and a comparison with Saccostrea commercialis.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 72 (6), 705-713 (1999).</li><li>Tamayo, D., Azpeitia, K., Markaide, P., Navarro, E., Ibarrola, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+regime+modulates+physiological+processes+underlying+size+differentiation+in+juvenile+intertidal+mussels+Mytilus+galloprovincialis.">Food regime modulates physiological processes underlying size differentiation in juvenile intertidal mussels Mytilus galloprovincialis.</a> Marine Biology. 163 (6), (2016).</li></ol>

저자는 공개 없다.

노출 시간:
심지어 1 개월 노출 메쉬 케이지 표시 보이는 성장 지역 (그림 3), 그래서 그들은 지역 특성화의 신속 하 고 쉽게 검색을 위한 매우 유용 간의 차이 반영. 그럼에도 불구 하 고, 결과의 관련성 조건, 흔들 리 다 수의 단기 상태에 따라 달라 집니다. 특히, 짧은 강우량 이벤트 역할을 재생할 수 있습니다. 반면, 예측할 수 없는 에피소드 오염 수 있습?...

그들의 상태의 후속 평가 함께 현장에서 실험 생물의 노출 종에 대 한 환경 품질 및 사이트 적합성 (특히)에 대 한 정보를 얻으려면 하나의 가능한 방법입니다. 동물, 이내 그런 bioindication는 주로 제한 된 제한 된 공간에서 살 수 있는 작은 무척 추 동물에 대 한 적용 됩니다. Bivalves (이매패류)의 젊은 단계는 한 같은 적당 한 유기 체 그룹1.
가족 Unionidae bivalves 수생 생태계2의 매우 중요 한 구성 요소입니다. 그러나, 이러한 종은 종종 비판적으로 멸종, 스트림 및 강에 특히. 그들 중 일부는 '우산 종'의 보존은 전체 스트림 소 생활권의 보존에 밀접 한 및 포괄적인 접근3필요로로 특징 이다. 이 동물의 홍합 애벌레 호스트6으로 물고기 인구에 있는 변화에 물 화학4,5 에서 많은 환경 구성 요소와 관련 된 라이프 사이클 있다. 홍합 청소년 홍합 라이프 사이클의 중요 한 단계, 수시로 대표 하기 때문에이 단계에서 그들의 개발에 대 한 사이트 적합성은 한 지역에서 성공적인 종 인구 개발에 대 한 중요 합니다.
민물 진주 홍합 (FWPM, Margaritifera margaritifera; Unionida, 이매패류) 비판적으로 멸종 위기에 놓인 쌍 각 조개 oligotrophic 유럽 스트림에서 발생 이다. 그들의 숫자는 20 동안 크게 추락발생 지역에서 세기 . 그것은 그 중앙 유럽 인구의 대다수에 종 복제에 현재 감소는 주로 기인한 매우 낮은 그들의 생활의 처음 몇 년 동안 청소년의 0 생존에 보인다. 그것은 가정 청소년 FWPMs는 얕은 hyporheic 영역7의 조건과 그들의 다양성은 여전히 하지 잘 설명 여러 해 동안 살. 또한, 생활의 그들의 2 학년까지는 청소년만가지고 약 1 m m의 치수 그래서 그들은 매우 자연 조건8에서 앙금의 큰 볼륨에서 찾기 어렵다. 따라서, 실험 포로 청소년은 그들의 생태학의 연구 필요 합니다.
체코 액션 플랜 민물 진주 홍합9, 내 청소년의 수천이 있다 반 자연 번 식 프로그램에서 매년 마다 일어나는. 그럼에도 불구 하 고, 거기에는 지역 및 서식 지는 이러한 청소년에 의해 성공적인 인구 지원 또는 최종 종 재 소개에 대 한 적합 한 질문이 이다. Bioindications 현장에서 답을 찾는 방법을 제시.
노출 장에 청소년 홍합의 일관성 없는 생존 율 bioindicators10청소년 홍합의 적합성을 의심 하는 일부 이전 작품에서 관찰 되었다 사실에도 불구 하 고 여러 최근 연구 결과 확인은 수 질 테스트11,,1213청소년 노출 방법의 응용 성. 또한, 그것은 여러 가지 요인 재고 기원14 및 애벌레 조건15의 지속 효과 등이 특정 연구의 결과 해석할 때 고려해 야 할 입증 되었습니다.
질문 시험된 지역에 있는 실험적인 청소년을 설치 하는 방법과 가장 효과적으로 그들의 상태를 평가 하는 방법의 발생. 청소년 FWPMs 노출 방법 현장에서 의 첫 번째 엄격한 응용 프로그램 Buddensiek16에 의해 출판 되었다. 청소년 FWPM 개인 스트림, 무료 흐르는 물에 노출 시트 장에 보관 했다 그리고 그들의 생존 및 성장 노출의 몇 주 후 계량 했다. 접근 반 인공 번 식 방법으로 원래 개발 되었다 하지만 저자는 또한 서식 지 요구 사항 및 수 질 평가 대 한 그것의 적용을 강조 했다. FWPM 청소년 생존은 자연스럽 게 매우 개월/년, 동물의 단지 아주 작은 수의 규모에 낮은 생존, 생존 율 몇 주16의 규모에 환경 영향의 좋은 표시 될 수 있습니다. 연구의 년간 노출 방법 개발 보류 실험 청소년 홍합에 스트림 서식 지 더 고 평가 하는 그들의 성장 및 생존 율; 모래 상자17, 홍합 사일로 upwelling 원리18및 다양 한 다른 노출 (껌과 동료에 의해 요약) 감 금 소11에 따라 포함 됩니다. 청소년 얕은 hyporheic 영역7에서 자연스럽 게 발생, 때문에 스트림 하단 내 실험 장치의 응용 프로그램 매우 바람직합니다.
우리의 문서에서 설명 하는 FWPMs에 대 한 두 개의 노출 장치를 사용 하 여: 나) Buddensiek 시트 감 금 소 ("메쉬 케이지") bioindication hyporheal 조건;에서 테스트 설정 수정 그리고 ii) Hruška 모래 상자 ("모래 케이지"). 오픈 물과 hyporheic 조건에서 두 가지 방법의 응용 프로그램 프로토콜에 설명 합니다 (즉, 노출의 4 개의 이체 설명). 방법은 점차적으로 수정 및 민물 진주 홍합9 체코 행동 계획 내에서 응용 프로그램의 15 년 이상에 걸쳐 확장 되었고 실험의 세트에 의해 확인.

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt;biological material maintenance and care&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Freshwater pearl mussel juveniles</td><td>any</td><td>NA</td><td>from a FWPM breeding programme</td></tr><tr><td>plastic boxes</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>thermobox</td><td>MERCI</td><td>212,070,600,030</td><td>There are many possibilities. This is one example only.</td></tr><tr><td>field thermobox (ca25 l)</td><td>any</td><td>NA</td><td>cold box (insulated box) commonly used for food transport</td></tr><tr><td>river water</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Petri dishes</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>plastic Pasteur pipettes with balloon bulb (droppers)</td><td>any</td><td>NA</td><td>hole diameter 1 mm</td></tr><tr><td>hydrogen peroxide</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>plastic container (ca 50 l) for river water</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>plastic tea strainer</td><td>any</td><td>NA</td><td>commonly used in kitchen</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;mesh cages construction&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>main plastic bodies</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>plactic covers</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>special technical sieves 340 &amp;micro;m</td><td>Silk &amp;amp;Progress</td><td>UHELON 20 T</td><td></td></tr><tr><td>special technical sieves 100 &amp;micro;m</td><td>Silk &amp;amp;Progress</td><td>UHELON 67 M</td><td></td></tr><tr><td>rubber hose (diameter 5.5 mm)</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>steel bolts</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>steel nuts</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>spanner</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>steel spikes</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>pliers</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>beakers</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>plastic dishes (ca. 25x15x3-5cm)</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>squirt bottle</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>field protocols</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>stationery</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>plastic container</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>string</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>hammer</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;sandy cages construction and use&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>sieve 1 mm</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>sieve 2 mm</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>special technical sieves 340 &amp;micro;m</td><td>Silk &amp;amp;Progress</td><td>UHELON 20 T</td><td></td></tr><tr><td>plastic boxes with tight-fitting lid</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>hot melt adhesive</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>plastic box (ca 250 x 150 x 100 cm)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>big plastic box (ca 25 l)</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>flat stone</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>net</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>river sand</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>round containers</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>magnifying glasses</td><td>Carson</td><td>Carson CP 60</td><td>There ar many possibilities. This is one example only</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;cages installation and maintenance&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>field temperature dataloggers</td><td>ONSET</td><td>UA-001-64</td><td>http://www.onsetcomp.com/products/data-loggers/ua-001-64</td></tr><tr><td>spade</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>toothbrush</td><td>any</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;experiment evaluation&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>trinocular dissecting zoom stereo microscope</td><td>Bresser optic</td><td>ICD 10x-160x</td><td>There are many possibilities. This is one example only.</td></tr><tr><td>digital camera/ electronic eyepiece</td><td>Bresser optic</td><td>MikroCamLab 5M</td><td>There are many possibilities. This is one example only.</td></tr><tr><td>Calibration gird</td><td>Am Scope</td><td>SKU: MR100</td><td>There are many possibilities. This is one example only.</td></tr><tr><td>external power source with two movable light guides</td><td>Arsenal</td><td>K1309010150021</td><td>There are many possibilities. This is one example only.</td></tr><tr><td>Image software</td><td>ImageJ software</td><td></td><td>There are many possibilities. This is one example only.</td></tr><tr><td>table processor</td><td>MS excel</td><td></td><td>There are many possibilities. This is one example only.</td></tr></tbody></table>

bioindication testing of stream environment suitability for young freshwater pearl mussels using in situ exposure methods

민물 홍합에 대 한 서식 지 적합성의 지식은이 멸종 그룹의 보존에 중요 한 단계 이다. 우리는 이상의 oligotrophic 강 catchments 내 청소년 노출 테스트 현장에서 수행 하기 위한 프로토콜을 설명 1 개월 및 3 개월 기간. 두 가지 방법 (두 수정)에 청소년 성장 및 생존 율을 평가 하 되 게 됩니다. 마다 그 혜택으로 제한과 방법 및 수정 위치 bioindication에 대 한 가치 다. 모래 케이지 방법은 개인의 큰 세트와 함께 하지만 일부 개인의 측정 그리고 결과 대량에서 평가 됩니다. 메쉬 케이지 방법에서 개인 유지와 별도로, 측정 하지만 낮은 개별 번호 평가. 오픈 워터 노출 수정은 상대적으로 쉽게 적용; 청소년 성장 사이트의 잠재력 및 고도 물 독성 테스트에 대 한 효과적일 수 있습니다. 내 침대 노출 수정 부하가 필요 하지만 자연 청소년 환경 조건에 가깝다 고 지 자체의 현실 적합성을 보고 더 나은. 다른 한편으로, 더 많은 복제의 높은 hyporheic 환경 변화 때문이 수정에 필요 합니다.

4 bioindication 방법 (오픈 워터 모래 연습장, 내 침대 모래 감 금 소, 물 메쉬 케이지, 열고 내 침대 메쉬 케이지) FWPMs에는 위 블타바 강 유역 (보헤미안 숲, 체코에 대 한 환경 조건 적합성 조사에 적용 공화국)입니다. 이 강 중앙 유럽19내 한 FWPM 잔여 위치를 나타냅니다. 여기, 우리는 특별히 선택 된 4 가지 방법 중 가장 중요 한 측면을 설명 하는 결과 집합을 ...

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Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

제자리에서 bioindications 위태롭게 한 홍합 종 대는 환경 적합성의 결정을 사용합니다. Oligotrophic 강 서식 지에 장에 민물 진주 홍합의 청소년 노출에 따라 두 가지 방법을 설명 합니다. 두 방법 모두 오픈 워터 및 hyporheic 물 환경에 대 한 변형에 구현 됩니다.

Bioindication 영 민물 진주 홍합에 현장 노출 방법을 사용 하 여에 대 한 스트림 환경 적합성의 테스트

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol ...

bioindication-testing-stream-environment-suitability-for-young

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Environment

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

7.2K 조회수.  Czech University of Life Sciences Prague. 제자리에서 bioindications 위태롭게 한 홍합 종 대는 환경 적합성의 결정을 사용합니다. Oligotrophic 강 서식 지에 장에 민물 진주 홍합의 청소년 노출에 따라 두 가지 방법을 설명 합니다. 두 방법 모두 오픈 워터 및 hyporheic 물 환경에 대 한 변형에 구현 됩니다.

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Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. Unfortunately, traditional benthic larval sampling methods, such as the dip-net, can be time-consuming and expensive. An alternative protocol involves collection of Chironomidae surface-floating pupal exuviae (SFPE). Chironomidae is a species-rich family of flies (Diptera) whose immature stages typically occur in aquatic habitats. Adult chironomids emerge from the water, leaving their pupal skins, or exuviae, floating on the water&#8217;s surface. Exuviae often accumulate along banks or behind obstructions by action of the wind or water current, where they can be collected to assess chironomid diversity and richness. Chironomids can be used as important biological indicators, since some species are more tolerant to pollution than others. Therefore, the relative abundance and species composition of collected SFPE reflect changes in water quality. Here, methods associated with field collection, laboratory processing, slide mounting, and identification of chironomid SFPE are described in detail. Advantages of the SFPE method include minimal disturbance at a sampling area, efficient and economical sample collection and laboratory processing, ease of identification, applicability in nearly all aquatic environments, and a potentially more sensitive measure of ecosystem stress. Limitations include the inability to determine larval microhabitat use and inability to identify pupal exuviae to species if they have not been associated with adult males.

Use of Chironomidae Diptera Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrates are often used to monitor and assess water quality. An efficient protocol involves collections of Chironomidae surface-floating pupal exuviae (SFPE). Here, techniques for field collection, laboratory processing, slide mounting, and identification of Chironomidae SFPE are described.

Chironomidae (파리목)의 사용 표면 부동 물 기관에 대한 신속한 생물학적 평가 프로토콜로 번데기 Exuviae을

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

연구

환경과학

Use of a Battery of Chemical and Ecotoxicological Methods for the Assessment of the Efficacy of Wastewater Treatment Processes to Remove Estrogenic Potency

Endocrine Disrupting Compounds pose a substantial risk to the aquatic environment. Ethinylestradiol (EE2) and estrone (E1) have recently been included in a watch list of environmental pollutants under the European Water Framework Directive. Municipal wastewater treatment plants are major contributors to the estrogenic potency of surface waters. Much of the estrogenic potency of wastewater treatment plant (WWTP) effluents can be attributed to the discharge of steroid estrogens including estradiol (E2), EE2 and E1 due to incomplete removal of these substances at the treatment plant. An evaluation of the efficacy of wastewater treatment processes requires the quantitative determination of individual substances most often undertaken using chemical analysis methods. Most frequently used methods include Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GCMS/MS) or Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LCMS/MS) using multiple reaction monitoring (MRM). Although very useful for regulatory purposes, targeted chemical analysis can only provide data on the compounds (and specific metabolites) monitored. Ecotoxicology methods additionally ensure that any by-products produced or unknown estrogenic compounds present are also assessed via measurement of their biological activity. A number of in vitro bioassays including the Yeast Estrogen Screen (YES) are available to measure the estrogenic activity of wastewater samples. Chemical analysis in conjunction with in vivo and in vitro bioassays provides a useful toolbox for assessment of the efficacy and suitability of wastewater treatment processes with respect to estrogenic endocrine disrupting compounds. This paper utilizes a battery of chemical and ecotoxicology tests to assess conventional, advanced and emerging wastewater treatment processes in laboratory and field studies.

Endocrine Disrupting Compounds (EDC) pose a substantial risk to the aquatic environment. Municipal wastewater treatment plants are major contributors to the estrogenic potency of surface waters. The methodology provided in this paper allows for an assessment of the efficacy and suitability of wastewater treatment processes with respect to EDC removal.

폐수 처리 프로세스의 효능의 평가를위한 화학 및 생체 독성 방법의 배터리를 사용하면 에스트로겐 효능을 제거하는 방법

Endocrine Disrupting Compounds pose a substantial risk to the aquatic environment. Ethinylestradiol (EE2) and estrone (E1) have recently been included in ...

Salinity-dependent Toxicity Assay of Silver Nanocolloids Using Medaka Eggs

Salinity is an important characteristic of the aquatic environment. For aquatic organisms it defines the habitats of freshwater, brackish water, and seawater. Tests of the toxicity of chemicals and assessments of their ecological risks to aquatic organisms are frequently performed in freshwater, but the toxicity of chemicals to aquatic organisms depends on pH, temperature, and salinity. There is no method, however, for testing the salinity dependence of toxicity to aquatic organisms. Here, we used medaka (Oryzias latipes) because they can adapt to freshwater, brackish water, and seawater. Different concentrations of embryo-rearing medium (ERM) (1x, 5x, 10x, 15x, 20x, and 30x) were employed to test the toxicity of silver nanocolloidal particles (SNCs) to medaka eggs (1x ERM and 30x ERM have osmotic pressures equivalent to freshwater and seawater, respectively). In six-well plastic plates, 15 medaka eggs in triplicate were exposed to SNCs at 10 mg/L&#8722;1 in different concentrations of ERM at pH 7 and 25 &#176;C in the dark.
We used a dissecting microscope and a micrometer to measure heart rate per 15 sec and eye diameter on day 6 and full body length of the larvae on hatching day (section 4). The embryos were observed until hatching or day 14; we then counted the hatching rate every day for 14 days (section 4). To see silver accumulation in embryos, we used inductively coupled plasma mass spectrometry to measure the silver concentration of test solutions (section 5) and dechorionated embryos (section 6).The toxicity of the SNCs to medaka embryos obviously increased with increasing salinity. This new method allows us to test the toxicity of chemicals in different salinities.

Embryonic stages are the most susceptible to xenobiotics. Although chemical toxicity depends on salinity, no method exists to test the salinity dependence of toxicity to aquatic organisms. Here, we describe a new and high-throughput method for determining the salinity dependence of toxicity to aquatic embryos.

메다카 계란을 사용하여 실버 Nanocolloids의 염도에 의존하는 독성 분석

Salinity is an important characteristic of the aquatic environment. For aquatic organisms it defines the habitats of freshwater, brackish water, and ...

발생학

Ecotoxicological Method with Marine Bacteria Vibrio anguillarum to Evaluate the Acute Toxicity of Environmental Contaminants

Bacteria are an important component of the ecosystem, and microbial community alterations can have a significant effect on biogeochemical cycling and food webs. Toxicity testing based on microorganisms are widely used because they are relatively quick, reproducible, cheap, and are not associated with ethical issues. Here, we describe an ecotoxicological method to evaluate the biological response of the marine bacterium Vibrio anguillarum. This method assesses the acute toxicity of chemical compounds, including new contaminants such as nanoparticles, as well as environmental samples. The endpoint is the reduction of bacterial culturability (i.e., the capability to replicate and form colonies) due to exposure to a toxicant. This reduction can be generally referred to as mortality. The test allows for the determination of the LC50, the concentration that causes a 50% decrease of bacteria actively replicating and forming colonies, after a 6 h exposure. The culturable bacteria are counted in terms of colony forming units (CFU), and the &#34;mortality&#34; is evaluated and compared to the control. In this work, the toxicity of copper sulphate (CuSO4) was evaluated. A clear dose-response relationship was observed, with a mean LC50 of 1.13 mg/L, after three independent tests. This protocol, compared to existing methods with microorganisms, is applicable in a wider range of salinity and has no limitations for colored/turbid samples. It uses saline solution as the exposure medium, avoiding any possible interferences of growth medium with the investigated contaminants. The LC50 calculation facilitates comparisons with other bioassays commonly applied to ecotoxicological assessments of the marine environment.

Ecotoxicological Method with Marine Bacteria Vibrio anguillarum to Evaluate the Acute Toxicity of Environmental Contaminants

This work describes a new protocol to assess the ecotoxicity of pollutants, including emerging contaminants such as nanomaterials, using the marine bacterium Vibrio anguillarum. This method allows for the determination of the LC50, or mortality, the concentration that causes a 50% decrease in bacteria culturability, after a 6 h exposure.

해양 박테리아와 생태 독성 학적 방법<em&gt; 비브리오 앵 귈라 룸</em&gt; 환경 오염 물질의 급성 독성 평가

Bacteria are an important component of the ecosystem, and microbial community alterations can have a significant effect on biogeochemical cycling and food ...

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity testing has been demonstrated. Overall, the sensitivity of the species to toxic compounds is in the range with, or higher than, that of other model species.
This work describes protocols for acute, chronic, and multigenerational bioassays of single and combined stressor effects on N. furzeri. Due to its short maturation time and life-cycle, this vertebrate model allows the study of endpoints such as maturation time and fecundity within four months. Transgenerational full life-cycle exposure trials can be performed in as little as 8 months. Since this species produces eggs that are drought-resistant and remain viable for years, the on-site culture of the species is not needed but individuals can be recruited when required. The protocols are designed to measure life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

In this work, we describe an acute, chronic and multigenerational bioassay to study the effects of single and combined stressors on the Turquoise killifish Nothobranchius furzeri. This protocol is designed to study life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

급성 및 만성 Ecotoxicity 청록색 송사리 Nothobranchius furzeri 의 테스트에 대 한 프로토콜

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity ...

Design and Use of an Apparatus for Quantifying Bivalve Suspension Feeding at Sea

As shellfish aquaculture moves from coastal embayments and estuaries to offshore locations, the need to quantify ecosystem interactions of farmed bivalves (i.e., mussels, oysters, and clams) presents new challenges. Quantitative data on the feeding behavior of suspension-feeding mollusks is necessary to determine important ecosystem interactions of offshore shellfish farms, including their carrying capacity, the competition with the zooplankton community, the availability of trophic resources at different depths, and the deposition to the benthos. The biodeposition method is used to quantify feeding variables in suspension-feeding bivalves in a natural setting and represents a more realistic proxy than laboratory experiments. This method, however, relies upon a stable platform to satisfy the requirements that water flow rates supplied to the shellfish remain constant and the bivalves are undisturbed. A flow-through device and process for using the biodeposition method to quantify the feeding of bivalve mollusks were modified from a land-based format for shipboard use by building a two-dimensional gimbal table around the device. Planimeter data reveal a minimal pitch and yaw of the chambers containing the test shellfish despite boat motion, the flow rates within the chambers remain constant, and operators are able to collect the biodeposits (feces and pseudofeces) with sufficient consistency to obtain accurate measurements of the bivalve clearance, filtration, selection, ingestion, rejection, and absorption at offshore shellfish aquaculture sites.

A flow-through device for using the biodeposition method to quantify filtration and feeding behavior of bivalve mollusks was modified for shipboard use. A two-dimensional gimbal table built around the device isolates the apparatus from boat motion, thereby allowing the accurate quantification of bivalve filtration variables at offshore shellfish aquaculture sites.

디자인 및 쌍 각 조개 서 스 펜 션 바다에서 먹이 측정 기구 사용

As shellfish aquaculture moves from coastal embayments and estuaries to offshore locations, the need to quantify ecosystem interactions of farmed bivalves ...

Development and Testing of Species-specific Quantitative PCR Assays for Environmental DNA Applications

New, non-invasive methods for detecting and monitoring species presence are being developed to aid in fisheries and wildlife conservation management. The use of environmental DNA (eDNA) samples for detecting macrobiota is one such group of methods that is rapidly becoming popular and being implemented in national management programs. Here we focus on the development of species-specific targeted assays for probe-based quantitative PCR (qPCR) applications. Using probe-based qPCR offers greater specificity than is possible with primers alone. Furthermore, the ability to quantify the amount of DNA in a sample can be useful in our understanding of the ecology of eDNA and the interpretation of eDNA detection patterns in the field. Careful consideration is needed in the development and testing of these assays to ensure the sensitivity and specificity of detecting the target species from an environmental sample. In this protocol we will delineate the steps needed to design and test probe-based assays for the detection of a target species; including creation of sequence databases, assay design, assay selection and optimization, testing assay performance, and field validation. Following these steps will help achieve an efficient, sensitive, and specific assay that can be used with confidence. We demonstrate this process with our assay designed for populations of the mucket (Actinonaias ligamentina), a freshwater mussel species found in the Clinch River, USA.

Environmental DNA assays require rigorous design, testing, optimization and validation before the collection of field data can begin. Here, we present a protocol to take users through each step of designing a species-specific, probe-based qPCR assay for the detection and quantification of a target species DNA from environmental samples.

환경 DNA 응용을 위한 종별 정량PCR 분석의 개발 및 시험

New, non-invasive methods for detecting and monitoring species presence are being developed to aid in fisheries and wildlife conservation management. The ...

Hellgrammite as a Non-Conventional Biomonitor for Surface Water and Environmental Health Assessment

The larvae of dobsonflies from the genus Corydalus, commonly known as Hellgrammites, are characterized by their notable size, extensive range of occurrence, and extended period of immaturity, which can last up to one year. Hellgrammites are clearly known to exhibit sensitivity to pollution and habitat structure impacts. Given these unique features, using Corydalus texanus larvae is highly suitable as reliable biomonitoring agents to assess the ecological integrity of aquatic ecosystems. This protocol aims to provide the necessary tools for C. texanus assessment and demonstrate their efficacy through a case study. Research findings have practical implications, indicating that C. texanus larvae exhibit early-warning responses to mining pollution, bioaccumulating high amounts of heavy metals such as Zn, Fe, and Al. The presence or absence of C. texanus populations may serve as a helpful indicator for identifying potential issues related to ecosystem health. The unconventional approach has shown early warnings of pollution in mining-impacted sites, highlighting the need for timely action to protect the environment. Given their unique traits, the use of C. texanus larvae is highly suggested as a reliable non-conventional bioindicator.

This protocol describes the use of biomarkers for the early detection of deleterious impacts in aquatic ecosystems. The biomarkers are closely related to sentinel traits, and their changes aid in detecting early-warning damages.

The larvae of dobsonflies from the genus Corydalus, commonly known as Hellgrammites, are characterized by their notable size, extensive range of ...

Standardizing a Non-Lethal Method for Characterizing the Reproductive Status and Larval Development of Freshwater Mussels (Bivalvia: Unionida)

Actively monitoring the timing, development, and reproductive patterns of endangered species is critical when managing for population recovery. Freshwater mussels are among the most imperiled organisms in the world, but information about early larval (glochidial) development and brooding periods is still lacking for many species. Previous studies have focused on the complex life history stage when female mussels are ready to parasitize host fish, but few studies have focused on the brooding period and timing of larval development. The protocol described here allows researchers to non-lethally evaluate the state of gravidity for female mussels. The results of this study show that this method does not affect a female mussel&rsquo;s ability to stay gravid or become gravid again after sampling has been performed. The advantage of this method may permit its use on federally threatened or endangered species or other populations of high conservation concern. This protocol can be adapted for use on both preserved or live individuals and was tested on a variety of mussel species. The database provided is a repository for a breadth of information on timing of reproductive habits and will facilitate future freshwater mussel research, conservation, and recovery efforts.

Standardizing a Non-Lethal Method for Characterizing the Reproductive Status and Larval Development of Freshwater Mussels Bivalvia: Unionida

Freshwater mussel conservation is dependent on monitoring reproductive patterns and processes of species. This study standardizes a non-lethal protocol for sampling gill contents, characterizing larval development, and providing a digital repository for data collected. This protocol-database package will be an important tool for mussel researchers in recovery of imperiled species.

민물 홍합의 생식 상태 및 애벌레 개발을 특성화하기위한 비 치명적인 방법 표준화 (비발비아 : 유니온니다)

Actively monitoring the timing, development, and reproductive patterns of endangered species is critical when managing for population recovery. Freshwater ...

생물학

A Toxicological and Ecotoxicological Assay Based on Mussel (Mytilus galloprovincialis) Hemocytes Motility

Hemocytes are the circulating immune-competent cells in bivalve mollusks and play a key role in several important functions of cell-mediated innate immunity. During the early stages of the immune response, hemocytes actively migrate to the site of infection. This inherent motility is a fundamental characteristic of these cells. It represents a key cellular function that integrates multiple processes, such as cell adhesion, cell signaling, cytoskeletal dynamics, and changes in cell volume. Therefore, alterations in cell motility following exposure to drugs or pollutants can serve as a useful toxicological endpoint. Despite the fundamental role of cell motility in cellular physiology, it has been poorly investigated from a toxicological perspective. This work proposes a novel in vitro method for the rapid and sensitive assessment of the toxicity and ecotoxicity of pollutants, based on evaluating the hemocyte motility of Mytilus galloprovincialis. We developed a cell motility assay on hemocytes adhering to the bottom of a 96-well polystyrene microplate. Following exposure to increasing concentrations of drugs, cell trajectories, and velocities were quantified by cell tracking under time-lapse microscopy, allowing us to measure the effects on hemocyte motility. Due to the ease of hemocyte collection from the animals in a relatively non-invasive manner, the proposed method offers an alternative test for screening the effects and mechanisms of action of pollutants and drugs. It aligns with the 3Rs (Replacement, Reduction, and Refinement) criteria, addressing ethical concerns and contributing to the reduction of vertebrate in vivo animal testing.

The article proposes a novel in vitro method for the rapid and sensitive assessment of the toxicity and ecotoxicity of pollutants, based on the motility of Mytilus galloprovincialis hemocytes. The method aims to contribute to the development of more ethical and sensitive toxicological and ecotoxicological exposure tests.

홍합(Mytilus galloprovincialis) 혈구 운동성을 기반으로 한 독성 및 생태 독성 분석

Hemocytes are the circulating immune-competent cells in bivalve mollusks and play a key role in several important functions of cell-mediated innate ...