Name: creation of a rodent model of abdominal aortic aneurysm by blocking adventitial vasa vasorum perfusion
Uploaded: 2017-11-08T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 37 s
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이 작품에 대 한 과학적 연구 (B) (20291958) N.U.;에 보조금에 의해 지원 되었다 젊은 과학자를 위한 연구비 뉴질랜드를 (A) (25713024)

동물 보호 및 실험 동물 관리에 대 한 지침을 따라야 하 마마 츠 대학 학교의 의학 동물 관리 위원회의 센터에서 수행 했다.
 1. 모델을 만들기 위한 수술 참고: 10 구슬 소독 기에 수술 도구를 배치 s preoperatively. 멸 균 글러브를 사용 하 여 intraoperatively.
<ol><li>사용 남성 쥐 300-400 g.를 무게 쥐 음식에 대 한 액세스를 허용 하 고 광고 libitum 물.</li>
	<li>는 Isoflurane 흡입 (2.0-3.0 mL/L)와 쥐 anesthetize. 발가락 핀치에 의해 적절 한 anesthetization를 확인 하십시오.</li>
	<li>전기 면도기, 복 부에 머리를 면도 하 고 알코올과 povidone-요오드 솔루션으로 복 부를 문질러.</li>
	<li>작업 테이블에서 부정사 위치에 쥐를 놓습니다. 수 의사 연 고를 사용 하 여 쥐에 &#39; 마 취에서 건조를 방지 하기 위해 s 눈.</li>
	<li>는 개복 술 복 부 정중 선 복 부 절 개를가 위를 사용 하 여 수행 합니다. 분명 수술 필드 확보, 팩 복 부 내용 복 부 구멍 안에 상처 견인을 사용 하 여 멸 균 거 즈와.</li>
	<li>대동맥 혈관 주위 조직에서 분리 하려면 부드럽게를 선택 하 고는 retroperitoneum 대동맥 벽을 노출 하 고 벗 겨 지 다 infrarenal 대동맥에서 분기 왼쪽된 신장 정 맥의 수준에서 후 공간에 핀셋으로 눈물은 혈관 주위 조직 ( 그림 1A).</li>
	<li>블록 혈액을 5-0 실크 문자열 복 부 대동맥에서 분기 혈관 대동맥 루멘 좁은 하지 않는 대동맥에서 지점에서 공급 하는 Ligate.</li>
	<li>대동맥 혈액 흐름을 차단 하는 혈관 클립 바로 아래 신장 동맥 및 대동맥의 분기 바로 위에 배치. 
	참고: 클립의 크기는 혈액의 흐름을 완전히 차단 하 대동맥 직경 보다 큰 이어야 합니다. 임시 5-0 실크 문자열 합자 만으로는 또한 클립 대신 혈액 흐름을 차단.</li>
	<li>폴리우레탄 카 테 터를 삽입 하려면 대동맥 클립, 신장 동맥 분 지에 인접 한에서 distally 마이크로 시저 5mm를 사용 하 여 앞쪽 대동맥 벽을 잘라 대동맥 벽의 표면에 점 출혈을 만드는 비슷합니다.</li>
	<li>폴리우레탄 카 테 터 삽입 (0.55 m m, 내경 외경 0.37 m m)를 물으로 대동맥에서 혈액을 씻어 절 개를 통해 얕게 바늘 내재 24 게이지를 사용 하 여. 폴리우레탄 테에 물으로 채워진 1 mL 주사기를 관리 하 고 물으로 대동맥에 나머지 혈액을 멀리 세척. 관개, 후 대동맥에서 카 테 터 제거.</li>
	<li>폴리우레탄 카 테 터를 삽입 하기 전에 (1.20 m m, 내경 외경 0.94 m m) 18-게이지 내재 바늘을 사용 하 여 잘라 폴리우레탄 테 길이가 10 mm ( 그림 1B).
	1.9 단계에서 만든 절 개에서 대동맥 루멘으로 폴리우레탄 카 테 터의 <ol><li>삽입 잘라 조각. 완전히 10 m m 카 테 터 대동맥 루멘으로 놓고 절 개 위치에 맞게 카 테 터의 중간점 위치 (즉, 카 테 터와 절 개를 커버).</li>
	</ol></li> <li>8-0 monofilament 문자열 ( 그림 1C)을 사용 하 여 중단 봉합 절 개를 복구.</li>
	<li>선 5-0 실크 문자열 및 폴리우레탄 테 ( 그림 1D)의 조합을 사용 하 여 복 부 대동맥. 
	참고: 대동맥 루멘 내재 카 테 터에 의해 유지 수 있습니다. 카 테 터 위치 이후 방지 하기 위해 단단히 대동맥 선 외과 의사 &#39; s 매듭은 것이 좋습니다 때 묶는 매듭, 두 배 overhand 매듭 형성의 첫 번째 던지기는 여분의 트위스트를 추가 하 고 추가 차례 더 많은 마찰을 제공 하 고 완화 하는 것을 줄일 수 있습니다.</li>
	<li>결 찰, 후 대동맥 분기점에서 혈관 클립을 제거 한 다음, 제거를 antegrade 혈액 흐름을 복원 하는 신장 동맥 아래 혈관 클립. 심한 대동맥 맥 동 확인.</li>
	<li>두 레이어, 복 막 및 다른 레이어, 4-0 폴 리 프로필 렌 봉합에 복 부 절 개를 닫습니다. 단단히 protruded 오르간을 방지 하기 위해 절 개를 봉합.</li>
	<li>복 부 절 개에 국 소 lidocaine을 적용합니다. 식을 반환 될 때까지 난방 패드에 쥐를 놓습니다. 두지 마십시오 쥐 무인 sternal recumbency를 유지 하기 위해 충분 한 의식 회복 될 때까지. 그것은 완전히 복구 될 때까지 작업을 다른 쥐의 회사를 겪고 있다 쥐를 반환 하지 않습니다.</li>
	<li>작업 후 쥐 밀접 하 게 모니터링합니다. 쥐 조 난 또는 몸 체중 감소의 흔적을 보여줍니다 하는 경우 멸 균 식 염 수 (1.0-2.0 mL) bolus를 피하 주사.</li>
	<li>Postoperatively, 초음파 echogram에 확대 대동맥의 시간-과정 개발을 관찰합니다. 설명 5 복 부 대동맥의 외부 가장자리에 가장자리 안쪽에서 최대 직경 측정.</li>
</ol> 2. 수확, 고정, 및 Elastica 반 Gieson (EVG) 얼룩 <ol><li>28 일 postoperatively, sodium pentobarbital 관리 &#8805; 100 mg/kg는 쥐를 안락사를 intraperitoneally.</li>
	<li>자르면 쥐 &#39; s 복 부 구멍 ventrally. 메스를 사용 하 여 초기 절 개를 확인 합니다. 가 위를 사용 하 여 동맥 류를 수확 하 고 수확된 aortas 24-48 헤에 대 한 중립으로 버퍼링 하는 10% 포 르 말린에 장소 
	참고: 외과 의사는 동맥을 노출 하는 경우 대동맥과 다른 장기에 부상을 방지 하기 위해 주의 해야 합니다. 높은 복 부 기관, AAA 형성을 나타내는 관찰 한다. 그림 2는 vivo에서 이미지와 비보 전 이미지; AAAs의 견본이 파열 되지.</li>
	<li>EVG 얼룩 9 <ol><li>솔루션 준비 <ol><li>준비 Verhoeff &#39; 주어진된 순서에 따라 다음을 혼합 하 여 s hematoxylin: 알콜 되며 20 mL, 10% 제 2 철 염화 8.0 mL, 그리고 Lugol &#39; s 요오드 8 mL. 각 추가 사이 솔루션을 믹스. 이 솔루션을 필요에 따라 신선한 준비 될 수 있다.</li>
			<li>준비 반 Gieson &#39; s 솔루션 1% 산 fuchsin 혼합 하 여 1 mL 및 포화 picric 산 45 mL. 고 서 서 하룻밤 잘 수 있습니다. 이 솔루션은 2 주 동안 안정.</li>
			<li>준비 차별화 솔루션 (2% 제 2 철 염화 물) 10% FeCl 3 10 mL 40 ml에서를 혼합 하 여 증류수. 이 솔루션을 필요에 따라 신선한 준비 있습니다.</li>
			<li>5.0 g 나트륨 thiosulfate 증류수 100 mL 물에 용 해 하 여 준비 5% 포. 이 솔루션은 1 년 동안 안정.</li>
		</ol></li> <li>얼룩 절차 참고: 자세한 내용은 참조 하십시오 참조 9.
		<ol><li>Verhoeff에는 aortas를 배치 하는 10 분을 위해 간단히, 증류수에 수확된 aortas의 고정된 파라핀 섹션 화 &#39; s 되며 물과 차별화 솔루션 (2% FeCl 3)에서 10-30 배 수영 25 분 세척에 대 한. 린스 물에. 1 분 씻어 물에 대 한 5% 포에 놓습니다. 반 Gieson에서 &#39; 5 분에 대 한 s 솔루션</li>
			<li>Dehydrate 다음에서 알코올에 순서: 75%, 90%, 95%, 100%, 그리고 100% 알코올 30 s 각. 그런 다음, 선택을 취소 5 분, 크 실 렌에 두 번 합니다. 수 지 장착 매체 coverslip에. 
			참고: 탄성 섬유 표시 검정; 블루 블랙 핵: 즐 블루ck; 콜라겐: 빨강; 그리고 다른 조직 요소: 노란색.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wolinsky, H., Glagov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+abdominal+and+thoracic+aortic+medial+structure+in+mammals.+Deviation+of+man+from+the+usual+pattern.">Comparison of abdominal and thoracic aortic medial structure in mammals. Deviation of man from the usual pattern.</a> Circ Res. 25 (6), 677-686 (1969).</li><li>Sano, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphangiogenesis+and+angiogenesis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Lymphangiogenesis and angiogenesis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 9 (3), e89830 (2014).</li><li>Vorp, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+intraluminal+thrombus+in+abdominal+aortic+aneurysm+with+local+hypoxia+and+wall+weakening.">Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening.</a> J Vasc Surg. 34 (2), 291-299 (2001).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adventitial+vasa+vasorum+arteriosclerosis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Adventitial vasa vasorum arteriosclerosis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 8 (2), e57398 (2013).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoperfusion+of+the+Adventitial+Vasa+Vasorum+Develops+an+Abdominal+Aortic+Aneurysm.">Hypoperfusion of the Adventitial Vasa Vasorum Develops an Abdominal Aortic Aneurysm.</a> PLoS One. 10 (8), e0134386 (2015).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Mass+Spectrometry+Reveals+a+Unique+Distribution+of+Triglycerides+in+the+Abdominal+Aortic+Aneurysmal+Wall.">Imaging Mass Spectrometry Reveals a Unique Distribution of Triglycerides in the Abdominal Aortic Aneurysmal Wall.</a> J Vasc Res. 52 (2), 127-135 (2015).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+preventive+effect+of+fish+oil+on+abdominal+aortic+aneurysm+development.">The preventive effect of fish oil on abdominal aortic aneurysm development.</a> Biosci Biotechnol Biochem. 80 (6), 1186-1191 (2016).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+in+vascular+wall+can+induce+the+rupture+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Adipocyte in vascular wall can induce the rupture of abdominal aortic aneurysm.</a> Sci Rep. 6, 31268 (2016).</li><li>Lichtenberg, A., Cebotari, S., Tudorache, I., Hilfiker, A., Haverich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+scaffolds+for+heart+valve+tissue+engineering.">Biological scaffolds for heart valve tissue engineering.</a> Methods Mol Med. 140, 309-317 (2007).</li><li>Heistad, D. D., Marcus, M. L., Larsen, G. E., Armstrong, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+vasa+vasorum+in+nourishment+of+the+aortic+wall.">Role of vasa vasorum in nourishment of the aortic wall.</a> Am J Physiol. 240 (5), H781-H787 (1981).</li><li>Yoshimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regression+of+abdominal+aortic+aneurysm+by+inhibition+of+c-Jun+N-terminal+kinase.">Regression of abdominal aortic aneurysm by inhibition of c-Jun N-terminal kinase.</a> Nat Med. 11 (12), 1330-1338 (2005).</li><li>Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+murine+experimental+abdominal+aortic+aneurysms+with+elastase.">Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase.</a> J Vis Exp. (29), (2009).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+Angiotensin+II+Infusion+using+Osmotic+Pumps+Induces+Aortic+Aneurysms+in+Mice.">Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice.</a> J Vis Exp. (103), (2015).</li><li>United Kingdom, E. T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+versus+open+repair+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Endovascular versus open repair of abdominal aortic aneurysm.</a> N Engl J Med. 362 (20), 1863-1871 (2010).</li></ol>

저자는 공개 없다.

생리 적인 조건 하에서 대동맥 벽의 내부 레이어는 외부와 중간 레이어는 영양 VV, adventitia에서 중간 VV1에 침투 하는 반면 luminal 혈액 흐름에서 확산에 의해 영양는 있습니다. VV 혈 복 부 대동맥 벽에는 다음 세 가지 방향/영역에서 발생 한 수 있습니다: (1) 대동맥 벽, 대동맥 벽, 및 (3) 혈관 주위 조직10(2) 원심 방향 통해 인접 방향. 이전에, 인간의 조직의 조직학 분석 중요 한 협 착 또는 폐색 복 부 대동맥 벽에 VV 혈액 흐름 감소4수 제안 AAA 벽에 VV의 식별. 그것은 infrarenal AAA 폴리우레탄 카 테 터 삽입 및 infrarenal 복 부 대동맥의 봉합 결 찰의 조합에 기인 했다이 프로토콜에서 매우 중요 한 포인트. 신중 하 게 조직 계층을 벗 겨 지 다, 외과 원활 하 게 대동맥에 폴리우레탄 카 테 터를 삽입 하 고 단단히 hypoperfusion adventitial VV 및 동맥 류 형성으로 인해 만성 저 산소 증을 대동맥 선 해야 합니다. 이러한 기술을 사용 하 여, 대동맥 벽에 혈액의 흐름을 따라서 감소 하 고, 그리고 로컬 hypoxic 환경 유발 됩니다. 혈액 흐름 감소와 hypoxia 유발 동맥 형성 나타냅니다 VV 혈 복 부 대동맥 벽으로 AAA 형성의 병 인에는 역할을 한다.
특히, 대동맥 동맥 모델 다음 조건을 충족 해야 합니다: 기준선, tunica 매체의 퇴보와 대동맥 벽의 염증에 비해 혈관 직경에 1.5-fold 증가. 가장 인기 있는 동물 모델 유도 하는 염증 성 반응을 CaCl211, elastase12, angiotensin II13등 물질을 사용 하 여 건설 되었습니다. 이 모델 수 높은 재현성을가지고 하 고 분명히 병 적인 변화를 일으킬 그들은 일반적으로 연구에서 사용 된. 우리의 모델에서 우리는 사용 하 여 초음파에서 7 일 마다 절차 (그림 3) 후 날 28까지 절차를 수행 하기 전에 대동맥 직경 평가. 결과 대동맥 직경 적당히 증가 28 일 동안, 직경에 있는이 변화는 이전 설치류 모델에서 유사한 나타내는 보여주었다. 혈관 형태의 총 관찰 표시 부드러운 방 추상 모양 (그림 2). 28 일에 우리는 쥐를 희생 하 고 복구 된 대동맥 조직의 histopathological 분석을 수행. 찢 어과 tunica 매체와 adventitia의 탄성과 콜라겐 섬유의 실종 (그림 4) 관찰 되었다. 또한, 염증 세포, 대 식 세포, 등 tunica 매체 tunica adventitia에서 참석 했다.
현재, AAAs 사용할 수 있는 치료 옵션에 외과 혈관 내 수술 텐트 접목, AAA 파열14환자의 30-50%의 사망률으로 제한 됩니다. 그러나, 약 AAAs 치료 임상 사용을 위해 승인 되었습니다. 병 적인 결과 인간과 AAA 연구에 사용 되는 설립된 동물 모델 사이에서 불일치는 논쟁이 있다. 인간의 AAA 및 AAA 모델 동물 간의 병 인 유사성 약리 치료의 발전을 위해 필수적입니다. 설치류 모델의 효과 관한 우리의 쥐 모델은 형태학 상으로 인간 intraluminal 혈전5 와 지질8점에서 비슷합니다. 또한,이 연구에서 쥐의 약 20%가 AAA 파열 졌고 절차 후 28 일 이내에 사망 했다. 대동맥 동맥 류 파열은이 질병에 대 한 가장 중요 한 이벤트, 파열 설립 실험 AAA 모델, 공통 이며 메커니즘은 아직 해명 하지 했습니다. 따라서,이 모델은 대동맥 직경의 팽창과는 동맥의 파열의 메커니즘을 이해 하는 데 유용 합니다.
이 모델의 창조는 어떤 수술 절차에 대 한 필요 합니다. 따라서, 연구자는이 모델의 한계는이 모델을 만드는 연습 해야 합니다. 미래에, 우리는 우리가 줄일 수 있습니다 혈액 흐름 점차 VV 벽을 두껍게 하 여 자발적인 대동맥 동맥에서 발생 한 설치류 모델을 만드는 고 싶습니다.

복 부 대동맥은 다음 세 계층으로 구성: 내부 혈관 벽 (intima), 중간 레이어 (미디어), 그리고 혈관 외벽 (adventitia), 이들의 adventitia 독특한 혈액 공급 시스템 바사 vasorum (VV)로 알려져 있다. 대동맥 조직 adventitial VV 관류 하 고 대동맥 혈액 흐름1에서 간단한 산소 보급을 통해 산소와 함께 공급 된다. 그러나, 지리적으로, 복 부 대동맥 대동맥의 다른 부분에서에 비해 VVs의 최소 배포가 하고있다. 2
이전 연구 보고 인간의 복 부 대동맥 동맥 류에서 조직 hypoxia에 두꺼운 intraluminal 혈전 (ILT)3(AAA) 벽. 또한, 관련 된 조직 hypoxia AAA 벽4에서 상당히 높은 비율로 arteriosclerotic 변경 aneurysmal 벽에 adventitial VV 가려진은 표시 되었습니다. 이러한 결과에 따라, AAA의 소설 설치류 모델 adventitial VV hypoperfusion5를 유도 하 여 만들었습니다. 이 모델에서 VV hypoperfusion 발생 조직 hypoxia 및 infrarenal AAA, 형태학 및 병 적인 특성 인간 AAA6의 그들과 유사 했다의 개발. 주요 사례 ILTs의 존재와 형성 adipocytes6, 그리고 파열7,8를 일으킬 가능성이의 축적 했다. 이 발견 이전 설치류 모델에서 드물게 관찰 되었습니다. 따라서이 모델 메커니즘 AAA 개발 및 파열에 대 한 책임의 깊은 이해에 크게 기여할 수 있습니다. 소개 하 고 adventitial VV hypoperfusion 통해 AAAs를 유도 하는 데 사용 하는 표준 프로토콜을 설명 하 고 수술 기법을 사용 하 여 대동맥 벽에 저 산소 증을 유발 하는 방법을 설명.

<table><tbody><tr><td>rat</td><td>Japan SLC.Inc</td><td>Slc:SD rat</td><td>Sprague&amp;ndash;Dawley ratTM</td></tr><tr><td>povidone-iodine solution</td><td>Libatape Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>4987335 111457</td><td></td></tr><tr><td>5-0 silk string</td><td>Akiyama Medical MFG. CO.,LTD</td><td>JIS No.1</td><td></td></tr><tr><td>vascular clips</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>C-42-S-2</td><td></td></tr><tr><td>polyurethane catheter (24-gauge indwelling needle)</td><td>MEDIKIT</td><td>24G</td><td>Supercath Z4VTM, 24-gauge indwelling needle</td></tr><tr><td>polyurethane catheter (18-gauge indwelling needle)</td><td>MEDIKIT</td><td>18G</td><td>Supercath Z3VTM, 18-gauge indwelling needle</td></tr><tr><td>8-0 monofilament string</td><td>Ethicon Suture</td><td>c-42-S-2</td><td>PROLENE Polypropylene Suture, Repair the incision with the suture</td></tr></tbody></table>

creation of a rodent model of abdominal aortic aneurysm by blocking adventitial vasa vasorum perfusion

Adventitial 바사 vasorum (VV) 산소와 대동맥 벽에 영양을 제공합니다. 대동맥 벽에서 hypoxia 확대 복 부 대동맥 동맥 류 (AAAs) 발생할 수 있습니다. 이 문서는 소개 하 고 대동맥 루멘 및 infrarenal 복 부 대동맥의 봉합 결 찰에 폴리우레탄 카 테 터 삽입의 조합으로 만든 adventitial VV hypoperfusion 통해 AAAs를 유도 하는 데 사용 하는 표준 프로토콜에 설명 합니다.
프로토콜 남성 쥐 음식과 물 광고 libitum제공 되는 300-400 g 무게의 사용을 포함. 복 부 중간 복 부 절 개를 가진 개복 술 후 대동맥의 각 질 제거는 혈관 주위 조직에서 혈액 흐름을 차단 수행 됩니다. 신장 동맥 분 지에 인접 한 작은 절 개를 포함 하는 Aortotomy를 수행 하 고 폴리우레탄 테 18 게이지 내재 바늘을 사용 하 여 삽입 됩니다. 절 개, 수리 후 카 테 터를 통해 대동맥의 단단한 결 찰 대동맥 혈액의 흐름을 방해 하지 않고 대동맥 벽을 통해 인접 방향에서 VV 혈액 흐름을 차단 합니다. 이 기술은 진보 대동맥 팽창으로 AAA를 유도할 수 있다.
이 모델의 가장 큰 장점은 VV hypoperfusion 조직 hypoxia과 인간의 AAA의 그들과 유사한 형태학 및 병 적인 특성을가지고 있는 infrarenal AAA, 개발 원인입니다.

기술된 요원 기술 쥐에 폴리우레탄 카 테 터 삽입 및 infrarenal 복 부 대동맥의 봉합 결 찰의 조합을 사용 하 여 만성 대동맥 hypoxia 유발 동맥의 새로운 동물 모델을 만듭니다. 쥐 프로토콜 섹션에 설명 된 절차 후 안락사 28 일 있었다. aortas 수확 되었고 동맥 류 형성을 시각화 하기 위해 몇 군데. 그림 2 는 방 추상 AAA의 개발. Ex vivo에서 대동맥의 위쪽과 아래쪽 끝 팽창 없이 정상적인 직경이 있다. 대동맥 직경 transabdominal 초음파 (그림 3)를 사용 하 여 측정 되었다. 지름은 일반적으로 프로시저; 후에 대략 14 일에 최대 크기에 도달 그 후, 그것은 그대로 또는 약간 증가. 그림 4 는 EVG 얼룩 후 최대 직경에는 동맥의 histopathological 이미지를 보여준다. (동맥)의 28 일에 조직 이미지 날 0에 비해 탄성 섬유의 저명한 저하를 보였다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig1.jpg"> 
복 부 대동맥 동맥 류 (AAA)를 유도 하기 위해 그림 1: 수술 절차. (A) infrarenal 대동맥 주변 조직에서 피부 박피입니다. (10 m m 긴 컷 B)는 폴리우레탄 카 테 터 대동맥에 작은 절 개를 통해 삽입 됩니다. (C) 절 개는 8-0 monofilament 봉합으로 복구 되 고 혈액의 흐름이 복원 됩니다. (D)는 대동맥은 삽입 된 카 테 터에 5-0 비단 봉합으로 출혈. 눈금 막대 = 5 m m. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/55763/55763fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig2.jpg"> 
그림 2: 수술 후 대표 결과입니다. 방 추상 복 부 대동맥 동맥 류 수술 후 하루 28 보여주는 개발에 거시적인 전망. retroperitoneum의 높은 마진 (깨진된 선; 왼쪽) 동맥의 외부 가장자리에 해당합니다. Ex vivo에서 대동맥의 위쪽과 아래쪽 끝 (오른쪽) 정상입니다. 눈금 막대 = 3 m m. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/55763/55763fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig3.jpg"> 
그림 3: 최대 대동맥 직경 transabdominal 초음파를 사용 하 여 측정 대동맥 직경은이 쥐 모델에서 꾸준히 증가 했다. 대동맥 직경은 평균 ± 표준 편차로 표시 됩니다 (n = 12). <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/55763/55763fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig4.jpg"> 
그림 4: 얼룩 Elastica 밴 Gieson와 aneurysmal 조직의 대표 이미지. EVG 퇴행 성 탄력 있는 lamina에서 보여주는 미디어와 intraluminal 혈전의 형성 절차 후 28 일 (오른쪽) 얼룩과 조직학 평가. 대동맥 미디어에 탄성 섬유 조각화 및 대동맥 adventitia에 스파스 콜라겐 섬유는 28 일에 관찰 된다. 0 (왼쪽) 프로시저가 전에 이다. 눈금 막대 = 500 µ m. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/55763/55763fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

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Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

루멘 대동맥 및 대동맥의 봉합 결 찰에 폴리우레탄 카 테 터 삽입 adventitial 바사 vasorum hypoperfusion 인해 만성 저 산소 증 유발. 이 문서에서는 AAA의 인 간에 있는 유사한 특성을 가진 복 부 대동맥 동맥 류 (AAA)의 소설 동물 모델을 설명합니다.

Adventitial 바사 Vasorum 관류를 차단 하 여 복 부 대동맥 동맥 류의 설치류 모델의 생성

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

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Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

9.0K 조회수.  Hamamatsu University School of Medicine. 루멘 대동맥 및 대동맥의 봉합 결 찰에 폴리우레탄 카 테 터 삽입 adventitial 바사 vasorum hypoperfusion 인해 만성 저 산소 증 유발. 이 문서에서는 AAA의 인 간에 있는 유사한 특성을 가진 복 부 대동맥 동맥 류 (AAA)의 소설 동물 모델을 설명합니다.

비디오: Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Orthotopic 대동맥 이식 : 만성 Vasculopathy의 개발 연구에 생쥐 모델

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

연구

의학

Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase 

Transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta is the most widely used animal model of abdominal aortic aneurysm (AAA) ever since it was first described in rats by Anidjar and colleagues.1 The rationale for its development was based on the disrupted nature of elastin observed in AAAs. This rat model has been modified to produce AAAs in the infrarenal aortic region of mice.2 The model has the ability to add broad insight into the pathobiology of AAA due to the emergence of numerous transgenic and gene knockout mice. Moreover, it is a viable platform to test potential therapeutic agents for AAA. In this video, we demonstrate the elastase infusion AAA procedure used in our laboratory. 
Mice are anesthetized using 2.5% isoflurane, and a laparotomy is performed under sterile conditions. The abdominal aortais isolated with the assistance of an operating stereomicroscope (Leica). After placing temporary ligatures around the proximal and distal aorta, an aortotomy is created at the bifurcation with the tip of a 30-gauge needle. A heat-tapered segment of PE-10 polyethylene tubing is introduced through the aortotomy and secured. The aortic lumen is subsequently perfused for 5-15 minutes at 100 mm Hg with saline containing type I porcine pancreatic elastase (4.5 U/mL; Sigma Chemical Co.). After removing the perfusion catheter, the aortotomy is repaired without constriction of the lumen.

Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase

This video shows how to induce abdominal aortic aneurysms (AAA) in mice via transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta. The model has the ability to add broad insight into the pathobiology of AAA due to the emergence of numerous transgenic and gene knockout mice.

엘라스타제와 Murine 실험 복부 대동맥 동맥류의 생성

Transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta is the most widely used animal model of ...

생물학

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

혈관 동맥류 수리의 새로운 쥐과 모델

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced into clinical practice. Furthermore, experimental models are needed to elucidate the complex aneurysm biology leading to rupture of saccular aneurysms.
Several different kinds of experimental models for saccular aneurysms have been established in different species. Many of them, however, require special skills, expensive equipment, or special environments, which limits their widespread use. A simple, robust, and inexpensive experimental model is needed as a standardized tool that can be used in a standardized manner in various institutions.
The microsurgical rat abdominal aortic sidewall aneurysm model combines the possibility to study both novel endovascular treatment strategies and the molecular basis of aneurysm biology in a standardized and inexpensive manner. Standardized grafts by means of shape, size, and geometry are harvested from a donor rat&#39;s descending thoracic aorta and then transplanted to a syngenic recipient rat. The aneurysms are sutured end-to-side with continuous or interrupted 9-0 nylon sutures to the infrarenal abdominal aorta.
We present step-by-step procedural instructions, information on necessary equipment, and discuss important anatomical and surgical details for successful microsurgical creation of an abdominal aortic sidewall aneurysm in the rat.

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

헬싱키 쥐 미세 측벽 동맥류 모델

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of aortic disease exist, in vivo imaging of the vasculature has been limited. In recent years, micro-computerized tomography (micro-CT) has emerged as a preferred modality for imaging both large and small vessels both in vivo and ex vivo. In conjunction with a method of vascular casting, we have successfully used micro-CT to characterize the frequency and distribution of aortic pathology in &#946;-aminopropionitrile-treated C57/Bl6 mice. Technical limitations of this method include variations in the quality of the perfusion introduced by poor animal preparation, the application of proper methodologies for vessel size quantification, and the non-survivability of this procedure. This article details a methodology for the intravascular perfusion of a lead-based radiopaque silicone rubber for the quantitative characterization of aortopathy in a mouse model of aneurysm and dissection. In addition to visualizing aortic pathology, this method may be used for examining other vascular beds in vivo or vascular beds removed post-mortem.

This article describes a detailed methodology of using a radiopaque lead-based silicone rubber to perfuse the murine vasculature for aortic diameter quantification in a mouse model of aortic aneurysm and dissection.

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. However, only minor improvement in the long-term results of transplanted solid organs could be observed over the past decades. In this context, chronic allograft vasculopathy (CAV) still represents the leading cause of late organ failure in cardiac, renal and pulmonary transplantation.
Thus far, the underlying pathogenesis of CAV development remains unclear, explaining why effective treatment strategies are presently missing and emphasizing a need for relevant experimental models in order to study the underlying pathophysiology leading to CAV formation. The following protocol describes a murine heterotopic cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique. In this technique, a segment of the thoracic aorta is interpositioned in the right common carotid artery. With the use of the non-suture cuff technique, an easy to learn and reproducible model can be established, minimizing the possible heterogeneity of sutured vascular micro anastomoses.

Here, we present a protocol of heterotopic aortic transplantation in mice using the non-suture cuff technique in a cervical murine model. This model can be used to study the underlying pathology of chronic allograft vasculopathy (CAV) and can help evaluate new therapeutic agents in order to prevent its formation.

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal abdominal aortic aneurysms (AAA) in swine. To achieve this, we use a combination of balloon angioplasty, elastase and collagenase, and a lysyl oxidase inhibitor, called &#946;-aminopropionitrile (BAPN), to create clinically significant infrarenal aortic aneurysms, analogous to human disease.
Noncastrated male swine are fed BAPN for 7 days prior to surgery to achieve a steady state in the blood. A midline laparotomy is performed and the infrarenal aorta is circumferentially dissected. An initial measurement is recorded prior to aneurysm induction with a combination of balloon angioplasty, elastase (500 units)/collagenase (8000 units) perfusion, and topical elastase application. Swine are fed BAPN daily until terminal procedure on either postoperative day 7, 14, or 28, at which time the aneurysm is measured, and tissue procured. BAPN + surgery pigs are compared to pigs that underwent surgery alone.
Swine treated with BAPN and surgery had a mean aortic dilation of 89.9% &#177; 47.4% at day 7, 105.4% &#177; 58.1% at day 14, and 113.5% &#177; 30.2% at day 28. Pigs treated with surgery alone had significantly smaller aneurysms compared to BAPN + surgery animals at day 28 (p &#60; 0.0003). The BAPN + surgery group had macroscopic and immunohistochemical evidence of end stage aneurysmal disease.
Clinically significant infrarenal AAA can be induced using balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion and topical application, supplemented with oral BAPN. This model creates large, clinically significant AAA with hallmarks of human disease. This has important implications for the elucidation of AAA pathogenesis and testing of novel therapies and devices for the treatment of AAA. Limitations of the model include variation in BAPN ingested by swine, quality of elastase perfusion, and cost of BAPN.&#160;

This novel model creates robust infrarenal abdominal aortic aneurysms in swine using a combination of balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion, topical elastase application, and oral compound &#946;-aminopropionitrile administration, which interferes with collagen cross-linking.

돼지 모델 의 관막 복 대동맥류

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...

<meta charset="utf8"></head><body>쥐 복부 대동맥류의 기저에 있는 분자 메커니즘 조사

A Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model by Periadventitial Calcium Chloride and Elastase Infiltration

Abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening disease associated with high mortality rates. It is characterized by the permanent dilation of the abdominal aorta with at least a 50% increase in arterial diameter. Various animal models of AAA have been introduced to mimic the pathophysiological changes and study the underlying mechanisms of AAA. Among these models, the calcium chloride (CaCl2)- and elastase-induced AAA models are commonly used in mice. However, these methods have certain limitations. Traditional intraluminal porcine pancreatic elastase (PPE) perfusion is associated with high technical difficulty and a high rupture rate, while periadventitial administration of PPE yields inconsistent results. In addition, the CaCl2-induced AAA model lacks human AAA features, such as atherothrombosis and aneurysm rupture. Therefore, the combined application of CaCl2 and PPE has been proposed as an approach to enhance success rates and induce greater diameter increases in AAA animal models. This manuscript presents a comprehensive protocol for establishing a mouse AAA model through periaortic infiltration of PPE and CaCl2 in the infrarenal segment of the abdominal aorta. By following this protocol, we can achieve an AAA formation rate of approximately 90% with technical simplicity and reproducibility. Further ultrasound and histological experiments confirm that this model effectively replicates the morphological and pathological changes observed in human AAA.

<meta charset="utf8"></head><body>저자 스포트라이트: Abdominal Aortic Aneurysm에 대한 마우스 모델의 개발 및 특성화

This manuscript presents a protocol for establishing a mouse abdominal aortic aneurysm model using calcium chloride and elastase, combining the advantages of previous modeling methods. This model can be utilized to investigate the pathophysiological mechanisms underlying abdominal aortic aneurysms.

Periadventitial Calcium Chloride and Elastase Infiltration에 의한 마우스 복부 대동맥류 모델

Abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening disease associated with high mortality rates. It is characterized by the permanent dilation of the ...

Adventitial 바사 Vasorum 관류를 차단 하 여 복 부 대동맥 동맥 류의 설치류 모델의 생성

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Orthotopic 대동맥 이식 : 만성 Vasculopathy의 개발 연구에 생쥐 모델

엘라스타제와 Murine 실험 복부 대동맥 동맥류의 생성

혈관 동맥류 수리의 새로운 쥐과 모델

헬싱키 쥐 미세 측벽 동맥류 모델

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

돼지 모델 의 관막 복 대동맥류

Periadventitial Calcium Chloride and Elastase Infiltration에 의한 마우스 복부 대동맥류 모델

Periadventitial Calcium Chloride and Elastase Infiltration에 의한 마우스 복부 대동맥류 모델

Periadventitial Calcium Chloride and Elastase Infiltration에 의한 마우스 복부 대동맥류 모델