Name: a component-resolved diagnostic approach for a study on grass pollen allergens in chinese southerners with allergic rhinitis and/or asthma
Uploaded: 2017-06-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 34 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Component-resolved Diagnostic Approach for a Study on Grass Pollen Allergens in Chinese Southerners with Allergic Rhinitis and/or Asthma at JoVE.com

우리는 그림을 준비하는 데 도움을 준 Yueming Su에게 감사드립니다. 이 연구는 광동 과학 기술 재단 (프로젝트 번호 : 2014A020212352), 광저우 교육 국 (1201630044, 1201630393) 및 중국 국립 자연 과학 재단 (NSFC 81572063, NSFC 81601394)의 지원을 받았다.

인간 혈청 샘플 사용을 포함한 연구 프로토콜은 광저우 의과 대학의 첫 번째 부속 병원 인 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 모든 참가자는 독립적으로 또는 부모 (자녀의 경우 )를 통해 서면 동의서를 제공했습니다. 이 프로토콜은 온라인으로 등록되었습니다 (중국 임상 시험 등록 번호 : ChiCTR-DCC-13004003, http://www.chictr.org/cn/ 참조). 1. 연구 집단의 확인 참고 : AIR는 중국 남부의 알레르기 항원 검사를위한 가장 잘 문서화 된 대용량 데이터베이스이므로 호흡기 질환 주요 연구실 (AIR-SKLRD)의 알레르기 정보 저장소 (AIR-SKLRD)가 환자 모집의 주요 원천입니다. AIR는 거의 10 년 동안 환자의 혈청 샘플을 보관 해왔다. 간단히 말하자면, 이들 저장 샘플은 미리 5 mL의 원심 분리정맥혈을 3,000 xg에서 10 분간 정맥 내로 채취하고 상등액을 회수 하였다. 혈청 샘플을 장기 보관을 위해 -80 ° C의 냉장고에 넣었습니다. 환자 삽입 기준을 충족시킨 샘플은 현재 연구에서 모든 테스트에 사용할 준비가되었습니다. <ol><li> AIR 데이터베이스에서 2013 년 1 월에서 2015 년 6 월 사이에 잔디 알레르기 항원 검사를받은 알레르기 비염 및 / 또는 천식 환자 데이터를 미리 디자인 된 연구 기간 동안 검색하십시오. </li><li> 알레르기 성 비염 및 천식에 미치는 영향 (ARIA) 11 및 천식 (GINA) 글로벌 지침 12 지침에 따라 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식이 경증 또는 중등도 인 환자를 선택하십시오. &quot;스터디 그룹&quot;으로 지정하십시오. </li><li> 불완전한 의료 기록이있는 환자, 추적 조사를 위해 잃어버린 환자, 과학적 목적을 위해 혈청 샘플을 사용하는 것에 대해 정보에 입각 한 동의를 거부하는 환자, 확인 된 환자현재 면역 요법 또는 면역 조절제에있는 환자 또는 기생충 감염이있는 환자. </li><li> 동일한 제외 기준에 따라 비 호흡기 알레르기 환자 ( 예 : 습진, 알레르기 성 피부염 및 음식 알레르기)를 선택하여 &quot;대조군&quot;으로 지정하십시오. </li><li> 검사 결과에 혼동을 최소화하기 위해 처방전이나 치료법을 받기 전에 혈청 샘플을 채취했는지 확인하십시오. 이 요구 사항을 충족시키지 못하는 모든 혈청 샘플을 제외하십시오. </li><li> 모든 과목이 광저우 광역의 모든 지역에서 영주권을 가졌는지 확인하십시오 ( 즉, 10 년 이상 거주했거나 거주 한 상태). </li></ol> 2. 연구 흐름 및 관심 측정 <ol><li> 자격있는 환자의 혈청 샘플을 바이오 뱅크에서 검색하십시오. 알레르기 항원 / 알레르기 항원 성분을 검사하려면 140 μL의 혈청 (100 μL을 포함하여 기입하십시오죽은 공간을 위로). 참고 : 본 연구에서 각 환자에게 필요한 최대 총 혈청 용적은 다음과 같습니다 : 3 개의 특정 알레르겐과 8 개의 알레르겐 성분, sIgE = 140 μL * 11 = 1,540 μL. </li><li> 이기구를 사용할 때는 주로 버뮤다 풀, 티모시 풀, Humulus scandens 의 전체 알레르겐에 대한 sIgE의 혈청 샘플을 테스트하십시오. 3 절의 지침을 따르십시오. 참고 :이 꽃가루는 버뮤다 풀 13 , 14 , 15 와 Humulus scandens 16 이 중국에서 널리보고 되었기 때문에 측정을 위해 선택되었으며, Timothy grass 17 , 18 , 19 는 열대에서 온대에 이르는 전형적인 식물 종입니다 영역이며 전세계에서 가장 많이 연구되고 있습니다. </li><li> 2 차적으로, 2.3 단계에서 확인 된 혈청 샘플을 검사하여버뮤다의 알레르겐 성분에 대한 sIgE의 존재에 대한 전체 알레르겐에 대한 sIgEs [Cyn d 1 (g216)], Timothy [Phlp 1 (g205), Php 4 (g208), Phl p 5 (g215), Phl p 6 (g209) ), Phl p 7 (g210), Phl p 11 (g211) 및 Phl p 12 (g212)] 및 교차 반응성 탄수화물 결정 인자 [CCD (o214)]. 3 절의 지침을 따르십시오. </li></ol> 3. Immunoassay 분석 시스템을 이용한 완전 자동 시험 절차 참고 : 완전히 자동화 된 알레르기 항원 검사의 전체 절차는 7 , 8 , 9 , 10 의 다른 곳에 기술되어 있으며 제조업체의 프로토콜을 따릅니다. <ol><li> 완전 자동화 된 면역 분석기 ( 예 : ImmunoCAP1000)를 시작하고 연구 전반에 걸쳐 면역 분석을 수행하기 위해 사용하십시오. 기본 제공되는 정보 데이터 관리 (IDM) 컴퓨터를 켭니다. 참고 : 면역 분석 항문yzer는 일상적으로 대기 모드입니다. </li><li> &quot;Primary Power&quot;가 켜지면 &quot;System Power&quot;를 켜고 내장 소프트웨어가 시작될 때까지 3 분간 기다립니다. &quot;린스 솔루션로드&quot;및 &quot;워시 솔루션로드&quot;를 클릭하십시오. </li><li> 각 알레르겐 / 알레르기 항원 검사를 위해 140 μL의 혈청을 바이알에 넣으십시오. 각 환자에게 고유 한 식별 번호가있는 140 μL의 혈청이 들어있는 각 약병에 표시합니다. </li><li> IDM 인터페이스에서 메뉴를 클릭하여 다음 단계를 실행하십시오. <ol><li> IDM의 &quot;Request List&quot;창에서 &quot;sIgE&quot;가 선택 테스트 방법인지 확인하십시오. </li><li> 시료 튜브를 시료 랙에 넣고 품질 관리 튜브를 바코드가있는 품질 관리 랙에 넣습니다. 참고 : 각 환자에 대해 처음에는 3 개의 특정 알레르기 항원과 8 개의 알레르겐 구성 요소 또는 346 * 11 (3,806) 개의 샘플 튜브에 대한 테스트가 진행되었습니다. 각 샘플 튜브에 대해 3 개의 품질 관리 튜브medium, high level의 sIgE control을 포함하고 있습니다 (자세한 내용은 Table of Materials 참조). 결국, 1 차 시험 (단계 2.3)에서 양성 반응을 보인 58 명의 환자 만이 2 차 시험 (단계 2.3)에서 추가로 검사되었다. 튜브의 적재는 컴퓨터 콘솔에서 자동으로 설정할 수 있습니다. </li><li> &quot;Assay Processing&quot;화면에서 &quot;Load Reagents&quot;를 선택하십시오. &quot;Loadlist&quot;에 따라 시료 및 품질 관리 랙, 개발 솔루션, 컨쥬 게이트, 캘리브레이터, 캐리어, 피펫 팁, 정지 용액 및 세척 솔루션의 로딩을 완료하십시오 (자세한 내용은 표 참조). </li><li> &quot;로드 및 시작&quot;에서 &quot;확인&quot;을 누릅니다. 참고 : 측정이 끝나면 결과가 IDM에 나타납니다. </li><li> IDM 인터페이스에서 내보낼 데이터를 선택하십시오. &quot;메뉴&quot;, &quot;승인&quot;및 &quot;다른 이름으로 저장&quot;을 클릭하고 sIgE 측정 결과를 스프레드 시트 파일로 내 보냅니다. </li&gt; <li> 스프레드 시트 파일을 통계 소프트웨어 ( 예 : SPSS) 10로 가져옵니다. SPSS 메뉴의 Spearman 계수에 대한 특정 모듈을 사용하여이 잔디 꽃가루 (양성 sIgE 대 전체 알레르기 항원)와 꽃가루 성분 (양성 sIgE 대 알레르겐 분자) 간의 민감성 상관 관계를 분석하십시오. </li></ol></li></ol> 4. sIgE 반응성의 정의 참고 : 희석하지 않은 혈청 검체의 경우 특정 IgE 측정 범위는 0.35 ~ 100 kU / L입니다. <ol><li> sIgE 값&gt; 100 kU / L 1 : 5로 희석하여 재 검정하십시오. 값이 100 kU / L 이상으로 유지되는 경우, 1,000 kU / L까지 종점 수준에 도달 할 때까지 추가 희석을 진행하십시오. </li><li> 0.35 kU / L의 역치 값을 기준으로 0.35 kU / L를 초과하는 sIgE 수준은 양의 5 , 7 , 10으로 간주합니다. 반응을 평가하십시오.sIgE 검사의 등급은 클래스 1 (≥0.35 및 &lt;0.70 kU / L), 클래스 2 (≥0.70 및 &lt;3.50 kU / L), 클래스 3 (≥3.50 및 &lt;17.50 kU / L), 클래스 4 17.50 및 &lt;50.00 kU / L), 클래스 5 (≥ 50.00 및 &lt;100.00 kU / L) 및 클래스 6 (≥100.00 kU / L). </li></ol> 5. 통계 분석 <ol><li> 통계 소프트웨어 ( 예 : SPSS)를 사용하여 데이터 분석 10 . 정량적 데이터를 평균 및 표준 편차로보고하고, 정 성적 데이터를 중간 및 사 분위 범위 (IQR)로, 그리고 범주 형 데이터를 양성 결과의 비율로보고합니다. </li><li> 비율의 집단 간 비교, 정량적 데이터에 대한 비공유 t- 검정, 정 성적 데이터에 대한 순위 합계 테스트를 위해 카이 제곱 검정을 사용하십시오. </li><li> 상관 계수를 &quot;r&quot;로 표현한 파라 메트릭 데이터와 비 파라 메트릭 값에 대한 Spearman의 테스트 사이의 상관 분석을 위해 피어슨의 테스트를 사용합니다.그는 &quot; r s &quot;로 표현 된 상관 계수를 가지고있다. P 값이 0.05 미만인 경우 통계적 유의성을 고려하십시오. </li></ol>

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완전 자동화 된 면역 분석 분석기는 시간이 지남에 따라 지역, 실험실 및 기관간에 만족할만한 일관성을 제공 할 수 있습니다. 이러한 자동 절차는 벤치 연구 및 임상 연구를 실질적으로 지원하고, 많은 알레르겐 및 / 또는 알레르겐 성분의 표준화 된 검출을 가능하게하고, CRD의 출현 전에 쉽게 밝혀지지 않았을 가능성이있는 알레르겐 교차 반응을 확인하는 것으로 밝혀졌다. 또한 엄격한 품질 관리를 통해 전체 테스팅 절차를 완료 할 수 있기 때문에 대규모 지리적 영역에 대한 설문 조사에서 요구되는 높은 처리량 방법을 고려할 수 있습니다. 테스트 절차는 대부분 컴퓨터 콘솔에 의해 수행되지만 몇 가지 중요한 문제를주의해야합니다. 이 기기는 사용자 매뉴얼을 엄격하게 준수하는 데 사용되어야합니다. 모든 수차는 불필요한 시험 오류, 기계적 손상 또는 레이저 빔이나 고전압으로 인한 인명 피해를 초래할 수 있습니다. 항상 en정확하고 정확한 교정 곡선이 시스템에 저장되었는지 확인하십시오. 이는 시험의 정확도와 관련이 있기 때문입니다. 그렇지 않으면 혈청 검체 검사 전에 특정 교정자의 농도를 측정해야합니다. 그 후, 시스템은 자동적으로 이후의 사용을 위해 검량선을 계산하고 저장할 수 있습니다. 다른 검사 기술과 마찬가지로 기술자를 감염으로부터 보호하고 환경 오염을 방지하기 위해 사람 혈청 조작의 안전성을 관찰하는 것도 중요합니다. 처음으로 CRD 접근법으로 완전 자동화 된 면역 분석기를 사용하여이 연구는 중국 남부 광저우에서 알레르기 비염 및 / 또는 천식 환자에서 버뮤다 풀 sIgE 양성 (22.5 %)의 상당한 유행을 보여주었습니다. Timothy grass와 Humulus scandens 는 광저우에서 흔하지 않으며 심지어 존재하지도 않기 때문에 Timothy grass (13.6 %)와 Humulus scandens sIgE (7.0 %)의 양성률잔디 화분 사이의 교차 반응이 원인이 될 수 있습니다. 잔디 화분 알레르기 항원을 분석 한 결과 모든 Timothy grass IgE 양성인 환자도 Timothy grass 항원 Phl 4에 양성 반응을 보였다. Phl p1 양성 반응을 보인 환자는 17.1 % 유럽에서는 Phl p 1에 대한 양성율이 Ph p 4보다 훨씬 높다 18 , 20 , 21 . Phl p 1이 Timothy grass의 주요 성분이기 때문에이 연구 집단에서 Phl p 1보다 Phl p 4 양성의 우세한 비율은 Phl p 4가 구조적 유사성을 공유하기 때문에 &quot;진짜&quot;민감성 이외의 가능한 교차 반응성을 제안 할 수있다 CCD와 나무, 야채, 열대 과일을 포함한 여러 가지 다른 알레르겐 19 , 22 , 23, 24 . 이 관찰의 임상 적 관련성은이 연구에서 티모시 잔디 양성 환자의 대다수가 현재 Phl p 1 25를 사용하는 티모시 잔디 면역 요법을 받도록 권고받지 않아야한다는 것일 수 있습니다. 연구 방법 및 기술의 몇 가지 한계를 언급해야합니다. 첫째, 면역 분석 분석기의 피펫 / 시약 트레이에 최대 3 개의 다른 캘리브레이터 스트립을 넣을 수 있기 때문에 최대 3 개의 테스트 배치를 동시에 실행할 수 있습니다. 더 큰 지역 조사와 같이 과중한 작업량이 필요할 때 처리하는 데 상당한 시간이 걸립니다. 둘째,이 연구에서 분석기를 사용할 때 인간 IgA, IgD, IgM 및 IgG와의 교차 반응은 생리 학적 농도에서 존재하지 않으므로 이들 면역 글로불린과 교차 반응성이 관련 될 때 다른 연구 방법이 필요합니다. 셋째, devic의 세련됨에도 불구하고e, 완전 자동화 된 면역 검정 분석기로 얻은 결과는 최종 진단이 내려 질 때 다른 검사실 조사, 임상 평가 및 의사의 전문 지식을 대신해서는 안됩니다. 넷째, 중국에서 알레르겐 CRD가 늦게 도입됨에 따라 아열대 잔디 꽃가루 성분의 여러 상업 제품이 현재 이용 가능하지 않거나 최근까지 연구 승인을받지 못했다. 따라서이 기술을 알레르기 유발 물질에 대한 CRD 접근법으로 사용하는 것은 실질적으로 한 지역에서의 특정 용도를위한 제조자로부터의 제품 공급의 상업적 이용 가능성에 달려있다. 열대 및 아열대 지역의 식물 꽃가루가 복잡해지면서 CRD 연구는 해당 알레르겐 제품이 부족하기 때문에 불충분하고 어려울 수 있습니다. 이러한 딜레마는이 기술의 효율성을 크게 떨어 뜨릴 수 있습니다. 그럼에도 불구하고 우리가 알고있는 최신 정보에 따르면, 이것은 CRD 접근법을 사용하는 개척적인 연구입니다o 중국 남부의 잔디 꽃가루 알레르겐에 대한 민감성을 조사. 더 많은 연구가이 맥락에서 계속 될 수 있으며 이러한 결과를 검증 할 수 있습니다. 지금까지 완전 자동 면역 검정 분석기를 사용하는 기술 은 체외 알레르겐 sIgE 테스트 26 , 27 의 황금 표준으로 받아 들여졌습니다. 방대한 범위의 중국 내에서 알레르겐 감작에 대한 매우 제한된 데이터를 감안할 때, CRD 접근법으로서 완전 자동화 된 면역 측정법을 사용하는 대규모 표본 연구는이 틈을 채우고이 분야에서 이용 가능한 증거를 추가 할 수 있습니다. 그러한 연구, 대개 멀티 센터 및 전국 협력은 표준화를위한 프로토콜을 기반으로하는 면역 측정법의 네트워킹을 필요로 할 수 있음을 주목하는 것이 중요합니다.

잔디 꽃가루는 면역 글로불린 E (IgE) 관련 알레르기의 거의 50 %를 차지하고 공기 중의 특성 때문에 알레르기기도 질환, 특히 천식과 알레르기 성 비염 1 , 2 , 3 , 4 의 세계적 위험을 부과합니다. 지역의 풀 꽃가루 알레르기에 대한 예방은 꽃가루 알레르겐의 지역 분포에 대한 정보에 의존합니다. 불행히도, 감작 알레르기 항원의 스펙트럼은 지역마다 다르며 일반적으로 지역 특이성으로 알려져 있습니다. 광대 한 동아시아 영토 인 중국에서는 초반 꽃가루 감작의 지역 특이성이 지난 수십 년 동안이 나라 남부에서 현재 이용할 수있는 제한된 자료에 의해 더욱 복잡해졌습니다. 이러한 자료 부족으로 전체적인 꽃가루 감각을 나타내는 데 어려움을 겪었습니다이 큰 나라에서의 화법 6 . 또한 중국 남부 지역의 매우 제한된 자료는 주로자가 신고 설문지, 피부 검사 (실험실 혈청 검사보다는), 총 IgE 측정 (알레르기 항원 특이 IgE (sIgE)보다는), sIgE 검출 (알레르기 항원 알레르겐 성분 분자보다는). 특정 알레르겐이 관련되어있을 때 알레르기 증상의 자체보고는 신뢰할 수 없습니다. 피부 찌름 검사는 광범위하게 접근 할 수 있지만 비 표준화 된 알레르겐 추출물의 사용을 포함하며, 그 자체가 결과 해석을 혼동시키는 다른 민감성 요소를 포함 할 수 있습니다. 피부 단자 검사의 신뢰성은 또한 알레르기 전문의 나 전문 간호사의 숙련 된 조작, 최근의 히스타민 사용, 환자의 순응도 (때로는 어린 어린이에게는 매우 어려움)에 따라 결정됩니다. 총 IgE는 알레르기 선별에 유용하지만 th를 현명하게 결정하지는 않습니다.환자의 알레르겐을 유발합니다. 더욱이, 거의 모든 알레르겐은 수많은 알레르겐 성분 분자를 포함합니다. 주요 성분 ( 예 : 집먼지 진드기의 Der p 1과 Der p 2)에 대한 민감성은 &quot;진정한&quot;알레르기 (다른 알레르겐과의 교차 반응으로 인한 위양성보다는 특정 알레르겐에 대한 알레르기)를 나타내지 만 감작 ( 즉, 교차 반응성 Der p 10, 트로포 미오신)은 그렇지 않을 수 있습니다. CRD (component-resolved diagnostics)가 도입되기 전에 이러한 실망스러운 결과로 중국에서의 알레르겐 연구가 저해되었습니다. CRD는 재조합 또는 정제 된 알레르겐 분자를 사용하여 알레르겐의 성분을 정확하게 검출함으로써 쉽게 측정 가능하고 특징화할 수있는 측정을 가능하게합니다. 지난 수십 년 동안 알레르기 연구는 필연적으로 여러 가지 무관 한 구성 요소를 포함하는 알레르겐의 조 추출물을 자주 사용했습니다. 이 공동의 많은지지자는 불활성이지만 때로는 혼란스런 긍정적 반응으로 이어질 수도 있습니다. CRD에서 재조합 또는 정제 된 알레르겐 분자를 사용하면이를 회피 할 수 있으므로 시험의 정확성이 향상됩니다. microarrays에서 가공 될 때, CRD 접근은 빨리 개인적인 주제에있는 알레르겐 분자의 수백에 과민성을 검열하거나 확인한다. 중국 남부의 잔디 꽃가루 감작에 대한 잘 설계된 CRD 연구는 현재 부족합니다. 이상적으로, 그러한 연구는 상당한 지리적 범위의 지역 인구를 포함해야하며, 중국에서 일반적으로보고 된 잔디 꽃가루를 고려해야하며 위에서 언급 한 기술적 측면을 언급해야합니다. 실용 수준의 임상 관련성을 확보하고 혈청 검체의 징집을 용이하게하기 위해 흡입 알레르기 항원 인 잔디 꽃가루에 대한 민감성에 대한 조기 조사는 일반인보다는 알레르기 성 호흡기 질환 환자에게 초점을 맞출 수 있습니다. 이 작품은CRD 접근법을 사용하여 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 광저우 광저우 (중국 광역시 및 그 외곽 지역) 환자에서 버뮤다 풀, 티모시 잔디 및 Humulus scandens 에 대한 혈청 sIgE 반응성을 테스트하는 데 사용되었습니다. 중국 남부의 아열대 및 온대 잔디 꽃가루에 대한 감작에 대한 이러한 발견은 현재 문헌에서 중요한 증거를 추가하고있다.

<table><tbody><tr><td>ImmunoCAP 1000 Instrument</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>12-3800-01</td><td></td></tr><tr><td>Phadia Information Data Manager Software Package</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>12-3801-11</td><td></td></tr><tr><td>Software Package, ImmunoCAP 1000</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>12-3801-12</td><td></td></tr><tr><td>g2&lt;br/&gt; (Bermuda grass)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-4131-01</td><td></td></tr><tr><td>g6&lt;br/&gt; (Timothy grass)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-4100-01</td><td></td></tr><tr><td>w22&lt;br/&gt; (Japanese Hop)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-4452-01</td><td></td></tr><tr><td>g216&lt;br/&gt; (nCyn d 1)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-4972-01</td><td></td></tr><tr><td>g205&lt;br/&gt; (rPhl p 1)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5234-01</td><td></td></tr><tr><td>g208&lt;br/&gt; (nPhl p 4)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5288-01</td><td></td></tr><tr><td>g215&lt;br/&gt; (rPhl p 5b)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5338-01</td><td></td></tr><tr><td>g209&lt;br/&gt; (rPhl p 6)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5289-01</td><td></td></tr><tr><td>g210&lt;br/&gt; (rPhl p 7)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5290-01</td><td></td></tr><tr><td>g211&lt;br/&gt; (rPhl p 11)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5291-01</td><td></td></tr><tr><td>g212&lt;br/&gt; (rPhl p 12)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5292-01</td><td></td></tr><tr><td>o214&lt;br/&gt; Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-5339-01</td><td></td></tr><tr><td>Specific IgE Conjugate 400</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9310-08</td><td></td></tr><tr><td>Specific IgE Calibrator Strip</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9459-08</td><td></td></tr><tr><td>Specific IgE Curve Control Strip</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9312-08</td><td></td></tr><tr><td>Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>14-4417-01</td><td></td></tr><tr><td>ImmunoCAP Specific IgE Negative Control</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9445-01</td><td></td></tr><tr><td>ImmunoCAP Specific IgE Control L</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9528-01</td><td></td></tr><tr><td>ImmunoCAP Specific IgE Control M</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9529-01</td><td></td></tr><tr><td>ImmunoCAP Specific IgE Control H</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9530-01</td><td></td></tr><tr><td>Development Solution</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9439-08</td><td></td></tr><tr><td>Stop Solution</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>34-2271-58</td><td></td></tr><tr><td>Washing Solution</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9202-08</td><td></td></tr><tr><td>FluoroC</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9264-01</td><td></td></tr><tr><td>Maintenance Solution Kit</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)</td><td>10-9476-01</td><td></td></tr></tbody></table>

a component-resolved diagnostic approach for a study on grass pollen allergens in chinese southerners with allergic rhinitis and/or asthma

잔디 꽃가루에 과민 반응은 알레르기 성기도 질환에 대한 세계적 위험을 부과합니다. 예방은 꽃가루 알레르겐에 대한 지역 조사에 의존하지만이 주제에 관한 데이터는 중국 남부 지역에 한정되어 있습니다. 입수 가능한 모든 자료는 자체 신고 설문지, 피부 찌름 검사 및 원유 추출물을 사용한 총 IgE 또는 특이 IgE 검사에 의해 얻어졌다. 여러 가지 이유로 이러한 방법은 신뢰할 수 없습니다. 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 동반 한 광저우 광역 (중국 남부 최대 도시 및 그 외곽)의 환자 집단에서 버뮤다 풀, 티모시 잔디 및 Humulus scandens 알레르겐에 대한 혈청 sIgE 반응성을 완전 자동 면역 분석기를 구성 요소로 사용하여 검사했습니다 해결 된 진단 (CRD) 도구. 처음으로 알레르기 비염 및 / 또는 천식이있는 중국 남부에서 버뮤다 풀 sIgE 양성율이 상당히 높은 것으로 나타났습니다. 이 환자들에게서 미묘한 감작의 유행후자의 두 가지가이 지역에서 공통적이지 않기 때문에 교차 반응 (cross-reactivity)으로 인해 발생할 수있는 티모시 잔디 (Timothy grass)와 흄스스런 스 (Humulus scandens) 에 주목했다. 이것은 또한 알레르겐 성분의 검출에 의해 뒷받침되었다. 완전 자동화 된 면역 분석 분석기는 시간이 지남에 따라 지역, 실험실 및 기관간에 만족할만한 일관성을 제공 할 수 있습니다. 장비의 자동성은 CRD의 출현 전에 쉽게 밝혀지지 않았을 표준화 된 탐지를 가능하게 할 수 있습니다. 이것은 중국 남부의 잔디 꽃가루 알레르겐에 대한 민감성을 조사하기 위해 CRD 접근법을 사용하는 연구입니다. 그것은 문헌의 현재 증거에 추가됩니다. 이러한 연구 결과를 검증하기 위해서는 앞으로의 연구가 필요합니다. 그러나 CRD가 유용한 도구 임에도 불구하고 완전 자동화 된 면역 분석기로 작성된 결과는 다른 검사실 조사, 임상 평가 및 의사 전문 지식을 대신해서는 안됩니다.

이 연구에 사용 된 완전 자동화 된 면역 분석기는 환자의 혈청 표본에서 관심 분자 (sIgE)와 반응하는 알레르겐 또는 알레르겐 성분을 공유 결합으로 덮은 고상 구조를 가지고 있습니다. 자동 프로그램으로 분석기는 150μL의 헹굼 용액으로 모든 비 특이성 IgE를 세척하고 이것을 5 번 반복합니다. 그런 다음 효소 표지 된 항 -IgE 항체 (50 μL)를 첨가하여 복합체를 만듭니다. 효소 표지 된 항 -IgE 항체 (접합체)는 특정 IgE에 결합하는 2 차 항체이다. 결합되지 않은 항 IgE 항체는 150 μL의 세척 용액으로 세척하여 제거합니다 (3 회 반복). 결합 된 복합체를 37 ℃에서 9 분 동안 현상 제 (50 μL)로 처리한다. 발달 제는 모든 결합 된 항 -IgE 항체를 차단하는 효소 - 소화제입니다. 후자는 알칼리성 조건 하에서 형광을 방출합니다. 반응은알칼리 정지 용액의 첨가. 이 후, 장비는 용리액을 짜내고 470 nm의 파장에서 생성 된 용리액의 형광을 측정하기 위해 고상 구조를 압축합니다. 형광은 용리액에서 관심 대상인 분석 대상 분자의 절대 수준과 선형으로 상관됩니다. 높은 형광 값은 혈청 표본에서 더 많은 sIgE를 의미합니다. 테스트 결과를 해석하기 위해 시스템은 검량선을 사용하여 샘플에 대한 반응을 농도로 자동 변환합니다. 측정 데이터는 전자적으로 IDM 소프트웨어로 전송되며, 분석 결과 계산, 통계 계산 및 결과보고 기능을 통합합니다. 포함 및 제외 기준에 따라, 본 연구에서는 346 명의 환자의 혈청을 조사했습니다. 연구 그룹에는 알레르기 비염 단독 환자 78 명, 천식 환자 92 명, 동반자 88 명천식과 비염에 잘 맞습니다. 대조군에는 비 호흡기 알레르기 환자 88 명이 포함되었다. 이 환자들은 1-87 세의 나이로 연구의 대상 지역 인 광저우의 모든 지역에서 영구 거주자로 확인되었습니다. 모든 연구 집단과 통제 집단은 성별, 연령, 가족력 등 인구 통계 학적 특성과 사회적 특성이 비슷했다. 연구 그룹에 속한 환자 중 22.5 %는 버뮤다 풀, 13.6 %는 티모시 풀, 7.0 %는 휴 뮤러스스런 덱스에 양성 반응을 보였다 . 연구 그룹에서 어떤 초본 꽃가루에 대한 민감도는 대조군보다 훨씬 높았다 ( 표 1 ). 모든 버뮤다 풀 sIgE 음성 환자는 티모시 잔디와 험비 스캔들에 대해서도 음성 이었습니다 . 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식 환자는 다른 알레르기 (n = 4, 4.5 %)를 가진 환자보다 버뮤다 풀 (n = 58, 22.5 %)에 대한 민감도가 현저히 높았다는 사실에 주목할 필요가 있습니다. Humulus scandens 또는 CCD에 대한 양성 반응의 가능성은 30 % 미만이었다. 대조적으로, class-4 Bermuda grass sIgE 반응성을 가진 환자는 Cyn d 1, Timothy grass allergens, Humulus scandens 또는 CCD ( 그림 1 )에 대해 67 ~ 100 %의 양성 반응 기회를 보였다. 버뮤다 잔디 sIgE 반응성 수준은 다른 잔디 꽃가루 IgEs (rs = 0.669, P &lt;0.001)에 대한 양성의 기회와 유의 한 상관 관계를 보였다. 티모시 잔디 민감성은 티모시 잔디 성분에 대한 sIgE에 의해 더 평가되었다. Timothy grass-positive 환자 35 명 중 가장 빈번하게 검출 된 알레르겐 성분은 Phlp4 (100 %, 35/35)이고 Phlp1(17.1 %, 6/35). 각각 3 명 (3/35, 8.6 %)이 Phl p 5, 6, 7, 11 및 12 중 어느 하나에 양성이었다 ( 표 2 ). 혈청 phl p 4 sIgE 수치는 총 티모티 잔디 알레르겐과 CCD sIgE 수치와 강하게 상관 관계가 있었다 (rs = 0.941과 0.928, P &lt;0.001, 표 3 ). 버뮤다 잔디 양성 환자의 41.4 % (24/58)와 티모시 잔디 감작 환자의 68.6 % (24/35)는 CCD에 양성 반응을 보였다. 스피어 만 (Spearman)의 순위 상관 분석은 CCD와 다른 풀 알레르기 항원 사이의 민감성에 중요한 연관성을 보여 주었다 ( 표 3 ). <img alt="그림 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55723/55723fig1.jpg" /> 그림 1 : 버뮤다 그래스에 긍정적 인 환자들 사이의 공동 증감. 이 수치는 버뮤다 풀 (n = 58)에 대한 sIgE 반응성과 다른 종류의 sIgE 반응성Timothy grass, Humulus scandens , CCD 및 기타 잔디 알레르기 성분에 대한 감작. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/55723/55723fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td colspan="3"> 양성 반응률 [% (n / patients)] </td></tr><tr><td></td><td> 버뮤다 풀 </td><td> 티모시 잔디 </td><td> 험비 스캔들 </td></tr><tr><td> AR 및 / 또는 AS 환자 </td><td> 22.5 % (58/258) †† ‡ </td><td> 13.6 % (35/258) † </td><td> 7.0 % (18/258) </td></tr><tr><td> AR 환자 </td><td> 21.8 % (17/78) †† </td><td> 10.2 % (8/78) </td><td> 7.7 % (6/78) </td></tr><tr><td> AS 환자 </td><td> 22.8 % (21/92)†† </td><td> 14.1 % (13/92) † </td><td> 5.4 % (5/92) </td></tr><tr><td> AR 및 AS 환자 </td><td> 22.7 % (20/88) †† </td><td> 15.9 % (14/88) </td><td> 8.0 % (7/88) </td></tr><tr><td> 나이 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 14 세 이하 </td><td> 18.6 % (8/43) </td><td> 14.0 % (6/43) </td><td> 7.0 % (3/43) </td></tr><tr><td> &gt; 4 년 </td><td> 23.3 % (50/215) </td><td> 13.5 % (29/215) </td><td> 7.0 % (15/215) </td></tr><tr><td> 섹스 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 남성 </td><td> 25.7 % (35/136) </td><td> 13.9 % (19/136) </td><td> 7.4 % (10/136) </td></tr><tr><td> 여자 </td><td> 18.8 % (23/122) </td><td> 13.1 % (16/122) </td><td> 6.6 % (8/122) </td></tr><tr><td> 다른 알레르기 환자 </td><td> 4.5 % (4/88) ** </td><td> 1.1 % (1/88) ** </td><td> 0 * </td></tr></tbody></table> 표 1 : 질병 개체 및 인구 통계 학적 세부 사항에 근거한 버뮤다 잔디, 티모그 잔디 및 Humulus 에 대한 sIgE 양성 판정 환자 . 알레르기 성 호흡기 질환이있는 환자의 비율은 버뮤다 풀 (χ 2 = 14.35, P &lt;0.001), 티모시 잔디 (χ 2 = 10.88, P &lt;0.001), 험군 scandens (χ 2 = 5.14, P = 0.02 ), 다른 알레르기 대조군 ( ** P &lt;0.01, * P &lt;0.05). 버뮤다에 긍정적 인 시험을 한 환자의 비율은 티모시에 대한 비율보다 현저히 높았습니다 ( ‡; P &lt;0.05), Humulus scandens ( †† P &lt;0.01). Timothy 양성 반응을 보인 환자의 비율은 Humulus scandens 보다 높았다 ( † P &lt;0.05). 버뮤다 풀, 티모시 잔디 및 Humulus scandens sIgE에 대한 양성 시험의 비율은 미성년자와 성인 집단간에 유의미한 차이가 없었다 (χ 2 = 0.07, P = 0.79, χ 2 = 0.06, P = 0.80, χ 2 = 0.11, P = 0.74; 잔디 화분 민감도는 남성과 여성간에 통계적으로 차이가 없었다 (χ 2 = 1.338, P = 0.25, χ 2 = 0.063, P = 0.80, χ 2 = 0.38, P = 0.54). 비슷하게 비염 환자와 천식 환자간에 민감도의 유의 한 차이는 나타나지 않았다 (χ 2 = 0.030, P = 0.985, χ 2 P = 0.558; χ2 = 0.528, P = 0.768; 각기). <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 환자 (%) </td><td></td><td> Phl p 4 </td><td> Phl p 1 </td><td> Phl p 5 </td><td> Phl p 6 </td><td> Phl p 11 </td><td> Phl p 7 </td><td> Phl p 12 </td></tr><tr><td> 28 명 (80.0 %) </td><td></td><td> + </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 4 명 (11.4 %) </td><td></td><td> + </td><td> + </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 1 (2.9 %) </td><td></td><td> + </td><td></td><td> + </td><td> + </td><td> + </td><td> + </td><td> + </td></tr><tr><td> 2 (5.7 %) </td><td></td><td> + </td><td> + </td><td> + </td&gt; <td> + </td><td> + </td><td> + </td><td> + </td></tr><tr><td> 합계 </td><td></td><td> 35 (100 %) </td><td> 6 명 (17.1 %) </td><td> 3 명 (8.6 %) </td><td> 3 명 (8.6 %) </td><td> 3 명 (8.6 %) </td><td> 3 명 (8.6 %) </td><td> 3 명 (8.6 %) </td></tr><tr><td> (kU / L) </td><td></td><td> 0.52, 0.06-2.02 </td><td> 0.02, 0.01-0.10 </td><td> 0.04, 0.03-0.24 </td><td> 0.12, 0.03-0.34 </td><td> 0.05, 0.02-0.27 </td><td> 0.03, 0.02-0.36 </td><td> 0.10, 0.04-0.28 </td></tr></tbody></table> 표 2 : Timothy Grass 구성 요소의 양성 및 수준에 따른 Timothy Grass Sensitization (N = 35). +, 긍정적 인 테스트; a , sIgE 수준 (kU / L)은 중간 값과 IQR로 표시됩니다. Timothy grass sIgE 양성인 환자 35 명 중 80.0 %가 Phlp4 양성균이었고 11.4 %는 Phlp4 또는 Phlp1 양성균이었다. <table border = &quot;1&quot;fo : keep-together.within-page = &quot;1&quot;fo : keep-with-next.within-page = &quot;always&quot;&gt; <tbody><tr><td> 알레르기 항원 </td><td> 버뮤다 </td><td> 디모데 </td><td> 험비 스캔들 </td><td> CCD </td></tr><tr><td> 버뮤다 </td><td> - </td><td> 0.709 ** </td><td> 0.682 ** </td><td> 0.565 ** </td></tr><tr><td> Cyn d 1 </td><td> 0.583 ** </td><td> 0.787 ** </td><td> 0.751 ** </td><td> 0.865 ** </td></tr><tr><td> 디모데 </td><td> 0.709 ** </td><td> - </td><td> 0.921 ** </td><td> 0.856 ** </td></tr><tr><td> Phl p 4 </td><td> 0.645 ** </td><td> 0.941 ** </td><td> 0.886 * </td><td> 0.928 ** </td></tr><tr><td> Phl p 1 </td><td> 0.616 ** </td><td> 0.681 ** </td><td> 0.712 ** </td><td> 0.507 ** </td></tr><tr><td> Phl p 5 </td><td> 0.46 </td><td> 0.273 </td><td> 0.590 * </td><td> 0.624 * </td></tr><tr><td> Phl p 6 </td><td> 0.445 </td><td> 0.306 </td><td> 0.583 * </td><td> 0.569 </td></tr><tr><td> Phl p 7 </td><td> 0.681 * </td><td> 0.481 </td><td> 0.632 </td><td> 0.531 </td></tr><tr><td> Phl p 11 </td><td> 0.589 * </td><td> 0.372 </td><td> 0.620 * </td><td> 0.568 </td></tr><tr><td> Phl p 12 </td><td> 0.671 * </td><td> 0.411 </td><td> 0.565 </td><td> 0.446 </td></tr><tr><td> 험비 스캔들 </td><td> 0.682 ** </td><td> 0.921 ** </td><td> - </td><td> 0.853 ** </td></tr></tbody></table> 표 3 : CCD와 잔디 꽃가루 알레르겐 간의 양성에 대한 상관 계수. †는 상관 계수 r s로 표시됩니다 . Spearman의 상관 분석은이 비모수적인 데이터 세트에 대해 수행되었습니다. * P &lt;0.05, ** P &lt;0.01.

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A Component-resolved Diagnostic Approach for a Study on Grass Pollen Allergens in Chinese Southerners with Allergic Rhinitis and/or Asthma

이 연구는 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 중국 남부의 환자 집단에서 꽃가루 알레르겐에 대한 민감성을 연구하기 위해 성분 분석법을 사용하는 프로토콜에 대해 설명합니다.

알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 중국 남부의 잔디 꽃가루 알레르겐에 대한 연구를위한 성분 분석 진단법

Sensitization to grass pollen imposes a global risk for allergic airway diseases. Although prevention relies on local investigation of the pollen ...

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Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

9.9K 조회수.  State Key Laboratory of Respiratory Disease.  이 연구는 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 중국 남부의 환자 집단에서 꽃가루 알레르겐에 대한 민감성을 연구하기 위해 성분 분석법을 사용하는 프로토콜에 대해 설명합니다. 

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Flow Cytometric Analysis of Particle-bound Bet v 1 Allergen in PM10

Flow cytometry is a method widely used to quantify suspended solids such as cells or bacteria in a size range from 0.5 to several tens of micrometers in diameter. In addition to a characterization of forward and sideward scatter properties, it enables the use of fluorescent labeled markers like antibodies to detect respective structures. Using indirect antibody staining, flow cytometry is employed here to quantify birch pollen allergen (precisely Bet v 1)-loaded particles of 0.5 to 10 &#181;m in diameter in inhalable particulate matter (PM10, particle size &#8804;10 &#181;m in diameter). PM10 particles may act as carriers of adsorbed allergens possibly transporting them to the lower respiratory tract, where they could trigger allergic reactions.
So far the allergen content of PM10 has been studied by means of enzyme linked immunosorbent assays (ELISAs) and scanning electron microscopy. ELISA measures the dissolved and not the particle-bound allergen. Compared to scanning electron microscopy, which can visualize allergen-loaded particles, flow cytometry may additionally quantify them. As allergen content of ambient air can deviate from birch pollen count, allergic symptoms might perhaps correlate better with allergen exposure than with pollen count. In conjunction with clinical data, the presented method offers the opportunity to test in future experiments whether allergic reactions to birch pollen antigens are associated with the Bet v 1 allergen content of PM10 particles &#62;0.5 &#181;m.

Here, we present a protocol to quantify allergen-loaded particles by flow cytometry. Ambient particulate matter particles may act as carriers of adsorbed allergens. We show here that flow cytometry, a method widely used to characterize suspended solids &#62;0.5 &#181;m in diameter, can be used to measure these allergen-loaded particles.

PM10의 입자 바인딩 베팅 1 절 알레르기의 유세포 분석

Flow cytometry is a method widely used to quantify suspended solids such as cells or bacteria in a size range from 0.5 to several tens of micrometers in ...

연구

면역학 및 감염병학

Absorption of Nasal and Bronchial Fluids: Precision Sampling of the Human Respiratory Mucosa and Laboratory Processing of Samples

The methods of nasal absorption (NA) and bronchial absorption (BA) use synthetic absorptive matrices (SAM) to absorb the mucosal lining fluid (MLF) of the human respiratory tract. NA is a non-invasive technique which absorbs fluid from the inferior turbinate, and causes minimal discomfort. NA has yielded reproducible results with the ability to frequently repeat sampling of the upper airway. 
By comparison, alternative methods of sampling the respiratory mucosa, such as nasopharyngeal aspiration (NPA) and conventional swabbing, are more invasive and may result in greater data variability. Other methods have limitations, for instance, biopsies and bronchial procedures are invasive, sputum contains many dead and dying cells and requires liquefaction, exhaled breath condensate (EBC) contains water and saliva, and lavage samples are dilute and variable.
BA can be performed through the working channel of a bronchoscope in clinic. Sampling is well tolerated and can be conducted at multiple sites in the airway. BA results in MLF samples being less dilute than bronchoalveolar lavage (BAL) samples.
This article demonstrates the techniques of NA and BA, as well as the laboratory processing of the resulting samples, which can be tailored to the desired downstream biomarker being measured. These absorption techniques are useful alternatives to the conventional sampling techniques used in clinical respiratory research.

This manuscript describes the use of nasal and bronchial absorption techniques, specifically using synthetic absorptive matrices (SAM) to sample the mucosal lining fluid (MLF) of the upper and lower airway. These methods provide better standardization and tolerability than existing respiratory sampling techniques.

비 강 및 기관지 체액의 흡수: 인간의 호흡기 점 막 및 실험실 처리 샘플의 정밀 샘플링

The methods of nasal absorption (NA) and bronchial absorption (BA) use synthetic absorptive matrices (SAM) to absorb the mucosal lining fluid (MLF) of the ...

의학

Application of Biochip Microfluidic Technology to Detect Serum Allergen-specific Immunoglobulin E (sIgE)

Allergic disease is common in both adults and children. Identification of the causative allergens is significant in disease management and prevention. However, a specific immunoglobulin E (IgE) measurement system with a high price-performance ratio is lacking in mainland China, especially in the primary care hospitals. This paper describes the principle and operation procedures of using a microfluidic cartridge-based chemiluminescence system to detect allergen-specific IgE in serum. The results were compared with those from ImmunoCAP (System 1), the industrial standard, and the reproducibility of the system to detect patients sensitized to common allergens is evaluated. The results showed that in comparison with ImmunoCAP (System 1), the BioIC System (System 2) has good precision and sensitivity in detecting serum-specific IgE against various inhalant and food allergens but with a significantly lower cost. It can serve as a good alternative to System 1 in primary care hospitals in mainland China who have lower financial affordability.

Application of Biochip Microfluidic Technology to Detect Serum Allergen-specific Immunoglobulin E sIgE

This paper presents a protocol for detecting serum-specific immunoglobulin E with a microfluidic cartridge-based chemiluminescence system and the evaluation of its usefulness in allergy diagnoses.

검출 하는 혈 청 알레르기 항 원 특정 면역 글로불린 e (sIgE) 바이오 미세 기술의 응용

Allergic disease is common in both adults and children. Identification of the causative allergens is significant in disease management and prevention. ...

Symptom Assessment of Patients with Allergic Rhinitis Using an Allergen Exposure Chamber

Allergen exposure chambers (AECs) are clinical facilities that allow the exposure of participants to allergenic and non-allergenic airborne particles. They provide stable particle concentrations under controlled environmental conditions. This is of great importance both for diagnostic purposes and for the monitoring of treatment effects. 
Here, a protocol and the technical prerequisites for performing a safe and effective allergen challenge in subjects sensitized to airborne allergens (i.e., house dust mite [HDM]) in the ALL-MED AEC are presented. With this method, triggering allergic symptoms corresponds to natural exposure. This can be used for an allergy diagnosis or as a plausible endpoint in clinical trials, particularly for allergen immunotherapy (AIT). A controlled environment (temperature, humidity, and carbon dioxide [CO2]) in the chamber must be maintained. Allergen particles must be dispersed evenly within the AEC at stable levels throughout the challenge. For this presentation, allergic rhinitis (AR) patients sensitive to HDM allergens were enrolled. AR symptoms were assessed by the following parameters: total nasal symptom score (TNSS), acoustic rhinometry (ARM), peak nasal inspiratory flow (PNIF), and nasal secretion weight. The safety of the procedure was assessed by the peak expiratory flow rate (PEFR) and the forced expiratory volume in the first second (FEV1). The allergic subjects developed symptoms within 120 min of the trial. On average, the most intense symptoms appeared after 60-90 min and, after reaching a plateau, remained stable until the end of the trial.

A protocol for conducting a challenge in an allergen exposure chamber (AEC) facility is presented. AECs have proven to be safe and effective tools for the induction of allergic symptoms or as an endpoint in the efficacy testing of allergen immunotherapy due to their ability to maintain stable particle concentrations and environmental conditions.

알레르겐 노출 챔버를 이용한 알레르기성 비염 환자의 증상 평가

Allergen exposure chambers (AECs) are clinical facilities that allow the exposure of participants to allergenic and non-allergenic airborne particles. ...

Basophil Activation Test for Allergy Diagnosis

The basophil activation test (BAT) is a complementary in vitro diagnostic test that can be used in addition to clinical history, skin test (ST), and specific IgE (sIgE) determination in the evaluation of IgE-mediated allergic reactions to food, insect venom, drugs, as well as some forms of chronic urticaria. However, the role of this technique in the diagnostic algorithms is highly variable and not well determined.
BAT is based on the determination of basophil response to allergen/drug cross-linking IgE activation through the measurement of activation markers (such as CD63, CD203c) by flow cytometry. This test can be a useful and complementary tool to avoid controlled challenge tests&#160;to confirm allergy diagnosis, especially in subjects experiencing severe life-threatening reactions. In general, the performance of BAT should be considered if i) the allergen/drug produces false positive results in ST; ii) there is no allergen/drug source to use for ST or sIgE determination; iii) there is discordance between patient history and ST or sIgE determination; iv) symptoms suggest that ST may result in systemic response; v) before considering a CCT to confirm the culprit allergen/drug. The main limitations of the test are related to non-optimal sensitivity, especially in drug allergy, the need to perform the test no longer than 24 h after sample extraction, and the lack of standardization between laboratories in terms of procedures, concentrations, and cell markers.

The basophil activation test is a complementary in vitro diagnostic test for the evaluation of IgE-mediated allergic reactions based on the detection of basophil activation in the presence of a specific stimulus through the measure of activation markers by flow cytometry.

알레르기 진단을 위한 호염기구 활성화 검사

The basophil activation test (BAT) is a complementary in vitro diagnostic test that can be used in addition to clinical history, skin test (ST), and ...

A Traditional Chinese Medicine Characteristic Therapy for Bronchial Asthma: Moxibustion

Bronchial asthma is a chronic inflammatory disease of the airway which can lead to symptoms such as recurrent wheezing, shortness of breath, chest tightness, or cough, as a result of increased airway reactivity. With high diurnal variation, these symptoms often occur or worsen at night or in the morning. By burning and roasting the Chinese medica above human acupoints, moxibustion is a type of treatment that stimulates the activity of the human meridians through drugs and heat stimulation to prevent and treat diseases. According to the principle of syndrome differentiation and treatment of traditional Chinese medicine, acupoints are selected on the corresponding parts, which has a definite effect. It is regarded as a characteristic traditional Chinese medicine therapy for bronchial asthma. This protocol elaborates the methods and steps of patient management, material preparation, selection of acupoints, operation, and postoperative nursing to ensure safe and effective moxibustion treatment to significantly improve the clinical symptoms and quality of life of patients with bronchial asthma.

This protocol presents a curative procedure of moxibustion in treating patients with bronchial asthma.

기관지 천식에 대한 중국 전통 의학 특성 요법 : 뜸

Bronchial asthma is a chronic inflammatory disease of the airway which can lead to symptoms such as recurrent wheezing, shortness of breath, chest ...

Allergic Rhinitis Rat 모델에서 코 조직의 Multicolor Immunofluorescence

Immunofluorescent Labeling in Nasal Mucosa Tissue Sections of Allergic Rhinitis Rats via Multicolor Immunoassay

Allergic rhinitis (AR) is a chronic, non-infectious inflammatory disease of the nasal mucosa, primarily mediated by specific immunoglobulin E (IgE), affecting approximately 10%-20% of the world's population. While immunofluorescence (IF) staining has long been a standard technique for detecting disease-specific protein expression, conventional IF techniques are limited in their ability to detect the expression levels of three or more proteins in the same sample. Consequently, multicolor IF techniques have been developed in recent years, which allow the simultaneous labeling of multiple targets in cells or tissues.
This protocol provides a comprehensive overview of the process for establishing a rat model of AR, obtaining nasal mucosal samples, and the technical procedures for multicolor immunofluorescence. All rats in the AR group exhibited typical symptoms such as sneezing, a runny nose, and an itchy nose, with behavioral observations scoring &#8805;5 points. Hematoxylin and eosin (H&amp;E) staining revealed increased inflammatory cell counts and disrupted nasal mucosal integrity in the AR group. Multicolor immunofluorescence (mIF) demonstrated increased expression of ROR&#947;t and TICAM-1, while Foxp3 expression decreased in the nasal mucosa tissue of AR rats.

저자 스포트라이트: Advancing Allergic Rhinitis Research with Multicolor Immunofluorescence(다색 면역형광을 통한 알레르기 비염 연구 발전)

This protocol describes a multicolor immunofluorescence technique for evaluating the rat model of allergic rhinitis.

Multicolor Immunoassay를 통한 알레르기 비염 쥐의 코 점막 조직 절편에서 면역형광 라벨링

Allergic rhinitis (AR) is a chronic, non-infectious inflammatory disease of the nasal mucosa, primarily mediated by specific immunoglobulin E (IgE), ...

<meta charset="utf8"></head><body>COPD 환자의 쌕쌕거림에 대한 중국 전통 의학 귀 포인트 요법

Auricular Acupressure as an Adjuvant Treatment for Wheezing in Stable Chronic Obstructive Pulmonary Disease

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a major public health problem. Due to the restriction of expiratory airflow, it is characterized by emphysematous destruction of the lungs. Shortness of breath is one of the main clinical symptoms. Auricular acupressure is a clinical therapy characteristic of Chinese medicine that treats the disease by compressing ear points. Usually, the seeds of Vaccaria segetalis are used to stimulate ear points, which has the effect of regulating qi and alleviating wheezing. In this paper, we propose this characteristic therapy of traditional Chinese medicine (TCM) for the clinical symptoms of wheezing of lung and kidney qi deficiency type in stable COPD patients. Ear points are selected as the treatment protocol for Lung (CO14), Spleen (CO13), Kidney (CO10), Shen Men (TF4), and Ping Chuan (AT1.2.4i) points. The protocol describes a case study using auricular acupressure for a patient with chronic obstructive pulmonary disease to relieve wheezing symptoms.

<meta charset="utf8"></head><body>저자 스포트라이트: 쌕쌕거림 증상 감소에 대한 귀 압박 콩 요법의 효능

This protocol describes an effective therapy using auricular acupressure to relieve wheezing symptoms in stable chronic obstructive pulmonary disease.

안정적인 만성 폐쇄성 폐질환에서 쌕쌕거림에 대한 보조 치료로서의 귓바퀴 지압 

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a major public health problem. Due to the restriction of expiratory airflow, it is characterized by ...

알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 중국 남부의 잔디 꽃가루 알레르겐에 대한 연구를위한 성분 분석 진단법

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비 강 및 기관지 체액의 흡수: 인간의 호흡기 점 막 및 실험실 처리 샘플의 정밀 샘플링

검출 하는 혈 청 알레르기 항 원 특정 면역 글로불린 e (sIgE) 바이오 미세 기술의 응용

알레르겐 노출 챔버를 이용한 알레르기성 비염 환자의 증상 평가

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기관지 천식에 대한 중국 전통 의학 특성 요법 : 뜸

Multicolor Immunoassay를 통한 알레르기 비염 쥐의 코 점막 조직 절편에서 면역형광 라벨링

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안정적인 만성 폐쇄성 폐질환에서 쌕쌕거림에 대한 보조 치료로서의 귓바퀴 지압