Lennart Wiman (photographer) is acknowledged for excellent video recording.

환자 동의서를 작성 제공하고, 연구는 예테보리 대학에서 지역 윤리 심의위원회에 의해 승인되었다. 1. 마취 <ol><li> 모든 모니터링 (ECG, 혈압 커프) (17)을 설정합니다. </li><li> 중반 흉부 레벨 17 아래에서 경막 외 카테터를 삽입합니다. </li><li> 포폴 2 ㎎ / ㎏, 펜타닐 150 μg의, 그리고 Rocuronium 0.6 mg의 마취를 유도 / 이전에 삽입 말초 정맥 카테터를 통해 킬로그램. </li><li> Preoxygenate하고 삽관 환자. 세보, 산소 및 공기 (17)와 마취를 유지한다. </li><li> 더블 루멘 중심 정맥 카테터 및 동맥 카테터를 삽입합니다. CVP와 동맥압 (17)를 모니터링합니다. </li></ol> 선박의 간 및 캐 뉼러 2. 분리 <ol><li> 헤파린의 100 IE / kg을 관리하고 예방 적 항생제를 (줄 예를 들어, 트리 메소 프림 80의 160 mg의설파 0 mg)을 얻었다. </li><li> 경피적 Seldinger 기술을 사용하여, 대퇴 정맥에 17 프랑 카테터와 외부 경정맥 (18)에 15 프랑 카테터를 배치합니다. 투시하여 카테터의 위치를​​ 확인합니다. </li><li> 중간 선 아래로 칼 모양의 과정에서 L 자형 절개하여 개복술을 수행 한 후 오른쪽 subcostal 절개 19 일까지 연장. </li><li> 더 간외 전이가 완벽한 검사 및 촉진하여 복부에 없는지 확인합니다. <ol><li> 의심스러운 병변이 발견되면 동결 절편에 의해 악성 종양을 확인합니다. </li><li> 간외 현시 (​​periaortal 병증, 복부 전이)의 증거가있는 경우의 절차를 종료한다. 간 문부에서 림프절 종대는 금기로 간주되지 않습니다. </li></ol></li><li> 낫 인대, 좌우의 삼각 인대 및 관상 인대 (19)를 분할하여 간을 동원. </li><li> caval을 해부하다복막 지류 혈관의 결찰과 다이어프램까지 신장 정맥에서 시작 정맥. </li><li> 오른쪽 부신 정맥을 확인하고 주위 혈관 루프를 배치합니다. </li><li> 오른쪽 성선 정맥을 확인합니다. 5~10cm을 위해 그것을 해부. caval 정맥의 입구 주위에 지갑 문자열 봉합을 놓습니다. <ol><li> 성선 정맥에 원심 합자를 놓습니다. 가위를 사용하여 caval 정맥에서 성선 정맥 3-5cm를 엽니 다. </li><li> 오른쪽 성선 정맥을 통해 18 천을 와이어 강화 카테터를 삽입하고 retrohepatically 신장 정맥 위의 팁을 배치합니다. </li><li> 카테터의 위치를​​ 확보하기 위해 성선 정맥 주위에 합자를 놓습니다. </li><li> 카테터를 통해 혈액의 반환을 확인합니다. 카테터 (18) Heparinize. </li></ol></li><li> hepatoduodenal 인대를 해부하고, 간동맥, 위 십이지장 동맥 적절한 간동맥을 시각화. <ol><li> 장소 용기는 일반적인 간 줄게 주위에 루프공예 및 gastrodoudenal 동맥. </li><li> 포털 정맥을 해부하고 주위 혈관 루프를 배치합니다. </li><li> 담관 함유 인대의 나머지 부분을 분리하고 용기 루프에서이 모두 포함된다. </li></ol></li><li> 선박 루프 위 십이지장 동맥을 들어 올립니다. 동맥 유입을 중단 한 후, 가위를 사용하여 절개를합니다. <ol><li> 적절한 간동맥에 자사의 팁 8-12 프랑 카테터를 삽입합니다. 위 십이지장 동맥 주위에 합자와 위치를 고정합니다. </li><li> 카테터 혈액 반환을 확인하고 그것을 18 다음을 heparinize. </li></ol></li><li> 프라임 적혈구 포장 한 단위, 알부민의 100 ㎖ (50g / L), Tribonat (중탄산 나트륨), 헤파린 2500 단위 (5000 IE / ㎖) 100㎖로 정출 물 250ml를 관류 시스템. </li><li> 동맥 및 롤러 펌프를 구비 심폐 기계 이루어진 관류 시스템 caval 정맥 카테터 및 히터를 연결 t일회용 타입의 혈조, 산화 기 및 배관 시스템과 ogether. </li><li> 히터 유닛과 함께, 원심 펌프로 구성된 정 정맥 바이 패스 펌프 대퇴 및 외부 경정맥 카테터를 연결하고 우회를 시작합니다. </li><li> infrahepatically 신장 정맥 위의 caval 정맥 주위에 Rumel 지혈대를 강화하고 Klintmalm 혈관 클램프를 사용하여 suprahepatically caval 정맥을 체결하여 간의 분리를 완료합니다. <ol><li> 담관, 포털 정맥과 오른쪽 부신 정맥 주위에 Rumel 지혈대를 조이고 마지막으로 혈관 클램프를 사용하여 간동맥을 클램프. </li></ol></li></ol> 3. 관류 <ol><li> 관류를 시작하고 수동으로 혈조의 혈중 농도를 모니터링 할 수 있습니다. 정상 상태 레벨이 500-1,200 ㎖ / 분 사이, 보통의 유량에 도달 할 때까지 유량을 조정한다. </li><li> 오른쪽과 왼쪽 간 엽에 서미스터 프로브를 직접 하나에동맥 카테터. </li><li> C. O 40의 타겟 간 온도를 목표 관류 히트 관류에 걸쳐이 온도를 유지합니다. </li><li> 정 정맥 바이 패스 펌프 머리에 섬광 프로브를 놓습니다. </li><li> 전신 순환으로 10 MBq 내지 99m의 TC-알부민 (1 mL)을 작은 도즈를 주입함으로써, 누설 모니터링 시스템을 보정하고 기준 활성을 등록한다. <ol><li> 간 관류 장치로, 10 배 높은 용량, 100 MBq의의 99m TC-알부민 (1 ml)에 주입한다. </li><li> 섬광 프로브로 측정 활동의 증가로 전신 순환에 관류 시스템에서 누출을 기록합니다. </li><li> 혈조에 볼륨의 증가로 관류 시스템에 전신 순환의 누출을 기록합니다. </li></ol></li><li> 유량의 정상 상태가 확립 될 때의 용량을 주입 멜 팔란, 누설이 존재하지 않으며 간 온도는 40 ° C에 도달관류 시스템에 1 ㎎ / kg (체중) 떨어져 30 분 투여 량으로 주어진 두 나누었다. </li></ol> 4. 관류을 종료하고 카테터를 제거 <ol><li> 관류의 60 분 후, 시스템으로부터 관류를 비우고 정질 1,000 ml로 간 관개. </li><li> 관류 장치에 포장 적혈구의 한 단위를 추가, 간으로 주입 한 후 관류를 중지합니다. </li><li> Klintmalm 클램프 및 caval 정맥에서 Rumel 지혈대를 놓습니다. </li><li> hepatoduodenal 인대에서 Rumel 지혈대를 놓습니다. </li><li> 위 십이지장 동맥에서 합자를 제거합니다. 카테터를 제거하고 혈관을 결찰. </li><li> 간동맥에서 클램프를 놓습니다. </li><li> 성선 정맥 카테터를 제거하고 혈관을 결찰. </li><li> veno 정맥 바이 패스 펌프를 중지하고 튜브를 분리합니다. </li><li> 중단 근막 봉합 한 후 피내 피부 봉합과 복부를 닫습니다. </li><li> C를 제거대퇴 및 외부 경정맥에 atheters과 5 분 동안 현지 압력을 적용합니다. </li></ol> 5. 수술 후 케어 <ol><li> 환자가 튜브를 빼내 24 시간 동안 수술 후 관리 장치에 전송할 수 있습니다. 중심 정맥 압력과 동맥 혈압을 모니터링하십시오. </li><li> 수술 후 치료 3-7 일 일반에 대한 수술 부서에 환자를 전송합니다. </li><li> 4 주 총 5000 IE / 일의 투여 량에서 저 분자량 헤파린 (LMWH) 계속. </li></ol>

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	<li>Virgili, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+uveal+melanoma+in+Europe.">Incidence of uveal melanoma in Europe.</a> Ophthalmology. 114 (12), 2309-2315 (2007).</li><li>Pereira, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+and+emerging+treatment+options+for+uveal+melanoma.">Current and emerging treatment options for uveal melanoma.</a> Clinical Ophthalmology. 7, 1669-1682 (2013).</li><li>Bergman, L., Nilsson, B., Lundell, G., Lundell, M., Seregard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ruthenium+brachytherapy+for+uveal+melanoma,+1979-2003:+survival+and+functional+outcomes+in+the+Swedish+population.">Ruthenium brachytherapy for uveal melanoma, 1979-2003: survival and functional outcomes in the Swedish population.</a> Ophthalmology. 112 (5), 834-840 (2005).</li><li>Diener-West, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+metastatic+disease+after+enrollment+in+the+COMS+trials+for+treatment+of+choroidal+melanoma:+Collaborative+Ocular+Melanoma+Study+Group+Report+No.+26.">Development of metastatic disease after enrollment in the COMS trials for treatment of choroidal melanoma: Collaborative Ocular Melanoma Study Group Report No. 26.</a> Archives of Ophthalmology. 123 (12), 1639-1643 (2005).</li><li>Kujala, E., Makitie, T., Kivela, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Very+long-term+prognosis+of+patients+with+malignant+uveal+melanoma.">Very long-term prognosis of patients with malignant uveal melanoma.</a> Investigative Ophthalmology &#38; Visual Science. 44 (11), 4651-4659 (2003).</li><li>Bedikian, A. Y., Papadopoulos, N., Plager, C., Eton, O., Ring, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+II+evaluation+of+temozolomide+in+metastatic+choroidal+melanoma.">Phase II evaluation of temozolomide in metastatic choroidal melanoma.</a> Melanoma Research. 13 (3), 303-306 (2003).</li><li>Kivela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=vincristine,+lomustine+and+dacarbazine+(BOLD)+in+combination+with+recombinant+interferon+alpha-2b+for+metastatic+uveal+melanoma.">vincristine, lomustine and dacarbazine (BOLD) in combination with recombinant interferon alpha-2b for metastatic uveal melanoma.</a> European Journal Of Cancer. 39 (8), 1115-1120 (2003).</li><li>Schmittel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+II+trial+of+cisplatin,+gemcitabine+and+treosulfan+in+patients+with+metastatic+uveal+melanoma.">Phase II trial of cisplatin, gemcitabine and treosulfan in patients with metastatic uveal melanoma.</a> Melanoma Research. 15 (3), 205-207 (2005).</li><li>Leyvraz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+intra-arterial+versus+intravenous+fotemustine+in+patients+with+liver+metastases+from+uveal+melanoma+(EORTC+18021):+a+multicentric+randomized+trial.">Hepatic intra-arterial versus intravenous fotemustine in patients with liver metastases from uveal melanoma (EORTC 18021): a multicentric randomized trial.</a> Annals Of Oncology : Official Journal Of The European Society for Medical Oncology / ESMO. 25 (3), 742-746 (2014).</li><li>Huppert, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transarterial+chemoembolization+of+liver+metastases+in+patients+with+uveal+melanoma.">Transarterial chemoembolization of liver metastases in patients with uveal melanoma.</a> European Journal Of Radiology. 74 (3), 38-44 (2010).</li><li>Klingenstein, A., Haug, A. R., Zech, C. J., Schaller, U. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radioembolization+as+locoregional+therapy+of+hepatic+metastases+in+uveal+melanoma+patients.">Radioembolization as locoregional therapy of hepatic metastases in uveal melanoma patients.</a> Cardiovascular and Interventional Radiology. 36 (1), 158-165 (2013).</li><li>Mariani, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+liver+metastases+from+uveal+melanoma:+16+years'+experience+at+the+Institut+Curie.">Surgical management of liver metastases from uveal melanoma: 16 years' experience at the Institut Curie.</a> European Journal Of Surgical Oncology : The Journal Of The European Society Of Surgical Oncology And The British Association of Surgical Oncology. 35 (11), 1192-1197 (2009).</li><li>Ausman, R. K., Aust, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+perfusion+of+the+liver+with+HN2.">Isolated perfusion of the liver with HN2.</a> Surgical Forum. 10, 77-79 (1960).</li><li>Dahl, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+hyperthermia+and+chemotherapy.">Interaction of hyperthermia and chemotherapy.</a> Recent results in cancer research. Fortschritte der Krebsforschung. Progres Dans Les Recherches Sur Le Cancer. 107, 157-169 (1988).</li><li>Barker, W. C., Andrich, M. P., Alexander, H. R., Fraker, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+intraoperative+external+monitoring+of+perfusate+leak+using+iodine-131+human+serum+albumin+during+isolated+perfusion+of+the+liver+and+limbs.">Continuous intraoperative external monitoring of perfusate leak using iodine-131 human serum albumin during isolated perfusion of the liver and limbs.</a> European Journal Of Nuclear Medicine. 22 (11), 1242-1248 (1995).</li><li>Olofsson, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hepatic+perfusion+for+ocular+melanoma+metastasis:+registry+data+suggests+a+survival+benefit.">Isolated hepatic perfusion for ocular melanoma metastasis: registry data suggests a survival benefit.</a> Annals of Surgical Oncology. 21 (2), 466-472 (2014).</li><li>Redai, I., Emond, J., Brentjens, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic+considerations+during+liver+surgery.">Anesthetic considerations during liver surgery.</a> The Surgical Clinics of North America. 84, 401-411 (2004).</li><li>Sakai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insertion+and+management+of+percutaneous+veno-venous+bypass+cannula+for+liver+transplantation:+a+reference+for+transplant+anesthesiologists.">Insertion and management of percutaneous veno-venous bypass cannula for liver transplantation: a reference for transplant anesthesiologists.</a> Clinical Transplantation. 24 (5), 585-591 (2010).</li><li>Skandalakis, J. E., Skandalakis, L. J., Skandalakis, P. N., Mirilas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+surgical+anatomy.">Hepatic surgical anatomy.</a> The Surgical Clinics of North America. 84 (2), 413-435 (1016).</li><li>Alexander, H. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+phase+I-II+study+of+isolated+hepatic+perfusion+using+melphalan+with+or+without+tumor+necrosis+factor+for+patients+with+ocular+melanoma+metastatic+to+liver.">A phase I-II study of isolated hepatic perfusion using melphalan with or without tumor necrosis factor for patients with ocular melanoma metastatic to liver.</a> Clinical Cancer Research : An Official Journal Of The American Association for Cancer Research. 6 (8), 3062-3070 (2000).</li><li>Alexander, H. R., Jr, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperthermic+isolated+hepatic+perfusion+using+melphalan+for+patients+with+ocular+melanoma+metastatic+to+liver.">Hyperthermic isolated hepatic perfusion using melphalan for patients with ocular melanoma metastatic to liver.</a> Clinical Cancer Research : An Official Journal Of The American Association For Cancer Research. 9 (17), 6343-6349 (2003).</li><li>Rizell, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hepatic+perfusion+for+liver+metastases+of+malignant+melanoma.">Isolated hepatic perfusion for liver metastases of malignant melanoma.</a> Melanoma research. 18 (2), 120-126 (2008).</li><li>Iersel, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hepatic+perfusion+with+200+mg+melphalan+for+advanced+noncolorectal+liver+metastases.">Isolated hepatic perfusion with 200 mg melphalan for advanced noncolorectal liver metastases.</a> Annals of Surgical Oncology. 15 (7), 1891-1898 (2008).</li><li>Carvajal, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+selumetinib+vs+chemotherapy+on+progression-free+survival+in+uveal+melanoma:+a+randomized+clinical+trial.">Effect of selumetinib vs chemotherapy on progression-free survival in uveal melanoma: a randomized clinical trial.</a> JAMA : the Journal Of The American Medical Association. 311 (23), 2397-2405 (2014).</li><li>Sharma, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+arterial+chemoembolization+for+management+of+metastatic+melanoma.">Hepatic arterial chemoembolization for management of metastatic melanoma.</a> AJR. American Journal Of Roentgenology. 190 (1), 99-104 (2008).</li><li>Eldredge-Hindy, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yttrium-90+Microsphere+Brachytherapy+for+Liver+Metastases+From+Uveal+Melanoma:+Clinical+Outcomes+and+the+Predictive+Value+of+Fluorodeoxyglucose+Positron+Emission+Tomography.">Yttrium-90 Microsphere Brachytherapy for Liver Metastases From Uveal Melanoma: Clinical Outcomes and the Predictive Value of Fluorodeoxyglucose Positron Emission Tomography.</a> American Journal Of Clinical Oncology. , (2014).</li><li>Etten, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+hypoxic+hepatic+perfusion+with+orthograde+or+retrograde+flow+in+patients+with+irresectable+liver+metastases+using+percutaneous+balloon+catheter+techniques:+a+phase+I+and+II+study.">Isolated hypoxic hepatic perfusion with orthograde or retrograde flow in patients with irresectable liver metastases using percutaneous balloon catheter techniques: a phase I and II study.</a> Annals of Surgical Oncology. 11 (6), 598-605 (2004).</li><li>Ku, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+adriamycin-removal+following+hepatic+artery+infusion:+use+of+direct+hemoperfusion+combined+with+veno-venous+bypass.">Extracorporeal adriamycin-removal following hepatic artery infusion: use of direct hemoperfusion combined with veno-venous bypass.</a> Nihon Geka Gakkai Zasshi. 90 (10), 1758-1764 (1989).</li><li>Curley, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+arterial+infusion+chemotherapy+with+complete+hepatic+venous+isolation+and+extracorporeal+chemofiltration:+a+feasibility+study+of+a+novel+system.">Hepatic arterial infusion chemotherapy with complete hepatic venous isolation and extracorporeal chemofiltration: a feasibility study of a novel system.</a> Anti-Cancer Drugs. 2 (2), 175-183 (1991).</li><li>Beheshti, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+isolated+liver+perfusion+for+treatment+of+hepatic+malignancy:+preliminary+report.">Percutaneous isolated liver perfusion for treatment of hepatic malignancy: preliminary report.</a> Journal of Vascular And Interventional Radiology : JVIR. 3 (3), 453-458 (1992).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

전이성 포도막 흑색 종 환자는 몇 치료 옵션이 있습니다. 화학 요법 (6), 면역 요법 (23)과 표적 치료 (24)는 개선 된 OS를 보여줄 수 없었다. 약간의 간 전이 환자, 간 절제술은 옵션 (12)이다. 다른 치료는 간 동맥 화학 요법 (HIA) 9, 화학 색전술 (TACE) (25)와 선택적 내부 방사선 치료 (SIRT) (26)를 포함한다. IHP는 주요 복잡한 수술 적 치료이며 Ausman에 의해 처음보고 있기 때문에 수술 기법의 개발되어졌다. 2004 년, 반 Etten 선수와 동료들은 고립 된 저산소 간 관류 (IHHP) 기술 (27)를 사용하여 첫 번째 임상 결과를 발표했다. 1990 년대 초, 3 개의 독립적 인 그룹은 체외 chemofiltration 28-30을 사용하여 새로운 경피적 간 관류 (PHP) 시스템을 개발했다. 어떤 연구 없습니다IHP에 이러한 기술을 비교하는 것이 수행되었다. 보고서는 지금까지 특정 기술에 찬성 될 것 같지 않습니다. 환자 선택이 치료에 대한 높은 중요하다. 이 로컬 처리이기 때문에, 간외 병의 근거가 없어야한다. 간부전으로 인해 발병 위험, 간 용적의 50 % 이하 (22)는 종양에 의해 대체 될 수 없습니다. 환자는 수술 후 심각한 이환율의 위험을 증가시킬 수있는 좋은 성능 상태 (ECOG 0-1)없이 심장 -, 폐 -, kidney- 또는 간 질환이 있어야합니다. 우리 그룹에서 최근 II 상 시험에서 26 개월 평균 생존 기간이 대조군에 비해 16 14개월의 전위 생존 이점을 암시 도시 하였다. 이 연구 결과를 확인하려면, IHP과 가장 좋은 대안 케어 (BAC) 사이의 다기관, 무작위 배정 상 임상 시험은 최근 스칸디나비아 (스칸듐 시험, ClinicalTrials 수에 시작 : NCT01785316). BAC 처리는 크로스 오버가 IHP 그룹 BAC에서 허용되지 않는다는 개념 기존의 실험이나 어느 다른 치료 옵션을 포함 할 수있다. 선정 기준은 조직 검사 확인 간 전이 및 PET-CT에 의한 간외의 질환의 증거를 포함한다. 주요 엔드 포인트는 응답 속도, 무 진행 생존과 삶의 질을 포함 차 엔드 포인트 24 개월 생존율이다. 계획 포함 5 년 동안 78 명이다. 요약하면, 여전히 단계에서 III 임상 시험은 포도막 흑색 종 간 전이 환자에 대한 모든 장기간 생존율을 보여 주었다 어떤 치료가 존재하지 않습니다. IHP는 생존의 잠재적 인 이익은 무작위 시험 (스칸듐 시험)에서 연구되고있다 흥미롭고 유망한 지역 요법이다.

포도막 흑색 종 발병률은 백인 인구 1에서 가장 높은 인으로, 성인에서 가장 흔한 일차 인공 악성 종양이다. 지역 치료는 안구 적출술 또는 지방 플라크 방사선 치료 2,3로 구성되어 있습니다. 에 관계없이 지역 치료, 전이성 질환은 궁극적으로 환자 4,5의 약 35~50%을 개발할 것입니다. 간은 가장 일반적인 전이 부위와 격리 간전에 존재 환자의 약 50 %이다. 간 전이 환자의 전체 생존 기간의 중앙값 (OS)는 6-12개월 4입니다. 여러 다른 지역 및 전신 치료 전략이 모색되었지만 생존율이 향상되지 않았다. 전신 항암 화학 요법 치료, 모두 단일 물질 (다카 바진 또는 테모 졸로 마이드 6) 또는 조합 치료 (BOLD식이 요법 7, treosulfan 8 젬시 타빈)를 선택한 다음, 이하의 응답 속도를 보여줍니다10 %. 간 동맥 화학 요법 (HIA)는 전신 화학 요법에 비해 약간 높은 반응률하지만, 전체 생존 기간 (9)의 증가없이 보여 주었다. 시스플라틴 (cisplatin) 및 카보 플 라틴 (carboplatin)과 화학 색전술 (TACE)는 9개월 (10)의 중앙 생존 환자의 57 %에서 부분 반응을 보였다. 선택적 내부 방사선 치료 (SIRT)는 7개월 (11)의 중앙 생존 환자의 62 %에서 부분 반응을 보이고있다. 255 명의 환자를 포함하는 간 절제술에 대한 연구에서 14 개월 생존율이보고되었다; 현미경 적 완전 절제가 가능했던 환자의 76, 생존 27개월 (12)이었다. 고립 간 관류 (IHP)는 원래 라이언 Ausman에 의해 개발 된 지역 치료 방법이다. 뒤에 기술의 이론적 근거는 전신적으로 회피하면서 수술 분리 및 화학 요법 제의 투여 량과 높은 간을 관류하는xicity (13). 또한, 동시 고열 종양 혈류 세포막 투과성 (14)의 변화에 의해 화학 요법 제의 증가 된 흡수를 매개한다. 완전한 혈관 아이솔레이션 TC-99은 인간 혈청 알부민 (15)를 이용하여 표지 된 방사성 트레이서 기법으로 확인된다. 후 향적 단계 II 연구는 스웨덴 16 포도막 흑색 종 간 전이 가장 긴 생존자에 비해 IHP을 시행 한 환자 14 개월 (26 대 12개월)의 잠재적 인 생존 이득을 보여 주었다. 여기에서 우리는 현재의 결과와 향후 전망에 대한 간단한 리뷰와 함께 IHP의 기술을 제시한다.

<table><tbody><tr><td>Wire re-inforced catethers</td><td>Medtronic Inc, Minnesota, USA</td><td></td><td>12-18Fr</td></tr><tr><td>St&amp;ouml;ckert S5</td><td>Sorin Group, Mirandola, Italy</td><td></td><td>Heart-lung machine</td></tr><tr><td>Rotaflow</td><td>Maquet, Jostra Medizintechnik AG, Hirrlingen, Germany</td><td></td><td>Centrifugal pump</td></tr><tr><td>HU 35</td><td>Maquet cardiopulmonary AG, Hirrlingen, Germany</td><td></td><td>Heater unit</td></tr><tr><td>Flexbumin 200 g/l</td><td>Baxter Medical AB, Kista, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tribonat</td><td>Fresenius Kabi AB, Uppsala, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin LEO, 5000 IE/ml</td><td>LEO Pharma AB, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ringer Acetate</td><td>Baxter Medical AB, Kista, Sweden</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vasculosis</td><td>Cis-Bio International, Gif-Sur-Yvette, France</td><td></td><td>99mTc-albumin</td></tr><tr><td>MedicView</td><td>SystemData AB, Gothenburg, Sweden</td><td></td><td>Leakage monitoring system</td></tr><tr><td>Alkeran</td><td>Aspen Europe GmbH, Bad Oldesloe, Germany</td><td></td><td>melphalan</td></tr></tbody></table>

isolated hepatic perfusion as a treatment for liver metastases of uveal melanoma

관류 간 격리 (IHP)는 간이 수술 단리 화학 요법 제의 멜 팔란 고농도 관류 절차이다. 간단히, 절차는 외부 경정맥에 대퇴 정맥에서 경피적 veno 정맥 바이 패스의 설치를 시작합니다. 개복술을 통해, 카테터는 적절한 간동맥 및 caval 정맥에 삽입됩니다. 위의의 뜻과 infrahepatically, 다음 클램핑 모두 문맥과 caval 정맥. 동맥과 정맥 카테터 심폐 기계에 연결되어 간 60 분 동안 멜 팔란 (1 ㎎ / kg 체중)로 관류시켰다. 그것이 가능하다이 방법은 로컬 전신 순환으로 누출하지 않고, 화학 요법 제의 투여 량과 높은 간 관류. 포도막 흑색 종의 고립 간 전이 환자를 포함하여 이전의 연구에서, 33-100%의 전반적인 응답 속도와 9 13개월 사이의 평균 생존 기간,보고되고있다. 이 프로토콜의 목적은 절차를 수행하는 방법의 명확한 설명을 제공하고, 포도막 흑색 종의 간전 대한 치료 옵션으로 IHP을 논의한다.

초기 보고서 또는 TNF-α없이 멜 팔란 치료 22 명을 포함. 결과는 두 CR (10 %)을 가진 환자, 11 개월 (20)의 중앙값을 포함 생존율 62 %의 반응율을 보였다. 후속 연구는 혼자 멜 팔란를 사용하여 치료 29 명의 환자의 결과를보고했다. 결과는 10 % 완전 반응 12 개월 (21)의 중앙 생존 기간을 포함하여 62 % 전체 응답과 매우 유사했다. 로 Rizell 등. 연구에서, 포도막 흑색 종 환자 20 명으로 하였다. 환자는 3 개의 다른 시대로 분할하고, 그 결과로 인해 개선 된 환자 선택 및 기술 개발 22 0 %에서 27 %까지 사망률의 감소를 보였다. IHP에 대한 지식은 주로 작은 향적 단일 기관 시리즈를 기반으로하며, 게시 된 결과는 표 1에 나열되어 있습니다.에요약하면, 반응률은 0-20 % 완료 반응률 포함한 33-100%이다. 수술 후 사망률은 6 %이며, 평균 생존 기간 12 개월입니다. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> 저자 </td><td> N </td><td> 유형 </td><td> ORR </td><td> CR </td><td> 평균 생존 </td><td> 사망 </td></tr><tr><td> 알. 2000 알렉산더 등 </td><td> (22) </td><td> IHP </td><td> 62 % </td><td> 10 % </td><td> 11개월 </td><td> 5 % </td></tr><tr><td> 알. 2003 알렉산더 등 </td><td> (29) </td><td> IHP </td><td> 62 % </td><td> 10 % </td><td> 12개월 </td><td> 0 % </td></tr><tr><td> Noter 외. 2003 </td><td> 8 </td><td> IHP </td><td> 50 % </td><td> 0 % </td><td> 10개월 </td><td> 0 % </td></tr><tr><td> Pingpank 등. 2005 </td><td> (10) </td><td> PHP </td><td> 50 % </td><td> 20 % </td><td> N / A </td><td> 0 % </td></tr><tr><td> Rizell 등. 2008 </td><td> (27) </td><td> IHP </td><td> 70 % </td><td> 7 % </td><td> 13개월 </td><td> 22 % </td></tr><tr><td> 알. 2008 Verhoef 등 </td><td> 4 </td><td> IHHP </td><td> 100 % </td><td> 0 % </td><td> 9개월 </td><td> 0 % </td></tr><tr><td> 알. 2008 반 Iersel 등 </td><td> (12) </td><td> IHP </td><td> 33 % </td><td> 0 % </td><td> 10개월 </td><td> 0 % </td></tr><tr><td> 알. 2009 반 Etten 선수 등 </td><td> 8 </td><td> IHHP </td><td> 37 % </td><td> 0 % </td><td> 11개월 </td><td> 0 % </td></tr><tr><td> 가중 평균 </td><td> (120) </td><td></td><td> 59 % </td><td> 7 % </td><td> 12개월 </td><td> 6 % </td></tr><tr><td> Olofsson이는 등. </td><td> (34) </td><td> IHP </td><td> 68 % </td><td> 12 % </td><td> 24개월(60); </td><td> 0 % </td></tr></tbody></table> 표 1. 고립 간 관류의 다른 양식으로 처리 고립 간 전이 환자에 대해보고 된 임상 결과와 격리 간 관류의 결과 간행물. ORR은 전체 응답 속도를 =; CR = 완전 반응; IHP는 고립 간 관류 =; IHHP는 = 저산소 간 관류를 격리; PHP는 경피적 간 관류 =; N / A = 사용할 수 없습니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/52490/52490fig1.jpg" /> 그림 1 :. veno 정맥 바이 패스 시스템과 관류 시스템의 개략도 그림은 빨간색 선은 간 동맥에 카테터를 나타내며, 파란색 하나는 caval 정맥 카테터를 나타냅니다. 이들은 형산, 롤러 펌프 및 가열 유닛 이루어진 관류 시스템에 연결된다. 검은 선은 veno을 나타냅니다롤러 펌프에 연결 -venous 바이 패스 시스템.

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Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Here, we present a protocol how to perform an isolated liver perfusion (IHP) with melphalan and we also discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

포도막 흑색 종의 간전이에 대한 치료로 고립 간 관류

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

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Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

13.4K 조회수.  Institute of Clinical Sciences. Here, we present a protocol how to perform an isolated liver perfusion (IHP) with melphalan and we also discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

비디오: Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Murine Model of Metastatic Liver Tumors in the Setting of Ischemia Reperfusion Injury

Liver ischemia and reperfusion (I/R) injury, a common clinical challenge, remains an inevitable pathophysiological process that has been shown to induce multiple tissue and organ damage. Despite recent advances and therapeutic approaches, the overall morbidity has remained unsatisfactory especially in patients with underlying parenchymal abnormalities. In the context of aggressive cancer growth and metastasis, surgical I/R is suspected to be the promoter regulating tumor recurrence. This article aims to describe a clinically relevant murine model of liver I/R and colorectal liver metastasis. In doing so, we aim to assist other investigators in establishing and perfecting this model for their routine research practice to better understand the effects of liver I/R on promoting liver metastases.

We describe in detail a clinically relevant colorectal cancer liver metastases (CRLM) tumor model and the influence of liver ischemia reperfusion (I/R) in tumor growth and metastasis. This model can help to better understand the mechanisms underlying surgery-induced promotion of liver metastatic growth.

허혈 재관류 손상의 설정에서 전이성 간 종양의 뮤린 모델

Liver ischemia and reperfusion (I/R) injury, a common clinical challenge, remains an inevitable pathophysiological process that has been shown to induce ...

연구

암 연구학

Generation of a Liver Orthotopic Human Uveal Melanoma Xenograft Platform in Immunodeficient Mice

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more representative models to study human cancers in immunodeficient mice than traditional established human cell lines in vitro. Recently, orthotopically implanted patient-derived tumor xenograft (PDX) models in mice have been developed to better replicate features of patient tumors. A liver orthotopic xenograft mouse model is expected to be a useful cancer research platform, providing insights into tumor biology and drug therapy. However, liver orthotopic tumor implantation is generally complicated. Here we describe our protocols for the orthotopic implantation of patient-derived liver-metastatic uveal melanoma tumors. We cultured human liver metastatic uveal melanoma cell lines into immunodeficient mice. The protocols can result in consistently high technical success rates using either a surgical orthotopic implantation technique with chunks of patient-derived uveal melanoma tumor or a needle injection technique with cultured human cell line. We also describe protocols for CT scanning to detect interior liver tumors and for re-implantation techniques using cryopreserved tumors to achieve re-engraftment. Together, these protocols provide a better platform for liver orthotopic tumor mouse models of liver metastatic uveal melanoma in translational research.

Orthotopic human liver metastatic uveal melanoma xenograft mouse models were created using surgical orthotopic implantation techniques with patient-derived tumor chunk and needle injection techniques with cultured human uveal melanoma cell lines.

면역결핍 마우스에서 간 직교 인간 편도 흑색종 Xenograft 플랫폼의 생성

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more ...

Implantation and Evaluation of Melanoma in the Murine Choroid via Optical Coherence Tomography

Establishing experimental choroidal melanoma models is challenging in terms of the ability to induce tumors at the correct localization. In addition, difficulties in observing posterior choroidal melanoma in vivo limit tumor location and growth evaluation in real-time. The approach described here optimizes techniques for establishing choroidal melanoma in mice via a multi-step sub-choroidal B16LS9 cell injection procedure. To enable precision in injecting into the small dimensions of the mouse uvea, the complete procedure is performed under a microscope. First, a conjunctival peritomy is formed in the dorsal-temporal area of the eye. Then, a tract into the sub-choroidal space is created by inserting a needle through the exposed sclera. This is followed by the insertion of a blunt needle into the tract and the injection of melanoma cells into the choroid. Immediately after injection, noninvasive optical coherence tomography (OCT) imaging is utilized to determine tumor location and progress. Retinal detachment is evaluated as a predictor of tumor site and size. The presented method enables the reproducible induction of choroid-localized melanoma in mice and the live imaging of tumor growth evaluation. As such, it provides a valuable tool for studying intraocular tumors.

Implantation and Evaluation of Melanoma in the Murine Choroid via Optical Coherence Tomography

The present protocol describes the implantation and evaluation of melanoma in the murine choroid utilizing optical coherence tomography.

광간섭 단층촬영을 통한 쥐 맥락막의 흑색종 이식 및 평가

Establishing experimental choroidal melanoma models is challenging in terms of the ability to induce tumors at the correct localization. In addition, ...

Normothermic Ex Vivo Liver Machine Perfusion in Mouse

This protocol presents an optimized erythrocytes-free NEVLP system using mouse livers. Ex vivo preservation of mouse livers was achieved by employing modified cannulas and techniques adapted from conventional commercial ex vivo perfusion equipment. The system was utilized to evaluate the preservation outcomes following 12 h of perfusion. C57BL/6J mice served as liver donors, and the livers were explanted by cannulating the portal vein (PV) and bile duct (BD), and subsequently flushing the organ with warm (37 &#176;C) heparinized saline. Then, the explanted livers were transferred to the perfusion chamber and subjected to normothermic oxygenated machine perfusion (NEVLP). Inlet and outlet perfusate samples were collected at 3 h intervals for perfusate analysis. Upon completion of the perfusion, liver samples were obtained for histological analysis, with morphological integrity assessed using modified Suzuki-Score through Hematoxylin-Eosin (HE) staining. The optimization experiments yielded the following findings: (1) mice weighing over 30 g were deemed more suitable for the experiment due to the larger size of their bile duct (BD). (2) a 2 Fr (outer diameter = 0.66 mm) polyurethane cannula was better suited for cannulating the portal vein (PV) when compared to a polypropylene cannula. This was attributed to the polyurethane material&#39;s enhanced grip, resulting in reduced catheter slippage during the transfer from the body to the organ chamber. (3) for cannulation of the bile duct (BD), a 1 Fr (outer diameter = 0.33 mm) polyurethane cannula was found to be more effective compared to the polypropylene UT - 03 (outer diameter = 0.30 mm) cannula. With this optimized protocol, mouse livers were successfully preserved for a duration of 12 h without significant impact on the histological structure. Hematoxylin-Eosin (HE) staining revealed a well-preserved morphological architecture of the liver, characterized by predominantly viable hepatocytes with clearly visible nuclei and mild dilation of hepatic sinusoids.

Normothermic Ex Vivo Liver Machine Perfusion in Mouse

A normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) system was created for mouse livers. This system requires experience in microsurgery but allows for reproducible perfusion results. The ability to utilize mouse livers facilitates the investigation of molecular pathways to identify novel perfusate additives and enables the execution of experiments focused on organ repair.

마우스의 Normothermic Ex Vivo 간 기계 관류

This protocol presents an optimized erythrocytes-free NEVLP system using mouse livers. Ex vivo preservation of mouse livers was achieved by employing ...

공학

Percutaneous Hepatic Perfusion (PHP) with Melphalan as a Treatment for Unresectable Metastases Confined to the Liver

Unresectable liver metastases of colorectal cancer can be treated with systemic chemotherapy, aiming to limit the disease, extend survival or turn unresectable metastases into resectable ones. Some patients however, suffer from side effects or progression under systemic treatment. For patients with metastasized uveal melanoma there are no standard systemic therapy options. For patients without extrahepatic disease, isolated liver perfusion (IHP) may enable local disease control with limited systemic side effects. Previously, this was performed during open surgery with satisfying results, but morbidity and mortality related to the open procedure, prohibited a widespread application. Therefore, percutaneous hepatic perfusion (PHP) with simultaneous chemofiltration was developed. Besides decreasing morbidity and mortality, this procedure can be repeated, hopefully leading to a higher response rate and improved survival (by local control of disease). During PHP, catheters are placed in the proper hepatic artery, to infuse the chemotherapeutic agent, and in the inferior caval vein to aspirate the chemosaturated blood returning through the hepatic veins. The caval vein catheter is a double balloon catheter that prohibits leakage into the systemic circulation. The blood returning from the hepatic veins is aspirated through the catheter fenestrations and then perfused through an extra-corporeal filtration system. After filtration, the blood is returned to the patient by a third catheter in the right internal jugular vein. During PHP a high dose of melphalan is infused into the liver, which is toxic and would lead to life threatening complications when administered systemically. Because of the significant hemodynamic instability resulting from the combination of caval vein occlusion and chemofiltration, hemodynamic monitoring and hemodynamic support is of paramount importance during this complex procedure.

Percutaneous Hepatic Perfusion PHP with Melphalan as a Treatment for Unresectable Metastases Confined to the Liver

In this manuscript, we describe percutaneous isolated hepatic perfusion with simultaneous chemofiltration as treatment for unresectable liver metastases. This procedure is performed under general anaesthesia in the angiosuite by an experienced team, consisting of an interventional radiologist, a clinical perfusionist and anaesthesiologist.

간으로 밀폐 절제 불가능한 전이에 대한 치료로 멜 팔란과 경피적 간 관류 (PHP)

Unresectable liver metastases of colorectal cancer can be treated with systemic chemotherapy, aiming to limit the disease, extend survival or turn ...

의학

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the silicone compound, via a 26 G catheter, into the portal or hepatic vein. After silicone injection, organs were explanted and prepared for ex-vivo micro-CT (&#181;CT) scanning. The silicone injection procedure is technically challenging. Achieving a successful outcome requires extensive microsurgical experience from the surgeon. One of the challenges of this procedure involves determining the adequate perfusion rate for the silicone compound. The perfusion rate for the silicone compound needs to be defined based on the hemodynamic of the vascular system of interest. Inappropriate perfusion rate can lead to an incomplete perfusion, artificial dilation and rupturing of vascular trees.
The 3D reconstruction of the vascular system was based on CT scans and was achieved using preclinical software such as HepaVision. The quality of the reconstructed vascular tree was directly related to the quality of silicone perfusion. Subsequently computed vascular parameters indicative of vascular growth, such as total vascular volume, were calculated based on the vascular reconstructions. Contrasting the vascular tree with silicone allowed for subsequent histological work-up of the specimen after &#181;CT scanning. The specimen can be subjected to serial sectioning, histological analysis and whole slide scanning, and thereafter to 3D reconstruction of the vascular trees based on histological images. This is the prerequisite for the detection of molecular events and their distribution with respect to the vascular tree. This modified silicone injection procedure can also be used to visualize and reconstruct the vascular systems of other organs. This technique has the potential to be extensively applied to studies concerning vascular anatomy and growth in various animal and disease models.

Tools used for visualizing vascular regeneration require methods for contrasting the vascular trees. This film demonstrated a delicate injection technique used to achieve optimal contrasting of the vascular trees and illustrate the potential benefits resulting from a detailed analysis of the resulting specimen using &#181;CT and histological serial sections.

일반 마우스의 70 % 부분 간 절제술 후 혈관 및 실질 재생의 시각화

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

Isolation of Regenerating Hepatocytes after Partial Hepatectomy in Mice

Partial hepatectomy has been widely used to investigate liver regeneration in mice, but the isolation of high yields of viable hepatocytes for downstream single-cell applications is challenging. A marked accumulation of lipids within regenerating hepatocytes is observed during the first 2 days of normal liver regeneration in mice. This so-called transient regeneration-associated steatosis (TRAS) is temporary but partially overlaps the major proliferative phase. Density-gradient purification is the backbone of most existing protocols for the isolation of primary hepatocytes. As gradient purification relies on the density and size of cells, it separates non-steatotic from steatotic hepatocyte populations. Therefore, fatty hepatocytes often are lost, yielding non-representative hepatocyte fractions. 
The presented protocol describes an easy and reliable method for the in vivo isolation of regenerating hepatocytes regardless of their lipid content. Hepatocytes from male C57BL/6 mice are isolated 24-48 h after hepatectomy by a classic two-step collagenase perfusion approach. A standard peristaltic pump drives the warmed solutions via the catheterized inferior vena cava into the remnant, using a retrograde perfusion technique with outflow through the portal vein. Hepatocytes are dissociated by collagenase for their release from the Glisson's capsule. After washing and careful centrifugation, the hepatocytes can be used for any downstream analyses. In conclusion, this paper describes a straightforward and reproducible technique for the isolation of a representative population of regenerating hepatocytes after partial hepatectomy in mice. The method may also aid the study of fatty liver disease.

Lipid-laden hepatocytes are inherent to liver regeneration but are usually lost upon density-gradient centrifugation. Here, we present an optimized cell isolation protocol that retains steatotic hepatocytes, yielding representative populations of regenerating hepatocytes after partial hepatectomy in mice.

생쥐의 부분 간 절제술 후 재생 간세포의 분리

Partial hepatectomy has been widely used to investigate liver regeneration in mice, but the isolation of high yields of viable hepatocytes for downstream ...

<meta charset="utf8"></head><body>Porcine Ex Situ Isolated Liver Perfusion Model의 개발 및 검증

Porcine Normothermic Isolated Liver Perfusion

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine livers are anatomically and physiologically close to humans, with similar organ size and bile composition. NMP preserves the liver graft at near-to-physiological conditions by recirculating a warm, oxygenated, and nutrient-enriched red blood cell-based perfusate through the liver vasculature. NMP can be used to study ischemia-reperfusion injury, preserve a liver ex situ before transplantation, assess the liver's function prior to implantation, and provide a platform for organ repair and regeneration. Alternatively, NMP with a whole blood-based perfusate can be used to mimic transplantation. Nevertheless, this model is labor-intensive, technically challenging, and carries a high financial cost.
In this porcine NMP model, we use warm ischemic damaged livers (corresponding to donation after circulatory death). First, general anesthesia with mechanical ventilation is initiated, followed by the induction of warm ischemia by clamping the thoracic aorta for 60 min. Cannulas inserted in the abdominal aorta and portal vein allow flush-out of the liver with cold preservation solution. The flushed-out blood is washed with a cell saver to obtain concentrated red blood cells. Following hepatectomy, cannulas are inserted in the portal vein, hepatic artery, and infra-hepatic vena cava and connected to a closed perfusion circuit primed with a plasma expander and red blood cells. A hollow fiber oxygenator is included in the circuit and coupled to a heat exchanger to maintain a pO2 of 70-100 mmHg at 38 &#176;C. NMP is achieved by a continuous flow directly through the artery and via a venous reservoir through the portal vein. Flows, pressures, and blood gas values are continuously monitored. To evaluate the liver injury, perfusate and tissue are sampled at predefined time points; bile is collected via a cannula in the common bile duct.

<meta charset="utf8"></head><body>Porcine Normothermic 격리 간 관류

The porcine model of liver normothermic machine perfusion (NMP), described here, can be successfully used to study NMP as a preservation strategy, a tool for viability assessment, and a platform for organ repair. It holds a high translational value, however it is technically challenging and labor-intensive.

Porcine Normothermic 격리 간 관류

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine ...

포도막 흑색 종의 간전이에 대한 치료로 고립 간 관류

요약

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허혈 재관류 손상의 설정에서 전이성 간 종양의 뮤린 모델

면역결핍 마우스에서 간 직교 인간 편도 흑색종 Xenograft 플랫폼의 생성

광간섭 단층촬영을 통한 쥐 맥락막의 흑색종 이식 및 평가

마우스의 Normothermic Ex Vivo 간 기계 관류

간으로 밀폐 절제 불가능한 전이에 대한 치료로 멜 팔란과 경피적 간 관류 (PHP)

일반 마우스의 70 % 부분 간 절제술 후 혈관 및 실질 재생의 시각화

생쥐의 부분 간 절제술 후 재생 간세포의 분리

Porcine Normothermic 격리 간 관류

Porcine Normothermic 격리 간 관류

Porcine Normothermic 격리 간 관류