大学院では、耐熱性、特にその行動要素に非常に興味を持ち、それ以来、行動的な体温調節と、吸熱者が体温を調節するために使用するメカニズムに非常に興味を持っています。耐熱性は、研究者が生物を観察して何十年にもわたって研究されてきました。最近では、耐熱性の側面を測定するためのビデオベースの自動化された方法が登場しています。
そして、これらの新しいテクノロジーが、温度調節に関連する行動や活動の複雑さを探求するという点で、私たちをどこに連れて行くのかを見るのは本当に素晴らしいことだと思います。この分野の課題の1つは、現在、大量の活動データを監視および収集する方法があるにもかかわらず、活動データが実際のアプリケーションに対する生物学的関連性の観点から何を意味するのかを解釈することは、さらなる研究が必要な問題として残っていることです。自動化されたプログラムを使用する利点の 1 つは、大規模なデータセットをはるかに簡単にアクセスできる方法で処理できることです。
以前は、結果を分析して解釈するために、大きなExcelファイルを手動で調べる必要がありました。自動化されたプログラムにより、データ分析がはるかに簡単になります。まず、フライをDAM2モニターチューブにロードし、チューブの両端を綿で覆います。
保持バイアルからモニターチューブに個々のハエを吸引します。アッセイチューブをアクティビティモニターに挿入し、各グループに対応するスロット番号を慎重に文書化します。モニターをアッセイインキュベーターにロードします。
データ取得を開始する前に、データ取得ソフトウェアを起動し、設定が設定されていることを確認します。DAMSystemインターフェースを介して、モニターデータとインデックス番号をリアルタイムで表示します。定義された数のインデックスが経過した後、インキュベーターに有害な温度を設定し、順応期間の終了を示します。
アクイジションソフトウェアのDAMSystemディスプレイを使用して、アクティビティカウントをリアルタイムで監視します。あるいは、DAMSystemファイルで直接アクティビティデータを監視する方が簡単な場合もあります。テキストファイルをコピーし、オリジナルの代わりにコピーを開いて、ライブデータ録画との干渉を防ぎます。
数分間どのハエにも動きが見られなかったら、捕捉ソフトウェアを停止します。データを取得したら、参照されているソフトウェアを使用してテキストファイルをスキャンしてエラーがないか確認します。有害な温度が誘導される前に実装された順応間隔に基づいて、スキャンしたファイルを保存する前に、アクティビティデータをビン化するための特定の開始点と停止点を選択します。
さあ、HoTDAMを開いてください!解析ソフトウェアをクリックし、[モニターデータのファイルおよびロード]をクリックして、スキャンしたモニターデータファイルをインポートします。DAM2モニター内の各セルに対応する治療グループを示すグループ指定を追加します。
「マルチグループ定義の開始」をクリックして、グループ指定を追加するためのダイアログボックスを開きます。次に、それぞれのセルをクリックしてグループ指定を適用し、[複数グループ指定の停止] をクリックします。各フライのTKDをCSVファイルとしてエクスポートするには、ファイル、ノックダウンデータのエクスポート、およびすべてのモニターのエクスポートまたは選択したモニターのエクスポートをクリックします。
出力は、各フライのTKDをグループ指定ごとに整理します。次に、[ファイル]、[アクティビティ データのエクスポート]、[すべてのモニターのエクスポート]、または[選択したモニターのエクスポート]をクリックして、各フライのアクティビティデータをCSVファイルとしてエクスポートし、タイムスタンプとカウントデータのみを保持してデータファイルを簡略化し、各フライに指定されたグループラベルを割り当てます。硬化したW1118の雌は、対照の雌と比較して、熱ストレス時のノックダウンの可能性が有意に低かった。
雄では有意差は観察されませんでしたが、硬化したTRPA1雄は、熱ストレス時に対照雄と比較してノックダウンの確率が有意に高かったのに対し、硬化した雌と対照の雌との間に有意差は見られませんでした。耐熱性中の平均活性は、W1118株の硬化群と対照群の間で明確に異なり、雌雄ともに約30分で活動量のピークが見られました。TRPA1銘柄の活動は、初期活動が急激に急増し、その後、すべてのグループで急速に減少しました。
